Albumin Imm. på Cobas c 501

Upprättat datum: 2016-05-18 1(11) Division Diagnostik Revisionsnr: 12 Giltigt t.o.m.: 2017-07-25 Laboratoriemedicin Metodansvarig:Emma C Göransson Medicinskt ansvarig: Lars Olof Artur L Hansson Upprättare: Emma C Göransson Granskare: Anna Jonsson Fastställare: Lars Olof Artur Hansson Albumin Imm. på Cobas c 501 Innehållsförteckning Analyskod i labdatasystemet NPU-kod Referenser Medicinsk bakgrund Mätprincip Instrument och tillbehör Reagens Beställningsinformation Beredningsbeskrivning Reagens: ALBT2, Tina-quant Albumin Gen.2 Kalibrator: C.f.a.s. PUC kalibrator Kontroller: Liquichek Urine Control 1 och 2 Kontroller: Liquid Multiqual 2 och 3 Spädningslösning: Natriumklorid, NaCl 9 g/l Provtagning Kalibrering Kontroller Utförande Beräkning Svarsrutiner Referensintervall Verifiering Imprecision Riktighet Mätområde Angiven mätosäkerhet

2(11) Interferens och felkällor Revideringar

3(11) Analyskod i labdatasystemet Albumin i Serum/plasma ALB Albumin i Urin UA Albumin i Urin, dygnsmängd TUAL Albumin i Csv SPAL Csv/P, S-Albuminkvot ALBK P, S-Albumin till Csv/P, S-Albuminkvot PSALB Albumin i diverse vätskor DALB Albumin i ascites DALBA Albumin i ledvätska DALBL Albumin i pleura DALBP Albumin i dialysat DIAL Albumin till elektrofores ALBE NPU-kod Albumin i Serum/plasma Albumin i Urin Albumin i Csv Albumin i ascites Albumin i ledvätska Albumin i pleura Albumin i dialysat SWE05155 NPU19676 NPU19663 NPU19674 NPU19675 NPU19674 NPU27387 Referenser Laurells KLINISK KEMI i praktisk medicin ISBN 978-91-44-04787-4 Peter Nilsson-Ehle, Maria Berggren Söderlund, Elvar Theodorsson och Studentlitteratur 1970, 2012. Nionde upplagan. Weichselbaum: AM. J. Clin. Path. 16. 40. 1946 Studentlitteratur 1997: 102-103, 350-353, 87-88 Kitinsert C.f.a.s. PUC Kalibrator, Roche 2004-01 Liquichek Urine Chemistry Control, bipacksedel, Bio Rad, 2005-09 Kit insert från Roche Diagnostics, Cobas c 501, ALBT2 Tina-quant Albumin Gen 2, 2014-01, v 11.0 Svenska Medicinsk bakgrund Albumin syntetiseras i levern och är det viktigaste proteinet i plasma, spinalvätska och urin. U-Albuminanalys används som mått på grad av glomeruluskada. Albuminförlusterna med urinen används för att bedöma sjukdomens förlopp. Mängden albumin i urinen kan vara stor, flera g/dygn. Om albuminförlusterna i urin är 20-200 mg/l kallas det mikroalbuminuri. Den normala albuminurin är <20 mg/l eller 30 mg/dygn.

