HPV detekteringsmetoder

Relevanta dokument
99,7% HPV i primärscreeningen. Matts Olovsson

Sonia Andersson Professor, överläkare. KVINNOKLINIKEN Karolinska Universitetssjukhuset, Karolinska Institutet

Framtida roll för HPVtestning

Vätskebaserad cytologi och kompletterande HPVtestning i populationsbaserad screening för prevention av cervixcancer

Cervical dysplasia and cervical cancer in pregnancy - diagnosis and outcome

Meddelande 6/2011. Från Unilabs Laboratoriemedicin Sörmland. Klinisk mikrobiologi

Genital HPV-infektion

Human papillomvirus-test vid primär screening för cellförändringar på livmoderhalsen

OMGRANSKNING AVSLÖJADE MISSADE CELLFÖRÄNDRINGAR

Namn Form Förp. Varunr AIP (SEK) AUP (SEK) Gardasil Injektionsvätska, suspension, förfylld spruta. Förfylld spruta 1x0,5 ml. Två nålar.

Utfallsmått:Sensitivitet/specificitet för CIN2+

Varför ökar livmoderhalscancer?

Humant papillomvirus (HPV) orsakade cancerformer -förutom livmoderhalscancer

Atypical squamous cells high grade. (Misstänkt höggradig dysplasi) Cancer in situ Ingår i CIN 3

Sökord: Gynekologi. Atypical squamous cells high grade. (Misstänkt höggradig dysplasi) Cancer in situ Ingår i CIN 3

CMV/EBV Molekylär diagnostik. Annika Allard Klinisk Mikrobiologi/Virologi Norrlands Universitetssjukhus

Cervical cancer prevention - Studies on possible improvements.

Humant papillomvirus-test eller upprepad cellprovtagning vid låggradiga cellförändringar på livmoderhalsen

Vårdprogram i Region Skåne för handläggning av avvikande vätskebaserat cytologprov.

Hur kan kvalitetsregister användas för prevention? Några exempel från Nationellt Kvalitetsregister för Cervixcancerprevention

FÖR IN VITRO-DIAGNOSTISK ANVÄNDNING.

Ny metod för screening av livmoderhalsen

JANINA WARENHOLT Molekylär patologi LUND

Lathund för kallelser och svarsbrev

Cirkulerande cellfritt DNA

Cirkulerande tumör-dna för cancerdiagnostik

DUGGA Molekylärbiologi T2 / VT p (G = 25 p)

Realtids-PCR. icycler BioRad, mikrotiterplattor. LightCycler Roche, kapillärer. ABI Prism 7000 Applied Biosystem mikrotiterplattor

HLA-diagnostik vid celiaki

HPV-ANALYSER ERSÄTTER STOR DEL AV CYTOLOGIN I NYA VÅRDPROGRAMMET FÖR CERVIXSCREENING

Delprov 3 Vetenskaplig artikel. Namn: Personnummer:

Finns det samband mellan orofarynx cancer och humant papillomvirus?

Framtida tekniker MLPA (Multiplex Ligation Probe Amplification) med tillämpning inom Talassemi. Dick Nelson Klinisk kemi, Labmedicin Skåne

Gynekologiska cellprovskontroller KUNGSÖRS VÅRDCENTRAL

Mötesanteckningar från Årsmöte, Nationellt Nätverk för HPV- baserad Screening.

Varför vill vi veta något om vilka patogener som finns i avloppsvattnet och hur gör vi?

Leukemier. Leukemier och genetik. Metoder inom cancergenetik. Varför genetisk diagnostik? Konventionell cytogenetik. Translokation

Studiedagar 2007 Riksföreningen för Klinisk Cytologi - Åhus Strand

Vem får livmoderhalscancer? Varför tar man cellprov? Vad är kondylom?

Droplet Digital PCR Ny metod för identifiering och kvantifiering av HTLV

Laboration v.40 Detektion av Legionella pneumophilia med nestad PCR

Sören Andersson. Professor, prefekt, överläkare. Institutionen för medicinska vetenskaper Örebro universitet & Laboratoriemedicin, Region Örebro län

Genexpressions analys - RNA-uttryck

Gynekologisk cellprovskontroll och handläggning av cellförändringar

Chagas sjukdom: Aktuell serologisk diagnostik

Hur kvalitetssäkrar vi den patientnära diagnostiken?

