Klinisk kemi och farmakologi Giltigt från: Fastställd av: Johanna Helmersson Karlqvist CRP, B- (Afinion)

Transkript

1 sida 1 (8) Koder Rapportnamn B-CRP Synonym B-C-reaktivt protein Beställningskod CRP-B alternativt CRPB NPU-kod/ EDI-kod NPU-kod finns ej, lokalt används XCRPB. Provmaterial Utförande Typ av provmaterial Kapillärblod eller venblod Typ av provrör och tillsatser Kapillärprovtagning direkt i medföljande kapillär. Vid venprovtagning: Rör med tillsats av EDTA eller Litiumheparin, samt serumrör. Helblod, plasma samt serum går att använda för analys. Provvolym 1,5 µl krävs för analys. Provberedning och förvaring EDTA- och heparinblod kan förvaras i kylskåp i 3 dygn före analys. Centrifugering görs enligt gällande rutin. Plasma och serum kan förvaras 10 dagar i kylskåp före analys. Vid kapillär blodprovstagning 1. Testkassetten ska ha en temperatur mellan C vid användning. 2. Öppna foliepåsen alldeles innan den ska användas. Testkassetten ska användas inom tio minuter från att folieförpackningen har öppnats. Använd handtagen för att hålla kassetten korrekt. 3. Genomför en kapillär blodprovstagning (vb se utförandebeskrivning för kapillärprovtagning). 4. Dra provtagningsenheten rakt upp ur testkassetten. 5. Håll provtagningsenhetens kapillär mot bloddroppen tills kapillären är helt fylld. Torka inte av kapillärens utsida. 6. Sätt omedelbart tillbaka provtagningsenheten i testkassetten. 7. Analys måste påbörjas inom 1 minut från att kapillären fyllts. 8. Tryck för att gå in i patientprovsfunktionen. Luckan öppnas automatiskt. Luckan får aldrig öppnas manuellt. 9. Sätt in testkassetten med streckkoden åt vänster.

2 sida 2 (8) Felkällor 10. Stäng luckan manuellt. 11. Tryck och skanna in LID nr. Tryck för att bekräfta. Provet analyseras, detta tar 3 min 40 sek. 12. Registrera resultatet. Tryck för att godkänna. Luckan öppnas automatiskt. 13. Ta ut och kontrollera testkassetten. Kontrollera att färgen på membranet ungefär motsvarar det uppmätta värdet, att reagensen har förbrukats och att kapillären är tom. 14. Kasta testkassetten. Stäng luckan manuellt. Venöst blod från provrör 1. Testkassetten ska ha en temperatur mellan C vid användning 2. Öppna foliepåsen alldeles innan den ska användas. Testkassetten ska användas inom tio minuter från att folieförpackningen har öppnats. Använd handtagen föra att hålla kassetten korrekt. 3. Dra provtagningsenheten rakt upp ur testkassetten. 4. Använd droppstift på provröret och applicera en droppe blod på en hydrofob yta. Fyll provtagningsenhetens kapillär. Torka inte av kapillärens utsida. 5. Sätt omedelbart tillbaka provtagningsenheten i testkassetten. 6. Analys måste påbörjas inom 1 minut från att kapillären fyllts. 7. Tryck för att gå in i patientprovsfunktionen. Luckan öppnas automatiskt. Luckan får aldrig öppnas manuellt. 8. Sätt in testkassetten med streckkoden åt vänster. 9. Stäng luckan manuellt. 10. Tryck och skanna in LID nr från vakuumröret. Tryck för att bekräfta. Analysen tar 3min 40sek. 11. Registrera resultatet. Tryck för att godkänna. Luckan öppnas automatiskt. 12. Ta ut och kontrollera testkassetten. Kontrollera att färgen på membranet ungefär motsvarar det uppmätta värdet, att reagensen har förbrukats och att kapillären är tom. 13. Kasta testkassetten. Stäng luckan manuellt. Interferenser Ingen signifikant interferens sågs upp till följande koncentrationer ( enligt tillverkaren ): Bilirubin 510 µmol/l Triglycerider 8 mmol/l Kolesterol 10 mmol/l Rheumatoid faktor 760 IU/ml Leukocyter 45 x 10 9 /L

