DuoFLEX Cocktail Anti-AMACR Anti-Cytokeratin HMW Anti-Cytokeratin 5/6 Ready-to-Use (Dako Autostainer/Autostainer Plus) Kod IK004 Avsedd användning Synonymer för antigen Sammanfattning och förklaring Medföljande reagens För in vitro-diagnostik. DuoFLEX Cocktail Monoclonal Rabbit Anti-Human AMACR, klon 13H4, Monoclonal Mouse Anti-Human Cytokeratin, High Molecular Weight, klon 34ßE12, och Monoclonal Mouse Anti-Human Cytokeratin 5/6, klon D5/16 B4 (Dako Autostainer/Autostainer Plus), är avsedd för användning i immunhistokemi tillsammans med Dako Autostainer/Autostainer Plus-instrument. Denna blandning av antikroppar används som ett ytterligare diagnostiskt test för bekräftelse av prostatakarcinom, prostataintraepitelneoplasi och dess benigna härmlesioner i formalinfixerade, paraffininbäddade prostatavävnader (1 5) efter den primära diagnosen har ställts genom en morfologisk undersökning av H&E-färgade objektglas. Den kliniska tolkningen av all färgning eller frånvaro av färgning måste göras genom morfologiska studier, med användning av lämpliga kontroller, och måste utvärderas av en kvalificerad patolog inom ramen för patientens anamnes och andra diagnostiska tester. AMACR: alfametylacylkoenzym A racemas, α-metylacyl-coa, P504S Cytokeratin HMW: keratin 903 AMACR: Monoclonal rabbit anti-amacr, klon 13H4, känner igen ett 382-aminosyraprotein, vilket identifierades av cdna-bibliotekssubtraktion i samband med mikroanalysscreening med hög kapacitet av prostatakarcinom (6). Alfametylacyl-CoA-racemas (AMACR) är ett enzym som är delaktigt i gallsyrebiosyntesen och β-oxidationen av grenade fettsyror (7). AMACR uttrycks i celler av premalign prostatisk intraepitelneoplasi av hög kvalitet (HGPIN) och prostataadenokarcinom, men förekommer i låga eller oupptäckbara nivåer i glandulära epitelceller av normal prostata och godartad prostatahyperplasi (6,8 13). CK HMW: Cytokeratiner är intermediära filamentcytoskelettproteiner som är väsentliga för utveckling och differentiering av epitelceller. Cirka 20 olika cytokeratiner har identifierats och klassificerats och numreras enligt molekylvikt och isoelektriska punkter (14). I allmänhet fördelas de flesta cytokeratiner med låg molekylvikt (40 54 kda) i icke-skivepitel, Molls katalognummer 7 8 och/eller 17 20 (15). Cytokeratiner med hög molekylvikt (48 67 kda) finns i skivepitel, Molls katalognummer 1 6 och/eller 9 16 (15). Cytokeratin 5/6: Monoclonal Mouse Anti-Human Cytokeratin 5/6, Clone D5/16 B4, är ett basiskt cytokeratin med hög molekylvikt på 58 kda och uttrycks i basala, intermediära och ytliga cellager i flerskiktat epitel samt i övergångsepitel, komplext epitel, mesotelceller och mesoteliom. CK5 har inte, med få undantag, påvisats i enkelt epitel och icke-epitelceller. CK 6 har också hög molekylvikt och är basisk med en molekylvikt på 58 kda, uttrycks av prolifererande skivepitel, och som ofta paras ihop med CK16 (48 kda) (16,17). Se Dakos Allmänna instruktioner för immunhistokemisk färgning eller detektionssystemets instruktioner om IHCprocedurer för: (1) Procedurprincip, (2) Material som behövs men inte medföljer, (3) Förvaring, (4) Provberedning, (5) Färgningsprocedur, (6) Kvalitetskontroll, (7) Felsökning, (8) Tolkning av färgningen, (9) Allmänna begränsningar. Bruksfärdig monoklonal musantikropp levererad i flytande form i en buffert innehållande stabiliseringsprotein och 0,015 mol/l NaN 3. Monoclonal Rabbit Anti-Human AMACR, klon 13H4, isotyp: IgG1, kappa Monoclonal Mouse Anti-Human Cytokeratin, hög molekylvikt, klon 34ßE12, isotyp: IgG1, kappa Monoclonal Mouse Anti-Human Cytokeratin 5/6, klon D5/16 B4, isotyp: