Blodstatus, B- (Microsemi CRP)

Transkript

1 sida 1 (17) Koder Rapportnamn, kortnamn, instrumentkod Rapportnamn i Cosmic och FlexLab Kortnamn i FlexLab Instrumentkod B-Hemoglobin Hb HGB B-EVF EVF HCT B-Erytrocyter ERC RBC (B)Erc-MCV MCV MCV (B)Erc-MCH MCH MCH (B)Erc-MCHC MCHC MCHC B-Leukocyter LKC WBC B-Trombocyter TRC PLT B-Neutrofila granulocyter Neut GRA B-Lymfocyter Lymfocyter LYM B-Monocyter Monocyter MON B-CRP (för PV) CRP-B (för PV) CRP P-CRP (för KKF) CRP (för KKF) CRP Synonym Hematokrit = EVF Diff = samlingsnamn för LKC, neutrofila granulocyter, lymfocyter, monocyter, eosinofila granulocyter och basofila granulocyter. Beställningskod Beställningskoder i Cosmic: Blodstatus B-Neutrofila Samlingskod för LKC, ERC, Hb, EVF, TRC, MCV, MCH, MCHC Samlingskod för LKC, Neut B-Celler klass (PV) Samlingskod för LKC, Neut, Monocyter, Lymfocyter B-CRP (för PV) P-CRP (för KKF) Beställningskoder i FlexLab: -BBST -BNEUT Samlingskod för LKC, ERC, Hb, EVF, TRC, MCV, MCH, MCHC Samlingskod för LKC, Neut

2 sida 2 (17) -BCELLPV CRP-B, BCRP eller CRPB (för PV) CRP (för KKF) Samlingskod för LKC, Neut, Monocyter, Lymfocyter NPU-kod LKC NEUT ERC Hb EVF MCV MCH MCHC TRC CRP NPU02593 NPU02902 NPU01960 SWE05074 NPU01961 NPU01944 SWE05129 SWE05128 NPU03568 SWE05027 CRP-B finns ej, lokalt används XCRPB Lymfocyter NPU02636 Monocyter Provmaterial NPU02840 Patientförberedelser Patienten bör ha vilat 15 minuter innan provtagningen. Typ av provmaterial Venblod, kapillärblod för blodstatus och CRP. Serum, plasma (EDTA och heparin) för CRP. Typ av provrör och tillsatser Vakuumrör innehållande EDTA-K 2. Kapillärrör innehållande EDTA-K 2. EDTA-K 3 accepteras för 250 µl kapillärrör. Li-heparinrör, med eller utan gel. Serumrör, med eller utan gel. Provvolym Instrumentet aspirerar 10 µl för blodstatus och 18 µl för CRP och blodstatus. För endast CRP aspireras 18 µl. Dödvolymen är 50 µl. Minsta provtagningsvolym är dock enligt nedan: För vakuumrör är minsta acceptabla mängd 20% fyllnadsgrad, dock minst 1 cm. Kapillären i kapillärrören från Triolab rymmer 100 µl, röret rekommenderas att fyllas till 250 µl om provet skulle behöva skickas till KKF.

3 sida 3 (17) Utförande Felkällor För övriga tillverkares kapillärrör ska fyllnadsgraden vara % av angiven volym på röret. Provberedning och förvaring EDTA-blod för blodstatus och CRP kan förvaras 24 tim i 2-8 ºC. Maskinell klassificering av leukocyter bör utföras inom 8 timmar men resultatet kan lämnas ut senare om inga larm förekommer. OBS! Klassificering av leukocyter i mikroskop är mycket svårt att utföra då mer än 8 timmar förflutit sedan provtagning. Plasma/serum för CRP kan sparas 24 timmar i kylskåp efter centrifugering och separering från blodkropparna. Analysutförande Se utförandebeskrivning Microsemi CRP, handhavande. Avläsning och bedömning Om leukocyter och/eller trombocyter ej kan godkännas ska provet skickas till Klinisk kemi och farmakologi eller räknas i mikroskop. Om leukocytvärdet är lägre än 1,5x10 9 /L utförs ej manuell klassificering av leukocyter, B-Celler, (om inte annat är överenskommet). Skicka alla prover som har MCV >107 fl till KKF. Skicka prov med TRC-värden <100 x 10 9 /L (om det inte är en känd patient) till KKF för verifiering eller räkna manuellt. Instrumentet larmar inte alltid för trombocytaggregat. Resultat som överskrider mätintervallet, se under Metodprincip, kräver spädning av blodprovet med Minidil LMG. En reanalys av det spädda provet, med korrigering för spädningsfaktorn, gör det möjligt att få fram ett korrekt analysresultat. Observera att endast analysen som överskrider mätintervallet lämnas ut från spätt prov, övriga analyser lämnas ut från originalanalysen. Koagel, övervaggning. Ej tillräckligt fyllt rör, överfyllt kapillärrör. Prov taget i dropparm. För gammalt prov. Interferenser Instrumentet är konstruerat så att det flaggar för prov som innehåller störande komponenter. Flertalet av interferenserna kan ses på kurvorna. Se även utförandebeskrivning Microsemi CRP, handhavande. Leukocyter (LKC) Omogna erytrocyter räknas in i LKC-parametern. Om antalet erytroblaster är tillräckligt stort för att aktivera en L1-varning detekteras interferensen. Genom att granska blodbilden på ett diffutstryk upptäcks de omogna erytrocyterna. Totalantalet leukocyter ska bestämmas med hematologiinstrument på KKF eller med manuell metod.

