CD-sens - Funktionellt allergitest När, Var Hur? Anna Nopp, Docent Institutionen för medicin Solna Enheten för klinisk immunologi och allergi Karolinska Institutet 2016-10-07 Nopp 1
Mastceller Basofiler 2016-10-07 Nopp 2
Basofiler Basofilerna mognar i benmärgen, cirkulerar i blodbanan och rekryteras ut till vävnaden Överlever ca 1-2 dygn Har IgE-receptorer binder IgE Aktiveras av allergen Frisätter histamin, heparin, leukotriener, cytokiner (IL-4) mm 2016-10-07 Nopp 3
Vilande basofil Aktiverad basofil IgE-antikropp Histamin CD203c CD63 2016-10-07 Nopp 4
Analys av basofilaktivering Natriumheparin som antikaogulantia Analys inom 24 timmar Förvaras i kylskåp Transport kan ske i rumstemperatur 2016-10-07 Nopp 5
Andel aktiverade basofiler Känslighet Reaktivitet 0 Allergenkoncentration 2016-10-07 Nopp 6
Vilande basofil Aktiverad basofil (Uttryck av CD63) Allergenkoncentration (SQU/ml) 30 100 300 1000 10000 2016-10-07 Nopp 7
% CD63-positiva basofiler Basofil allergenkänslighet 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0,1 1 10 100 1000 EC50 = 4,5 SQU/ml 80 % 40 % Allergenkoncentration 2016-10-07 Nopp 8
CD-sens Ett sätt att ange allergenkänsligheten EC50 inverterat och multiplicerat med 100 (100/EC50) Ju högre CD-sens, desto högre allergenkänslighet 2016-10-07 Nopp 9
Reproducerbarhet Intra assay CV: 13% Inter assay CV: 5,5% Nopp et al. Allergy 2006;61:298-302 Biologisk variation: 25% Dahlén et al. CEA 2011;41:1091-1097 Glaumann et al, Allergy 2012;67:242-247 2016-10-07 Nopp 10
Non responders / Low responders Non-responder: < 5% positiva basofiler ( -Fc RI) - Provet kan inte bedömas Low-responder: 5-16% positiva basofiler ( -Fc RI) - Provet bedöms som pos/neg men CD-sens beräknas inte 2016-10-07 Nopp 11
CD-sens hos allergiker Allergen Antal patienter Geom. medel Björk 37 1 Katt 16 5 Timotej 27 16 2016-10-07 Nopp 12
Diagnostik 2016-10-07 Nopp 13
Allergen testade i CD-sens Luftvägsallergen Björk, timotej, katt, hund, häst, kvalster Födoämnen Mjölk, ägg, vete, jordnöt, hasselnöt, kardemumma, potatis, kyckling, krokodil Läkemedel Penicilin, patent blå, fluorescein, NMBA Övrigt Bi och geting, aspergillus 2016-10-07 Nopp 14
Komplement till provokationer Varför? 2016-10-07 Nopp 15
Utförs på ett fåtal sjukhus lång väntetid Tidskrävande Svåra att utvärdera - påverkas ex. av patientens förväntningar, rädsla, stress Kan ge svåra allergiska reaktioner 2016-10-07 Nopp 16
Korrelation mellan CD-sens och allergenkänsligheten i målorganet SPT-titrering Nasalprovokation Bronkialprovokation (PD20Ag) Födoämnesprovokation (jordnöt och hasselnöt) 2016-10-07 Nopp 17
CD-sens och bronkialprovokation 10000 Allergen PD 20 1000 100 10 0.001 0.01 0.1 1 10 Inverted CD-sens r=0.41, p<0.05 Dahlén et al, CEA 2011;41:1091 2016-10-07 Nopp 18
CD-sens hos astmatiker med hög (A) respektive låg (B) bronkiell hyperreaktivitet A. B. 10000 10000 Allergen PD 20 1000 100 Allergen PD 20 1000 100 10 0.001 0.01 0.1 1 10 Inverted CD-sens r=0,38; p=0,26, n=13 (r=0.88; P<0.0001) 10 0.001 0.01 0.1 1 10 Inverted CD-sens r=0,88; p=0,0001, n=13 (r=0.38; P=0.3) Dahlén et al, CEA 2011;41:1091 2016-10-07 Nopp 19
Behandlingsuppföljning 2016-10-07 Nopp 20
A(S)IT (allergen (specifik) immunterapi) 2016-10-07 Nopp 21
% Activated basophils A(S)IT 100 Before After 80 60 40 20 0 0 0.1 1 10 100 Allergen concentration 2016-10-07 Nopp 22
CD-sens A(S)IT 120 100 80 60 40 20 0 Before treatment Before pollen season Nopp et al, Allergy 2009;64:811-814 2016-10-07 Nopp 23
