DA212115.03 1 BRUKSANVISNING FÄRDIGA ODLINGSPLATTOR DA212115.03 Rev.: Oct 2005 BBL UROTUBE BBL UROTUBE M BBL UROTUBE E BBL UROTUBE E. coli BBL UROTUBE SXT AVSEDD ANVÄNDNING BBL UROTUBE är dipslidesprodukter som är avsedda för isoleringen och bestämningen av koloniräkningar av mikroorganismer isolerade från urinprov. Diplsideytorna är betäckta med två eller tre olika odlingsmedia. Alla BBL UROTUBEprodukter innehåller CLEDagar för bestämningen av det totala antalet bakterier och/eller jästsvampar, och MacConkeyagar för detektionen av gramnegativa bacteria, t.ex., Enterobacteriaceae. Tredje mediet, om tillgängligt, är beroende av respektive produkt. PRINCIPER FÖR OCH FÖRKLARING AV METODEN Mikrobiologisk metod. Dipslidemetodiken används allmänt idag som en screeningsteknik för räkningen och isoleringen av mikroroganismer från vanliga urinprov. 15 Efter det att plattan har doppats ned i ett korrekt insamlat färskt urinprov och därefter inkuberats, jämförs koloniantalet på ytan av CLEDagar med en referensbild. CLEDagar utvecklades av Sandys 1960 för att förhindra svärmning av Proteus genom att begränsa elektrolyterna i odlingsmediet vilket senare modifierades flera gånger för användning i urinodling. 6 Det betecknades som ett cystinlaktoselektrolytbrist (CLED) och rapporterades vara idealt för doppinokulattekniker och för urinbakeriologi i allmänhet. 6,7 Näringsämnena i CLEDagar tillhandahålls av gelatinet och kaseinpeptoner samt extrakt av nötkött. Laktos inkluderas får att ge en energikälla för organismer kapabla till att utnyttja denna genom en fermentering. Bromtymolblått används som en phindikator för att differentiera laktosfermenterande från ickelaktosfermenterande organismer. Organismer som fermenterar laktos kommer att sänka ph och ändra färgen på mediet från grönt till gult. Cystin tillåter växt av dvärgkolonier av koliforma. 3 Elektrolytkällor har reducerats för att minimera svärmning av Proteus species. Antalet kolonier på CLEDagar är direkt proportionellt till antalet bakterier per ml urinprov. CLEDagar inkluderas på alla BBL UROTUBE dipslideprodukter som 1. Det andra mediet är MacConkeyagar. Det är endast något selektiv eftersom koncentrationen av gallsalter, vilka inhiberar grampositiva mikroorganismer, är låg i jämförelse med andra enteriska plattmedia. Detta rekommenderas för användning med kliniska prover somförmodas innehålla en blandad mikrobiell flora som t.ex. urin. Det tillåter en preliminär gruppering av enteriska och många andra gramnegativa bakterier i laktosfermenterare respektive ickelaktosfermenterare. 8,9 I MacConkeyagar ger peptoner näring. Kristallviolett inhiberar grampositiva bakterier, speciellt enterokocker och stafylokocker. Differentieringen av enteriska mikroorganismer åstadkoms genom kombinationen av laktos och den neutralt röda phindikatorn. Färglösa eller rosa till röda kolonier produceras beroedne på förmågan av isolatet att fermentera kolhydratet. MacConkeyagar inkluderas på alla UROTUBE dipslideprodukter som 2. Ett tredje inkluderas på de tresidiga dipslideytorna för att detektera närvaron av karakteristiska grupper av bakterier och jästsvampar. Denna typ av beror av vilken produkt som används: BBL UROTUBE innehåller, som tillägg till media 1 och 2 enligt ovan, cetrimidagar, ett allmänt använt för den selektiva isoleringen av Pseudomonas aeruginosa. 10,11 Gelatinpepton och kasein ger näring. Kalium och magnesiumsalter förstärker pigmentformationen av P.
