2015/02/02 A93A01360BSV A11A01611 25 ml 23.5 ml Högkänslig metod 400 Diagnostisk reagens för kvantitativ in vitro bestämning av en högkänslig metod för C-Reaktivt protein (CRP HS) i serum eller plasma med latexförstärkt immunoturbidimetri. QUAL-QA-TEMP-0846 Rev.9 Programvaruversion Serum, plasma: CRPhs 3.xx Användningsområde är en reagens som är avsedd för användning vid kvantitativ in vitro-diagnostisk bestämning av C-reaktivt protein i humant serum och plasma baserat på en immunturbidimetrisk analys. Mätning av C-reaktivt protein hjälper till vid utvärdering av storleken på skador i kroppsvävnad. Klinisk betydelse a Normalt analysinstrument (1,0-800 mg/l): Nivån av C-reaktivt protein i serum kan stiga dramatiskt efter hjärtinfarkt, stress, trauma, infektion, inflammation, operation eller neoplastisk tillväxt. Stegringen inträffar inom 24 till 48 timmar och nivån kan stiga till 2000 gånger det normala. Eftersom stegringen är ospecifik kan den inte tolkas utan en fullständig medicinsk historik, och även då endast genom att jämföra med tidigare värden. Högkänsligt (hjärt-) analysinstrument (0,12-100 mg/l): Studier har även visat att upptäckten av mycket låga CRP-nivåer kan ge värdefull information. Den normala CRP-koncentrationen hos en frisk vuxen är (beroende på a Modifiering: Modifiering av klinisk betydelse. b Modifiering: "Metod": modifiering. den specifika nivån hos varje enskild patient) < 1 mg/l (1). Något högre värden kan indikera en förhöjd risk för kranskärlssjukdom hos asymtomatiska patienter (2, 3). CRP-koncentrationer över 3 mg/l, vid sjukhusinläggning, förutsäger ett osäkert resultat efter en hjärtinfarkt (4). Följande relativa riskkategorier i relation till den genomsnittliga CRP-nivån har rekommenderats: låg < 1 mg/l, måttlig 1,0 till 3,0 mg/l och hög > 3,0 mg/l (5). Ett förhöjt CRP-värde är inte exakt och bör inte tolkas utan en fullständig medicinsk historia eftersom CRP är ett akutfasprotein vars nivåer kan öka ospecifikt på grund av andra inflammatoriska sjukdomar. Vid riskanalys för hjärtsjukdomar måste fler specifika tester för hjärtsjukdomar genomföras, som exempelvis totalkolesterol, HDL-kolesterol och LDL-kolesterol. Vid riskbedömning bör nivåerna för CRP > 10 mg/l utvärderas för övriga icke-kardiovaskulära ursprung. Test för riskbedömning bör inte genomföras när det finns indikationer på infektion, systemisk inflammation eller trauma. Den här analysen är inte avsedd för behandling av akuta kranskärlssjukdomar och är inget substitut för traditionella kardiovaskulära riskfaktorer. Screening av hela den vuxna befolkningen för hscrp rekommenderas inte. Det genomsnittliga värdet i hscrp-nivån som bestäms med två veckors mellanrum bör användas vid riskbedömningen hos patienter som är metaboliskt stabila. hscrp anses vara en klass IIa-markör för akuta kranskärlssjukdomar utöver Troponin I (6). Metod b (Licensierad för USP6, 248, 597/ USP6, 828, 158 och motsvarande patent i andra länder) är en latexförstärkt immunturbidimetrisk analys som 1 / 5
