Högupplösande masspektrometri för screening av internetdroger

Högupplösande masspektrometri för screening av internetdroger Dr. Martin Josefsson Docent, Forskningskemist Avdelningen för rättsgenetik och rättskemi Rättsmedicinalverket Linköping Avdelningen för fysik och mätteknik (IFM) Linköpings Universitet TF-MS karaktäristik hög MS-upplösning (resolving power) >0,000 up to 50,000 (00,000) hög massnoggrannhet (accuracy) < ppm (<0.5 ppm) ppm 0.0003 amu (0.3 mda) 263.88529 (tramadol) hög känslighet (ESI) lägre pg-området ner till fg (injicerat) stort dynamiskt mätområde 5 magnituder! (för nya instrument)) inom 50-3000 m/z ( 20 spektra/sekund) snabb datainsamling (acquisition) -4 GHz (ett krav för hög massnoggrannhet) genererar stora datamängder/analys, 00 Mb - Gb/analys hybridinstrument tandem-ms, Q-TF (möjligt att generera MS-spektra) Kan användas för såväl riktad screening targeted som förutsättningslös non-targeted analys av data

QTF-MS instrumentering hybridinstrument Time of Flight (TF) Ion Funnel (Agilent) StepWave (Waters) Quadrupole (Q) MS upplösning (resolution/resolving power) "Lågupplösande Quadrupol-MS FWHM = 0.7 (RP 500) MS-spektra för tramadol Högupplösande TF-MS RP 0 000 (FWHM 0.05) m/z abund(%) 264.958 00 265.99 8.05 266.209.94 267.2045 0.6 268.2072 0.0 hög upplösning möjliggör analys av isotoper! A, A+, A+2 osv 2

Massnoggrannhet vs. antal isobarer accuracy Quadrupol MS (Q) analyt formel nominell mass tramadol C6 H25 2 263,4 -desmethyl-venlafaxin C6 H25 2 263,4 -desmethyl-venlafaxin C6 H25 2 263,4 melperon C6 H22 F 263,4 nortriptylin C9 H2 263,4 Time of Flight MS (TF) analyt formel exakt massa tramadol C6 H25 2 263.88529 -desmethyl-venlafaxin C6 H25 2 263.88529 -desmethyl-venlafaxin C6 H25 2 263.88529 melperon C6 H22 F 263.68542 nortriptylin C9 H2 263.67399 2243 träffar! Databehandling, TF-MS alla massor mäts och all data sparas retrospektiv analys möjligt! genererar hög bakgrundsingnal ger mycket brus! filtrering av data med hjälp av algoritmer Identifiera kromatografiska toppar identifiera alla joner som länkar inkludera addukter som; a + or K + inkludera isotoper ([M+H] +, [M+H+] +, inkludera olika laddningsfördelning identifiera eventuella dimerer generera ett analytspecifikt spektra Summerar alla signaler till ett värde (Feature) Helt automatiserad data processning 3

Databas / Bibliotek exakt massa / spektra PCDL = Personal Composed Database / Library Find By Formula (FBF) Formula matching parameters total score (pos i.d.) max = 00 retention time accurate mass isotopic pattern Compound information from formula or database Spectra extracted from integrated peak XIC drawn from information Spectral performance calculated 4

Auto MS/MS data-dependent acquisition Precursors (MS) max precursors per cycle, 2 co-eluted compounds can be identified active exclusion excluded after spectrum average of several spectra on each peak released after 0.05 min Spectra matching (MS/MS) reversed: library vs. sample forward: sample vs. library gives most often the highest scores often bad scores in urine analyses Library spectra at 0, 20 and 40 ev fixed collision energy (CE) CE based on MW from formula individual CE settings screening for analogues/homologes (T5) screening for more different chemical identities (T6/T8) when target lists are used (T7) Auto MS/MS MDPV (bath salt) x0 2 0.75 0.5 0.25 0 x0 2 0.5 0-0.5 - +ESI Product Ion (5.485, 5.526, 5.567 min, 3 Scans) CID@5.9 (276.595[z=] -> **) ADF30A.d CE from formula 205.086 27.06 49.0226 72.0805 57.0700 05.0667 84.0800 9.076 233.04 +ESI Product Ion (5.485, 5.526, 5.567 min, 3 Scans) CID@5.9 (276.595[z=] -> **) ADF30A.d forward (sample vs library) 26.277 75.0744 205.086 27.06 49.0226 72.0805 57.0700 05.0667 84.0800 9.076 233.04 reversed (library vs sample) 5.9 V 260.649 260.649 276.594 276.594 x0 2 MDPV C6H23 + Product Ion Frag=25.0V CID@20.0 T08_PCDL.cdb 26.278 276.595 0.75 35.044 75.0753 ref spectrum 20 V 205.086 0.5 49.0233 0.25 72.082 84.080 0 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 00 05 0 5 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 200 205 20 25 220 225 230 235 240 245 250 255 260 265 270 275 280 285 Counts vs. Mass-to-Charge (m/z) 5

