PTH Resultat t från EQUALIS provutskick PTH 2011-21 21 Göran Brattsand, goran.brattsand@vll.se Martin Carlsson, martinc@ltkalmar.se
PTH 2011-21 21 Tre prover skickades på kolsyreis Prov A = Serumpool (normal nivå PTH) Prov B = Prov A + WHO IS 95/646 (cirka 10 pmol/l) Prov C = Prov A + WHO IS 95/646 (cirka 50 pmol/l)
Ingen av de använda PTH-metoderna är standardiserad mot 95/646
Beredning av prov B och C IS 95/646 1 ml 378 ul 15 ul 3 ml Pr rov C rov B P En ampull 15 ml buffert 4,622 ml buffert 15 ml 12 ml 95/646 =100 ug PTH löses 1 ml buffert serumpool A = 50 pmol/l (teoretiskt) serumpool A =10 pmol/l (teoretiskt) Omräkningsfaktor: pg/ml x 0,106 = pmol/l Spädning 1/472 000 Buffert: 0,05M fosfat buffert, ph 7.4, 0.2% bovint serum albumin, 0.075 M NaCl, 0.05% NaN3, 0.5% Tween 20
Bearbetning av resultat 15 lab rapporterade resultat. 7 rapporterar i enhet ng/l och 8 rapporterar i enhet pmol/l För att kunna jämföra resultaten har samtliga resultat räknats om till pmol/l med formeln ng/l*0,106 = pmol/l. Vi har valt att indela resultaten i metodgrupperna: Abbott 1 Beckman Coulter 1 Roche 7 Siemens Advia Centaur 2 Siemens Immulite 3 Ortho/Vitros 1
8 250 Figur 1 Abbott 7 Beckman Roche intervall (p pmol/l) Referens /L IS 95/646) ellt 50 pmol/ pm mol/l (nomin 6 5 4 3 2 200 150 100 50 Lägst 5,4 pmol/l (Roche) Centaur Immulite Vitros Högst 9,4 pmol/l (Immulite) 1 0 0 0 10 20 30 40 50 pmol/l (nominellt 10 pmol/l IS 95/646) 0 2 4 6 8 10 Resultat prov A (pmol/l)
pmo ol/l (nomine ellt 50 pmol/ /L IS 95/646 6) Jämförelse mellan prov B Figur och 1 C efter subtraktion av A 250 200 150 100 50 Abbott Beckman Roche Centaur Immulite Vitros 0 0 10 20 30 40 50 pmol/l (nominellt 10 pmol/l IS 95/646)
Jämförelse mellan metodernas nivå i prov A och ökning i prov B Metodgrupp ökn ning i pro ov B (pmo l/l) 60 50 40 30 20 Abbott Beckman Coulter Roche Siemens Advia Siemens Immulite Vitros 10 0 0 2 4 6 8 10 Prov A (pmol/l)
Recovery Figur 2bias plot Bias (% av metodern nas medelvä ärde i prov A) 140 120 100 80 60 40 20 Abbott Beckman Roche Centaur Immulite Vitros 0 0 100 200 300 400 500 Återvinning (%) av IS 95/646
Abbott Architect n Medelåtervinning (%) Medelbias % av 95/646 prov A 1 318 117 Beckman 1 307 95 Roche 7 241 84 Siemens Advia 2 355 105 Centaur Siemens 3 436 131 Immulite Vitros 1 290 93
Metoder Uppgifter hämtade från tillverkarnas beskrivningar. Spårbarhet kalibrator Omräkningsfaktor Abbott IS 79/500 ng/l * 0,106=pmol/L Beckman Coulter Egen ng/l * 0,106=pmol/L Roche Egen ng/l * 0,106=pmol/L Siemens Advia Centaur (73% av ) IS 79/500 ng/l * 0,106=pmol/L Siemens Immulite Egen ng/l * 0,1053=pmol/L Ortho/Vitros Egen ng/l * 0,106=pmol/L
Slutsatser Betydande d nivåskillnader mellan metodgrupperna. Nivåskillnad huvudsakligen skillnad i kalibratornivåer mellan metodgrupperna. Samtliga metoder visar för höga resultat t jämfört med om metoderna varit standardiserade mot IS 95/646. Bättre överensstämmelse mellan metodgrupperna bör nås genom att metoderna kalibreras mot WHO IS 95/646.
Vi ser medelrecovery 241 439%
EQUALIS har tillfråga de aktuella företagen om och i så fall när man avser standardisera om PTHmetoderna mot WHO IS 95/646
Abbott Abbott har för närvarande inga planer på att restandardisera ARCHITECT PTH till IS 95/646.