aeruginosa. Glycerol är en energi och kolkälla. Cetyltrimetylammoniumbromid (=cetrimid) är ett lösningsmedel som selektivt inhiberar de flesta gramnegativa stavar andra än P. aeruginosa. BBL UROTUBE M innehålller, som tillägg till media 1 och 2 enligt ovan, maltagar, ett partiellt selektivt för isolering av jästsvampar t.ex. Candida albicans. Maltextrakt och mjölksyra ger näring och bibehåller ph på en låg nivå vilket ger selektivitet att inhibera många bakteriella species. 11 BBL UROTUBE E innehåller, som tillägg till media 1 och 2 enligt ovan, Enterococcusagar, en selektivt differentierande för Enterococcus species. 11 I Enterococcusagar, tillhandahåller kasein och jästextrakt näring. Natriumklorid bibehåller den osmotiska stabiliteten. Kombinationen av citrate, azid, kanamycin, polymyxin B, nalidixinsyra och neomycin inhiberar de flesta bakterier förutom Enterococcus species. Eskulin är ett substrat för betaglukosidas, som är ett kännetecken för Enterococcus species. En av produkterna för enzymatisk hydrolys, eskuletin, reagerar med järnjoner för att producera ett brunt till svart precipitat i mediet runt Enterococcus kolonierna. BBL UROTUBE E. coli innehåller, som tillägg till media 1 och 2 enligt ovan, betaglukuronidas (=BGLU) agar, ett differentierande för den specifika detektionen av E. coli och Proteus species. Mediet innehåller nitrofenylßglukuronid, ett kromogent substrat för att detektera betaglukuronidasaktivitet vilket vanligtvis finns hos Escherichia coli, medan många andra bakterier, inkluderande Proteus, Providencia, och Morganella, är negativa. 11,12 Vid degradering av substratet, ackumuleras gult nitrofenol i mediet och kolonierna, medan glukuronidasnegativa kolonier är färglösa till gråaktiga på ett färglöst. Gul växt från detta mediet kan utsättas för en indoltest vilken, om positiv, bekräftar identifikationen av E. coli. Indolformeringen på detta förstärks genom tillsats av indolprekursorn (tryptofan). Alternativt, utgör denna aminosyra substratet för enzymet tryptofandeaminas (TDA), vilket vanligtvis återfinns hos Proteus, Providencia, and Morganella species. Detta enzyme kan lätt detekteras genom att utföra ett TDAtest med järnklorid. För vidare bekräftelse, kan en indoltest utföras från färglös växt vilken också är positiv hos Proteus vulgaris, Providencia species och Morganella morganii. BBL UROTUBE SXT innehåller, som tillägg till media 1 och 2 enligt ovan, antagonistfritt (PDM Medium) med trimetoprim/sulfametoxazol (SXT) för bestämning av resistens eller känslighet för SXT. Växt av någon bakteri på detta betyder resistens för SXT. Efter inokulation, eller efter inokulation och inkubation, kan dipslides också användas som transport från läkarens mottagning till de analytiska laboratorierna. Växt från dipslidemedia kan användas för identifikation och resistensbestämning av isolaten. REAGENSER Sammansättningar* per liter aqua purif Medium 1 och 2 är vanliga för alla BBL UROTUBEdipslides. Medium 1: CLEDagar Medium 2: MacConkeyagar Peptisk spjälkning av kasein 4,0 g Peptisk spjälkning av kasein 17,0 g Valda peptoner 4,0 Köttpepton 3,0 Köttextrakt 3,0 Laktos 10,0 Laktos 10,0 Natriumklorid 5,0 Cystin 0,128 Gallsaltsblandning 1,5 Bromtymolbått 0,02 Naturligt röd 0,03 Agar 15,0 Kristallviolett 0,001 ph 7,3 ± 0,2 Agar 13,5 ph 7,1 ± 0,2 Medium 3: Typen av 3 (om tillgängligt) beror på den produkt som används (se PRINCIPER FÖR OCH FÖRKLARING AV METODEN). BBL UROTUBE innehåller, som tillägg till media 1 och 2 enligt ovan, cetrimidagar: Peptisk spjälkning av gelatin 16,0 g Glycerol 8,0 g Hydrolyserat kasein 10,0 Cetyltrimetylammoniumbromid 0,3 Kaliumsulfat 10,0 Agar 13,0 DA212115.03 2