4(11) Spinal-Albumin Blod-hjärnbarriären uppkommer genom att kapillärerna i CNS har ett mycket tätt kärlendotel. Fettlösliga ämnen har en god förmåga att penetrera blod-hjärnbarriären och passerar därför obehindrat från blodet in i CNS. Exempel på detta är etanol, nikotin, narkosmedel och heroin. Vattenlösliga proteiner t ex albumin har mycket begränsad passage över blod-hjärnbarriären. Trots detta kommer mer än 80 % av proteinmängden i liqvor från blodet via denna passage. Blod-hjärnbarriären fungerar som ett filter, det bildas en koncentrationsgradient mellan serum och liqvor. Som mått på denna gradient används albuminkvoten. Ökad Albuminkvot ses t ex vid infektioner, tumörer, trauma, cerebrovaskulära sjukdomar och vid avflödeshinder för liqvor. Diverse vätskor Orsaken till Ascites, dvs en ökad ansamling av vätska i bukhålan (> 100 ml) kan vara såväl generella som lokala. Ex på generella orsaker är hjärtinkompensation och nefrotiska syndrom. Lokala orsaker kan vara levercirros ett avflödeshinder i levern, inflammatoriska reaktioner eller tumörer i hela eller begränsade delar av bukhålan. I pleurahålan finns normalt endast en mycket liten mängd vätska och orsakerna till ökning av denna är i princip detsamma som för bukhålan. Man försöker skilja på transudat där man har en normal relativt låg konc. av protein < 25 g/l och exsudat med en proteinhalt som mer liknar plasmans (inflammation eller tumörväxt). Ledvätska (synovia) är ett filtrat av plasma med tillsats av hyaluronsyra. Proteinkoncentrationen i ledvätska är ~ 20 g/l dvs. samma som i intercellulärvätska. Fibrinogen saknas nästan helt i normal ledvätska och koagulerar därför inte. Mätprincip Immunturbidimetrisk analys Anti-albuminantikroppar reagerar med antigenet i provet och bildar antigen/antikroppskomplex vilka efter agglutination kan bestämmas turbidimetriskt. Instrument och tillbehör Se Cobas 6000 Beskrivning Reagens Beställningsinformation Se Cobas 6000 Reagens Beredningsbeskrivning Se Cobas 6000 Reagens Reagens: ALBT2, Tina-quant Albumin Gen.2 Reagenskoncentrationer i flaskor R1 Tris(hydroxymetyl) aminometan, ph 8,0 50 mmol/l Polyetylenglykol (PEG) 4,2 %

5(11) EDTA 2,0 mmol/l Konserveringsmedel R2 Polyklonala Anti-human albuminantikroppar (får) beroende på titer Tris-buffert, ph 7,2 100 mmol/l Konserveringsmedel R3 Reagens för antigenöverskottskontroll Albumin utspätt i serum (humant) NaCl 150 mmol/l Fosfatbuffert, ph 7,0 50 mmol/l Konserveringsmedel Förvara i kyl I kyl hållbara till utgångsdatum I instrumentet 12 veckor Kalibrator: C.f.a.s. PUC kalibrator Bruksfärdig kalibrator Förvara i kyl 5 x 1 ml Hållbar oöppnad förpackning till utgångsdatum i kyl öppnad förpackning 1 månad i kyl Kontroller: Liquichek Urine Control 1 och 2 LU1 och LU2/ SPAL (LU2) Färdig kontroll Förvaras i kyl 12 x 10 ml Hållbar obruten flaska i kyl till utgångsdatum (om ej annat anges) öppnad flaska i kyl 30 dagar Kontroller: Liquid Multiqual 2 och 3 MQ 2 och MQ 3 Färdig kontroll Förvaras i frys 12 x 10 ml Produkten innehåller poolat fryst humanserum Varje enskild givarenhet är testad med avseende på förekomsten av HIV-antikroppar och hepatit B ytantigen och hepatit C (HCV) Produkten skall trots detta behandlas med samma försiktighetsåtgärder som patientprov Hållbart otinad i frys till utgångsdatum (om ej annat anges) tinad i kyl 2 veckor

6(11) Spädningslösning: Natriumklorid, NaCl 9 g/l Används som spädningslösning för prov Provtagning Serum/Plasma Plasma: 5 ml Li-heparinplasma med gel, mintgrön propp är det rör som rekommenderas. K2-EDTA plasma kan användas Serum: 5 ml venblod i rör med separationsgel, gul propp eller rör utan tillsats, röd propp kan också användas Hållbart 10 veckor i rumstemperatur 5 månader i kyl 4 månader i frys Urin 10 ml urin, i plaströr, av välblandad dygnsmängd, spontan-, dygnsurin eller andra morgonurinen U-Alb/U-Krea kvot: Morgonurin eller stickprov från annan tid på dygnet Centrifugera urinen vid 800 g Hållbart 7 dygn i rumstemperatur 1 månad i kyl 6 månader i frys Csv Centrifugera csv före analys Hållbart 3 dagar i kyl 6 månader i frys Dialysat Analyseras obehandlat Diverse vätskor Na- eller Li-Heparinrör utan gel, grön propp Centrifugera provet före analys Tillsätt hyalas vid behov, se beskrivning för Leukocyter i ledvätska Hyalasbehandlat prov ska centrifugeras innan analys Kalibrering Använd H 2 O och C.f.a.s. PUC som kalibreringsmaterial för 6-punktskalibrering Gör en 6-punktskalibrering vid lotbyte av reagens Kalibrera också om kontrollresultaten indikerar att en metodkalibrering är nödvändig Uteslut först andra felkällor

