Blödningsdiagnostik i cerebrospinalvätska Resultat från senaste utskick 2014:02 2015:01 Ronald Lautner Expertgrupp för proteinanalyser
Utskick Översikt 2010-09 2012-50 Pilotomgångar 2014:01 2014:02 2015:01 Ordinarie utskick 2 ggr/år 2 prov per utskick 2
Utskick Provframställning Preparerad (blodkontaminerad) cerebrospinalvätska Färsk blödning (isolerad oxihemoglobintopp): 3 µl hemolyserat EDTA blod späds till ca. 6 ml likvor (likvorpool) Ca. 2 ml av denna blandning späds till ca. 40 ml med pool likvor. Äldre blödning (oxihemoglobintopp + bilirubinskuldra): 7 ml klar likvor blandas med 4 µl hemolyserat EDTA-blod och 120 µl serum från ett barn med högt bilirubinhalt. 2,5 ml av den blandade likvorn späds upp till 30 ml. 3 Källa: Mariann Wall, Neurokemi SU/Mölndal
Utskick Provframställning Preparerad (blodkontaminerad) cerebrospinalvätska Isolerad oxihemoglobintopp: Oxihemoglobintopp + bilirubinskuldra: 4 Laurells klinisk kemi i praktisk medicin, 9:e upplaga, 2012
Utskick 2014:02, prov A Man född 1956. Plötslig debut av kraftig huvudvärk kl.15.00 den 17/7. Söker akuten två dagar senare, på morgonen den 19/7. DT hjärna ua. LP utförs kl.09.00 den 19/7. Provet anländer till lab kl.09.10. Centrifugering: 09.20. Tre rör anländer till lab varav det tredje används för absorbanskurvan. Likvor är gul och klar efter centrifugering. P-Bilirubin: 15 µmol/l. Csv-Erytrocyter: 500 x 10 6 /L. Csv-Leukocyter mono: 1 x 10 6 /L. Csv-Leukocyter poly: 5 x 10 6 /L. Absorbans 415 nm 0,049 AE 5
Utskick 2014:02, prov A Man född 1956. Plötslig debut av kraftig huvudvärk kl.15.00 den 17/7. Söker akuten två dagar senare, på morgonen den 19/7. DT hjärna ua. LP utförs kl.09.00 den 19/7. Provet anländer till lab kl.09.10. Centrifugering: 09.20. Tre rör anländer till lab varav det tredje används för absorbanskurvan. Likvor är gul och klar efter centrifugering. P-Bilirubin: 15 µmol/l. Csv-Erytrocyter: 500 x 10 6 /L. Csv-Leukocyter mono: 1 x 10 6 /L. Csv-Leukocyter poly: 5 x 10 6 /L. 6
Utskick 2014:02, prov B Kvinna född 1987. Akut påkommen åskknallshuvudvärk kl.18.00. Akut DT ua. LP utförs kl.06.00 nästa morgon. Provet anländer till lab kl.06.10. Centrifugering: 06.15. Tre rör anländer till lab varav det tredje används för absorbanskurvan. Likvor är gul och klar efter centrifugering. P-Bilirubin: 20 µmol/l. Csv-Erytrocyter: 900 x 10 6 /L. Csv-Leukocyter mono: 0 x 10 6 /L. Csv-Leukocyter poly: 0 x 10 6 /L Absorbans 415 nm 0,057 AE 7
Utskick 2014:02, prov B Kvinna född 1987. Akut påkommen åskknallshuvudvärk kl.18.00. Akut DT ua. LP utförs kl.06.00 nästa morgon. Provet anländer till lab kl.06.10. Centrifugering: 06.15. Tre rör anländer till lab varav det tredje används för absorbanskurvan. Likvor är gul och klar efter centrifugering. P-Bilirubin: 20 µmol/l. Csv-Erytrocyter: 900 x 10 6 /L. Csv-Leukocyter mono: 0 x 10 6 /L. Csv-Leukocyter poly: 0 x 10 6 /L 8
Utskick 2015:01, prov A Man född 1966. Plötsligt påkommen kraftig huvudvärk i samband med träning på gym. Symptomen släpper efter några timmar. Får en liknande episod 3 veckor senare och söker då akuten dygnet därpå. DT-hjärna ua. LP utförs kl.20.15. Provet anländer till lab kl.20.25. Centrifugering: kl.20.35. Tre rör anländer till lab, varav det tredje används för absorbanskurvan. Likvor är klar och färglös efter centrifugering. P-Bilirubin: 10 µmol/l, P-Albumin: 39 g/l, P-Totalprotein: 71 g/l, Csv-Erytrocyter: <5 x 10 6 /L, Csv-Leukocyter poly: <1 x 10 6 /L, Csv-Leukocyter mono: <5 x 10 6 /L Absorbans 415 nm 0,019 AE 9