Magnesiumklorid 1,4 ph 7,1 ± 0,2 BBL UROTUBE M innehåller som tillägg till media 1 och 2 enligt ovan, maltagar: Maltextrakt 30,0 g Agar 18,0 g Mjölksyra 6,3 ph 4,0 ± 0,4 BBL UROTUBE E innehåller som tillägg till media 1 och 2 enligt ovan, Enterococcus agar: Peptisk spjälkning av kasein 20,0 g Kanamycin 0,02 g Jästextrakt 5,0 Polymyxin B 0,002 Natriumklorid 5,0 Nalidixinsyra 0,0075 Citrat 1,5 Neomycin 0,002 Natriumazid 0,15 Agar 15,0 Esculin 1,0 ph 7,1 ± 0,2 Järnammoniumcitrat 0,5 BBL UROTUBE E. coli innehåller som tillägg till media 1 och 2 enligt ovan, betaglukuronidas (=BGLU)agar: Pepton 10,0 g Natriumklorid 5,0 g Nitrofenylßglukuronid 0,1 Agar 15,0 Tryptofan 0,3 ph 7,2 ± 0,2 BBL UROTUBE SXT innehåller som tillägg till media 1 och 2 enligt ovan, antagonistfritt (PDM Medium) med trimetoprim/sulfametoxazol (SXT). PDM Medium 32,3 g Trimetoprim 0,003 g Sulfametoxazol 0,04 ph 7,3 ± 0,3 *Formuleringar kan vara justerade och/eller kompletterade efter behov för att uppfylla prestandakriterierna. FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRDER. Endast för professionellt bruk. Dipslides får inte användas om de uppvisar tecken på mikrobiell kontamination, missfärgning, uttorkning, sprickbildning eller andra tecken på försämring. Lakttag aseptiska tekniker och åtgärder mot smittspridning under hela proceduren. Använd skyddshandskar vid provtagning och hantering av prover och positiva dipslides innehållande smittsamma agens. Se skriften ALLMÄN BRUKSANVISNING för information om aseptiska förfaranden vid hantering, biorisker och bortskaffning av använd produkt. När dessa produkter används som ett transport från en läkares mottagning till ett diagnositicerande laboratorium, iakttag lokala bestämmelser för transport av smittsamma prover. FÖRVARING OCH HÅLLBARHET Förvara BBL UROTUBE mörkt vid 15 20 C i originalkartongen efter mottagandet fram till dess användning. Undvik nedfrysning, överhettning, uttorkning och temperaturväxlingar. Plattorna kan inokuleras fram till utgångsdatum (se etiketten på förpackningen) och inkuberas under rekommenderad inkubationsperiod. Oöppnade plattor från öppnade förpackningar kan användas fram till utgångsdatum vid förvaring inom ett rent område vid 15 20 C. När plattorna har öppnats måste de användas omedelbart. KVALITETSKONTROLL UTFÖRD AV ANVÄNDAREN Förbered suspensioner av fysiologisk koksalt och de teststammarna som omnämnts ovan så att de stämmer överens med McFarland 0,5 standard (ca 5 x 10 7 CFU/mL). Späd suspensionerna till ett CFU på 10 4 till 10 5 per ml. Sänk ned odlingsplattorna i denna lösning; tillåt att överflödet DA212115.03 3
av suspensionen rinner av och stoppa tillbaka plattorna i respektive rör. Inkubera vid 35 till 37 C under 18 24 h. Inspektera såsom beskrivits. De förväntade resultaten är omnämnda i tabellen: Produkt och Färg (ickeinokulerade) BBL UROTUBE Medium 1 gulaktig till gulgrön Escherichia coli ATCC 25922 +; gula gult Medium 2 rosa +; rosa rött till rosa Medium 3 färglöst till ljust bärnstensf ärgat BBL UROTUBE M Medium 1 gulaktig till gulgrön +; gula gult Medium 2 rosa +; rosa rött till rosa Medium 3 färglöst till ljust bärnstensf ärgat BBL UROTUBE E Medium 1 gulaktig till gulgrön +; gula gult Medium 2 rosa +; rosa rött till rosa Medium 3 ljust bärnstensfärgad Proteus mirabilis ATCC 12453 gulgrönt till grönt till beigefärgade orangebrunt Enterococcus faecalis ATCC 29212 +; gula gult Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 +; svagt blå till blågröna blågrönt +; svagt blå till blågröna kolonier med eller utan fluorescens +; kolonier gulaktiga till blågröna gulgrönt till grönt till beigefärgade orangebrunt +; gula gult +; svagt blå till blågröna blågrönt +; svagt blå till blågröna kolonier med eller utan fluorescens Candida albicans ATCC 10231 +; små, vitaktiga gulaktiga till blågrönt +; små, vitaktiga gulaktiga till blågrönt +; vitaktiga kolonier gulgrönt till grönt till beigefärgade orangebrunt +; gula gult +; bruna till svarta kolonier, brunt till svart +; svagt blå till blågröna blågrönt +; svagt blå till blågröna kolonier med eller utan fluorescens +; små, vitaktiga gulaktiga till blågrönt (+)/ DA212115.03 4