IgG1, kappa Immunogen AMACR: Rekombinant P504S av full längd (6) CK HMW: Solubiliserat immunogenkeratin extraherat från humant stratum corneum Cytokeratin 5/6: Isolerat cytokeratin 5 Specificitet Specificiteten hos monoklonal kanin-anti-amacr utvärderades med immuncytokemi och Western blotting. Anti- AMACR-positiva, bundna formalinfixerade HEK293-celler, vilka överuttryckte AMACR, men var inreaktiva med celler som transfekterats med en tom plasmid. Vid Western blotting av lysat från primära prostatakarcinomprover identifierade monoklonal anti-amacr från kanin ett 54 kda-protein, vilket stämmer med den förväntade molekylvikten för AMACR (9). Anti-CK HMW, 34βE12, har visat sig reagera med proteiner på 66, 57, 51 och 49 kda (1) motsvarande cytokeratiner 1, 5, 10 och 14 i Molls katalog (14,15,18). Shah et al. (19) föreslog att anti-ck HMW, 34ßE12, är kliniskt användbart som ett hjälpmedel vid differentieringen av Pagets sjukdom och Bowens sjukdom (karcinom in situ) från Pagets ytligt spridande melanom. Anti-CK HMW, 34βE12-positivitet rapporterades i Pagets sjukdom i bröst (5/5) och Bowens sjukdom (10/10), men 25 % (1/4) av Pagets sjukdom i vulva och 0/6 av Pagets ytligt spridande melanom färgades (19). (119842-001) 307773SE_001 s. 1/5
När det gäller Anti-Cytokeratin 5/6, klon D5/16 B4, märker antikroppen cytokeratin 5 i Western blotting av cytoskelettpreparat av epidermis och icke-keratiniserande epitel. Den märker också cytokeratin 6 och märker cytokeratin 4 svagt. Ingen korsreaktion med cytokeratiner 1, 7, 8, 10, 13/14, 18 och 19 har upptäckts. Försiktighetsåtgärder 1. För yrkesmässigt bruk. 2. Denna produkt innehåller natriumazid (NaN 3), en kemikalie som är mycket giftig i ren form. I produktkoncentrationer kan natriumazid, trots att det inte klassificeras som farligt, reagera med bly- och kopparrör och bilda högexplosiva metallazider. Skölj med stora mängder vatten vid kassering, så att inte metallazider ansamlas i avloppet. 3. I likhet med alla produkter av biologiskt ursprung krävs en korrekt hantering. 4. Använd lämplig personlig skyddsutrustning för att undvika kontakt med ögon och hud. 5. Oanvänd lösning måste kasseras i enlighet med lokala och statliga föreskrifter. Förvaring Provberedning inklusive material som behövs men inte medföljer Färgningsprocedur inklusive material som behövs men inte medföljer Tolkning av färgningen Förvaras vid 2 8 C. Får inte användas efter det ut gångsdatum som anges på flaskan. Användaren måste verifiera alla förvaringsförhållanden som avviker från de som specificerats. Det finns inga tydliga tecken som tyder på instabilitet hos denna produkt. Därför bör positiva och negativa kontroller analyseras samtidigt med patientproverna. Kontakta Dako Teknisk Support om du observerar oväntad färgning som inte kan förklaras med variationer i laboratorieprocedurerna och om du misstänker att något problem med antikroppen förekommer. Antikroppblandningen kan användas för märkning av formalinfixerade paraffininbäddade vävnadssnitt. Vävnadsprover ska snittas i cirka 4 µm tjocka snitt. Förbehandling med värmeinducerad epitopåtervinning (HIER) krävs. Optimala resultat erhålls genom att förbehandla vävnader med EnVision FLEX Target Retrieval Solution, High ph (50x) (kod K8004). Avparaffinerade snitt: Förbehandling av avparaffinerade formalinfixerade paraffininbäddade vävnadssnitt med Dako PT Link (kod PT100/PT101) rekommenderas. Ytterligare information finns i användarhandboken för PT Link. Följ förbehandlingsproceduren som beskrivs i bipacksedeln för EnVision FLEX Target Retrieval Solution, High ph (50x) (kod K8004). Följande