Skillnader för P-Glukos mellan PNAinstrument och labmetoder är labmetoder riktigare än patientnära mätare och egenmätare? Eva Landberg och Gunnar Nordin 20181115 Glukos en enkel molekyl som är lätt att mäta Ca 60 % 2 1
I praktiken är glukos inte så enkelt En fysiologiskt dynamisk variabel olika nivåer i fasta och postprandiellt Skillnad mellan koncentration i olika blodkärl olika nivåer på grund av hur mycket glukos som extraheras av vävnaderna 3 I praktiken är glukos inte så enkelt Glukos är löst i vatten, inklusive i erytrocyternas vatten. Transporten av glukos in i erytrocyten är inte beroende av insulin Glukoskoncentrationen är omvänt proportionell mot proteininnehållet i vätskan som man mäter i glukoskoncentrationen i blod är lägst, i blodplasma högre och i interstitialvätskan högst. Trots att glukosaktiviteten i vattenfasen är precis densamma Glukoskoncentration i blodplasma är 5 % lägre i liggande (plasmavolymförändring) 4 2
I praktiken är glukos inte så enkelt Glukos är inte stabilt i provmaterialet efter provtagningen Glykolyshämmande tillsatser vid provtagningen kan göra materialet inkommutabelt 5 Skillnader mellan PNA-instrument och labmetoder PNA-instrument mäter på kapillärblod. Inga provtillsatser, ingen tidsfördröjning. Labmetoder mäter på blodplasma, oftast från venprov. Antikoagulantia eller koagulation. Glykolyshämning. Jämförelser mellan PNA-instrument och labmetoder måste göras med samma provkälla; venprov eller kapillärprov. 6 3
SKUP-proceduren för jämförelse av kapillärprov Vid samma tillfälle: Kapillärprov för egenmätare och direkt mätning Kapillärprov 300 µl med Li-heparin (Microvette). Omedelbar centrifugering och frånskiljning av plasma som fryses -80 C Plasmaprov mäts med jämförelsemetoden parallellt med NIST-standarder (SRM 965b) på fem nivåer. Om jämförelsemetoden avviker signifikant jämfört med åsatta värden för NIST-standarden så korrigeras mätresultaten 7 SKUP strikt kontroll av jämförelsemetoden genom parallellmätning av SRM 965b. 8 Om bias är större än ca 1 % så korrigeras alla resultat 4
Sammanfattning av utprövningar av 10 glukosmätare Jämförelsemetod bias labb Mätare bias PNA Abbott Architect 8000 0,15% FreeStyle Lite -0,39 mmol/l Abbott Architect 8000 1,18% OneTouch Verio +0,17 mol/l Abbott Architect 8000 2,85% AccuChek Performa -0,22 mmol/l Abbott Architect 8000 1,45% Contour XT -0,23 mmol/l Abbott Architect 8000 2,10% Mendor Discreet -0,23 mmol/l Roche c6000-0,08% AccuChek Mobile -0,17 mmol/l Roche c6000 2,55% mylife Unio -0,08 mmol/l Roche c6000-0,08% AccuChek Aviva -0,39 mmol/l Roche c6000-0,15% AccuChek Guide -0,40 mmol/l Roche c6000 2,25% AccuChek Instant -0,29 mmol/l medel 1,22% -0,2 mmol/l - 3% Oftast positiv bias för labmetoderna Oftast negativ bias för PNA-instrument 9 Inte bara SKUP som ser negativ bias för glukosmätare 10 Klonoff, 2018 Medelbias = -2,3% 5
Bias stämmer med SKUP-resultaten för mätare på den svenska marknaden 11 Klonoff, 2018 Slutsats I Positiv bias för labinstrument och negativ bias för egenmätare med kapillärprov 12 6
Extern kvalitetssäkring Resultat av glukos i Equalis utskick 13 Labmetoder ofta en positiv bias i förhållande till referensmetodvärde Provmaterial: nativt serum! 14 7