Beckman Coulter Det finns även ett initiativ från UK NEQAS för denna standard. Noggrann kalibrering med IS 95/646 kommer att förbättra jämförbarheten betydligt men några metodrelaterade skillnader associerade med specificiteten kommer att bestå. Resultaten på de kliniska proverna kommer att förändras signifikant och kliniska bedömningar kommer att behöva revideras vilket kommer att kräva ett stort pedagogiskt arbete världen över. Beckman har en representant i PTH standardiseringsgruppen som leds av Dr Cathy Sturgeon och tar initiativet iti t mycket seriöst: Emellertid kan jag i nuläget inte ange någon tidsram för när projektet kan vara klart.
Siemens Enligt vår forsknings och utvecklingsavdelning kommer Siemens att kalibrera PTH metoden mot WHO standarden, men det kommer att dröja minst ett år till innan det är på plats. För närvarande för Siemens en dialog med Key Oppinion Leaders inom området angående den nya WHO preparationen och vi diskuterar med IFCC angående användningen av human prover för att få fram relevanta prover som fungerar oberoende av metod.
Roche Har meddelat att de besvarar frågan senare.
Ortho/Vitros Det finns inga omedelbara planer - vad jag känner till - på att omstandardisera VITROS ipth-metod. Idag är de flesta metoderna på marknaden kalibrerade för att ge överensstämmelse i resultatnivå med andra leverantörers nivå, alltså kalibrerade mot annan kommersiellt tillgänglig metod. En harmonisering kommer att leda till större skillnader i resultatnivå/referensintervall eftersom recovery för standarden varierar kraftigt t vilket ju inte sällan är fallet för olika leverantörers immunkemimetoder när de inte använder samma antikropp. I fallet ipth har de flesta metoderna en recovery (för WHO-standarden) på över eller långt över 100%. Tekniska hinder och kommersiella överväganden kan kanske i detta fall fördröja omstandardiseringen men Ortho följer förstås utvecklingen på marknaden.
EQUALIS Försöksutskick för S-PTH, intakt maj 2008 Martin Carlsson Länsenheten för klinisk kemi, Kalmar
Njurinsufficienta Medel S-PTH 27,3 ± 47 4,7 pmol/l Min-Max S-PTH 22,6-34,7 pmol/l 53% högsta värdet (Architect) jfr med Roche Cobas e 601 God samstämmighet inom grupperna Njurinsufficienta patienter S-PTH pmo ol/l 40 35 30 25 20 15 10 5 0 Architect Architect Immulite 2500 Immulite 2000 Immulite 2000 Beckman Modular E Modular E Cobas e 601 Cobas e 601 Cobas e 601 PTH pmol/l
Patienter med misstänkt primär hyperparatyreoidism Medel PTH 7,2 ± 1,1 pmol/l Min-Max Max 5.6 (Beckman) 9,1 (Architect) pmol/l Högsta värdet 62% högre jfr med lägsta På 4 lab hade patienterna värden över referensintervallet (Architect och Immulite 2000) På 5 lab hade patienterna PTH koncentrationer inom referensvärdet (Immulite 2500, Beckman, Roche) Patienter med susp primär hyperparatyreoidism pmol/l 10 8 6 4 2 0 pmol/l Architect Architect Immulite 2 2500 Immulite 2 2000 Immulite 2 2000 Beckman Modular E Cobas e e 601 Cobas e e 601
Friska Medel S-PTH 3,6 ± 047 0,47 pmol/l Min-Max S-PTH 3,0-4,3 pmol/l 43% högsta värdet (Architect), jfr med lägsta värdet (Beckman) Alla hamnade inom sitt referensintervall "Friska"patienter " t pmol/l 4,5 3,5 4 2,5 3 1,5 2 05 0,5 1 0 pmol/l Architect Architect Immulite e 2500 Immulite e 2000 Beckman Modular E Cobas e 601 Cobas se e 601
Patienter med njurinsufficiens men med normala PTH-nivåer Medel PTH =4.8±0,9 09 pmol/l Min-Max 3.5-6.4 Högsta värdet (Architect) 82% högre jfr med lägsta värdet (Beckman) Samtliga lab hade PTH koncentrationer inom referensvärdesgränserna Njurinsufficienta patienter med normalt S-PTH pmol/l 7 6 5 4 3 2 1 0 Architect Architect Immulite 2500 Immulite 2000 Immulite 2000 Beckman Modular E Cobas s e 601 Cobas s e 601
Slutsatser maj 2008 Det fanns ett stort t nationellt intresse för försöksutskicket för S-PTH, intakt, från EQUALIS Olika PTH metoder gav skilda analysresultat Trots detta finns en stor samstämmighet mellan referensvärden I nationella kvalitetsregister och i nationella/internationella riktlinjer tar man ofta inte hänsyn till metodvariationer De olika enheterna (pmol/l eller ng/l) som används inom landet skapar förvirring