parametrar ska användas för PT Link: förvärmningstemperatur: 65 C, temperatur och tid för epitopåtervinning: 97 C i 2 0 (±1) minuter, nedkylning till 65 C. Ta bort Auto stainerobjektglasstället med objektglas från PT Link-tanken och doppa omedelbart ned objektglasen i ett kärl/en tank (t.ex. PT Link-sköljningsstation, kod PT109) innehållande spädd rumstempererad EnVision FLEX Wash Buffer (20x), (kod K8007). Lämna objektglasen i Wash Buffer i 1 5 minuter. Paraffininbäddade snitt: Användning av vattenhaltigt monteringsmedium (Dako Faramount, kod S3025) är den föredragna metoden för färgning. Som alternativ provberedning kan både avparaffinering och epitopåtervinning utföras i PT Link med en modifierad procedur. Anvisningar finns i användarhandboken för PT Link. När färgningsproceduren har slutförts måste snitten lufttorkas vid 60 C, nedsänkas i xylen och monteras med permanent monteringsmedium. Alkohol ska undvikas vid permanent montering eftersom det kan försvaga reaktiviteten hos den röda kromogenen. Låt inte vävnadssnitten torka ut under förbehandlingen eller under den följande immunhistokemiska färgningsproceduren före monteringen. För bättre vidhäftning av vävnadssnitten till objektglasen rekommenderas användning av Dako FLEX IHC Microscope Slides (kod K8020). Det rekommenderade visualiseringssystemet är EnVision DuoFLEX Doublestain System, (Dako Autostainer/Autostainer Plus) (kod K6807). Färgningsmomenten och inkuberingstiderna är förprogrammerade i programvaran för Dako Autostainer/Autostainer Plus-instrument, med användning av följande protokoll: Protokollmall: DuoFLEX2 (200 µl dispenseringsvolym) eller DuoFLEX3 (300 µl dispenseringsvolym) Autoprogram: PINct (utan kontrastfärgning) eller PINcth (med kontrastfärgning) Alla inkubationsmoment ska utföras vid rumstemperatur. Ytterligare information finns i användarhandboken för respektive instrument. Kontakta Dako Teknisk Service om protokollen inte finns tillgängliga på det Dako Autostainer-instrument som används. Optimala förhållanden kan variera beroende på prov- och beredningsmetod och bör bestämmas av varje enskilt laboratorium. Om den utvärderande patologen önskar en annan färgningsintensitet kan en applikationsspecialist/teknisk servicespecialist från Dako kontaktas för information om omprogrammering av protokollet. Bekräfta att prestandan för det justerade protokollet fortfarande är giltig genom att kontrollera att färgningsmönstret är identiskt med det färgningsmönster som beskrivs i "Prestandaegenskaper". Kontrastfärgning i hematoxylin med EnVision FLEX Hematoxylin, (Dako Autostainer/Autostainer Plus) (kod K8018). När färgningsproceduren är slutförd måste snitten lufttorkas, nedsänkas i xylen och monteras med permanent monteringsmedium. Alkohol ska undvikas vid permanent montering eftersom det kan försvaga reaktiviteten hos den röda kromogenen. Positiva och negativa kontroller bör analyseras samtidigt med patientproverna med samma protokoll. Den positiva kontrollvävnaden bör inkludera prostata (normal eller hyperplasi) och cellerna/strukturerna bör visa reaktionsmönster som beskrivs för denna vävnad i "Prestandaegenskaper" i alla positiva prover. Karcinomceller som märkts av Anti-AMACR visar röd granulär cytoplasmisk färgning. Celler som märkts av Anti-Cytokeratin med hög molekylvikt visar brun cytoplasmisk färgning. Celler som märkts av Anti-Cytokeratin 5/6 visar brun cytoplasmisk färgning. (119842-001) 307773SE_001 s. 2/5
