Arterioskleros. En inflammatorisk sjukdom. Smooth muscle Foam cells Cholesterol crystals T cells

Transkript

1

2 Arterioskleros En inflammatorisk sjukdom T cell Monocyte REVI EW Endothelium Collagen LDL Prothrombotic factors, proteases, cytokines, eicosanoids oxldl LDL, oxldl and other antigens APC Macrophage Smooth muscle Foam cells Cholesterol crystals TH1 T cells DC B cells Macrophage Tertiary lymphoid tissue in adventitia Figure 1 Immune components of the atherosclerotic plaque. The atheroma has a core of lipids, including cholesterol crystals, living and apoptotic cells and a fibrous cap with smooth muscle cells and collagen. Plasma lipoproteins accumulate in the subendothelial region. Several types of cells of the immune response are present throughout the atheroma including macrophages, T cells, mast cells and DCs. The atheroma builds up in the intima, the innermost layer of the artery. Outside the intima, the media contains smooth muscle cells that regulate blood pressure and regional perfusion, and further abluminally, the adventitia continues into the surrounding connective tissue. Here, cells of the immune response accumulate outside advanced atheroma and may develop into tertiary lymphoid structures with germinal centers. APC, antigen-presenting cell. Katie Vicari America, Inc. All rights reserved. Mast cell Neutrophil

3 Apoptos Celldöd utan omgivande vävnadsskada. Lösliga markörer: stnfr:s, Fas, sfasl Plack: I alla faser av sjukdomen. Myokardium: Ischemi, läkning, remodellering. Cirkulation: Lösliga markörer korrelerar med graden av apoptos. Nivåer predikterar risk och prognos.

4 Avhandlingens mål Mäta lösliga apoptosmarkörer vid olika kliniska manifestationer av koronarsjukdom. Korrelera dessa till vita blodkroppar samt Undersöka eventuella kopplingar mellan apoptosmarkörer och graden av skada vid hjärtinfarkt.

5

6 Syfte Att klargöra om apoptos bidrar till det sänkta NKcellsantalet vid koronarsjukdom. Om en sådan koppling drivs av oxidativ stress uppmätt i cirkulationen. Samt, att studera NK-cellers benägenhet att gå i apoptos vid exponering för oxidativ stress ex vivo.

7 Material och metoder 28 CAD (Stabil angina) 32 Friska kontroller 12 CAD+14 Kontroller 1. NK cell apoptos in vivo 16 CAD+ 16 Kontroller 11 Blodgivare 2. NK cell apoptos ex vivo. 3. Stimulering via oxldl/7βoh -> Apoptos och ROS produktion. 4. Oxidativ stress i plasma 5. Antioxidanter (karotenoider) i plasma

8 Resultat 1. NK-cell apoptos in vivo (% av NKceller): Patienter vs Kontroller: 2,6 vs 0,6 p=0,02 3. Oxidativ stress i plasma 2. NK-cell apoptos ex vivo (antal ggr ökning): Spontan och efter exponering för oxiderade fetter. 4. Antioxidanter i plasma

9 Slutsatser Ökad NK-cellsapoptos vid koronarsjukdom. NK-cellers känslighet för oxiderade fetter ex vivo pekar på länk mellan sänkt NK-cells antal och oxidativ stress vid koronarsjukdom. Trots lägre nivåer av antioxidanter, kunde dock en klar koppling mellan oxidativ stress och ett sänkt NK-cellsantal i cirkulationen ej fastställas.

10

11 Syfte Vidare klargöra orsaker till sänkt NK-cellsantal vid koronarsjukdom. Om en förhöjd apoptostakt hos dessa celler korrelerar med nivåer av lösliga apoptosmarkörer i cirkulationen, mätt över tid. Värdera benägenheten hos NK-celler att vid stimulering frisätta lösliga apoptosmarkörer och därmed försöka utröna dess ursprung.

12 Material och metoder Kohort I Kohort II 5 Blodgivare Kohort I Kohort II Blodgivare 31 NSTEMI +34 SA + Kontroller 15 NSTEMI+28 SA 3 och 12 m FU 16 post PCI/NSTEMI+K ontroller NK-cells apoptos in vivo. Spontan NK-cells apoptos ex vivo. Cytokininducerad NK-cells apoptos in vitro. sfas, sfasl och IL-6 i plasma. sfas och sfasl i plasma. Cytokininducerat sfas och sfasl från NK-celler in vitro.