CD-sens mot timotej under A(S)IT Före Underhållsdos Före pollensäsong CD-sens 39 4,2 3,9 Nopp et al., Allergy 2009;64:811-814 2016-10-07 Nopp 24
Sammanfattning A(S)IT Minskar allergenkänsligheten 2016-10-07 Nopp 25
Omalizumab (Xolair, anti-ige) 2016-10-07 Nopp 26
Humaniserad monoklonal anti-ige antikropp: omalizumab (Xolair) IgE C 3 region Omalizumab 2016-10-07 Nopp 27
Allergen IgE C 3 Binding site Fc RI receptor Mast cell 2016-10-07 Nopp 28
% Activated basophils Omalizumab vid kattallergi 80 60 Before After 40 20 0 0 100 1000 10000 Allergen concentration Johansson, Allergy 2009; 64:1472-1477 2016-10-07 Nopp 29
Relationen mellan IgE och %IgE-antikroppar Ankerst J et al, Int Archives Allergy Immunol 2010;152:71-74 2016-10-07 30 Nopp
CD-sens CD-sens före Xolair-behandling Låg% (L) och hög% (H), aktiv behandling (a) eller placebo (p). CD-sens before versus %IgE-ab 100 10 1 Ha Hp La Lp 0,1 0,01 0,1 1 10 100 %IgE-ab Johansson et al, Allergy 2009:64;1472-1477 2016-10-07 Nopp 31
CD-sens after CD-sens efter Xolair-behandling CD-sens after versus %IgE-ab 1000 100 10 1 Ha Hp La Lp 0,1 0,01 0,1 1 10 100 % IgE-ab Johansson et al, Allergy 2009:64;1472-1477 2016-10-07 Nopp 32
CD-sens casein Omalizumab Ökad dos omalizumab resulterade i negativ CD-sens och inga kliniska symtom 10 1 0.1 0.01 0 5 10 Months Nilsson, Asia Pac Allergy 2014;4:257-260 2016-10-07 Nopp 33
David idag 2016-10-07 Nopp 34
Omalizumab-behandling vid jordnötsallergi Jordnötsallergiska barn n=20, CD-sens och provokation (eller dokumenterad anafylaxi) Standarddos i 8 veckor n=8, CD-sens och negativ provokation Ökad dos (50%) i 8 veckor n=10, CD-sens och negativ provokation Ytterligare dosökning (50%) i 8 veckor n=2, CD-sens och negativ provokation Brandström un-published 2016-10-07 Nopp 35
CD-sens peanut Före omalizumab-behandling 100 p<0.01 10 1 0.1 0.01 Normal dose omalizumab High dos omalizumab Brandström un-published 2016-10-07 Nopp 36
Sammanfattning omalizumab En optimal dos omalizumab tar bort basofilens svar och kliniska symtom 2016-10-07 Nopp 37
% Activated basophils % Activated basophils A(S)IT Omalizumab 100 Before After 80 60 40 20 80 60 40 20 Before After 0 0 0.1 1 10 100 Allergen concentration 0 0 100 1000 10000 Allergen concentration 2016-10-07 Nopp 38
Kombination av omalizumab och A(S)IT 2016-10-07 Nopp 39
Natalie 15 år Multiallergisk, svårbehandlad astma, svårt eksem Känd allvarlig mjölkallergi Äter bröd som kontaminerats med ost Kraftig allergisk reaktion andningsuppehåll, cyanos Nedstämd, vill inte äta och vill absolut inte gå till skolan Viktminskning, kraftigt försämrad astma och eksem Nilsson, Asia Pac Allergy 2014;4:257-260 2016-10-07 Nopp 40
Behandling Kombination av omalizumab och OIT CD-sens mot kasein = Positiv Omalizumab i 3 månader CD-sens mot kasein = Negativ Mjölkprovokation, ingen klinisk reaktion OIT med mjölk, inga allergiska reaktioner Avslutad omalizumab-behandling vid 19 års ålder (November 2014) Idag äter och dricker hon mjölk dagligen utan begränsning Eksemet är nästan helt borta Astman är under kontroll med minskad kortisonbehandling än tidigare Nilsson, Asia Pac Allergy 2014;4:257-260 2016-10-07 Nopp 41
% Activated basophils Kombination av omalizumab och OIT 100 80 Before After 60 40 20 0 0 0.1 0.3 1 3 10 30 100 Allergen concentration (casein) Nopp, un-published 2016-10-07 Nopp 42
Natalie 20 år Jag har fått ett nytt liv Använd CD-sens för att: Mäta behandlingseffekt Säker dosjustering Individanpassad behandling 2016-10-07 Nopp 43
Användningsområden Diagnostik Komplement till provokationer Följa ett förlopp över tid 2016-10-07 Nopp 44