Strategier analys Läkemedel (blod) obduktionsärenden LC-TF-MS (GC-PD) arkotika (hår) LC-TF-MS (LC-MS/MS) Särskild förfrågan (urin) steroider GC-MS (full scan, SIM) Screening/Sållning arkotika (urin/serum/blod) alla ärendetyper Immunoassay (EMIT, ADVIA) modersubstanser metaboliter Verifikation/Kvantifiering Alkoholer, flyktiga (blod) GC-HS (verifikation/kvantifiering) Läkemedel (vävnad) bduktionsärenden LC-QTF-MS (GC-PD) Särskild förfrågan (urin/blod) internetdroger LC-QTF-MS (GC-MS) X ej vidare för verifikation! Läkemedel (urin, blod, hår) multikomponentmetoder frekvent! en eller fåtalet analyt/er mindre frekvent! LC-MS/MS eller GC-PD arkotika (urin/blod/hår) dedicerade MS-metoder en eller fåtalet analyt/er frekvent! GC-MS eller LC-MS/MS deutererade interna standarder Instrumentering Agilent 6540/6550, Jet-Stream ESI generella parameter inställningar! kapillär 3500 V, fragmentor 25 V MS-mode med 20 ppm detektionsfönser, auto MS/MS-mode m/z 50-000,.5 spektra/sekund profil och centroiddata vid 2 GHz (utökat dynamiskt område) Agilent 290 UHPLC lång kolonn för maximal upplösing! HSS T3, 50x2.,.8 µm (Waters) Linjär gradientkromatografi inom 2 min (A) 0.05% FA i 0 mm H 4 FA, (B) 0.05% FA i Acetonitril 0.5 ml/min vid 60 C, 2 µl injicerat MassHunter Acq, Qual and Quant egna databaser/bibliotek (PCDL = personal composed database/library) >600 föreningar med tillgång till certifierat eller väldokumenterat referensmaterial (t ex beslag) 6

Provberedning blod - 0.25 g protein fällning (PPT) med 500 µl 0.075 % myrsyra i MeC:EtH 90/0 v/v centrifugera, överför 200 µl, injicera 2 µl. urin - 0.5 ml med eller utan hydrol med β-glucuronidase (E.coli) extraktion genom utsaltning (SALLE) med 500 µl MeC och 250 µl 0 M H 4 Ac centrifugera, överför 00 µl MeC, injicera 2 µl. interna standarder för standard metoder (amfetamin-d8, diazepam-d5, mianserin-d3) för syntetiska cannabinoider (tillgängliga deutererade analoger) UHPLC - gradientkromatografi HSS T3, 50x2.,.8 µm GHB THC (A) 0 mm H 4 FA + 0.05% FA (B) actetonitril+0.05% FA Linjär gradient -95% B inom 0 minuter Kromatografin är en kompromiss! Blankt blodprov (överst). Autentiskt blodprov från obduktion (nederst). Interna standarder markerade med svarta pilar (amphetamine-d8, mianserine-d3, diazepam-d5). 7

Strategier för TF-/QTF-MS analys single state TF-MS (6540/6550) används för screening som följs av verifikationsanalys LC-MS/MS, GC-MS eller GC-PD för verifikation och kvantifiering högt genomflöde av prover! data-dependent MS/MS acquisition QTF-MS (6540) används för screening där ingen kvantifiering krävs screening och verifikation av internetdroger tillförlitliga identifieringar! QTF-MS med mer känsligt instrument (6550/iFunnel) -data-dependent MS/MS med inklusionslista (prefered list) -prekusorer + fragment; All Ions (Agilent), MSe (Waters), bbcid (Bruker) screening och verifikation av internetdroger i låga koncentration (syntetiska cannabinoider i blod) tillförlitliga identifieringar vid låga koncentrationer! Syntetiska cannabinoider JWH-08 JWH = John W. Huffman research chemical (RC) designade droger / internetdroger ( spice, K2) flera olika klasser naftoylindoler (JWH-08) tetrametylcyxlopropylindoler (XLR-) adamantoylindoler (AKB-48) många analoger genererar flera metaboliter hydroxylering, karboxylering monohydroxylering (Fas I) konjugering, glukuronider (Fas II) 8