BBL UROTUBE E. coli Medium 1 gulaktig till gulgrön +; gula gult Medium 2 rosa +; rosa rött till rosa Medium 3 färglöst +; och till ljust kolonier gula bärnstens färgat Indoldroppstest a + TDA b BBL UROTUBE SXT Medium 1 gulaktig till gulgrön +; gula gult Medium 2 rosa +; rosa rött till rosa gulgrönt till grönt till beigefärgade orangebrunt kolonier DA212115.03 5 + gulgrönt till grönt till beigefärgade orangebrunt +; gula gult +; svagt blå till blågröna blågrönt +; svagt blå till blågröna kolonier med eller utan fluorescens +; och kolonier gula +; gula gult +; svagt blå till blågröna blågrönt +; svagt blå till blågröna kolonier med eller utan fluorescens +; små, vitaktiga gulaktiga till blågrönt (+) +; små, vitaktiga gulaktiga till blågrönt Medium 3 färglöst till + + ljust bärnstensf ärgat = ingen växt spår av växt; (+) = svag växt; + = bra till utmärkt växt a, b Utför dessa kompletterande tester med växt från 3. För reagenstillgänglighet, se Material som ej medföljer. FÖRFARANDE BBL UROTUBE, BBL UROTUBE M, BBL UROTUBE E, BBL UROTUBE E. coli, eller BBL UROTUBE SXT Mikrobiologiskt kontrollerade. Material som ej medföljer Extra odlingsmedier, reagenser och laboratorieutrustning efter anvisning. För indol och TDAtester på 3 av BBL UROTUBE E. coli: Indole Dropper Reagent (Indoldroppsreagens) (kat. nr 261185) eller Indole DMACA Dropper Reagent (Indol DMACA Droppreagens) (kat. nr 261187). Ferric Chloride Dropper Reagent (Järnkloriddroppsreagens) (kat. Nr 261190). För oxidastester på 3 av BBL UROTUBE: Oxidase Dropper Reagent (Oxidasdroppsreagens) (kat. nr 261181). Provtyper Dessa produkter är lämpliga för isoleringen och räkningen av bakterier och svamp från urin (mittströms eller kateterurin, eller urin tagen från suprapubisk blåspunktion). Se KLINISKA PRESTANDA OCH METODENS BEGRÄNSNINGAR. Provtagning och provberedning Iakttag aseptisk teknik vid provtagning. Använd standardprocedurer vid provtagning. 1,13 Urinen måste vara färsk eller ej äldre än 2 h. Alternativt kan urinproven förvaras i kylskåp (inte längre än 24 h) för att undvika överväxt av smittsamma agens eller kontaminanter innan inokulation. 13 Testförfarande
1. Inspektera agarytorna med röret stängt. Dipslides som uppvisar tecken på uttorkning, kontamination eller annan nedbrytning får inte användas. 2. Märk röret med patientnamn, provnummer och inokulationsdatum. 3. Skruva av skyddet och avlägsna plattan från plaströret utan att röra vid agarytorna (fig. 1). Insamla ej urinprov i BBL UROTUBEröret! 4. Doppa plattan snabbt tre gånger i urinen så att agarytorna är fullständigt nedsänkta (fig. 2). Lämna ej plattan i vätska längre än 10 sekunder eftersom detta kan leda till att beståndsdelar spolas bort från mediet och/eller att gelen lossnar från plasthållaren. Om det ej finns tillräckligt med urin för att doppa plattan, slå urinen försiktigt över agarytorna. 5. Låt överflöd av urin rinna av genom att hålla plattänden mot rörkantens insida (fig. 3). De sista dropparna kan tas bort från plattänden med ett mjukt papper (fig. 4). 6. Sätt plattan försiktigt tillbaka i plaströret och stäng ordentligt. 