13 Resultat Plasma sfasl korrelerade signifikant med antalet NKceller vid uppföljningen. Plasma sfasl korrelerade med NK-cellsapoptos ex vivo. In vitro resulterade cytokininducerad apoptos i betydande frisättning av sfasl.

14 Slutsatser Vid koronarsjukdom är sfasl associerat med en apoptosbenägenhet hos NK-celler. Efter en koronarhändelse finns en positiv korrelation mellan ökningarna av sfasl och NK-celler i cirkulationen. NK-celler är själva en källa till sfasl. sfasl en surrogatmarkör för NK-cellsstatus?

15

16 Syfte Att undersöka möjliga samband mellan lösliga apoptosmarkörer och infarktstorlek, systolisk vänsterkammardysfunktion och remodellering hos patienter med ST-höjningsinfarkt som genomgår primär PCI.

17 Material och metoder 48 patienter Symtomduration<6h Blodprover PCI Blodprover CMR CMR 24 h 5 dagar 4 månader Blodanalyser stnfri, stnfrii, sfas, sfasl (ELISA) MMP-2 (ELISA) Hjärt-MR (CMR) Infarktstorlek Late Gadolinium Enhancement (LGE) zone. LV-dysfunktion (LVEF) LV remodellering (δedvi and δesvi vid 5 d jmf med 4 m)

18 Resultat Korrelationer mellan lösliga apoptosmarkörer och infarktstorlek. Korrelationer mellan lösliga apoptosmarkörer och vänsterkammardysfunktion och remodellering.

19 Slutsatser I en STEMI-population genomgående PCI inom 6 timmar från symtomdebut: Korrelerar stnfri med den slutliga infarktstorleken och graden av vänsterkammardysfunktion. Patienter med de högsta nivåerna av stnfri hade de största infarkterna och mest uttalad vänsterkammardysfunktion vid 4 månader. Apoptos kan vara en betydande faktor vid ischemireperfusionsskada.

20 Submitted

21 Syfte Att undersöka mönstret av lösliga apoptosmarkörer i plasma, i akutskede och vid uppföljning hos patienter med ST-höjnings- och icke SThöjningsinfarkt.

22 Material och Metoder 61 STEMI 40 NSTEMI Blodprover hstnt Blodprover EKO Blodprover Före Clopidogrel 6-8 h Dag 3 6 månader Blodprov: Lösliga apoptosmarkörer (stnfri, stnfrii, sfas, sfasl samt Interleukin- 6 (IL-6) i plasma).

23 IL - 6 (p g /m L ) IL - 6 (p g /m L ) s F a s L (p g /m L ) s F a s L (p g /m L ) s F a s (p g /m L ) s F a s (p g /m L ) s T N F R 2 (p g /m L ) s T N F R 2 (p g /m L ) s T N F R 1 (p g /m L ) s T N F R 1 (p g /m L ) Figure+1.+Plasma!levels!of!markers!of!apoptosis!and!IL86!in!(A)!STEMI!and!(B)!NSTEMI!patien Resultat B a s e lin e 3 d a y s 6 m o n th s B a s e lin e 3 d a y s 6 m o n t h s Nivåer av lösliga apoptosmarkörer från olika apoptosvägar skiljer sig markant åt över tid B a s e lin e 3 d a y s 6 m o n t h s B a s e lin e 3 d a y s 6 m o n t h s B a s e lin e 3 d a y s 6 m o n t h s B a s e lin e 3 d a y s 6 m o n th s STEMI- och NSTEMIpatienter uppvisar dock likartade mönster B a s e lin e 3 d a y s 6 m o n th s B a s e lin e 3 d a y s 6 m o n th s B a s e lin e 3 d a y s 6 m o n th s 0 B a s e lin e 3 d a y s 6 m o n th s STEM NSTEMI A+ I B+! Data!are!presented!as!mean!(SD)!for!sTNFR1,!sTNFR2,!sFas!and!sFasL,!and!as!median!(25th,!75th!per IL86.!p<0.05.!sTNFR1,!soluble!tumour!necrosis!factor!receptor!1;!sTNFR2,!soluble!tumour!necrosis!f

24 Slutsatser Apoptos har likartade aktiveringsmönster och bidrar till myokardskadan både vid STEMI och NSTEMI. TNF- och Fas/FasL-systemen tycks aktiveras annorlunda vid hjärtinfarkt. Nyttan av mätning av apoptosmarkörer i akutskedet och vid uppföljning av hjärtinfarkt måste utvärderas i större prospektiva studier.