utvecklats för att noggrant mäta CRP-nivåer i serum- och plasmaprover. När en antigen-antikroppsreaktion inträffar mellan CRP i ett prov och anti-crp-antikropp som sensibiliserats för latexpartiklar, får detta agglutination till följd. Denna agglutination detekteras som en absorbansändring, varvid ändringens storlek står i proportion till mängden CRP i provet. Den faktiska koncentrationen bestäms sedan genom interpolering från en kalibreringskurva som tagits fram med hjälp av kalibratorer med känd koncentration. Reagenser är redo att användas. Reagens 1: Buffertlösning: Glycinbuffertlösning Reagens 2: Latexsuspension: 0,20% (vikt/volymprocent) suspension av latexpartiklar som sensibiliserats med antikroppar mot anti-crp (kanin) Efter utförda mätningar ska reagenskassetterna vara kvar på den kylda brickan i 400. Var noga med att rätt lock sätts tillbaka på respektive kassett. Reagenser med olika lot-nummer får inte bytas ut mot varandra eller blandas. ska användas i enlighet med denna reagensbipacksedel. Om anvisningarna inte följs kan tillverkaren inte garantera prestandan. Hantering 1. Ta bort båda locken från kassetten. 2. Använd en plastpipett för att avlägsna eventuellt skum. 3. Placera kassetten i det kylda 400 reagensfacket. Kalibrator c Kontroll För intern kvalitetskontroll, använd: Low CRP Control, ref. A11A01731 (ej inkluderat) 4 x 1 ml Varje kontroll ska analyseras dagligen och/eller efter varje kalibrering. Kontrollfrekvensen och konfidensintervallen bör motsvara riktlinjerna för laboratorier och landspecifika föreskrifter. Federala, statliga och lokala riktlinjer ska följas vid test av kvalitetskontrollmaterial. Resultaten måste ligga inom intervallet för de definierade konfidensgränserna. Varje laboratorium bör upprätta en metod som ska följas om resultaten överskrider dessa konfidensgränser. Material som behövs men ej medföljer Automatiskt kliniskt-kemiskt analysinstrument: 400 Kalibrator: CRP HS Cal, ref. A11A01983 Kontroll: Low CRP Control, ref. A11A01731 Rengöringslösning: Clean-Chem CP, ref A11A01755, 30 ml eller Clean-Chem 99 CP, ref. A11A01789, 4 x 99 ml Vanlig laboratorieutrustning. Prov Serum. Plasma i litiumheparin. Plasma i EDTA. Andra antikoagulanter än de listade har inte testats av HORIBA Medical och rekommenderas därför inte för användning med denna analys. Stabilitet (7): Vid 20-25 C: 15 dagar Vid 2-8 C: 2 månader Vid -20 C: 3 år För kalibrering, använd: CRP HS Cal,ref. A11A01983 (medföljer ej) 2 x 2 ml Denna kalibrator är spårbar till IRMM/ERM-DA472/IFCC. c Modifiering: information tillagd. 2 / 5
Referensintervall (8) d Eftersom värdena kan variera med hänsyn till ålder, kost, kön och geografisk spridning, bör varje laboratorium fastställa sitt eget referensintervall. Värdena som anges här ska endast betraktas som vägledande. CRP: Vuxna (20 60 år) < 5 mg/l Rekommenderade kategorier för att bedöma risken för hjärtsjukdomar (5) Låg < 1 mg/l Måttlig 1,0 till 3,0 mg/l Hög < 3,0 mg/l Intraindividuella variationer av CRP är signifikanta och ska beaktas vid tolkning av värden. Förvaring och stabilitet Reagenser i oöppnade kassetter är stabila fram till det utgångsdatum som anges på etiketten om de förvaras vid 2-10 C. Stabilitet i öppnad kassett: se Prestanda för 400. Avfallshantering Följ gällande föreskrifter. Detta reagens innehåller mindre än 0,1% natriumazid som konserveringsmedel. Natriumazid kan reagera med bly eller koppar och bilda explosiva metallazider. Allmänna försiktighetsåtgärder Detta reagens är endast avsett för yrkesmässig in vitrodiagnostik. Endast avsedd för bruksanvisningar. När diagnos ställs ska alltid hänsyn tas till kliniska symtom och resultat från andra analyser. Följ sedvanliga försiktighetsåtgärder för laboratoriearbete. Reagenskassetterna är endast för engångsbruk