Klassning LVFS 20:0 syntetiska cannabinoider Klassade (April 203). arkotika (n=20) 2. Hälsofarlig vara (n=0) arkotika (Aug 203) EAM-220 Hälsofarligvara (Dec 203) 5F-PB-22 STS-35 JWH-08 -(5-klorpentyl)analog AM-694 klorderivat AB-00 (JWH-08 adamantoylderivat) JWH-08 adamantylkarboxamide (SDB-00, 2E, APICA) 5F-AKB-48 (5F-APIACA) AKB-48 (APIACA) 5F-UR-44 2 2 2 4-H-pentyl Kromatografi optimerad för metaboliter syntetiska cannabinoider bifunktionell stationärfas ACE Excel 2 C8-AR (00*2mm) C8 kedjor med integrerade fenylgrupper 44 metaboliter till 3 modersubstanser (A) 0.05% FA in 0 mm H 4 FA, (B) 0.05% FA in metanol HSS T3 (C8),.7 µm 50 x 2.mm i.d. 0.5 ml/min 60 C flack gradient 50-70% B inom 3 min 9

Arbetsflöde syntetiska cannabinoider i urin Provberedning 600 µl urin Hydrolys (β-glukuronidas), 20 min rumstemp SALLE (MeC, 0 M H 4 Ac) UHPLC-QTF-MS (AT290, 6540) 5 µl (2µl) injicerat, 7 minuters analys Auto MS/MS (data-dependent acquisition) MassHunter Qual Identifiering av prekursorer (MS) Matchning av spektra (Auto-MS/MS, fast CE 20 ev) MussHunter Quan Konfirmering av fynd i jämförelse mot standarder vid tröskelvärdet 2 ng/ml (5ng/ml) få positiva resultat är att förvänta! Function Criteria Mass accuracy ± 5 ppm Retention time ± 0. Score (MS) >80 Cut-off (Calibrator) 5 ng (2 ng) Score Lib (MS/MS) >80 (CE 20 V) Blankkontroll Hydrolyskontroll (JWH-8 5-H-pentyl glucuronid) Fyra standardera-d vid tröskelvärdet Standard 326 322 32 3209 3205 Calibration (A) 44 43 42 4 40 ame Score (Lib)Score (Lib)Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) otes RCS-4 A, 9,08 94,87 95,54 90,8 84,43 5-H-pentyl JWH-250 5-H-pentyl A, 82,5 89,3 89,7 88,65 84,38 JWH-073 3-H-butyl A, 88,4 96,73 85,7 90,6 96,88 JWH-08 5-H-pentyl A, 84, 96,96 96,95 95,25 87,5 UR-44 4-H-pentyl A, 70,7 87,84 72,32 72,89 76,58 MAM-220 4-H-pentyl A, 89,59 94,0 93,72 87,84 89,89 JWH-09 5-H-hexyl A, 90,34 92,89 94,8 92,89 92,79 JWH-22 5-H-pentyl A, 8,95 89,9 95,88 90,36 88,2 AKB48 pentansyra A, 9,66 93,04 9,6 90,35 93,8 JWH-20 4-H-pentyl A, 87,79 89,4 88,2 92,97 89,89 JWH-398 4-H-pentyl A, 76,54 78,29 9,8 86,2 85,64 d5-jwh-250 4-H-pentyl IS 0 0 0 0 0 d5-jwh-073 3-H-butyl IS 0 0 0 0 0 d5-jwh-08 pentansyra IS 0 0 0 0 0 d7-jwh-073 6-H-indol IS 0 0 0 0 0 d9-jwh-08 6-H-indol IS 0 0 0 0 0 d9-jwh-08 7-H-indol IS 0 0 0 0 0 Autentiskt fall, urinanalys d5-jwh-250 4-0H-pentyl d5 JWH-8 d5-jwh-073 pentansyra 3-0H-butyl JWH-8 4-0H-pentyl d7-jwh-073 6-0H-indol d9-jwh-8 6-0H-indol d9-jwh-8 7-0H-indol JWH-073 butansyra JWH-8 pentansyra JWH-8 5-0H-pentyl Substans Funnet (ng/ml) JWH-08 4-H-pentyl 27 JWH-08 5-H-pentyl 6 JWH-08 pentansyra JWH-073 butansyra 6 0