7(11) Signera alla utskrifter av kalibreringsresultat och arkivera minst 2 år i pärm märkt Kalibreringsrapporter Utförande: se Cobas 6000 Kalibratorer Kontroller Analysera Serum/plasma - albumin på MQ2 och MQ3 vid uppstart Analysera U-alb på LU1 och LU2 vid uppstart Analysera Spal på LU2 SPAL vid uppstart alternativt när prov kommer Se kontrollschema för respektive ort för kontrollfrekvens: Kontrollschema för Cobas 6000 Gävle Kontrollschema för Cobas 6000 Hudiksvall Kontrollschema för Cobas 6000 Bollnäs Analysera kontroller även efter kassettbyte och kalibrering. Instrumentet markerar L respektive H på kontroller utanför gränserna, som är desamma som finns i labdatasystemet För bedömning av kontrollresultaten används de gränser som finns inlagda i labdatasystemet Utförande: se Cobas 6000 Kontroller Utförande Se Cobas 6000 Provhantering Beräkning Instrumentet beräknar resultatet med hjälp av kalibratorernas absorbanser Beräkningar av kvoter Csv/P - Albuminkvo t U - Albumin/U - Kreatininkvot alb i Csv- vätska alb i plasma U - Albumin U - Kreatinin Svarsrutiner Serum/plasma och diverse U-Alb tu-albumin Svaret anges utan decimal i g/l Resultat < 3 g/l besvaras < 3 g/l Svaret anges utan decimal i mg/l Resultat < 3 mg/l besvaras < 3 mg/l Svaret anges utan decimal i mg/d Skriv in ersättande komm på resultat där U-Alb är < 3 mg/l Kan ej beräknas pga. U-Alb < 3 mg/l

8(11) U-Albumin/U-Kreatininkvot Svaret anges med 1 decimal i g/mol Skriv in ersättande komm på resultat där U-Alb är < 3 mg/l Kan ej beräknas pga. U-Alb < 3 mg/l Csv Svaret anges utan decimal i mg/l Resultat < 36 mg/l besvaras < 36 mg/l Albumin i dialysat Csv/P-Albuminkvot Svaret anges med 2 decimaler i g/l Svaret anges med 1 decimal För beräkning av Csv/P-Albuminkvot se Teknisk Bedömning CGM Analytix KKL Referensintervall Serum/plasma Albumin < 6 månader 35 45 g/l 6 månader 12 år 38 47 g/l 12 18 år 41 50 g/l 18 40 år 36 48 g/l > 40 år 35 45 g/l Urin U-Albumin < 20 mg/l tu-albumin < 30 mg/d U-Albumin/U-Kreatininkvot Referensintervall saknas. U-alb/U-kreakvot är individberoende och används för att följa en patient. Csv Csv-Albumin 17-40 år < 280 mg/l 40 50 år < 320 mg/l > 50 år < 390 mg/l Csv/P-S Albuminkvot 17 30 år < 5,7 x 10-3 30 40 år < 6,2 x 10-3 40 50 år < 7,2 x 10-3 50 60 år < 8,9 x 10-3 > 60 år < 9,0 x 10-3 Diverse Albumin i dialysat eller diverse vätskor är ej tillgängligt Referenser: Referensintervallen för vuxna är det gemensamma nordiska (Klinisk kemi i Norden 1993;5:13-17) CRM 470