Prestandaegenskaper Normala vävnader: Anti-AMACR: Vävnadstyp Positivt färgade vävnadselement (antal testade) (8,9,12) Njure (12) 8 12/12 tubulära epitelceller Lever (15) 8 15/15 hepatocyter Lunga (12) 8 12/12 bronkepitelceller Gallblåsa (10) 8 10/10 epitelceller Tjocktarm (20) 9 20/20 ytepitel i tjocktarm, fokala och luminala Hyperplastisk tjocktarm (28) 12 1/28 Prostata, benign (194) 9 23/194 Binjure (12) 8 0/12 Urinblåsa (7) 8 0/7 Hjärna (5) 8 0/5 Bröst (12) 8 0/12 Endometrium (12) 8 0/12 Hjärta (5) 8 0/5 Lymfkörtel (7) 8 0/7 Bukspottkörtel (15) 8 0/15 Prostata (19) 8 0/19 Äggstock (12) 8 0/12 Tunntarm (18) 8 0/18 Spottkörtel (7) 8 0/7 Hud (7) 8 0/7 Mjälte (12) 8 0/12 Magsäck (13) 8 0/13 Sköldkörtel (5) 8 0/5 Testiklar (5) 8 0/5 Anti-CK HMW, 34βE12 är reaktivt med normala epitelvävnader som innefattar: skivepitel och svettkörtelgångar i hud (18), alla epitellager inklusive luminal- och basalepitel och körtelgångsceller i bröst (20), vissa pneumocyter, mesotel och bronkepitel i lunga, samlande körtelgångsepitel i njure och körtelgångsceller i bukspottkörtel, gallgångar i lever, mesotel och en del av epitel (celler med mer basal placering) i mag/tarmkanalen (18). Hepatocyter, acinära celler i bukspottkörtel, proximala njurtubuli och normala icke-epitelvävnader märks inte av anti-ck HMW, 34βE12 (18). Anti-CK HMW, 34βE12 färgade mjölkkörtel i bröst, skivepitel i livmoderhals, prostatakörtel, utsöndrande körtelgångar i lingual spottkörtel, skivepitel i hud, retikelceller och Hassallska kroppar i tymus och skivepitel i tonsill. Ingen färgning påvisades på binjure, benmärg, cerebellum eller cerebrum, tjocktarm, hjärta, njure, lever, lunga, mesotelceller, äggstock, bukspottkörtel, bisköldkörtel, pericardium, perifer nerv, hypofys, skelettmuskel, tunntarm, mjälte, magsäck, testiklar, sköldkörtel eller livmoder. Antikroppen Cytokeratin 5/6 märker flerskiktat skivepitel. I komplext epitel uttrycker basala celler i de flesta fall CK5. Enkelt epitel och icke-epitelceller märks i allmänhet inte av antikroppen. Onormala vävnader: Anti-AMACR är immunreaktiv med huvuddelen av testade prostatakarcinom (8-13). Vävnadstyp (antal testade) Positivt färgade tumörer Adenokarcinom i prostata (18) 8 17/18 Hepatocellulärt karcinom (21) 8 17/21 Njurkarcinom (24) 8 18/24 Urinblåsa, övergångscellkarcinom (29) 8 9/29 Adenokarcinom i magsäck (15) 8 4/15 Bröstadenokarcinom (61) 8 9/61 Kolangiokarcinom i gallgång (14) 8 2/14 Lungadenokarcinom (23) 8 3/23 Neuroendokrint karcinom; GI, lunga och lever (9) 8 1/9 Epitelsarkom i mjukvävnad (12) 8 1/12 Adenokarcinom i äggstock (27) 8 2/27 Adenokarcinom i bukspottkörtel (13) 8 1/13 Kortikal tumör i binjure (20) 8 1/20 Spottkörteltumörer (28) 8 1/28 Tjocktarmskarcinom (176) 12 122/176 Väldifferentierade (58) 12 45/58 Måttligt differentierade (88) 12 66/88 Dåligt differentierade (30) 12 11/30 Könscellstumörer (14) 8 0/14 Karcinoida tumörer; lunga och GI (10) 8 0/10 Småcelligt karcinom; lunga och hud (15) 8 0/15 Pleuramesoteliom (16) 8 0/16 (119842-001) 307773SE_001 s. 3/5
Odifferentierat karcinom (27) 8 0/27 Melanom (20) 8 0/20 Skivepitelcellskarcinom; hud och mukosa (25) 8 0/25 Basalcellskarcinom i huden (20) 8 0/20 Synovialt sarkom (6) 8 0/6 Sköldkörteltumörer (54) 8 0/54 Tymom (8) 8 0/8 Endometriekarcinom (10) 8 0/10 Anti-CK HMW, 34βE12-positivitet har rapporterats för skivepitelcells- och körtelgångs- eller övergångscellskarcinom inklusive: skivepitelcellskarcinom i hud, lunga och nasofarynx, körtelgångscellskarcinom i bröst, bukspottkörtel, gallgång och spottkörtel samt övergångscellskarcinom i urinblåsa och nasofarynx och tymom (21,22). Anti-CK HMW, 34βE12 färgade epitelmesoteliom, men reagerade inte med sarkomatoida eller desmoplastiska mesoteliom (23). Anti-CK HMW, 34βE12-negativa epiteltumörer