Immunologisk screening abs 0,08 0,07 0,06 0,05 0,04 0,03 0,02 0,0 0,00 0 5 0 5 20 25 30 ng/ml Analyserat med Advia 850-50% +50% 5 0 20 9.7% 9.0% 5.8% 6.4% 5.0% 2.9% MAM-220 pentansyra 52% korsreaktivitet MAM-220 4-H pentyl 36% korsreaktivitet JWH-22 4-H & 5-H pentyl 40 resp. 39% korsreaktivitet Ingen korsreaktivitet för UR-44 pentansyra UR-44 4-H & 5-H pentyl forts Tröskelvärde; HEIA 5 ng/ml, LC-QTF 2 ng/ml utvalda prover (3 månader, n=87) HEIA - LC-Q-TF - 40 + 5 F än god överensstämmelse mellan metoderna men UR-44 detekterades ej med HEIA 80 positiva fynd i 38 fall med LC-QTF JWH-22 5-H-pentyl, JWH-08 5-H-pentyl + 9 FP 33 Strategies for the analysis of synthetic cannabinoids in urine. A comparison between an immuno assay and an LC-QTF method Kronstrand R, Birath-Karlsson C, Brinkhagen L, Roman M, Josefsson M. Anal. Bioanal. Chem. 204 epub-