Gynekologisk cellprovskontroll (GCK)

18-19 december 2006 Christina Fjæraa Doktorand, avd för kemi och biomedicinsk vetenskap Karlstads Universitet

Diana Zach

NORDSCREEN Internationellt tillgängliggörande av standardiserade kvalitetsindikatorer

Screening för livmoderhalscancer. Rekommendation och bedömningsunderlag

HPV vaccination. Bakgrund - sjukdomsbörda. Sjukdomsbörda Sverige. Bakgrund - virologi. Nationell uppföljning av vaccinationsprogrammen

Atypisk cervixcytologi under graviditet

Immunologi. Laboration; Epstein Barr Virus (EBV) serologi. Oxblodshemolysat test (OCH) Epstein Barr Virus ELISA (EBNA)

Humant papillomvirus som riskmarkör för utveckling av prolifererande verrukös leukoplaki

Molekylärbiologisk diagnostik av tarmparasiter

Corpuscancer ca 83% Cervixcancer ca 68% Ovarialcancer ca 42 % Corpuscancer ca Ovarialcancer ca 785. Cervixcancer ca 439

Lycka till! Tentamen. Sal: T143. OBS! Ange svaren till respektive lärare på separata skrivningspapper om inget annat anges

Lathund till kallelser och svarsbrev inom Gynekologisk cellprovskontroll, samt utredning och behandling

KURSPLAN. Prevention, diagnostik samt behandling av livmoderhalscancer -från virusinfektion till allvarlig sjukdom med multimodel behandlingsstrategi

Du hittar en knöl vad händer sen?

MYKOBAKTERIER INDIKATION

Screening för livmoderhalscancer med HPV-test. En systematisk litteraturöversikt

Fokus : HPV-vaccination. Pia Collberg

Screening mot cervixcancer Hur bra är vi? Hur kan vi bli bättre? Björn Strander

Syfilis - diagnostik och fallbeskrivning Owe Källman, överläkare Specialistläkare i klinisk bakteriologi, klinisk virologi och infektionssjukdomar

Vaccination mot HPV - nationellt program för pojkar

Delprov 3 Vetenskaplig artikel

Molekylärgenetisk diagnostik inom malign hematologi

Genital Herpes HSV 1 & 2. Anders Strand M.D. Ph.D. Department of Medical Sciences University Hospital Uppsala - Sweden

) / (c l) -A R ) = (A L. -ε R. Δε = (ε L. Tentamen i Biomätteknik (TFKE37), 9 januari Uppgift 1 (10p)

HPV-vaccinationsprogram: Vilka är de förväntade effekterna och när kommer vi att kunna se dem?

Seminarie: orala (virus) infektioner

MYKOBAKTERIER INFORMATION

VÅRDPROGRAM FÖR CERVIXDYSPLASI

Strategy of TCR sequencing by 454

süoamoldo^j= c o= `bosfuavpmi^pf= =

Virus, vaccination, vårtor och cancer verklighet och visioner

Remissrunda 1 Cervixcancerprevention Nationellt vårdprogram samt konsekvenser av införande av Socialstyrelsens screeningrekommendationer

Nya virus påvisade hos gris pilotundersökningar om deras kliniska betydelse

Varför vill vi veta något om vilka patogener som finns i avloppsvattnet och hur gör vi?

Alkoholberoende efter obesitaskirurgi

Cervixcancer. Henrik Falconer, docent 2016

1970 Lungcancer = DÖD

Cervixcancerscreening Rapport 2012 Kaj Bjelkenkrantz, 15 oktober (Preliminära manus utskickade till styrgruppen för cervixcytologi i februari

Leishmaniasis. Handläggning i Sverige över tid. Hedvig Glans Infektionsläkare Karolinska Universitetssjukhuset

Kodnummer: 1) Beskriv processerna som sker i replikationsgaffel (eng. replication fork)? (3)

Vårens utskick Fall 1 och 2

Screeningprogram för Gynekologiska cellprovskontrollen (GCK)

Docent Sven Eric Olsson, Danderyds sjukhus, svensk koordinator för studierna på Gardasil, tfn

HCC-övervakning (surveillance)

Kommunikationsstöd för hälso- och sjukvårdspersonal om Humant papillomvirus (HPV)

Cervixcancer Cervixcancerprevention

Kunskapsveckan ht 2018

TENTAMEN ORAL PATOLOGI. Torsdag den 17:e januari 2013 PÅ FRÅGA 1-36 SKA DU MARKERA DITT SVAR PÅ DE SEPARATA SVARSBLADEN

Regionala riktlinjer för screening för cervixcancer

Mikrobiologins tekniksprång Dr. Erik Nygren SP Food and Bioscience

VÅRDPROGRAM FÖR CERVIXDYSPLASI

Avvikande cellprovsvar Ob-gyn NLL

1. Bättre information om HPV-vaccin och HPV-test, tack!

Transkript:

HPV detekteringsmetoder Sydöstra IH-guppens möte m 2007 okt 4-54 5 JönkJ nköping

Epidemiologi Cervixcancer Incidens/100000/år Sverige 10 USA (ACS) ca 10 Canada 10 Mortalitet/100000/år Ca 3 Ca 3,7 Ca 3 Ca 480000 nya fall/år r 80% i utvecklingsländer nder

Bakgrund Papovavirus fam. DNA virus HPV-s centrala roll i etiologin av cervical intraepitelial neoplasi Walboomers et al. 1999; Bosch et al, 2002; zur Hausen 2002

