Vaksiner og framtidens diagnostikk. Johan Berglund Professor, MD, PhD

Storlek: px

Starta visningen från sidan:

Download "Vaksiner og framtidens diagnostikk. Johan Berglund Professor, MD, PhD"

Gunilla Gustafsson
för 8 år sedan
Visningar:

1 Vaksiner og framtidens diagnostikk Johan Berglund Professor, MD, PhD

2 Vaccin

4 Ingen behandling Vaccin Vaccin mot fästingburen virusencefalit (TBE), Baxter Encepur, Chiron Grundimmunisering Frekvent boostring Skyddseffekt >98% Få biverkningar Vaccinationsgenombrott 27 fall publ. Vaccine Apr 1;28(16):

5 Vaccinationsrekommendationer Fast boende och sommarboende i särskilda riskområden Personer som vistas mycket i skog och mark i områden med smittrisk Resenärer som skall vistas mycket i skog och mark på Åland, I Baltikum, särskilda områden i central- och Östeuropa samt Ryssland

7 Akut infektion Vaccinationsgenombrott IgM i serum (ELISA) Intratekal antikroppsproduktion (ELISA) Immunitetsprövning Korsreaktivitet (andra flavivirus) NT (RFFIT) NT (RFFIT)

10 Infected unfed tick, spirochetes present in lumen of midgut Osp Expression : OspA + OspC -

11 Infected unfed tick, spirochetes present in lumen of midgut Blood meal Osp Expression : OspA - OspC + Environmental signals e.g. temperature, ph Naive host Osp Expression : OspA + OspC -

12 Infected unfed tick, spirochetes present in lumen of midgut Migration from midgut to salivary glands Blood meal Naive host Osp Expression : OspA + OspC - Osp Expression : OspA - OspC +

13 Infected unfed tick, spirochetes present in lumen of midgut Migration from midgut to salivary glands Blood meal Naive host Osp Expression : OspA + OspC - Osp Expression : OspA - OspC + Transmission of spirochetes to nonimmunized host

14 Infected unfed tick, spirochetes present in lumen of midgut Osp Expression : OspA + OspC -

15 Infected unfed tick, spirochetes present in lumen of midgut Blood meal Antibody to OspA in blood meal Y Y Y Y Y Y binds to spirochetes in mid-gut Y Y Osp Expression : OspA + OspC - OspA Immunized host

16 Infected unfed tick, spirochetes present in lumen of midgut Blood meal Antibody kills spirochetes and blocks passage to salivary glands Osp Expression : OspA + OspC - OspA Immunized host Y Y

17 Infected unfed tick, spirochetes present in lumen of midgut Blood meal Antibody kills spirochetes and blocks passage to salivary glands X OspA Immunized host Y Y Osp Expression : OspA + OspC - No Transmission

18 Vaccin E.coli derived recombinat OspA chimaeric vaccine (trivalent) Täcker in 6 borrelia serotyper predicted coverage 98% av LB och 99% av NB (Baxter)

21 Borrelia är en sjukdom! deviation from or interruption of the normal structure or function of any body part, organ or system that is manifested by a caracteristic set of symptoms and signs and whose aetiology, patology and prognosis may be known or unknown The Free Dictionary 2010 Thus no disease without signs and/or symptoms Ingen Borrelia utan kliniska manifestationer!

22 Antikroppar mot B. burgdorferi s.l. Skiljer inte på aktiv eller ett immunologiskt avtryck från en tidigare symtomatisk eller asymtomatisk infektion. God kunskap om de kliniska manifestationerna vid Borreliasjukdom en förutsättning för att använda de diagnostiska testern!

23 ? = genotyping in progress

Hudbiopsi 50 85 % CSF 10 20 % Blod < 10 % Synovia < 10 % Organ < 10 % Nackdelar: Kostsamt,

24 Hudbiopsi % CSF % Blod < 10 % Synovia < 10 % Organ < 10 % Nackdelar: Kostsamt, omständigt och långsamt Fördelar: Viabla isolat, kompletta genom Forskning, t ex vaccinutveckling

Hudbiopsi 50 70 % CSF 25 100 % Synoviabiopsi 50

25 Hudbiopsi % CSF % Synoviabiopsi % Synovialvätska % Blod 0 30 % Urin osäkert

26 Fästingburna infektioner PV 2009 JB Låg sensitivitet i odling, antigendetektion och PCR Antigen heterogenitet Ofullständig seroreaktivitet i tillgängliga tester Både IgM och IgG kvarstår länge, hög seroprevalens Korsreaktivitet - falskt positiva Svårigheter att standardisera diagnostiska reagens Inter-assay-variabilitet Diffusa frågeställningar Patientdriven diagnostik Dåligt samarbete laboratorium-klinik

EIA, IMx Hög sensitivitet för screening, rule out Låg specificitet (fr a IgM) Semikvantitativ (som bäst) Serum-likvorindex Hög specificitet och sensitivitet för intratekal

27 EIA, IMx Hög sensitivitet för screening, rule out Låg specificitet (fr a IgM) Semikvantitativ (som bäst) Serum-likvorindex Hög specificitet och sensitivitet för intratekal Ig-produktion Western Blot Konfirmerande test, rule-in Hög specificitet 1 gen: Sonikat 2 gen: Fraktioner, enstaka antigen 3 gen: Rekombinanta antigen 4 gen: In vivo antigen

Stadium I IgM dominerar, sens 20 50 % Betydelse?