och ska avfallshanteras enligt gällande lokala föreskrifter. Ytterligare information finns i det varuinformationsblad som hör till reagenset. Använd inte produkten om det finns synliga tecken på biologisk, kemisk eller fysisk skada. Analysen är endast för konventionell CRP-användning. Användaren är skyldig att kontrollera att detta dokument är tillämpligt för det reagens som används. Prestanda för 400 De prestandadata som anges nedan har fastställts i analysinstrumentet 400. Antal test: 200 tester om antalet begärda tester som krävs är lågt och användaren av 400 avser att använda kassetten till den maximala stabiliteten i instrumentet, rekommenderarhoriba Medical att förbrukningsartikel XEC084 (satsmembran) används för att genomföra det antal tester som anges i detta dokument. Reagensets stabilitet i instrumentet: Sedan förpackningen öppnats är reagenskassetten som är placerad i kylfacket i 400 stabil i 64 dagar. Provvolym: 12 µl/test Kvantifieringsgräns: Kvantifieringsgränsen har fastställts enligt CLSI (NCCLS), EP17-A-protokollet (9) och uppgår till 0,12 mg/l. Minsta tolkningsgräns: Minsta tolkningsgräns (MIL) har fastställts med hjälp av flera bestämningar av låga provkoncentrationer och uppgår till 0,048 mg/l. Noggrannhet och precision: Repeterbarhet (precision inom körning) 4 prover med låg, medelhög och hög koncentration och 1 kontroll analyseras 20 gånger enligt rekommendationerna i Valtec-protokollet (10). Medelvärde mg/l Variationskoefficient % Kontrollprov 1 1,78 0,86 Prov 1 0,30 2,48 Prov 2 1,06 1,38 Prov 3 5,76 0,43 Prov 4 8,74 0,55 Reproducerbarhet (total precision) 4 prover med låga, måttliga och höga nivåer samt 1 kontroll analyseras med dubbelprover i 20 dagar (2 serier per dag) i enlighet med rekommendationerna i CLSI (NCCLS), EP5-A2-protokollet (11). d Modifiering: modifiering av referensintervall. 3 / 5
Medelvärde mg/l Variationskoefficient % Kontrollprov 1 1,59 3,27 Prov 1 0,23 6,05 Prov 2 0,91 3,61 Prov 3 4,78 2,35 Prov 4 8,23 2,18 Mätintervall: Analysen bekräftade ett mätintervall på 0,12 till 10 (mg/l), med en automatisk efterspädning på upp till 100 mg/l. Reagenslinjäriteten har bedömts upp till 10 mg/l i enlighet med rekommendationerna i CLSI (NCCLS), EP6- A-protokollet (12). Korrelation e Patientprover: Serum Antal patientprover: 103 Prover korreleras med ett kommersiellt reagens som referens i enlighet med rekommendationerna i CLSI (NCCLS), EP9-A3 protokollet (13). Värdena låg mellan 0,19 och 9,57 mg/l. Ekvationen för den allometriska linje som erhölls med proceduren för Passing-Bablock-regression (14) är: Y = 1,05 X 0,03 (mg/l) med korrelationskoefficienten r 2 = 0,996. Interferenser: Hemoglobin: Ingen betydande påverkan har observerats upp till 290 µmol/l (500 mg/dl). Triglycerider: Ingen betydande påverkan har observerats upp till en triglyceridkoncentration på 6,18 mmol/l (541 mg/l). Totalt bilirubin: Ingen betydande påverkan har observerats upp till 440 µmol/l (25,7 mg/dl). Direkt bilirubin: Ingen betydande påverkan har observerats upp till 560 µmol/l (32,8 mg/dl). Askorbinsyra: Ingen betydande påverkan har observerats upp till 340 µmol/l (5,98 mg/dl). Ibuprofen: Ingen betydande påverkan har observerats upp till 2,43 mmol/l (50,1 mg/dl). Acetaminofen: Ingen betydande påverkan har observerats upp till 1324 µmol/l (20 mg/dl). Acetylsalicylsyra: Ingen betydande påverkan har observerats upp till 3,62 