Diagnostiken runt på ½ timma

Transkript

1 Diagnostiken runt på ½ timma av Charlotte Hoffmann-Timmol Nordic Manager, Leg.vet Preanalytiska faktorar När kan det gå galet? Förbered patient (fasta, stress, motion) Blodprovstagning (korrekt reagensglas, stastid, kanylstorlek, vacutainer) Hantering/Tid från uttagning till klart serum/plasma Uppbevaring (temperatur, solljus) Tid på dagen, tid på året Kurir / Post Test procedurer (Test metod) Resultat tolkning Innan provtagning... Vilket ska användas? Serum eller plasma (hvilken slags plasma?) Hur mycket ska användas? Märkning av prov? Märkning på reagensglas (bruk av streckkoder)

2 Antikoagulanter / reagensglas Serum / Plasma Hematologi: EDTA-blod (+ tunt bloduttstryk) Serologi, klinisk kemi: Serum (sällan plasma) Serum: är den cellfria delen efter centrifugering av ett: Plasma: är den cellfria delen efter centrifugering av ett: PCR tests: Glukos: Steril torr-svab NaFl-blod komplett koagulerad prov utan fibrin ukoaguleret prov med fibrin Hormoner: Kyld serum el. plasma!! Ca. 1/3 serum utbyte Ca. ½ plasma utbyte Tid på dagen/året Daglig kropps-rytm / fluktuation Glukos nivå Hormoner (speciellt T4, TSH, Cortisol) Årlig variation ACTH Undvik hemolys Stasa venen så kort tid som möjligt Kort, stor kanyl - så stor G som möjligt Håll reagensglasset snett, så blod rinner ned av väggen Vänd provet 6-10 gånger direkt efter uttagning Undgå solljus Centrifugera snarast möjligt (samma dag) Enbart serum/plasma tåler frysning Uppbevaring ved 4 grad håller prov stabil i 24 timer (frysning anbefallt ved ACTH- och insulinprov)

3 Undvik hemolys Hemolys ASAT, ALP, -HBDH LDH, CK Amylas Total bilirubin Creatinin Glukos GGT Fe, Mg, P, K, Total protein UREA (BUN) Packa riktigt... Förpackning - Transport Korrekt förpackningsmaterial (UN 3373, Cat.B) Tid (kurir eller post?) Korrekt identifikation / streckkoder Komplett utfylld remiss Klinikstämpel, djurart, chipnummer mm. Temperatur

4 Störande faktorer Analysapparater Lipemi Hemolys!! Ikterus Medicin Just ätet Provuttagnings-teknik, handtering, Transport! Leversjukdom, hemolys mm. Corticosteroider, sulfunamider, NSAID m.m. Pålitlighet?? Test procedurer (vem gör vad, när) Test metod (sensibilitet/specificitet) Underhåll/ service Precision och noggrannhet (kalibrering) Validering / ackreditering Test resultat Sensitivitet: A/(A+C) Specificitet: D/(B+D) Sensitivitet/specificitet Sann sjukdom status Sjuk Rask Total Positiv A B A+B Negativ C D C+D Total A+C B+D N A = sann positiv B = falsk positiv C = falsk negativ D = sann negativ N = totale antal djur Hur bra är testen på att påvisa sjuka djur Hur bra är testen på at påvisa sjukdomsfria djur Arbeta standardiserat Använd samma rutiner varje gång Tag ut prov på samma tidspunkt varje gång Använd samme laboratorium till samma test varje gång!! varje labb har sina ägna referens intervaller Använd enbart ackrediterade tests Ha system på allt

5 PPID Diagnostik PPID Diagnostik ACTH Dexamethason Suppression Test (DST) Insulin (känd EMS-status!!) Proxies (TRH-Stimulation Test) Andra fynd vid Cushing-Patienter: Glukos ( 64%) (evtl. glukos i urin!) Stress-leucogram hos några Triglycerider -GT, GOT, CK, AP: ofta förhöjde Insulin ( 70%) ACTH analys Avslappnad häst (inte vid akut laminitis!) EDTA-blod uttas Centrifugeras innan 1 timma EDTA-plasma pipetteras från och frysas Skickas direkt från frys via kurir till laboratoriet (inte nödvändigt att skicka i frys-container!) ACTH analys PPID (n) Healthy (n) Cut-Off Sensitivity Specificity Accuracy Reference pg/ml 100 % 100 % 100 % Van der Kolk et al pg/ml 67 % 100 % 88 % Beech et al pg/ml 71 % 96 % 83 % Beech et al Hemolys fri!! Uttagning: % 97 % 90 % stress-fria! Cave: Smärta, Säsong variation!

6 Horses with PPID Reference value Healthy Horses Dexamethasone Suppression Test 15:00 - Basal Cortisol - 40 g/kg Dexamethasone i.m./i.v. (10 ml/500 kg) 19 Hours 10:00 - Cortisol value after stimulation Referens intervaller: < 29 pg/ml < 47 pg/ml August-Oktober Dexamethasone Suppression Test Time in hours Interpretation: Friska hästar hämmar cortisol till < 10 ng/ml 1 g/dl PPID / ECS Normal values Normal response 19h : < 1 g/dl (< 27 nmol/l) PPID Några hästar med Cushing har samtidig Insulin-resistens (IR) Ökad laminitis risk Därför: Testa alltid PPID-hästar för insulin-resistens! Insulin (kraftfoder fastat) Serum inom 1h Frysas, från frys direkt till kurir CLIOs (chemiluminescence-metod (som Liverpool) Referens interval < 23 /ml Glukos (NaFl-glas, kraftfoder fastat)

7 Proxies Proxies RISQI = 1 : Insulin -0.5 = Insulin sensitivity MIRG = [ x(ins-50) 2 ] : [gluc-30] = Pancreatic ß-cell function reciprocal inverse square of insulin modified insulin to glucose ratio Reference: > 0.32 Reference: < 5.6 Proxies I/G-ratio = Fasted-Ins : Fasted-Glucose = Pancreatic ß-cell function Reference: < 6 Cave 1. Stress / Smärta Kraftig smärta eller hårt arbete (30 min) influerar ACTH 2. Stabilitet Plasma inom 1h och på frys för ACTH plus Insulin. 3. Säsongsberoende En viss grad av hypofys-hyperaktivitet Aug-Okt är normalt Optimalt att testa August-Oktober 4. Säkerhet ACTH mer säker än DST

8 ACTH rekommenderas som rutin diagnostisk test for PPID (istället för DST) Om fortfarande osäkerhet test igen till hösten! Säsong variation kan motverkas genom att använda laboratorier, som har egna säsongsberoende referens värden ACTH test för behandlingskontroll Snabb/korrekt hantering, frysning, <20 timer transport! Test hästen för båda EMS och PPID!! Expresskurir 120:- per patient