9(11) Information från SFKK och Equalis AB; Införande av gemensamma referensintervall (NORIP) i Sverige, version 2004-03-24 Faluprojektet 2012 Barnreferensintervall U-Albumin och tu-albumin Laurells Klinisk kemi i praktisk medicin. Sjunde upplagan, Lund: Studentlitteratur, 1997 U-Albumin/U-Kreatininkvot Equalis expertgrupp 2002-04 Verifiering Imprecision Inom serie: Mätningen utförd:061207 Provmaterial Lot nr Nivå Antal mätningar SD CV % MQ2 46312 34 19 1,043 3,09 MQ3 46313 42 13 0,972 2,32 Inomserieimprecision beräknad på seriebestämningar enligt formel CV = s x 100 x s ( x x) 2 n 1 Mellan serie: Mätningarna gjorda mellan:061215-070111 Provmaterial Lot nr Nivå Antal mätningar SD CV % MQ2 46312 34 77 0,78 2,23 MQ3 46313 42 80 0,87 2,03 Riktighet Albumin immunologisk metod kalibreras med av Roche åsatta värden på kalibratorerna. Metoden är standardiserad mot CRM 470 Albumin ingår i Equalis proteinkontroll, extern kvalitetssäkring för laboratoriemedicin i Sverige Protokoll för bedömning av Equalis samt avvikande mätresultat arkiveras i pärmar märkta EQUALIS som står på Kemi Lab. Equalis mätresultat sparas online på www.equalis.se Mätområde Serum/Plasma Lägsta mätbara koncentration 3 g/l Högsta mätbara koncentration 101 g/l vid normal provvolym 128 g/l vid utökad provvolym Urin Lägsta mätbara koncentration 3 mg/l Högsta mätbara koncentration 400 mg/l vid normal provvolym 4400 mg/l vid minskad provvolym

10(11) Csv Lägsta mätbara koncentration 36 mg/l Högsta mätbara koncentration 4800 mg/l vid normal provvolym 29760 mg/l vid minskad provvolym Vid resultat > tekniska gränsen begär spädning i citm Alternativt späd manuellt med NaCl, 9g/L Skriv in värdet och spädningsfaktorn manuellt i labdatasystemet och tryck Tab Angiven mätosäkerhet Se dokumentet Ackrediteringens omfattning Klinisk Kemi Interferens och felkällor Serum/plasma Hemolys Ikterus Lipemi H-index g/l I-index µmol/l L-index 1000 10 60 1026 1500 Rheuma faktorer < 1200 IU/mL interfererar ej I sällsynta fall kan förekomst av M-komponent, i synnerhet av IgM-typ, ge otillförlitliga resultat Urin Hemolys Ikterus Lipemi H-index g/l I-index µmol/l L-index - 10-855 - Beroende på antigen excess i reagenset R3 kommer ingen oflaggad högdos hookeffekt att uppträda upp till en urin-albuminkoncentration på 40000 mg/l Aceton 60 mmol/l Interfererar ej Ammoniumklorid 0,11 mol/l Kalcium 40 mmol/l Kreatinin 0,18 mol/l γ-globuliner 500 mg/l Glukos 0,19 mol/l Urea 0,8 mol/l Urinsyra 5,95 mmol/l Urobilinogen 378 µmol/l

11(11) Csv Hemolys Ikterus Lipemi H-index g/l I-index µmol/l L-index - 10 - - - Beroende på antigen excess i reagenset R3 kommer ingen oflaggad högdos hookeffekt att uppträda upp till en CSV albuminkoncentration på 30000 g/l Revideringar Datum Revisionsnr Orsak 080825 3 Ändrat namn på dokument det hänvisas till.ändrat CSF till CSV 090430 4 Ändrat till angiven mätosäkerhet 101123 7 Ändrat under, analyskod, beräkning, svarsrutin, mätområde, angiven mätosäkerhet samt ändrat spinal och sp till Csv på flera ställen 140610 8 Lagt till information kring diverse vätskor och NPU-koder. Lagt till Laurells Klinisk kemi 9:e upplagan. Länkat beskrivningar. Ändrat enhet på urin-albumin och Csv-albumin vilket medför uppdaterering av mätområde, referensintervall, svarsrutiner. Uppdaterat interferenser 151008 9 Uppdaterat logga och länkar 160112 10 Tagit bort referensintervall för U-alb/U-kreakvot samt justerat referensintervall för U-alb 160324 11 Länkat till Teknisk bedömning för beräkning av Csv/P-Alb kvot 160518 12 Justerat medicinsk bakgrund och lagt till att hyalasbehandlat prov ska centrifugeras