mmol/l (65,2 mg/dl). Andra begränsningar anges av Young i form av en lista över läkemedel och preanalytiska variabler som är kända för att interferera med denna metod (15, 16). Prozone-effekt f : Inget antigenöverskott har påträffats vid koncentrationer upp till 200 mg/l. När provkoncentrationen ligger ovanför mätintervallet för den här högkänsliga metoden (> 100 mg/l) måste provet mätas med det andra analysinstrumentet (mätintervall på 1 till 800 mg/l). Kalibreringsstabilitet: Reagenset kalibreras dag 0. Kalibreringsstabiliteten kontrolleras genom analys av 1 kontrollprov. Kalibreringsstabiliteten är 18 dagar. Obs! En ny kalibrering rekommenderas vid byte av reagenssats eller när resultatet av kvalitetskontrollen ligger utanför det intervall som fastställts. Programvaruversion: 3.xx Referenser 1. Raifai N, Ridker PM. Population Distributions of C- reactive Protein in Aparently Healthy Men and Women in the United States: Implication for Clinical Interpretation. Clin Chem (2003) 49: 666-669. 2. Morrow AD, Ridker PM. C-reactive protein, inflammation, and coronary risk. Med. Clin. of North Am. (2000) 84: 149161. 3. Ridker PM. Novel risk factors and markers for coronary disease. Adv. Int. Med. (2000) 45: 391-419. 4. Ridker PM, Cannon CP, Morrow D, Rifai N, Rose LM, McCabe CH, Pfeffer MA, Braunwald E. C-Reactive Protein Levels and Outcomes after Statin Therapy. N. Eng. J. Med. (2005) 352: 20-28. 5. Pearson TA et al. Markers of inflammation and cardiovascular disease. Application to clinical and public health practice. A statement for healthcare professionals from the Centers for Disease Control and Prevention and the American Heart Association. http://www.circulationaha.org. e Modifiering: modifiering av korrelation. f Modifiering: data tillagda. 4 / 5
6. R.H. Christianson et al. NACB Biomarkers of Acute Coronary Syndrome & Heart Failure (draft guidelines) AACC Press, (2004). 7. Guder WG, Zawta B. The Quality of Diagnostics Samples. Samples: From the Patient to the Laboratory. 1 st ed. Guder WG, Narayanan S, Zawta B. (WHILEY-VCH, Darmstadt, Germany), (2001): 24. 8. Roberts WL, McMillin GA, Burtis CA, Bruns DE. Reference Information for the Clinical Laboratory, Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics; 4 th Ed., Burtis CA, Ashwood ER, Bruns DE (Elsevier Saunders eds., St Louis, USA), (2006): 2263. 9. Evaluation of detection capability for clinical laboratory measurement procedures. Approved Guideline, 2 nd ed., CLSI (NCCLS) document EP17-A2 (2012) 32 (8). 10. Vassault A, Grafmeyer D, Naudin C et al. Protocole de validation de techniques (document B). Ann. Biol. Clin. (1986) 44: 686-745. 11. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Method. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP5-A2 (2004) 24 (25). 12. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP6-A (2003) 23 (16). 13. Measurement Procedure Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples. Approved Guideline, 3 rd ed., CLSI (NCCLS) document EP9-A3 (2013) 33 (11). 14. Passing H, Bablock W. A new biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. (1983) 21: 709-20. 15. Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 4 th Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: 143-163. 16. Young DS. Effects of Preanalytical Variables on Clinical Laboratory Tests. 2 nd Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: 120-132. 5 / 5