är antingen adenom av "acinär" typ (t.ex. hypofys) eller adenokarcinom av enskiktat epitel (t.ex. endometriekarcinom, njur- och hepatocellulära karcinom) eller neuroendokrina tumörer (18,22,24). Därför kan anti-ck HMW, 34βE12 användas som ett hjälpmedel vid underklassificeringen av karcinom (22). Det har också föreslagits att anti-ck HMW, 34βE12 är användbar vid differentiell diagnos av små acinära lesioner i prostatakörteln (11). Dess diagnostiska värde kan ligga i identifieringen av basalceller. O Malley et al. (25) observerade positiv färgning av basalceller i 47 exempel av benigna prostatalesioner, inklusive atypisk adenomatös hyperplasi (26), basal cellhyperplasi (21), atrofi (20), post-sklerotisk hyperplasi (19) och fibroepitelnodulus (14), medan 21 fall av små acinära adenokarcinom inte visade någon reaktivitet. Man framhöll att förlust av basala cellager inte är enhetlig i alla prostatiska adenokarcinom. Basalceller förloras endast i små acinära adenokarcinom. Det rekommenderades att fullständig frånvaro av färgning av prostatalesioner med anti-ck HMW, 34βE12 bör anses starkt tyda på, men inte diagnostisera, malignitet. Antikroppen Cytokeratin 5/6 märkte 56/61 (92 %) av pleuralt epitelmesoteliom, medan 9/63 (14 %) av metastatiska adenokarcinom märktes. Reaktiva mesotel märktes också (27). I en annan studie (28) märktes alla 23 mesoteliom med epitel- eller acinär differentiering starkt av antikroppen, medan märkningen av sarkomatoida områden av tumörer med en blandad morfologi var svag eller frånvarande. Ett fall av sarkomatoid mesoteliom gav en tvetydig reaktion, medan mesoteliom av desmoplastisk eller sarkomatoid typ var negativa. Av 27 sekundära adenokarcinom i lungsäck var 22 negativa, 4 svaga eller tvetydiga och 1 fokalt positiv. Höga nivåer av cytokeratin 5/6-positivitet i duktal hyperplasi av vanlig typ, och negativ färgning av de flesta fall av atypisk duktal hyperplasi och duktalt karcinom in situ, har uppvisats med antikroppen (29). Referenser 1. Du J, Pei F, Zheng J, Wang K: [P504S and 34betaE12 dual-staining of immunohistochemistry in the diagnosis of prostate cancer], Zhonghua Bing Li Xue Za Zhi 2005, 34:311-312 2. Varma M, Morgan M, Amin MB, Wozniak S, Jasani B: High molecular weight cytokeratin antibody (clone 34betaE12): a sensitive marker for differentiation of high-grade invasive urothelial carcinoma from prostate cancer, Histopathology 2003, 42:167-172 3. Martens MB, Keller JH: Routine immunohistochemical staining for high-molecular weight cytokeratin 34-beta and alpha-methylacyl CoA racemase (P504S) in postirradiation prostate biopsies, Mod Pathol 2006, 19:287-290 4. Abrahams NA, Ormsby AH, Brainard J: Validation of cytokeratin 5/6 as an effective substitute for keratin 903 in the differentiation of benign from malignant glands in prostate needle biopsies, Histopathology 2002, 41:35-41 5. Abrahams NA, Bostwick DG, Ormsby AH, Qian J, Brainard JA: Distinguishing atrophy and high-grade prostatic intraepithelial neoplasia from prostatic adenocarcinoma with and without previous adjuvant hormone therapy with the aid of cytokeratin 5/6, Am J Clin Pathol 2003, 120:368-376 6. Xu J, Stolk JA, Zhang X, Silva SJ, Houghton RL, Matsumura M, Vedvick TS, Leslie KB, Badaro R, Reed SG. Identification of differentially expressed genes in human prostate cancer using subtraction and microarray. Canc Res. 2000; 60:1677 7. Ferdinandusse S, Denis S, Ijst L, Dacremont G, Waterham HR, Wanders JA. Subcellular localization and physiological role of α-methylacyl-coa racemase. Journal of Lipid Research. 