Cyklosporin A metodbyte från RIA till LC-MS/MS

Klinisk kemi Värmland Cyklosporin A metodbyte från RIA till LC-MS/MS - värmländska erfarenheter från 2009/2010 Ann-Sofie Jonsson Sjukhuskemist Klinisk kemi Centralsjukhuset, Karlstad

Varför ville vi byta metod? Då: Radioimmunologisk metod från Dia Sorin (CYCLO-Trac SP), handfull användare i Europa Kvalitetsaspekter: RIA-metoden uppvisade stor positiv bias i externkontrollprogram Vi ville förbättra precisionen Snabbare svar till en lägre kostnad Framtid: kunna analysera fler immunosuppressiva läkemedel i samma applikation Arbetsmiljö: undvika arbete med radioaktiva isotoper

Nivåskillnader mellan metoderna CMIA Vid tolkning av resultat är det viktigt att känna till vilken metod som använts. HPLCMS CMIA HPLCMS CEDIA CEDIA CYCLO-Trac CYCLO-Trac Helblod spikat med CsA 250 ug/l Externkontroller 2009 Patientpool; njurtransplanterade Externkontroller 2009

Ciclosporin International Proficiency Testing Scheme, 2008 14 % 2 % 14 % 18 % 3.5 % 21 % HPLCMS Others ACMIA CEDIA EMIT FPIA ABBOTT AxSYM RIA 536 deltagare 14 % 14 %

Ciclosporin International Proficiency Testing Scheme, 2010 0.7 % 4 % 6 % 3 % 17 % 11 % 15 % 24 % ADVIA CMIA HPLCMS Others ACMIA CEDIA EMIT FPIA ABBOTT AxSYM RIA 438 deltagare 19 % 0.5 %

En värmländsk patient ska transplanteras Klinisk Kemi Värmland

Lungor Hjärtan Barn Klinisk kemi Värmland

Njurar Lungor Hjärtan Barn

Lungor Hjärtan Barn Njurar Levrar Benmärg

Metodsituation 2009/2010 RIA (Nu: LC-MS/MS) Njurar Lungor Hjärtan Barn CMIA (Architect i2000) CEDIA Levrar Benmärg CEDIA (Nu: LC-MS/MS)

Vår verklighet 2009 Olika analysmetoder används på förekommande transplantationscentra De immunologiska metoderna uppvisar olika korsreaktivitetsmönster Immunologiska metoder har relativt hög imprecision Behandlingsprotokollen tar inte hänsyn till analysmetod (vi ringde runt till ett antal olika transplantationscentra och frågade)

Korsreaktivitetsdata för CYCLO-Trac och CEDIA (enl inserts) CYCLO-Trac SP CEDIA (200 µg/l) Metabolit % korsreaktivitet % korsreaktivitet AM 1 4,4 M17: AM1 0,7 AM 9 20 M1: AM9 1,7 AM 4n 16 M21: AM4N 0,8 AM 19 0,9 AM 4N9 1 AM 1c 1,6

Vi valde LC-MS/MS

CsA ( in µg/l) determined with LC-MS/MS Klinisk Kemi Värmland Jämförelse med CYCLO-Trac SP 300 LC-MS/MS=0.6039x CYCLO-Trac SP + 5.8694. r 2 = 0.9133, n= 100 250 200 150 100 Medelavvikelse: -30 % 50 0 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 CsA (in µg/l) determined with CYCLO-Trac SP

Differens RIA (Karlstad) -CEDIA (Uppsala) Klinisk Kemi Värmland Differens LC-MS/MS (Karlstad) -CEDIA (Uppsala) Jämförelse Uppsala-Karlstad 20 LC-MS/MS (CSK) vs CEDIA (UAS) 0-20 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450-40 -60 N= 62-80 160 140 120 100 80 60 40 20 0-20 -40 RIA (CSK) vs CEDIA (UAS) N= 62 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 Cyklosporin A-koncentration (µg/l) bestämd med CEDIA (Akademiska Sjukhuset i Uppsala) -100-120 Cyklosporin A-koncentration (µg/l) bestämd med CEDIA (Akademiska Sjukhuset i Uppsala)

Plan för metodbytet Initiala informationsmöten med kliniker 2009-11-01: start för dubbelrapportering (både RIA och LC-MS/MS) 2010-01-01: planerat att endast LC-MS/MS svar rapporteras Efter önskemål från beställare: Dubbelrapportering förlängs till 1/4, invänta transplantationsmöte i regionen. Informationsmöten med kliniker för att gå igenom resultat av dubbelrapportering 2010-06-15: endast LC-MS/MS-svar lämnas ut Klinisk Kemi Värmland

Slutsatser Man önskar mäta den immunsuppressiva effekten. Laboratorierna mäter koncentrationen cyklosporin A och/eller metaboliter Studier löper under många år; viktigt att vi ligger på samma nivå under lång tid God överensstämmelse mellan resultat från transplantationscentra och patientens hemma-sjukhus = viktigt Behandlingsprotokoll ska ta hänsyn till analysmetod

Hur ser det ut nu 2013? Vi analyserar cyklosporin och takrolimus med LC-MS/MS

Tack för uppmärksamheten! ann-sofie.jonsson@liv.se