4 sida 4 (17) Ickelyserade erytrocyter i vissa mycket sällsynta fall blir inte erytrocyterna i blodprovet helt lyserade. Dessa ej lyserade röda blodkroppar kan upptäckas i LKC-histogrammet med en L1-varning eller som en upphöjd baslinje på sidan av lymfocytpopulationen. Totalantalet leukocyter ska bestämmas med hematologiinstrument på KKF eller med manuell metod. Multipelt myelom proteinfällning hos patienter med multipelt myelom kan ge förhöjda värden vid LKC-räkning. Är provet hemolyserat före analys kan det orsaka förhöjda värden vid räkning av LKC, pga erytrocytvävnaden. Leukemi ett falskt lågt värde på LKC-resultatet kan uppkomma beroende på en ökad skörhet hos leukocyterna som gör att vissa av cellerna förstörs vid räkning. Fragmenten av de här vita blodkropparna interfererar också vid differentialräkning av leukocyterna. Detta kan synas på erytrocyt- och trombocytkurvorna. Ett falskt lågt värde vid LKC-räkning kan också observeras hos patienter med lymfatiska leukemier. Det orsakas av förekomst av onormalt små lymfocyter som inte räknas av instrumentet. Detta bör ses på erytrocyt- och trombocytkurvorna. Kemoterapi cytotoxiska och immunosuppressiva mediciner kan öka skörheten hos leukocyterna, vilket kan orsaka låga värden. Dessa patienter bör ej analyseras på Microsemi CRP. Kryoglobuliner förhöjda nivåer av kryoglobulin kan ge förhöjda värden för LKC-, ERC- eller TRC-räkningar och förhöja Hb-värdet. Skicka patienten för provtagning på KKF. Skriv en kommentar om (misstänkt) kryoglobulin. Erytrocyter (ERC) I sällsynta fall då LKC-antalet är extremt högt kan ERC-värdet bli falskt för högt. Felet blir störst om ERC-antalet är lågt. Agglutinerade röda blodkroppar kan orsaka ett falskt minskat ERCantal. Blodprover som innehåller de agglutinerade röda blodkropparna kan identifieras genom att observera onormala MCV-, MCH- och RDWvärden. Köldagglutinat IgM-immunoglobuliner som är förhöjda vid agglutinatsjukdom kan orsaka lägre värden vid ERC- och TRCräkningar och öka MCV-värdet. Kryoglobuliner förhöjda nivåer av kryoglobulin kan ge förhöjda värden för LKC-, ERC- eller TRC-räkningar och förhöja Hb-värdet. Skicka patienten för provtagning på KKF. Skriv en kommentar om (misstänkt) kryoglobulin. Hemoglobin (Hb) Grumlighet i provet på grund av ett antal olika fysiologiska och/eller terapeutiska faktorer kan falskt förhöjda Hb-resultat erhållas. Upptäcks genom att jämföra Hb med EVF. För att få korrekta hemoglobinresultat vid förhöjd grumlighet i blodproven bestämmer man orsaken till grumligheten och följer lämplig metod nedan:

5 sida 5 (17) förhöjda LKC-värden: Ett extremt förhöjt LKC-värde orsakar en omfattande ljusspridning. Följ referensmetoderna (i det här fallet HemoCue). förhöjda värden för lipider: Förhöjda värden för lipider i blodprovet ger plasman ett mjölkaktigt utseende. Hb resultatet kan ej lämnas ut. Skicka provet till KKF med beställning av ett manuellt EVF. ökad grumlighet kan också observeras i fall där röda blodkroppar är resistenta mot lysering. Det här tillståndet orsakar ett felaktigt förhöjt Hb-resultat, men kan upptäckas genom att observera de onormala MCH- och MCHC-värdena och den ökade baslinjen i LKChistogrammet. Fetalt blod blandning av fetalt och maternellt blod kan orsaka ett falskt förhöjt Hb-värde. Kryoglobuliner förhöjda nivåer av kryoglobulin kan ge förhöjda värden för LKC-, ERC- eller TRC-räkningar och förhöja Hb-värdet. Skicka patienten för provtagning på KKF. Skriv en kommentar om (misstänkt) kryoglobulin. EVF (Erytrocytvolymfraktion) Agglutination av erytrocyter kan orsaka ett felaktigt EVF-värde. Erytrocytagglutinationen kan detekteras genom att observera onormala MCH- och MCHC-värden, samt genom att undersöka blodutstryk. MCV (medelvärde för erytrocytvolymen) MCV-värdet beräknas med hjälp av EVF-värdet och erytrocyträkningen. De begränsningar som räknas upp för EVF och erytrocyter påverkar MCV-värdet och kan orsaka felaktiga resultat. Agglutination av erytrocyter kan orsaka ett felaktigt MCV-värde. Erytrocytagglutinationen kan detekteras genom att observera onormala MCH- och MCHC-värden, samt genom att undersöka blodutstryk. Ett mycket stort antal stora trombocyter kan interferera med den korrekta bestämningen av MCV-värdet. MCH (medelvärde för hemoglobininnehåll i erytrocyterna) MCH-värdet beräknas med hjälp av Hb-värdet och erytrocyträkningen. De begränsningar som räknas upp för Hb och erytrocyter påverkar MCH-värdet och kan orsaka felaktiga resultat. MCHC (medelvärde för hemoglobinkoncentrationen i erytrocyterna) MCHC-värdet beräknas med hjälp av Hb- och EVF-värdet. De begränsningar som räknas upp för Hb och EVF påverkar MCHC-värdet och kan orsaka felaktiga resultat. Trombocyter (TRC) Mycket små erytrocyter (mikrocyter), erytrocytfragment (schistocyter) och LKC-fragment kan interferera med räkning av trombocyter och orsaka förhöjda värden.

6 sida 6 (17) Agglutinerade erytrocyter kan fånga in trombocyter, vilket ger ett felaktigt lågt värde vid räkning av trombocyter. Förekomst av agglutinerade erytrocyter kan detekteras genom att observera onormala MCH- och MCHC-värden. Makrotrombocyter i mycket stort antal kan orsaka ett felaktigt lågt värde vid räkning av trombocyter, eftersom de stora trombocyterna kan överskrida den övre tröskeln för trombocytparametern och därmed inte medräknas. Kemoterapi cytotoxiska och immunosuppressiva mediciner kan öka skörheten hos cellerna, vilket kan orsaka låga värden vid TRC-räkning. Är provet hemolyserat före analys kan det orsaka förhöjda värden vid räkning av TRC, pga erytrocytvävnaden. Erytrocytinklusioner, t. ex. Howell-Jolly-kroppar, Heinz-kroppar, järngranulat och basofila granulat kan orsaka falskt förhöjda värden vid räkning av trombocyter. Trombocytagglutination hopklumpade trombocyter som orsakas av dålig provtagningsteknik eller EDTA-aktivering av immunoglobuliner, kan leda till minskade värden vid räkning av trombocyter och/eller förhöjda värden vid LKC-räkning. Svar på Hb och CRP kan lämnas ut från Micros CRP-instrumentet. Önskas fullständigt blodstatus tas provet om i rör med natrium-citratantikoagulans och analyseras på hematologiinstrument på KKF. Gör så här: skapa två beställningar i Cosmic, en för TRC som ska analyseras i citrat (beställ B-Trombocyter och skriv citratblod/aggregat? på etiketten) och en för blodstatus i EDTA. Tänk på att provtagningstiden måste skilja en minut på de två beställningarna trots att det är olika LID-nummer. Sätt en gummisnodd runt båda rören för att markera att de hör ihop. Kryoglobuliner förhöjda nivåer av kryoglobulin kan ge förhöjda värden för LKC-, ERC- eller TRC-räkningar och förhöja Hb-värdet. Provet kan värmas till 37 och analyseras om omedelbart. Manuell räkning av parametrarna kan också göras. Om prov placeras i värmeskåp kommenteras detta, se Svarsrutiner. Alternativt skickas patienten för provtagning på KKF. Skriv en kommentar om (misstänkt) kryoglobulin. Neutrofila granulocyter, neut (absolutvärde vid räkning av neutrofiler) Neutrofilräkningen härleds ur LKC-räkningen. Ett mycket stort antal eosinofiler, basofiler, metamyelocyter, myelocyter, promyelocyter, blastceller och plasmaceller kan interferera med ett korrekt svar på neutrofila. Lymfocyter (absolutvärde vid räkning av lymfocter) Lymfocyträkningen härleds ut LKC-räkningen. Förekomst av erytroblaster och erytrocyter som är resistenta mot lysering kan interferera med ett korrekt svar på lymfocyter.