3 sida 3 (8) Svarsrutiner Utrustning Svar lämnas i heltal, enhet mg/l. Om instrumentet är uppkopplat sker svarsöverföring automatiskt till Flexlab TEK där svaret godkänns eller underkänns. Är serum eller plasma analyserat och värdet är >160 ska provet underkännas och skrivas in manuellt med kommentarskod TSEKOM och analyskommentaren Värdet är > 160mg/L. Provet analyserat som serum/plasma. Fungerar inte uppkopplingen skrivs svaren in manuellt. Resultat mindre än 5 mg/l registreras som 4 mg/l i FlexLab. Resultatet svaras då automatiskt ut som <5 mg/l. Resultat mer än 200 mg/l registreras som 201 mg/l i FlexLab. Resultatet svaras då automatiskt ut som >200 mg/l och blir patologmärkt. Referensintervall <10 mg/l Svaret rapporteras ut som B-CRP även om serum eller plasma analyserats. Se även Bra att veta. Referensurvalsgrupp Labboken 2003, Klin kem lab, Universitetssjukhuset Lund. Instrument Afinion TM AS100 Analyzer. Instrumentet får ej utsättas för stötar. Vid all förflyttning skall instrumentet vara avstängt. Instrumentet ska stängas av vid arbetsdagens slut, verksamheter som har dygnet runt verksamhet ska slå av instrumentet en gång/dygn. OBS! Luckan får aldrig öppnas manuellt. Underhåll Dagligt Stäng av och sätt på instrumentet. Display Vid behov torkas displayen med medföljande putsduk. OBS! Använd ingen vätska då skärmen innehåller elektronik som inte tål fukt. Ytterhölje Vid behov torkas utsidan av med en lätt fuktad trasa. Använd vatten eller DAX-ytdesinfektion. Instrumentet skall vara avslaget och nätkontakten utdragen innan rengöring. Kassettkammare Kassettkammaren ska rengöras omedelbart om material eller vätskor runnit ner i kassettkammaren. För normalt underhåll (damm etc) ska kassettkammaren rengöras en gång per månad. 1. Tryck för att öppna luckan. 2. Ta ur nätkontakten.

4 sida 4 (8) Reagens Kalibrering 3. Fukta en rengöringspinne med 3 droppar vatten eller ytdesinfektion. Pinnen ska inte vara blöt. 4. Torka försiktigt bort stänk och smutspartiklar från kassettkammaren med hjälp av den fuktade pinnen. 5. För att desinfektera kassettkammaren måste ytan i kammaren vara exponerad för desinfektionsmedlet i minst 10 minuter. 6. Torka bort all kvarvarande vätska från kassettkammaren med ny torr rengöringspinne. 7. Stäng luckan. 8. Sätt i nätkontakten och slå på strömmen på instrumentet. Felsökning Se den svenska användarmanualen för Afinion TM AS100 Analyzer. Tillägg till manualen: Felkod 213, 214 och 215 kan även vara ett larm för att provet innehåller höga nivåer av leukocyter. Åtgärdas genom att centrifugera provet och analysera om. Om CRP resultat då erhålls bör LKC kontrolleras. Kemikalier/ Kit Afinion TM testkassett 15-pack, Art nr 40738, leverantörens art nr F Seronorm TM kontroll, 2 nivåer, Liquid L-1 Art nr 48260, leverantörens art nr och Liquid L-3 Art nr 52638, leverantörens art nr Droppkork till Seronorm CRP Art nr 50350, leverantörens art nr Rengöringspinne, Art nr 43637, leverantörens art nr A Förvaring och hantering Testkassetterna är hållbara till utgångsdatum vid förvaring i kylskåp (2-8 C). Testkassetterna måste uppnå en temperatur av C innan de används, det tar ca 15 minuter. Testkassetterna kan förvaras i oöppnade foliepåsar i rumstemperatur (15-25 C) i 4 veckor. Notera datum på förpackningen när den tas ur kylskåpet. Testkassetterna får inte frysas. Testkassetterna skall användas inom 10 min från det foliepåsen öppnats. Kassetterna ska skyddas från direkt solljus. Riskbedömning Inga farliga ämnen, i angivna koncentrationer. Kalibrator Afinion TM CRP är kalibrerad mot ERM DA470 referenspreparation. Spårbarhet CRM 470