Utskick 2015:01, prov A Man född 1966. Plötsligt påkommen kraftig huvudvärk i samband med träning på gym. Symptomen släpper efter några timmar. Får en liknande episod 3 veckor senare och söker då akuten dygnet därpå. DT-hjärna ua. LP utförs kl.20.15. Provet anländer till lab kl.20.25. Centrifugering: kl.20.35. Tre rör anländer till lab, varav det tredje används för absorbanskurvan. Likvor är klar och färglös efter centrifugering. P-Bilirubin: 10 µmol/l, P-Albumin: 39 g/l, P-Totalprotein: 71 g/l, Csv-Erytrocyter: <5 x 10 6 /L, Csv-Leukocyter poly: <1 x 10 6 /L, Csv-Leukocyter mono: <5 x 10 6 /L 10
Utskick 2015:01, prov B Kvinna född 1979. Plötslig debut med åskknallshuvudvärk kl.10.00 den 28/1. Söker akuten samma dag. DT-hjärna ua. LP utförs kl.23.30. Provet anländer till lab kl.23.40. Centrifugering: kl.23.50. Tre rör anländer till lab, varav det tredje används för absorbanskurvan. Likvor är gul och klar efter centrifugering. P-Bilirubin: 17 µmol/l, P-Albumin: 42 g/l, P-Totalprotein: 75 g/l, Csv-Erytrocyter: 600 x 10 6 /L, Csv-Leukocyter mono: 4 x 10 6 /L, Csv-Leukocyter poly: <5 x 10 6 /L Absorbans 415 nm 0,036 AE 11
Utskick 2015:01, prov B Kvinna född 1979. Plötslig debut med åskknallshuvudvärk kl.10.00 den 28/1. Söker akuten samma dag. DT-hjärna ua. LP utförs kl.23.30. Provet anländer till lab kl.23.40. Centrifugering: kl.23.50. Tre rör anländer till lab, varav det tredje används för absorbanskurvan. Likvor är gul och klar efter centrifugering. P-Bilirubin: 17 µmol/l, P-Albumin: 42 g/l, P-Totalprotein: 75 g/l, Csv-Erytrocyter: 600 x 10 6 /L, Csv-Leukocyter mono: 4 x 10 6 /L, Csv-Leukocyter poly: <5 x 10 6 /L 12
Slutsatser Utskick 2014:02, prov A Utskick 2015:01, prov B Utskick 2014:02, prov B Mycket bilirubin Mindre bilirubin Inget bilirubin 20 14 11 0 5 9 Bra samstämmighet Dålig samstämmighet 13
Slutsatser UK guidelines NBA Tangential baslinje Net bilirubin absorbance (NBA) vid 476 nm Bedömningsalgoritm med NBA som utgångspunkt Lägger större vikt på förekomst av bilirubin Minst 12 tim. duration mellan symptomdebut och provtagning. Cruickshank A, Auld P, Beetham R, et al. Revised national guidelines for analysis of cerebrospinal fluid for bilirubin in suspected subarachnoid haemorrhage. Annals of clinical biochemistry. May 2008;45(Pt 3):238-244. 14
Slutsatser UK guidelines Cruickshank A, Auld P, Beetham R, et al. Revised national guidelines for analysis of cerebrospinal fluid for bilirubin in suspected subarachnoid haemorrhage. Annals of clinical biochemistry. May 2008;45(Pt 3):238-244. 15
Slutsatser Isolerad oxihemoglobintopp (avsaknad av bilirubin) Olika tolkningar av samma fynd UK guidelines om >12 timmar efter symtomdebut Inga hållpunkter för SAB. (eller inkonklusivt fynd ) övriga om provet korrekt hanterat Förenligt med färsk SAB. (eller färsk SAB kan inte uteslutas ) 16
Slutsatser Sammanfattning Bilirubin i provet: Bra samstämmighet Inget (eller låg halt av) bilirubin i provet: Sämre samstämmighet Svagpunkten för likvorbaserad blödningsdiagnostik ligger i det akuta skedet (< 12 timmar efter symptomdebut), där bilirubin ännu inte hunnit bildas efter en blödning i subarachnoidalrummet. 17
Proteinanalyser i cerebrospinalvätska Resultat från senaste utskick 2014:02 2014:03 2014:04 2015:01 Ronald Lautner Expertgrupp för proteinanalyser
Utskick 2014:02 Utskick 2014:03 Utskick 2014:04 Överlag god överensstämmelse i de kvalitativa bedömningarna. Låg spridning i de kvantitativa mätningarna. 19
Utskick 2015:01 Bedömning av blod-hjärnbarriärfunktion Blod-hjärnbarriärskada 7 1 2 Gränsvärde Normal blod-hjärnbarriärfunktion Låg variation i albuminkvoten: Medelvärde 7,76 (SD 0,44) CV 5,7 % Olika referensgränser? på SU: <6,8 (15-45 år) 20
TACK! Expertgruppen för proteinanalyser: Aleksandra Mandic Havelka, Stockholm Karin Bolin, Malmö Lars-Olof Hansson, Stockholm Magnus Jonsson, Malmö Anders Larsson, Uppsala Benny Larsson, Malmö Ronald Lautner, Göteborg/Mölndal Göran Oleröd, Göteborg Programkoordinator: Marie Lundberg 21