2000; 41:1890 8. Jiang Z, Fanger GR, Woda BA, Banner BF, Algate P, Dresser K, Xu J, Chu PG. Expression of α-methylacyl- CoA racemase (P504S) in various malignant neoplasms and normal tissues: A study of 761 cases. Human Pathology. 2003; 34(8):792 9. Jiang Z, Woda BA, Rock KL, Xu Y, Savas L, Khan A, Pihan G, Cai F, Babcook JS, Rathanaswami P, Reed SG, Xu J, Fanger GR. P504S: a new molecular marker for the detection of prostate carcinoma. Am J Surg Pathol. 2001; 25(11):1397 10. Jiang Z, Wu C, Woda BA, Dresser K, Xu J, Fanger GR, Yang XJ. P504S/α-methylacyl-CoA racemase: a useful marker for diagnosis of small foci of prostatic carcinoma on needle biopsy. Am J Surg Path. 2002; 26(9):1169 11. Yang XJ, Wu C, Woda BA, Dresser K, Tretiakova M, Fanger GR, Jiang Z. Expression of α-methylacyl-coa racemase (P504S) in atypical adenomatous hyperplasia of the prostate. Am J Surg Path. 2002; 26(7):921 12. Jiang Z, Fanger GR, Banner BF, Woda BA, Algate P, Dresser K, Xu J, Reed SG, Rock KL, Chu PG. A dietary enzyme: alpha-methylacyl-coa racemase/p504s is overexpressed in colon carcinoma. Cancer Detect Prev. 2003;27(6):422 (119842-001) 307773SE_001 s. 4/5
13. Beach R, Gown AM, de Peralta-Venturina MN, Folpe AL, Yaziji H, Salles PG, Grignon DJ, Fanger GR, Amin MG. P504S immunohistochemical detection in 405 prostatic specimens including 376 18-gauge needle biopsies. Am J Surg Pathol. 2002; 26(12):1588 14. Moll R, Franke WW, Schiller DL. The catalog of human cytokeratins: Patterns of expression in normal epithelia, tumors and cultured cells. Cell 1982; 31:11 15. Miettinen M. Keratin immunohistochemistry: update of applications and pitfalls. Pathol Ann 1993; 28:113 16. Moll R, Franke WW, Schiller DL. The catalog of human cytokeratins: Patterns of expression in normal epithelia, tumors and cultured cells. Cell 1982;31:11-24 17. Moll R, Löwe A, Laufer J, Franke WW. Cytokeratin 20 in human carcinomas. A new histodiagnostic marker detected by monoclonal antibodies. Am J Pathol 1992;140:427-47 18. Gown AM, Vogel AM. Monoclonal antibodies to human intermediate filament proteins II. Distribution of filaments in normal human tissues. Amer J Pathol 1984; 114:309 19. Shah KD, Tabibzadeh SS, Gerger MA. Immunohistochemical distinction of Paget s Disease from Bowen s Disease and superficial spreading melanoma with the use of monoclonal cytokeratin antibodies. Amer J Clin Pathol 1987; 88:689 20. Varma M, Amin MB, Linden MD, Zarbo RJ. Discriminant staining pattern of small glandular and preneoplastic lesions of the prostate using high molecular weight cytokeratin antibody A study of 301 consecutive needle biopsies. Mod Pathol 1997; 10:93A 21. Bacchi CA, Zarbo RJ, Jiang JJ, Gown AM. Do glioma cells express cytokeratin? Appl Immunohistochem 1995; 3:45 22. Dairkee SH, Puett L, Hackett AJ. Expression of basal and luminal epithelium-specific keratins in normal, benign and malignant breast tissue. J Nat Can Inst 1988; 80:691 23. Bolen JW, Hammar SP, McNutt MA. Reactive and neoplastic serosal tissue: a light-microscopic, ultrastructural, and immunocytochemical study. Amer J Surg Pathol 1986; 10:34 24. Hurlimann J, Gardiol D. Immunohistochemistry in the differential diagnosis of liver carcinomas. Amer J Surg Pathol 1991; 15:280 25. O Malley FP, Grignon DJ, Shum DT. Usefulness of immunoperoxidase staining with high-molecular-weight cytokeratin in the differential diagnosis of small-acinar lesions of the prostate gland. Virch Arch Pathol Anat 1990; 417:191 26. Brown DC, Theaker JM, Banks PM, Gatter KC, Mason DY. Cytokeratin expression in smooth muscle and smooth muscle tumors. Histopathol 1987; 11:477 Utgåva 03/09 (119842-001) 307773SE_001 s. 5/5