5 sida 5 (8) Kvalitetskontroll All personal som använder instrumentet bör med jämna mellanrum köra både intern- och externkontroller. Att köra kontroller är ett bra sätt att upptäcka avvikelser/fel på både instrument och handhavande. Intern processkontroll En elektronisk självtest utförs automatiskt varje gång instrumentet startas för att säkerställa att instrumentet fungerar enligt fastställda specifikationer. Stäng därför av och sätt på instrumentet en gång varje dygn. Internkontroll Seronorm TM CRP Control från SERO, två nivåer. Oöppnade kontroller är hållbara till utgångsdatum angivet på flaskans etikett vid förvaring i kylskåp (2-8ºC). Öppnade kontrollflaskor är hållbara i 1 månad vid förvaring i kylskåp. Skriv datum när flaskan öppnas. Kontrollerna kan användas direkt från kylskåpet. Kontrollen ska ej stå framme i rumstemperatur. En nivå av kontrollen analyseras en gång per vecka, vid oväntade patientresultat samt ev vid instrumentproblem Ena kontrollnivån analyseras i en månad, nästa månad analyseras den andra kontrollnivån. Åsatta nivåer på kontrollen finns på Sero s hemsida På bipacksedeln, högt upp till vänster, efter en symbol på en uppslagen bok finns ett kodnummer som anges. Öppna det dokument som har lotnr i rubriken. Kontrollens åsatta värden ska läsas på raden för Abbott Architect. Vid behov kontaktas support för hjälp med att ta fram rätt åsatta värden. Vid nytt lot nr. anteckna lot nr. på kontrollformuläret samt åsatta värden. Primårvården rapporterar in byte av kontroll-lot till laboratoriesamordnare. Resultaten dokumenteras, antingen i loggbok eller i FlexLab Kemi. Utförande 1. Blanda kontrollflaskan. Om ny kontrollflaska öppnas sätts en ny droppkork på den. 2. En droppe av kontrollen appliceras på en hydrofob yta. 3. Ta fram kassetten ut foliepåsen och dra provtagningsenheten rakt upp ur testkassetten. 4. Fyll provtagningsenhetens kapillär med kontrollösning genom att spetsen sätts mot droppen. 5. Sätt omedelbart tillbaka provtagningsenheten i testkassetten. 6. Tryck för att gå in i kontrollfunktionen. Luckan öppnas automatiskt. 7. Sätt in testkassetten med streckkoden är vänster. 8. Stäng luckan manuellt. 9. Tryck och lägg in kontroll-id. Tryck för att bekräfta.

6 sida 6 (8) 10. Registrera resultatet. Tryck för att godkänna. Luckan öppnas automatiskt. 11. Ta ut och kasta testkassetten. Stäng luckan manuellt. 12. Om värdet avviker från angivet värde trots upprepad analys får patientprov ej analyseras. Kontrollens åsatta värde ska läsas på Abbott Architects rad på kontrollbladet som finns att hämta i bibliotekets på Seros hemsida Vid behov av hjälp kontaktas laboratoriesamordnare. Externkontroll Akademiska sjukhuset och Enköpings lasarett: Externt kvalitetssäkringsutskick (plasma) 5 ggr/år, se AL8945. Primärvården använder Equalis kontrollprogram. Kontakt vid problem Vid problem med instrument eller metod kontaktar: Primärvården - laboratoriesamordnare tel val 1. Akademiska sjukhuset - Support patientnära analysverksamhet, klinisk kemi, och farmakologi tel val 2. Enköpings lasarett - Processansvarig patientnära analysverksamhet tel alternativt support patientnära analysverksamhet, klinisk kemi, och farmakologi tel val 2. Indikation/Medicinsk betydelse/användningsområde Metodprincip CRP (120 kda) är uppbyggt av fem icke kovalent bundna subenheter och syntetiseras i levern. Av plasmas akutfasproteiner ökar CRP mest och snabbast vid inflammatoriska reaktioner. CRP kan anses vara en mycket primitiv antikropp med en snabb ökning vid inflammation (6-12 timmar) och en kort halveringstid (18 timmar). Vid tillstånd med akut cellsönderfall kan förhöjd plasmanivå påvisas redan inom åtta timmar. CRP stiger vid sjukdomar karakteriserade av cellsönderfall som aseptiska nekroser och vissa kroniska inflammatoriska tillstånd. Kraftig ökning av CRP ses vid bakteriella infektioner, men CRP stiger ofta inte vid okomplicerade virusinfektioner. CRP är därför av stort värde i differentialdiagnostiken mellan bakteriella och virusbetingade febrila tillstånd. Begränsad eller utebliven ökning är vidare vanligt vid SLE. Plasmakoncentrationen av CRP varierar mer följsamt med sjukdomsprocessens aktivitet än övriga akutfasproteiner på grund av sin mycket snabba elimination. Därför är upprepade CRP-analyser ett viktigt hjälpmedel vid uppföljning av behandlingsresultat vid bakteriella infektioner, för uttitrering av minsta terapeutiska steroiddos vid kollagenoser, samt för att upptäcka postoperativa komplikationer. Kan anses ersätta B-SR i många, dock inte alla, fall. Afinion TM testkassetten innehåller alla reagens som behövs för bestämning av CRP koncentrationen i humant helblod-, serum- eller plasmaprov. Provmaterialet uppsamlas med en integrerad provtagningsenhet och testkassetten placeras i Afinion TM AS 100 instrumentet. I testkassetten späds provet med en vätska som också lyserar blodkropparna.

