Positiv direkt antiglobulintest (DAT)

Transkript

1 Positiv direkt antiglobulintest (DAT) Docent Jan Säfwenberg Klinisk immunologi och transfusionsmedicin Uppsala

2 Direkt antiglobulintest, DAT Förr ofta kallad Coombs prov eller Coombs direkta test Robin Coombs Coombs RRA, Mourant AE, Race RR (1945) A new test for the detection of weak and incomplete Rh agglutinins. Br J Exp Pathol 26:255

3 Avsikten med DAT Påvisa om erytrocyter in vivo är mantlade med immunglobuliner och/eller komplement Manuella och automatiserade metoder EDTA-blod Ingår i Equalis program Blodgruppering med DAT

4 Vanliga indikationer för DAT Gruppering av spädbarn/misstanke om hemolytisk sjukdom hos nyfödd Utredning vid misstanke om autoimmunhemolytisk anemi, AIHA ABO oförenlig transplantation, stamceller/organ Efter transfusionsreaktion (akut inom 24h, fördröjd inom 2-28 dagar): Prov före och efter samt på inblandade blodenheter

5 DAT ingår inte i Förenlighetsprövning Test inför blodgivning

6 Reagens Antihumanglobulin, AHG Är en kompromiss! Ska innehålla anti-igg (vanligen polyklonalt kanin anti-igg) och anti-c3d (vanligen monoklonalt) Räcker detta? IgM autoantikroppar är alltid komplementbindande Enbart IgA autoantikroppar är mycket sällsynt För test av spädbarn kan anti-igg räcka

7 Reagens Monospecifika Positiv DAT med AHG kompletteras med test med monospecifika reagens: Anti-IgG, anti-iga, anti-igm, anti-c3c anti-c3d och Ctl (kontroll) Undantag: Positiv DAT på spädbarn Vid positivt utfall kompletteras med autolog kontroll

8 Hur förhålla sig till resultatet positiv DAT? Välja teknik som inte påverkas av positiv DAT T.ex inte använda Indirekt antiglobulintest (IAT) för typning av mantlade erytrocyter

9 Läkemedel kan ge positiv DAT Kommenteras inte här och nu

10 Fenotypning Använd direkt agglutinerande teknik (antikroppar av IgM-klass) Kan använda IAT om man efter behandling med t.ex. klorokin lossat Ig från erytrocyterna. (Även Bg antigen lossnar!) Kommentar: Abstract: New York Blood Center: Transfusion 2017 Vol. 57 Supplement S3 C34-A03D

11 Spädbarn som är DAT positivt Har modern kända antikroppar? Har modern under graviditeten provtagits enligt rekommendation? Alla gravida blodgrupperas och screenas vid första mödravårdsbesöket, idealt i graviditetsvecka Alla kontrolleras också i graviditetsvecka Testa annars mamman eller testa navelsträngsprovet Finns förutsättningar för ABO-immunisering? I regel O moder och barn med annan ABO grupp

12 DAT i samband med organtransplantation, ett fall Patienten och donatorn hade före transplantationen inga tecken på irreguljära erytrocytantikroppar Tolv dagar efter transplantationen fick patienten kraftig hemolys. DAT var starkt positiv, anti-igm och anti-c3d. Plasmautbyten, sammanlagt 15 L under 4 dagar. DAT försvagas DAT följdes dagligen och befanns dag positiv med anti-igg och anti-c3d. Efter dag 38 var DAT negativt Tolkas som en primär immunisering mot Jk a Serologiska och molekylärgenetiska labdata talar starkt för att antikroppsproduktionen har sitt ursprung i donator-b-celler tillförda via levertransplantatet

13 Varför har man ordinerat/tagit DAT? Vad kan vara indikationen för DAT i det individuella fallet? Vad framgår av remissen? Vilken avdelning? Vad finns för information i bloddatasystemet?

14 Fall från BIS 82 år gammal kvinna. Anti-D sedan 2003 detta fynd visas inte nedan! 20 mars Prov för BAS-test. Ingen kontakt tas med avdelningen 21 mars Vid 04-tiden nytt prov med blodbeställning MG-test på instrument först med 2 sedan ytterligare 3 enheter RhD neg Reaktivitet: 1st 0,5 och 3st 2 och 1st 3 vid maskinell avläsning. Ingen lämnades ut Avdelningen trycker på om blodbehov BMA sätter på eget initiativ DAT som blir positiv Telefonkontakt med BMA på regionblodcentral. Kort samtal som ej bokförs BMA utför på eget initiativ autoadsorption x1 (ingen metodkontroll utförd!) Manuell MG-test mot 4 nya RhD neg blodenheter som blir negativa, utlämnas och transfunderas

15 Fall från BIS Prov skickas den 23 mars till regionblodcentral för utredning På remissen DAT positiv och fungerande autoadsorption x 1

16 Fall från BIS Svar på utredningen Erytrocyter: DAT positiv med IgG och C3d. Anti-Fy a antikroppar kan elueras Plasma: Anti-Fy a av IgG-klass, titer 16

17 Fall från BIS Befintliga uppgifter i ProSang redan den 5 mars Transfunderad med 7 blodenheter 2008 Transfunderad med 4 blodenheter 4-5 mars 2010

18 Fall från BIS Patientens diagnos: Hemikolectomi Samtliga 8 blodenheter transfunderade i mars 2010 var Fy a positiva! Fallet är en fördröjd hemolytisk transfusionsreaktion Fy a pos 66%

19 Blodgivare som upptäcks vara DAT positiv Kan upptäckas genom att blodenhet genomgående blir positiv vid MG-test Kap 2 i Handbok för blodcentraler: DAT bör primärt bedömas tillsammans med B-Hb. Personer med positiv DAT och normalt B-Hb bör kontrolleras efter 3-4 månader. Om positiv DAT kvarstår, bör personen utredas. Personer med upprepat positiv DAT godkänns inte som blodgivare till patient, även om medicinsk utredning friat från sjukdom.

20 DAT positiv Är ett analysresultat inte en diagnos! Allt ska bedömas i sitt rätta sammanhang!