7. Inkubera röret under 18 till 24 h vid 35 till 37 C (fig. 5) eller skicka det till ett bakteriologisk laboratorium för vidare analys.) Obs! Inokulerade rör bör transporteras till laboratoriet inom 24 h. Undvik höga temperaturer och nedfrysning av plattorna under transport. Resultat och tolkning Efter incubation, avlägsna plattan från röret för tolkning. För kvantitativ beräkning av livsdugliga kolonier, jämför växten på CLEDagar med de tillhandahållna referensbilderna nedan; använd god belysning vid tolkningen (fig. 6). Sammanflytande växt, orsakad av livsdugliga kolonier 10 6 /ml kan vara svåra att igenkänna eftersom den kan täcka hela agarytan jämnt. Det kan vara av hjälp att röra vid ytan med en slynga eller pinne i detta fall. Växt på MacConkeyagar ( 2) talar för närvaro av gramnegativa stavar. Närvaro av växt på 3 (om tillgänglig) talar för närvaro av respektive grupper av mikroorganismer, beroende på mediet och typ av platta som används. En detaljerad beskrivning av växten på mediet tillhandahålls nedan. Försök inte att bestämma livsdugliga kolonier av organsimer som växer på sidan 2 och 3 eftersom selektiva agens på dessa media kan påverka växten! Efter subkultivering på lämplig plattmedia, kan växt från något media på plattorna användas för fortsatt biokemiska tester och resistensbestämningar. DA212115.03 6
CLEDagar ( 1 på alla BBL UROTUBEprodukter): CLEDagar tillåter växt av grampositiva och gramnegativa bakterier och jästsvampar. En gulaktig missfärgning av mediet talar för laktosfermentering, medan en gulgrönaktigt eller grönt talar för ickelaktosfermenterare. Följande riktlinjer och tolkningsguide (bilder) i slutet av denna dokumentation kan vara till användning vid tolkning av livsdugliga kolonier på CLEDagar: Livsdugliga kolonier Mindre än 10 000 bakterier per ml 10 000 till 100 000 bakterier per ml Mer än 100 000 bakterier per ml Klinisk tolkning Mittströmsurin: Kontamination. Låga räkningar kan vara signifikanta hos förbehandlade patienter eller hos patienter med kroniska infektioner. Urin erhållen via kateterisering eller blåspunktion: I dessa fall, kan mindre än 10 000 bakterier per ml tala för en infektion. Mittströmsurin: Tveksamt. Upprepad testning rekommenderas eftersom dessa bakterieräkningar uppträder vid kroniska urinvägsinfektioner men också kan finnas i mittströmsprov som kontaminanter. Dessa räkningar kan vara signifikanta hos förbehandlade patienter eller hos patienter med kroniska infektioner. Urin erhållen via kateterisering eller blåspunktion: I dessa fall, kan mindre än 10 000 bakterier per ml tala för en infektion. Dessa höga livsdugliga räkningar talar för en befintlig infektion i alla typer av urinprov (inkluderande mittströmsurin) I dessa fall, kan diagnosen bekräftas med befintligt högt leukocytantal i urinsedimentet. Hos kvinnor, kan ett högt antal bakteriekolonier uppträda som ett resultat av extern kontaminering (leukorré, vaginit); denna diagnos bekräftas genom ett befintligt ökat antal av skivepitelceller utan en ökning av leukocytantalet i urinsedimentet. MacConkeyagar ( 2 på alla BBL UROTUBEprodukter): På detta, kan alla Enterobacteriaceae och vissa ickefermenterare (t.ex., Pseudomonas aeruginosa) växa. En rosa till röd missfärgning talar för laktosfermentering, t.ex. med E. coli, medan färglösa, beiga eller bärnstensfärgade kolonier på ett orangebrunt talar för ickelaktosfermenterare. Tolkning av växt på det respektive tredje mediet ( 3) Som nämnts ovan, beror det tredje mediet på typ av platta som används: BBL UROTUBE: Växt på cetrimidagar bör tolkas enligt följande: Grön till gul, fluorescerande kolonier talar för närvaro av Pseudomonas aeruginosa. Diagnosen kan bekräftas med ett positivt oxidastest (se Material som ej medföljer). Ickefluorescerande växt på detta kan testas vidare för fullständig identifikation. BBL UROTUBE M: Växt på maltagar talar för närvaro av jästsvampar, t.ex. Candida albicans eller andra svampar. Observera att vissa jäststammar behöver 42 till 48 h för fullständig utveckling av växt på mediet. Sällan växer vissa bakterier, såsom