Metodutvärdering I. Metodutvärdering -validering. Metodutvärdering II. Metodutvärdering III

Storlek: px

Starta visningen från sidan:

Download "Metodutvärdering I. Metodutvärdering -validering. Metodutvärdering II. Metodutvärdering III"

Linnéa Abrahamsson
för 5 år sedan
Visningar:

1 Metodutvärdering I Metodutvärdering -validering Nya metoder utvecklas för att Förbättra noggrannhet och precision Tillåta automation Minska kostnader Arbetsmiljö Bestämning av ny analyt Metoden måste verifieras experimentellt Metodutvärdering II Rutinkontroller Upptäcker fel om de överstiger etablerade kontrollgränser Tillverkaren Uppfyller krav från kontrollerande myndighet Medicinska behov Felet i analysen måste vara mindre än angivet tillåtet fel vid kritisk analytnivå Metodutvärdering III Utvärderingen Bestämmer storlek på analytiskt fel för enskilda patientprover Bestämmer tillfälliga och systematiska fel Tillåtet fel kan anges som CV A = ½ CV intra CV A analysmetodens CV CV intra biologisk variation inom en individ 1

2 Metodutvärdering IV Antaganden Laboranten är förtrogen med metoden Reagensen är stabila Linjär dos-respons - minst tre standarder; duplikat Standard preparation i buffert Standard i rätt biologisk matris Seriespädning rekommenderas inte Tillfälliga och systematiska fel Tillfälliga fel (RE, random error) acuracy precision imprecision reproducerbarhet repeterbarhet Tillfälliga fel I, RE - Instabilitet i instrument - Variation i temperatur - Variation i reagens, inkl kalibratorer (standarder) - Variation i handhavande - Pipettering - Blandning - Tidtagning - Variation i operatören Tillfälliga fel II Tillfälliga fel har flera komponenter σ t2 =σ wr2 + σ br2 + σ 2 bd wr within run br between run, within day bd between day 2

3 Tillfälliga fel III Inomkörningsvariation (σ wr ) Pipetteringsprecision Korttidsvariation i temperatur Stabilitet hos instrumentet Tillfälliga fel IV Inomdag mellan körning (σ br ) Instabilitet i kalibreringskurvan Skillnad i omkalibrering Långvarig variation i instrumentet Ändringar i reagens Ändringar i miljön Trötthet hos personal Tillfälliga fel V Mellandagsvariation (σ bd ) Variationer i instrumentet som sker över dagar Ändringar i reagens Byte av personal Systematiska fel I, SE Fel som är låga eller höga hela tiden 1. Konstanta systematiska fel (CE) a. Interfererande substanser b. Reagens som ger falsk signal 2. Proportionella systematiska fel PE a. Felaktig angivelse av mängd substans i kalibratorer b. Sidoreaktioner med analyten 3

Systematiska fel II Experiment för bestämning av specifika fel Preliminär studie I Tillfälliga fel (RE) replikat Inomkörning replikation precision över mkt kort tid - standard i buffertlösning -

4 Systematiska fel II Experiment för bestämning av specifika fel Preliminär studie I Tillfälliga fel (RE) replikat Inomkörning replikation precision över mkt kort tid - standard i buffertlösning - standard i rätt biologisk matris (serum, urin etc) Konc som studeras vid medicinskt kritiskt värde - upprepad analys av samma prov RE < E A Preliminär studie II Systematiska fel Konstanta fel (CE) interferensstudier Tillsats av interfererande substans till prov (<10% av volymen); gör även en blank Analysera i minst duplikat Skillnad mellan spikat prov och blank interferens Alla spektrofotometriska analyser testas för: - Hemolys - Ikterus - Lipemi - Jämför med E A CE < E A 4

5 Systematiska fel Proportionella fel (PE) recovery studier - tillsätter känd mängd analyt till provet; gör blank på motsvarande sätt - beräkna mängd från stamlösningens konc och volym tillsatt - pipettering viktig Preliminär studie III bestämningar på varje prov Recovery = mängd bestämd x 100/ mängd tillsatt % PE < E A Går vi vidare? Om RE < E A CE < E A Gå vidare med slutgiltig validering PE < E A Mellandagsvariation Metodjämförelse - Bias - Korrelationskoefficient - Linjär regression Bestämning av totalt fel (TE) mellandagsvariation Inomkörningsexperimentet upprepas ca 20 dagar Material med känd stabilitet används Minimera alikvot-alikvot variation RE = 4xSD TM RE TM < E A Bestämmer systematiskt fel hos testmetoden Patientprover analyseras >40, helst 100 st Olika sjukdomstillstånd jmf rutinanvändning Analytkonc fördelade över hela arbetsområdet Hemolytiska, lipemiska och ikteriska prover inkluderas om inte annat anges Analys i duplikat i resp metod Prover som stämmer dålig analyseras om Metodjämförelse I 5

6 Metodjämförelse II Metodjämförelse III Bias, s d endast om PE saknas Systematisk skillnad mellan testmetod och referensmetod Skillnad i medelresultatet i resp metod s d standardavvikelse för skillnaden Bias = Σ (y i x i )/N y i testmetod resultat x i referensmetod resultat N antal talpar t = Bias x N ½ / s d tvåsidig om beräknat t överstiger kritiskt t (tabell) skillnad finns mellan metoderna Om SE < E A accepteras Korrelationskoeficient (r) Extremt känslig för analytens konc område i patientproverna vid jämförelsen r studerar graden av linjärt samband r > 0,975, tillräckligt spridning i mätområdet av provresultat Linjär regressions statistik Gör en x-y plot linjärt samband? Linjen kan beskrivas som Y i = a + b x i Y i beräknat värde, svarar mot x i a intercept b lutning intercept ger konstant fel (CE) lutning ger proportionellt fel (PE) SD runt linjen (s y/x ) ger tillfälligt fel (RE) 6

7 Linjär regressions statistik II Bestämning av systematiskt fel vid X C SE = Y C -X C = a + bx C - X C Begränsningar Data undersöks för linjäritet och olinjäritet Outliers upptäcks (<1 / 40 observationer) Analytiskt konc område är stort X-data (referens metoden) måste vara utan fel Om r > 0.99 < 1% fel I lutning Bestämning av totalt fel Tillfälliga och systematiska fel kombineras Avståndet från medelvärdet på kurvan till det sanna värdet = SE Spridning runt RE definieras som 4 x SD Sämsta möjliga kombination TE = RE + SE Om TE < E A acceptera metoden 7

Relevanta dokument

Illustrerad noggrannhet

Illustrerad noggrannhet riktighet och precision med mål och mening Equalis Allmän klinisk kemi 15-16 november 2012 Mikaela Norman, Sjukhuskemist, Klinisk kemi, Falu Lasarett mikaela.norman@ltdalarna.se