Bakgrund Cutana och mucosa associerade virustyper Mucosa-associerade onkogena typer ex 16 och 18

HPV-infektion HPV smittans frekvens i befolkningen 2/3 Symptom 10% Olika virustyper: lågrisk och högriskh virus olika kapacitet till neoplasiutveckling

Virustyper HR-HPV HPV ex. 16, 18,, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 56, 58, 59, 68 LR-HPV ex. 6, 11, 40, 42, 53, 54, 57, 66, 84

Mekanismer i virusinfektionen Cellpåverkan HR-HPV E6 och E7 gener och relaterade proteiner degradering av p53 och prb >95% av skivepitelca i cervix innehåller HPV Watanabe et. al. 1989.

Klinisk praxis - problemområden HPV diagnostik värdering av neg cytologi vs persistent infektion ASCUS Alternerande infektioner

Detekteringsmetoder HPV DNA baserad HPV mrna E6/E7 baserad

Detekteringsmetoder Detektering av viral nucleinsyra Target-amplifieringsmetod amplifieringsmetod Signal-amplifieringsmetod amplifieringsmetod

Detekteringsmetoder Target amplifiering Konsensus PCR: ett brett spektrum av HPV är amplifierad med sk konsensus primers, sedan detekterad med typ-specifika prober. Detektering och/eller genotyping av konsensus PCR produkter: hybridisering av inmärkta konsensus PCR produkter till typ-specifika oligos som är r fixerade till en filter.

Detekteringsmetoder Target amplifiering (forts.) Typ-specifik PCR specifika designade primers mrna amplifiering detektering av viral mrna som kodar för f r E6/E7. Reverse- transcriptase eller NASBA J. Compton 1991.

Detekteringsmetoder Signal-amplifieringsteknik amplifieringsteknik Liquid-phase signal amplifiering Hybrid Capture 2; HPV-Proofer Proofer.. Hybridisering av olika full-längd RNA prober till virus DNA detektering med peroxidas-märkta rkta antikroppar. Visualisering: fluorescent metod. Morfologisk signal-amplifiering amplifiering - ISH

Provtyper lämpliga för f target amplification metod 1. PCR baserad formalin-fixerat fixerat- paraffinbäddat, cellprov 2. LBC media organiskt lösningsmedel l måste m tas bort! 3. Digene Universal Collection Medium (UCM) fungerar 4. Provtyper för r mrna amplifieringsmetoder svårare att hitta media som bevarar mrna

Forskningsresultat Kate.S.Cuschieri et al., 2004: : HPV Type Specific DNA and RNA Persistence Implications for Cervivcal Disease Progression and Monitoring (Journal of Medical Virology) HPV-DNA genotypbestämning i patienter med negativ cytologi med påföljande follow up Detektering av HPV-DNA (typ specifik) och mrna E6/E7 transkriptioner vid follow up. Detektering av mrna E6/E7 transkriptioner mer specifik - roll i patient-selektering

Forskningsresultat forts. I Kraus et al., 2004: HPV in the dysplastic portio; An investigation of biopsies from 190 cervical cones (British J Cancer, 2004) HPV mrna analys med NASBA och jämförelse med konventionell PCR av HPV DNA

Forskningsresultat forts. Elisabeth I. Johnston et al., 2006.: Cytologic Diagnosis of Atypical Squamous Cells of Undetermined Significance in Perimenopausal and Postmenopausal Women (Cancer Cytopathology 2007) HCII HPV-DNA assay användbar ndbar metod förf patient-selektering med ASCUS dg

Forskningsresultat forts. Jack Cuzick et al.: Overview of the European and North American studies on HPV testing in primary cervical cancer screening (Int( J Cancer 2006) Jämförelse mellan HPV-test och cytologi avseende sensitivitet och specificitet; HPV test är r mer sensitiv än cytologi (96% vs 53%) men mindre specifik (90,7% vs 96,3%)i detektering av CIN2+ Resultat: rekommendation av primär r HPV-test med påföljande p cytologi vid positivt resultat. Obs! Ny strategi som kräver stora studier och utvärdering

p16 IH Stark nukleär r och cytoplasma positivitet i ett flertal tumörer, bl de cervixcancer E7 gene product (oncoprotein)) binder till och inaktiverar RB gene product Resultat: stark ökning av p16ink4a som kontrolleras via negativ feed-back av RB protein

p16 IH Uttryck av p16 protein är r associerad med HPV-s s onkogena potencial i cervixlesioner

p16 IH Färgningen: kärn- och cytoplasmafärgning intensitet homogenitet diffus fokal

Metodval Kong, Christina S. et al.: p16 INK4A Immunohistochemistry is Superior to HPV In Situ Hybridization for the Detection of High-risk HPV in Atypical Squamous Metaplasia Am J Surg. Pathol 2007; 31:33-43