Ammoniumjon som PNA-metod. Finn Thormark Fröst ST-läkare, Klinisk Kemi Karolinska Universitetslaboratoriet

Transkript

1 Ammoniumjon som PNA-metod Finn Thormark Fröst ST-läkare, Klinisk Kemi Karolinska Universitetslaboratoriet

2 Medicinsk bakgrund I blodet förekommer ammoniak till 99% som ammoniumjon Cirkulerande ammoniumjon från upptag i tarmen Omvandlas i levern till urea Ammoniumjon stiger vid leversvikt, cirros, genetiska metabola sjukdomar Ammoniumjon passerar blod-hjärnbarriären Encephalopati 2 Finn Thormark Fröst, ST-läkare

3 Bakgrund Karolinska ca 2000 beställningar per år Stora beställare: Barn-IVA IVA Gastro/lever 3 Finn Thormark Fröst, ST-läkare

4 Utmaningar Instabil analyt Provet tas på isvatten, till lab inom 15 min Deaminering av kvävegrupper ger falskt höga svar Luftexponering Tids- och temperaturberoende Ej kapillärprover, ej microrör 4 Finn Thormark Fröst, ST-läkare

5 Nuvarande metod Cobas 8000 Ammoniumjon proportionerligt med minskning av NADPH Absorbans 5 Finn Thormark Fröst, ST-läkare

6 PNA-instrument Fuji-film NX10N Kolorimetrisk metod Filter Reaktionslager Detektionslager brofenolblått Färgskiftning färgintensitet proportionerlig med mängd ammoniak 6 Finn Thormark Fröst, ST-läkare

7 Instrument Fujifilm NX10N Roche Modular/Cobas Metod Kolorimetrisk Enzymatisk - absorbans Mätvolym 10 ul 20 ul Tidsåtgång 2-3 min Minst 10 min + kylcentrifugering 10 min Mätområde umol/l umol/l Bilirubintålighet 340 umol/l 1026 umol/l / 513 umol/l Lipidtålighet Endast data för (50 lipidindex - Ca170 chylomikroner mabs (ca mg/dl)bas) Kontroll Ja Ja Hemolystålighet 5 g/l 0,5 g/l / 2,0 g/l Mäter Helblod/plasma Plasma Uppkoppling Väntar på svar tillverkare Ja Rör 7 Finn Thormark Fröst, ST-läkare EDTA/Li-Heparin/Na- Heparin EDTA/Li-Heparin/Na- Heparin

8 Instrument Fujifilm NX10N Roche Modular/Cobas Metod Kolorimetrisk Enzymatisk - absorbans Mätvolym 10 ul 20 ul Tidsåtgång 2-3 min Minst 10 min + kylcentrifugering 10 min Mätområde umol/l umol/l Bilirubintålighet 340 umol/l 1026 umol/l / 513 umol/l Lipidtålighet Endast data för (50 lipidindex - Ca170 chylomikroner mabs (ca mg/dl)bas) Kontroll Ja Ja Hemolystålighet 5 g/l 0,5 g/l / 2,0 g/l Mäter Helblod/plasma Plasma Uppkoppling Väntar på svar tillverkare Ja Rör 8 Finn Thormark Fröst, ST-läkare EDTA/Li-Heparin/Na- Heparin EDTA/Li-Heparin/Na- Heparin

9 Instrument Fujifilm NX10N Roche Modular/Cobas Metod Kolorimetrisk Enzymatisk - absorbans Mätvolym 10 ul 20 ul Tidsåtgång 2-3 min Minst 10 min + kylcentrifugering 10 min Mätområde umol/l umol/l Bilirubintålighet 340 umol/l 1026 umol/l / 513 umol/l Lipidtålighet Endast data för (50 lipidindex - Ca170 chylomikroner mabs (ca mg/dl)bas) Kontroll Ja Ja Hemolystålighet 5 g/l 0,5 g/l / 2,0 g/l Mäter Helblod/plasma Plasma Uppkoppling Väntar på svar tillverkare Ja Rör 9 Finn Thormark Fröst, ST-läkare EDTA/Li-Heparin/Na- Heparin EDTA/Li-Heparin/Na- Heparin

10 Instrument Fujifilm NX10N Roche Modular/Cobas Metod Kolorimetrisk Enzymatisk - absorbans Mätvolym 10 ul 20 ul Tidsåtgång 2-3 min Minst 10 min + kylcentrifugering 10 min Mätområde umol/l umol/l Bilirubintålighet 340 umol/l 1026 umol/l / 513 umol/l Lipidtålighet Endast data för 50 lipidindex Cobas (ca chylomikroner mg/dl) Kontroll Ja Ja Hemolystålighet 5 g/l 0,5 g/l / 2,0 g/l Mäter Helblod/plasma Plasma Uppkoppling Väntar på svar tillverkare Ja Rör 10 Finn Thormark Fröst, ST-läkare EDTA/Li-Heparin/Na- Heparin EDTA/Li-Heparin/Na- Heparin

11 NX10N Whole blodd Roche Cobas Fujifilm NX10N Whole blood (umol/l) y = 0,9135x + 1,8113 R² = 0, Cobas 8000 Plasma 11 Finn Thormark Fröst, ST-läkare

12 50% Whole blood (NX10N - Cobas 8000) / Cobas 8000 Plasma 40% 30% 20% 10% 0% -10% % -30% -40% 12 Finn Thormark Fröst, ST-läkare

13 NX10N Plasma 350 Roche Cobas FujiFilm NX10N Plasma (umol/l) y = 0,9727x - 2,3893 R² = 0, Cobas 8000 Plasma 13 Finn Thormark Fröst, ST-läkare

14 50% Plasma (NX10N - Cobas 8000) / Cobas 8000 Plasma 40% 30% 20% 10% 0% -10% % -30% -40% 14 Finn Thormark Fröst, ST-läkare

15 Lipemiska prover Ultrafiltration Rutin på olika svenska laboratorier Bla Skåne, Göteborg Ultracentrifugering Under utprovning på Karolinska Preliminär testning utförd 15 Finn Thormark Fröst, ST-läkare

16 Framtiden? Fujifilm NX10N som komplement till C-labmetoden i utvalda fall? Kortare svarstider Olika interferensprofiler Kontroll vid osäkra värden 16 Finn Thormark Fröst, ST-läkare

17 NX10N utanför lab? Ut på avdelningarna som PNA-metod? Slipper transport till lab Ökad manuell hantering Pipettering Luftexponering Förorening 17 Finn Thormark Fröst, ST-läkare