28 Stadium I IgM dominerar, sens % Betydelse? Ofta helt seronegativ vid kort sjd duration Stadium II IgM och IgG, sens % Intratekal Ig-produktion vid neuroborrelios Stadium III Ofta bara IgG, sens % Höga titrar, multipla band i WB vid artrit, AC Intratekal Ig-produktion vid neuroborrelios

29 Prevalens seropositiva IgG bland blodgivare Borrelia 12/150 8% (95% CI 4-12%)

30 Seropos Seroneg Sjuka 32 2 PPV Friska NPV 0,99 Sens 0.94 Spec 0.81 Dag Nyman, Ålands Centralsjukhus

31 Hänsyn till sannolikheten för sjukdom före test Pre-test 20% = PPV 30% Pre-test 80% = PPV 89% Singla slant = PPV 50%!!! Billigt! Dag Nyman, Ålands Centralsjukhus

32 Nytillkommen titer Signifikant titerstegring under 4 6 veckor (samkörning, validerad semikvantitativ metod) IgM IgG konversion Positivt serum-likvorindex

33 Krav på anamnestiska och kliniska data Tvåstegsförfarande: EIA som rule-out Konfirmation med Western Blot PCR på ledvätska vid misstänkt borreliaartrit

34 Fördelar: Utvärdering av multipla antigen Temporal information Kan sortera bort falskt positiva EIA-resultat Nackdelar: Arbetskrävande Svår att automatisera Tolkningsproblem Dyrt Kräver selektivt urval Inte alltid klokare svar

37 Tolkningsstöd Databas inklusive bilder Spårbarhet Bedömning på distans Möjlighet att skicka utskrift av tolkningsprotokoll

38 Viktigt med bra dialog med beställaren Klinisk bild typisk Pos serologi ej diagnostisk såvida inte förändring Neg serologi x 2 inom 4 6 v = osannolik borrelios IgM? Odling/PCR i vissa fall Celler i likvor Annat? (Western Blot på likvor, nervskademarkörer, cytokiner, cellulär immunitet, antigendetektion, autoimmunitet, mm)

39 Serologiskt visst stöd för aktuell borrelios. Ospecifik reaktivitet kan dock förekomma. Förnyat prov med serokonversion i IgG kan konfirmera diagnosen, men det är adekvat att behandla på detta resultat. /IE Borreliaserologi är en relativt grov, semikvantitativ test. Att följa IgG-titer över tid är inte meningsfullt när diagnos har ställts. /IE För diagnostik av neuroborrelios krävs samtidigt taget serumoch likvorprov för beräkning av serum-likvor index, som mått på intratekal produktion av immunglobuliner. Negativ serologi utesluter inte helt neuroborrelios. /IE Borrelia ger oftast upphov till kronisk, recidiverande artrit, ofta i en större led, typ knäled. Småledsartriter, symmetriska artriter och diffus kronisk ledvärk, gör borreliaetiologi osannolik. /IE

40 Kunnigare! Ödmjukare! Bättre på dialog med mikrobiologen! Bättre strategi för borreliaserologi! men fortfarande är borreliadiagnostiken svår och ofullständig

41 Genotypning PCR-baserad OspA serotypning för epidemiologiskt bruk Fylogenetiska jämförelser RT-PCR -> kvantitering möjlig

42 Lymfoproliferativ assay: ELISPOT Utgår från T-lymfocyter i perifert blod Stimuleras med borreliaantigen Cytokinfrisättning som svar på stimuli detekteras Utvidgad klinisk utvärdering planerad Ej standardiserad, få indikationer i dagsläget

43 Infektions-diagnostik, baserad på lymfocyter som alternativ till antikroppar Borreliapeptid HLA klass I Dextran-polymer Fluorokrom Tcell receptor CD8+ T-lymfocyt Flödescytometri-analys av borrelia-specifik Tcell

44 0-3 månader 3-12 månader >12 månader 80 p<0.05 p< Ej kronisk NB Kronisk NB Kontroller Ej kronisk NB Kronisk NB Kontroller Ej kronisk NB Kronisk NB Kontroller n=7 n=6 n=7 n=6 n=7 n=7 n=3 n=6 n=7 Mona Widhe et al.

Relevanta dokument

Fästingar ett ämne som bitit sig fast. Johan Berglund Professor, MD, PhD

Fästingar ett ämne som bitit sig fast. Johan Berglund Professor, MD, PhD Vilket spektrum av symtom kan man se vid borrelios? Differentialdiagnoser? Köns- och åldersskillnader? Hur tolkar man serologisvaret?