Rutinscreening för syntetiska cannabinoider i urin stor efterfrågan > 250 prover per vecka - problem med kontamination av instrumentet ny screeningmetod (T9) jan-4 problem okt-3 start (T5) sept-3 328 327 325 32 320 38 37 34 33 308 304 303 3030 3028 3025 3024 B 3024 3023 302 3020 309 307 306 304 300 3009 3004 3002 30930 30927 B 30927 A 30923 30920 B 30920 A 6098 3096 3092 3090 38 37 36 35 34 33 32 3 30 29,5 28 27 26 25 24 23 22 2 20 9 8 7 6 5 4 3 2 0 9 8 7 6 5 4 3 2 Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib)Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib)Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib)Score (Lib)Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib)Score (Lib)Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) Score (Lib) 90,6 89,84 90,6 9,4 83,0 87,88 94 95,2 89,2 95,26 90,38 76,07 56,08 6,80 0,00 8,36 83,0 89,88 83,65 0,00 83,0 89,00 9,03 82,07 8,62 83,0 94,69 9, 9,50 9,78 92,37 92,0 92,93 90,92 75,5 60,98 77,24 82,8 76,48 8,4 82,99 85,02 88,2 78,49 0,00 54,63 75,4 68,32 78,60 72,00 66,26 78,38 77,3 65,95 69,35 74,6 82,49 7,75 7,09 80,68 75,58 89,24 68,2 83,52 79,69 83,90 83,66 8,65 83,82 80,50 75,98 83,39 84,39 89,92 88,87 87,95 85,5 84,46 94,97 89,8 90,5 93,25 6,24 69,53 73,90 68,30 86,33 62,34 70,82 80,05 8,3 52,78 7,26 75,69 87,46 8,82 87,78 93,4 92,23 9,85 86,46 94,48 85,90 76,23 94,92 93,69 89,79 88,80 93,48 92,52 76,09 86,8 82,93 75,37 83,84 94,3 86,64 95,5 92,7 90,5 73,48 70,89 64,06 83,00 76,53 73,48 73,48 9,93 67,63 73,48 73,48 78,80 92,88 77,86 83,78 83,98 93,32 9,95 94,2 86,3 88,46 94,3 92,9 9,5 94,02 9,45 93,60 94,90 75,86 62,6 70,03 76,26 69,4 73,99 69,08 72,69 8,83 76,09 0,00 55,62 0,00 5,00 5,2 50,83 0,00 50,83 59,22 72,50 68,58 75,03 7,7 72,00 85,09 65,53 66,0 6,00 78,69 79,23 64,3 77,34 74,88 7,54 73,58 86,4 90,55 80,35 85,34 92,72 9,54 93,6 89,08 85,3 94 54,59 57,72 63,84 56,57 75,86 0,00 58,23 5,90 76,20 55,35 0,00 77,9 93,36 83,00 94,78 89,40 74,65 90,42 83,58 8,35 83,48 94,3 9,20 85,09 92,08 90,79 92,43 9,39 90,2 86, 85,9 88,86 8,44 93,22 96,42 94,6 89,9 96,09 72, 76,7 86,93 76,7 86,7 50,6 75,42 76,7 76,7 76,7 69,97 87,0 86,95 87,3 89,05 9,54 86,92 90,72 87,07 79,57 9,78 87,07 90,3 88,6 9,69 90,58 9,62 9,69 78,49 94,2 88,69 85,34 92,63 85,35 93,07 89,8 84,73 94,9 7,56 59,76 59,2 0,00 70,50 7,54 73,92 6,76 77,26 66,5 74,57 77,60 87,89 56,82 89,9 7,7 92,94 82,62 76,59 80,88 80,6 78,87 93,87 93,49 9,75 85,79 85,80 9,47 93,92 73,36 79,7 9,52 9,66 90,89 90,83 92,44 9,64 87,33 83,32 69,26 87,45 83,28 9, 78,8 8,87 88,7 90,05 0,00 68,55 79,54 72,26 58,48 0,00 62,33 76,06 72,39 0,00 7,93 6,60 88,76 87,74 87,83 87,28 62,47 86,4 76,27 84,20 90,35 89,22 8,46 89,65 9,7 88,74 87,77 9,67 8,02 78,82 82,5 82,23 75,77 80,3 86,39 84,79 87,49 90,73 68,77 73,55 52,68 6,89 64,56 0,00 73,92 67,30 50,34 73,64 80,49 80,49 74,8 84,27 78,7 75,88 7,82 79,98 77,46 88,06 84,32 80,5 76,05 83,8 87,0 83,24 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Steg Mindre injektionsvolym, 2µl (vs 5) och höjda tröskelvärden, 5ng (vs 2) Steg 2 Utveckla ny snabbare screening metod (T9). ett mer känslig instrument (6550), 0.5 µl injicerat (jfr 5 µl ursprunligen) snabbare kromatografi, from 7 to 6 minuter TF-MS-analyser Bara de positiva fynden analyseras och verifieras med hjälp av den ursprungliga metoden (T5) Resultat syntetiska cannabinoider i urin Riktad QTF screening av 3 substanser genom analys av 44 metaboliter Tidsperiod T5 T9 Positiva fynd 30909-406 (5 mån) 889-73 4% 4020-4027 ( mån) 50 25 40 3% 30909 start JWH-8 + JWH-73 + AM-220 UR-44 JWH-22 JWH-20 AKB-48 323 addition of AKBs 2 9 2 7 2 2-4020 new pre-screening 3 2 2 0 0 0 28 2 0 8 3 0 25 26 5 23 5 2 53 u har vi tillgång till ytterliggare 6 metaboliter till 7 nya modersubstanser BB-22 3-CH-indol AB-PIACA 5-H-pentyl 5F-PB-22 3-CH-indol AB-PIACA pentansyra PB-22 3-CH-indol 5F-AB-PIACA 4-H-pentyl PB-22 4-H-pentyl PB-22 5-H-pentyl ADBICA 4-H-pentyl PB-22 pentansyra ADBICA pentansyra PB-22 4-H-pentyl-3-CH-indol PB-22 5-H-pentyl-3-CH-indol ADB-PIACA 4-H-pentyl PB-22 pentansyra-3-ch-indol ADB-PIACA pentansyra det finns ett behov av att ständigt uppdatera screeningmetoderna! 2