7 sida 7 (8) Provspädningen sugs genom ett membran som är täckt med anti-crpantikroppar. På så sätt koncentreras allt CRP i provet på detta membran. En lösning som innehåller anti-crp-antikroppar konjugerande till ultrasmå guldpartiklar sugs sedan genom membranet. De guldmärkta antikropparna kommer att bindas till det CRP som redan bundits på membranet, som färgas röd-brunt. Överskott av guldantikropps-konjugat tvättas bort med en tvättlösning. Afinion TM AS100 instrumentet mäter färgintensiteten på membranet, som är proportionellt mot mängden CRP i provet. CRP koncentrationen visas på instrumentet. Mätintervall Helblod mg/l Serum /plasma mg/l Storhet Mätosäkerhet Bra att veta Hänvisningar Masskoncentration. Rutiner för hur mätosäkerheten tas fram beskrivs i Verksamhetshandboken kapitel 6. Mätosäkerhet vid två nivåer finns angivet i ett separat dokument för hela KKF. CRP-resultatet korrigeras automatiskt för patientens aktuella EVFvärde. Instrumentet lämnar därför ut plasma-crp. Maskinen godtar EVF-värden mellan 0,20-0,60 L/L Referensintervallet skiljer sig åt för P-CRP och B-CRP, < 5 resp < 10. Framförallt används helblod som provmaterial på Afinion. Att ändra ref.intervallet till < 5 skapar följdproblem i journalsystemet Cosmic. Med tanke på hur resultaten från dessa instrument används, ett snabbt svar på sjuk eller frisk patient, spelar cut-off på 5 eller 10 mg/l mindre roll. Referenser UAS metodbeskrivning B-CRP, snabbtest, Produktbeskrivning AfinionTM CRP, Medinor AB. Användarmanual Afinion AS100 Analyzer.

8 sida 8 (8) Dokumenthistorik Versioner Orsak / ändring 3.0 xx-xx-xx Ny metod Tillägg : Månadsunderhåll Senast ändrad av Kerstin Johansson Kerstin Johansson 1 Införd i Centuri. 2 Redigering av text, pålagt bilder. Ingrid Wahlberg, Kicki Palmberg 3 Ändrade kontrollrutiner. Tillägg under svarsrutiner, instrument, felsökning och Bra att veta. UllaCarin Johansson 4 Ändrade svarsrutiner och mätintervall. Saba Haile 5 Nya kontroller, förtydliga svarsrutiner, tillägg under felsökning och Bra att veta. 6 Ändrat reagensets hållbarhet i rumstemperatur och redigerat under bra att veta. Förtydligat handhavandet. Saba Haile Saba Haile 7 Tillägg till svarsrutiner. Tillägg i kontrollhanteringen Saba Haile 8 Instrument Data anslutning. Förtydligat hantering av kontrollens åsatta värde. Saba Haile