laktobaciller, på detta mediet. Därför kan en gramfärgning på växt från detta mediet vara till hjälp. Vidare testning är nödvändig för fullständig identifikation. BBL UROTUBE E: Bruna till svarta kolonier på Enterococcusagar talar för närvaro av Enterococcus species, t.ex. Enterococcus faecalis. Växt av färglösa till gråa kolonier kan tala för närvaro av streptococci, men bekräftande analys är nödvändig. BBL UROTUBE E. coli: Om BGLUmediet blir gult, kan Escherichia coli eller andra betaglukuronidaspositiva bakterier finnas. Utför en indoltest från gul växt på detta mediet. En positive indolreaktion talar för närvaro av E. Coli. Om det finns en färglös till beige växt på detta, utför en TDAtest. En positiv TDAtest talar för närvaro av organismer från ProteusMorganellaProvidenciagruppen. För tillgänglighet avseende indol Och TDAreagens, se Material som ej medföljer. För utförandet av dessa kompletterande tester, följ instruktionerna som medföljer reagensen. BBL UROTUBE SXT: Detta används för att bestämma känslighet (eller resistens) av isolerade bakterier mot trimetoprim/sulfametoxazol (SXT). Ingen växt på detta mediet talar för känslighet, stark växt talar för resistens mot SXT. En reducerad växt på detta mediet vid jämförelse med CLEDagar ( 1) kan tala för närvaron av en blandad kultur innehållande åtminstone en SXTresistent organism. DA212115.03 7
Efter användning och före kassering, måste alla använda rör och annat kontaminerat material autoklaveras eller förbrännas. För detaljer, se dokumentet ALLMÄNNA INSTRUKTIONER FÖR ANVÄNDNING. KLINISKA PRESTANDA OCH METODENS BEGRÄNSNINGAR BBL UROTUBE, BBL UROTUBE M, BBL UROTUBE E, BBL UROTUBE E. coli och BBL UROTUBE SXT är lämpliga för diagnosticering av vanliga urinvägsinfektioner på urinprov. Denna dipslidemetod med CLED och MacConkeyagar har visat sig vara ett effektivt och enkelt sätt att räkna vanliga bakterier (t.ex. Enterobacteriaceae, andra gramnegativa stavar (såsom Pseudomonas), enterokocker, stafylokocker och andra närvarande i urin. 18 Användning av ett tredje (om tillgängligt), och som tillägg till dessa standardmedia, är till hjälp där speciella grupper av organismer misstänks vara närvarande som infektiösa agens. 912 Det är obligatoriskt att de urinprov som används med dessa eller andra system och media har tagits aseptiskt och att de är färska (inte äldre än 2 h) eller att de har förvarats i kylskåp (inte längre än 24 h). 1,13 Olämplig insamling av urin, förvaring av proverna en längre tid än vad som angetts ovan, långa transporttider innan analys av inokulerade plattor samt exponering av inokulerade plattor för extrema temperaturer, kan resultera i felaktig diagnos och även omöjliggöra diagnosticeringen. 1,13 Den mest exakta diagnosen av urinvägsinfektioner erhålls om urin tas via blåspunktion eftersom mikroorganismer närvarande i normal uretraflora kan kontaminera urin erhållen med andra provtagningstekniker. Kräsna bakterier såsom mykoplasmas, klamydia, Neissseria gonorrhoeae, mykobacterier eller Gardnerella vaginalis kommer ej att växa på mediet från dessa dipslides. Om dessa organismer misstänks vara involverade i en urinvägsinfektion, måste lämpliga tekniker applicerar för deras detektion. 