Statistik - Beslag F F ADIS 203 Fynd Substanser 80 ADB-FUBIACA 6 ABIACA 59 5F-AB-PIACA 30 AB-FUBIACA H H 3 C H 3 C CH 3 ADB-FUBIACA H 2 H H 3C H 2 H H 3 C CH3 AB-FUBIACA CH 3 H 2 H H 2 F H 3 C CH 3 H 3 C CH 3 ADBICA 5F-AB-PIACA SKL 204 (jan-febr) Substanser 5F-AKB48 (5F-APIACA) AB-FUBIACA 5F-PB22 BB-22 H 5F-AKB-48 (5F-APIACA) F F 5F-PB-22 BB-22 Övriga internetdroger katinoner, fenetylaminer, tryptaminer, bensodiazepiner, andra standard gradientkromatografi (UHPLC) GHB THC enkel provberedning (SALLE för urin, PPT för blod) auto MS/MS (AT 6540) endast kvalitativ analys eget bibliotek, PCDL (för närvarande ca 20 substanser) tröskelvärde: urin 50-500 ng/ml, blod 20-00 ng/g (analytberoende) 3

Separation of isomerer (isobarer) x0 4 +ESI EIC(54.027) Scan Frag=25.0V FA_REF.d Smooth. 0.9 0.8 0.7 0.6 Fluoramphetamine (FA) F H * 2.307 * 2.45 * 2.579 Kinetex PFP Pentafluorphenyl 0.5 0.4 0.3 0.2 0. 0 x0 5 4.5 4.25 4 3.75 3.5 3.25 3 2.75 2.5 2.25 2.75.5.25 0.75 0.5 0.25 0 2-FA 3-FA 4-FA 2 2.05 2. 2.5 2.2 2.25 2.3 2.35 2.4 2.45 2.5 2.55 2.6 2.65 2.7 2.75 2.8 2.85 2.9 2.95 3 Counts vs. Acquisition Time (min) +ESI EIC(78.226) Scan Frag=25.0V MMC_REF_2.d Smooth Methylmethcathinone (MMC) * 5.489 2-MMC H * 5.96 5 5.05 5. 5.5 5.2 5.25 5.3 5.35 5.4 5.45 5.5 5.55 5.6 5.65 5.7 5.75 5.8 5.85 5.9 5.95 6 6.05 6. 6.5 6.2 6.25 6.3 6.35 6.4 6.45 6.5 6.55 6.6 6.65 6.7 6.75 6.8 6.85 6.9 6.95 7 Counts vs. Acquisition Time (min) * 6.28 3-MMC 4-MMC mephedrone Cosmosil piap aphtylethyl π-πinteraktion alternativ isokratisk kromatografi Resultat internetdroger I urin och blod Riktad screening för >00 substanser Topp fem urin T6 Topp fem blod T8 Maj-Dec 203 n=3344 Maj-Dec 203 n=20 400/mån 50/mån Metylfenidat 26 MDPV 74 MDPV 96 PVP 78 3-MMC (3-metylmetkatinon) 66 3-MMC (3-metylmetkatinon) 57 PVP 63 Metylfenidat* 2* MDPPP (+ MDPV el. PVP) 37 Flubromazepam 20 övrigt 8 övrigt 63 totalt antal positiva 796 392 24% 34% *flera fynd, vid riktad frågeställning analyserat med 3Q LC-MS/MS 25C-BMe 2-amiodarone 2-FA 4-EMC 4-FA 4-MEC 5-MAPB 6-APB AH-792 beta-ethylmethcathinone butylone cathinone ephedrine MDPV badsalt ethylphenidate etizolam mcpp MDAI mephedrone mescaline methylone metiopropamine metoxiethamine methylone MPPP MXE norephedrine 4

Sammanfattning LC-TF-MS kan på ett snabbt och rationellt sätt användas för screening av ett stort antal prover på en relativt kort tid, men en uppföljande verifikationsanalys av positiva fynd är nödvändig. Martin Josefsson, Agilent Forensic Solution Summit, Mannheim Germany 40226 LC-QTF-MS kan användas för screening och verifikation vid ett och samma analystillfälle men är ofta mer tidskrävande både gällande analys och utvärdering av data. Med TF-MS metoder kan man uppnå den flexibilitet som krävs vid analys av internetdroger där omsättningen är stor för de substanser som metoderna bör täcka. De är möjligt att retrospektivt analysera data från tidigare analyserade prover och att utföra förutsättningslös (ej riktad) analys av data. Ansvariga medarbetare RMV Markus Roman (QTF specialist, blodmetoderna) Linda Brinkhagen (syntetiska cannabinoider i urin) Carina Munter (övriga internetdroger i urin) Carolina (Carro) Birath-Karlsson (immunologisk screening) Dr. Robert Kronstrand (toxikologisk specialist, design/planering) Tack för uppmärksamheten! 5