Labmetoderna ofta en positiv bias i förhållande till referensmetodvärde 15 Positiv bias för labinstrument även i Labqualitys utskick 16 Inger Plum, DSKBnyt 2017 8
Patientnära instrument ofta en negativ bias i förhållande till jämförelsevärdet Provmaterial: EDTA blod med glykolyshämning! 17 Slusats II Positiv bias för labinstrument och negativ bias för egenmätare när EQA-material används Hur ser det ut om venprov i stället används? 18 9
Linköpingsstudie OGTT gravida olika provmaterial Selektion/urval Kapillärt P-glukosvärde 8,9-12,1 mmol/l (ej fastande, screening i graviditetsvecka 10, 25, 29 och 32) Identifierade riskfaktorer (tidigare graviditetsdiabetes, stort barn eller intrauterin fosterdöd, hereditet, BMI 30, utomeuropeisk härkomst, nyupptäckt polyhydramnios eller hög fostertillväxt) Antal: 100 OGTT: 75 g glukos Provtagning: 0, 1 och 2 timmar. Venöst och kapillärt (varierad ordning) Rör (venöst): K2-EDTA (6/7 ml, BD) och FC Mix (3/5 ml Greiner-bio-one) Analys: Accu-Chek Inform II (Roche) kapillärt och venöst, dubbelprov Cobas c701 (Roche) venöst, FC Mix rör 19 Skillnad mellan metoder PNA mot sjukhuslab Venöst prov Faste 1-h 2-h Accu-Chek (PNA) 4,80 7,44 6,42 Cobas c701 (sjukhus) 5,09 8,04 6,90 Skillnad % -5,9-7,6-7,3 20 10
Andel med diagnos graviditetsdiabetes Venöst prov Faste 1-h 2-h Accu-Chek (PNA) 25 % 9 % 7 % Cobas c701 (sjukhus) 44 % 18 % 17 % Nya gränser* 5,1 mmol/l 10 mmol/l 8,5 mmol/l *Enligt nya nationella riktlinjer från Socialstyrelsen och WHOs rekommendationer 21 Jämförelse olika rör Rör1: K2-EDTA (6/7 ml, BD) Centrifugering 5-10 min från provtagning (2500 g, 7 min) Plasma överfördes därefter omedelbart till sekundärrör Rör2: FC Mix (3/5 ml Greiner-bio-one) Analys: Cobas c701 (Roche) Hexokinas 22 11
Jämförelse olika rör P-glukos EDTA P-glukos FC-mix Skillnad (mmol/l) Skillnad (%) 1 5,03 5,26-0,23-4,47 2 4,47 4,51-0,04-0,89 3 5,52 5,7-0,18-3,21 4 5,94 5,97-0,03-0,50 5 12,11 12,51-0,4-3,25 6 5,07 5,14-0,07-1,37 7 5,91 6,04-0,13-2,18 8 5,58 5,52 0,06 1,08 9 4,87 4,89-0,02-0,41 10 5,55 5,62-0,07-1,25 11 6,67 6,61 0,06 0,90 12 4,31 4,33-0,02-0,46 13 5,54 5,67-0,13-2,32 14 5,75 5,81-0,06-1,04 15 6,7 6,84-0,14-2,07 MV 5,93 6,03-0,09-1,43 Median 5,55 5,67-0,07-1,25 T-test P=0,008 23 Slutsats III Högre resultat med labinstrument än med PNA-instrument även på venprov 24 12
Vad är problemet? Ett litet systematiskt fel har stor inverkan på ett test som används för att ställa diagnos. Oohps - inga undersökningar gjorda med FC Mix-rör! Hur stor bias är acceptabelt? Tumregeln (Gowans, 88) är att Bias < 0,25 x biologisk variation (intra + interindividuell variation) [eller < 0,125v x range för referensintervallet] NORIP referensintervall: 4,2 6,3 mmol/l. 0,125 x [6,3-4,2] = 0,26 mmol/l (ca 5%) Ricos: CV intra = 6,5 %, CV inter = 7,7 % 0,25 x rot(6,5%^2+7,7%^2) = 2,5 % (0,13 mmol/l) Coskun: CV intra = 4,2%, CV inter = 5,4 % 0,25 x rot (4,2%^2 + 5,3%^2) = 1,7 % (0,09 mmol/l) 25 Hur ska vi tänka med kvalitetsmålet? Olika glukosvärden i kapillär och venblod. Hur mycket bias får det finnas för att uppfylla kvalitetsmålet 26 13
27 Tack för uppmärksamheten! Frågor? 28 14
Silvermetod Max Totalfel: 10 % Totalfel= +/- 1,64 x (CVa 2 +matriseffekt 2 +preanalytiskt slumpfel 2 ) 1/2 + bias Analytisk CV: ca 2 % Ger maximal bias: +/- 6,7 %?? Enligt Equalis externkontrollprogram Kvalitetsmål: +/- 10 % 29 15