1,13 Vissa stammer av streptokocker, speciellt Streptococcus agalactiae (grupp B) kommer inte att växa tillräckligt på 1 (CLEDagar). Om de misstänks vara involverade i en urinvägsinfektion, rekommenderas en kultivering av urin på en blodagarplatta (t.ex. BD Columbia Agar with 5% Sheep Blood (BD Columbiaagar med 5 % fårblod)). Dipslidemedia får inte användas för att utföra resistensbestämningar med diskdiffusionsmetoden. Fastän vissa diagnostiska tester kan utföras direkt på mediet,är biokemisk och, om så angetts, immunologisk testning med rena kulturer nödvändig för fullständig identifikation. Undantag är E. coli och ProteusMorganellaProvidenciagrupperna, vilka kan identifieras på 3 (BGLUagar) i BBL UROTUBE E. coli om de rekommenderade, kompletterande testerna (indol, TDA) har utförts. Också kan Pseudomonas aeruginosa direkt identifieras på 3 (cetrimidagar) i BBL UROTUBE om grönaktiga fluorescerande kolonier återfinns vilka producerar en positiv oxidasreaktion. För lämplig behandling, kan resistensbestämningar av isolerade organismer bli nödvändiga. Växt av någon bakterie på 3 (PDM med trimetoprim/ sulfametoxazol) i BBL UROTUBE SXT måste tolkas som att organismerna är resistenta till detta antimikrobiella medel (SXT). REFERENSER 1. Gallien, R.1988. Mikrobiologische Diagnostik in der ärztlichen Praxis, G. Fischer Verlag, Stuttgart. 2. Ellner, P.D., and M.S. Papachristos. 1975. Detection of bacteriuria by dipslide. Am. J. Clin. Pathol. 63: 516521. 3. Guttmann, D. 1967. Dipslide: an aid to quantitative urine culture in general practice. Br. Med. J. 3: 343345. DA212115.03 8
4. McAllister, T.A., et al. 1973. Assessment of plane dipslide quantitation of bacteriuria. Nephron 11: 111122. 5. Van Dorsten, J.P., and E.R. Bannister. 1986. Office diagnosis of asymptomatic bacteriuria in pregnant women. Am. J. Obstet. Gynecol. 155: 777780. 6. Sandys, G.H. 1960. A new method of preventing swarming of Proteus sp. with a description of a new suitable for use in routine laboratory practice. J. Med. Lab. Technol. 17:224233. 7. Mackey, J.P., and G.H. Sandys. 1965. Laboratory diagnosis of infection of the urinary tract in general practice by means of a dipinoculum transport. Br. Med. J. 2:12861288. 8. Farmer III, J.J. 2003. Enterobacteriaceae: introduction and identification. In: Murray, P.R., E.J. Baron, J.H. Jorgensen, M.A. Pfaller, and R.H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 9. Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R.H. Yolken (ed.). 2003. Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 10. King, E.O., M.K. Ward, and E.E. Raney. 1954. Two simple media for the demonstration of pyocyanin and fluorescein. J. Lab. Clin. Med. 44: 301. 11. MacFaddin, J.F. 1985. Media for the isolation cultivation maintenance of medical bacteria. Volume 1. Williams and Wilkins, Baltimore, London. 12. Chapin, K.C., and T.L. Lauderdale. 2003. Reagents, stains, an media: bacteriology. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 13. Thomson, R.B. jr., and J.M. Miller. 2003. Specimen collection, transport, and processing: bacteriology. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. TILLGÄNGLIGHET Kat. Antal Produktnamn Förpackningsstorlek 212115 BBL UROTUBE E. coli 10 plattor 272805 BBL UROTUBE E 10 plattor 273007 BBL UROTUBE 10 plattor 273357 BBL UROTUBE 50 plattor 273008 BBL UROTUBE SXT 10 plattor 273171 BBL UROTUBE M 10 plattor YTTERLIGARE INFORMATION Kontakta närmaste BDrepresentant för ytterligare information. BD Diagnostic Systems Tullastrasse 8 12 D69126 Heidelberg/Germany Phone: +4962 2130 50, Fax: +4962 2130 52 16 Reception_Germany@europe.bd.com BD Diagnostic Systems Europe Becton Dickinson France SA 11 rue Aristide Bergès 38800 Le Pont de Claix/France Tel: +33476 68 3636 Fax: +33476 68 3292 http://www.bd.com BD, BD logo and BBL are trademarks of Becton, Dickinson and Company. Urotube is a trademark of Becton Dickinson GmbH. ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection 2003 Becton, Dickinson and Company TOLKNINGSGUIDE (endast CLEDagar, 1!) DA212115.03 9
1 000 10 000 (=10 3 )/ml (=10 4 )/ml Kontamination 1 000 10.000 (=10 3 10 4 ) CFU/mL Tveksamt >10 000 <100.000 (=10 4 10 5 ) CFU/mL 100 000 1 000 000 (=10 5 )/ml (=10 6 )/ml Infektion 100.000 1.000.000 (=10 5 10 6 ) CFU/mL DA212115.03 10