7 sida 7 (17) Svarsrutiner Monocyter (absolutvärde vid räkning av monocyter) Monocyträkningen härleds ur LKC-räkningen. Förekomst av stora lymfocyter, atypiska lymfocyter, blastceller och ett stort antal basofiler kan interferera med ett korrekt svar på monocyter. LKC anges med en decimal i antal x 10 9 /L. Resultat mindre än 0,1 x 10 9 /L svaras automatiskt ut som <0,1 x 10 9 /L. ERC anges med två decimaler i antal x /L. Hb anges i heltal i g/l. B-EVF anges med två decimaler i L/L. MCV anges med en decimal i fl. Skicka blodstatus med MCV >107 fl till KKF. MCH anges i heltal i pg. MCHC anges i heltal i g/l. TRC anges i antal x 10 9 /L. TRC-värden < 100 x 10 9 /L, ej kända, verifieras genom mikroskopi eller genom att skicka provet till KKF, detta för att upptäcka eventuell TRCaggregation. TRC-värden mindre än 10 x 10 9 /L måste räknas i mikroskop. Om prov placeras i värmeskåp kommenteras TRC-värdet med kommentaren HE012, Provet värmebehandlat p g a agglutinationstendens varför cellantalet kan vara otillförlitligt. B-CRP anges i heltal i mg/l. Resultat mindre än 5 mg/l svaras automatiskt ut som <5 mg/l. CRP anges med två decimaler upp till 1 mg/l, därefter med en decimal upp till 10 mg/l, sedan utan decimal. Resultat mindre än 0,2 mg/l svaras automatiskt ut som <0,2 mg/l. Referensintervall B-Leukocyter 8-14d 4,5-16, /L 15-30d 5,1-18, /L 31-60d 4,4-16, /L d 4,1-16, /L 6mån-8år 3,5-14, /L 9-17år 4,1-12, /L Vuxna: 3,5-9, /L Nyfödda kan ha upp till 30,0 x 10 9 /L utan att det behöver vara patologiskt.

8 sida 8 (17) B-Neutrofila granulocyter 8-14d 1,7-7, /L 15-30d 2,0-8, /L 31-60d 1,7-7, /L d 1,6-7, /L 6mån-14år 1,6-6, /L 15-17år 2,0-9, /L Vuxna: 1,3 5, /L B-Lymfocyter 8-14d 1,5-5, /L 15-30d 1,8-7, /L 31-60d 2,4-8, /L d 2,1-7, /L 6mån-5år 1,8-7, /L 6-12år 1,3-4, /L 13-17år 1,2-3, /L Vuxna: 0,7 3, /L B-Monocyter 8-14d 0,1-1, /L 15-30d 0,1-2, /L 31-60d 0,1-1, /L d 0,4-1, /L 6mån-17år 0,2-0, /L Vuxna: 0,1-0, /L Upp till 4 års ålder kan barn ha mer mononukleära än polynukleära celler. B-Erytrocyter 8-14d 4,0-5, /L 15-30d 3,8-5, /L 31-60d 3,4-5, /L d 3,9-5, /L 6mån-7år 4,0-5, /L 8-17år (F) 4,1-5, /L 8-17år (M) 4,3-5, /L

9 sida 9 (17) Kvinnor: 3,90-5, /L Män: 4,30-5, /L B-Hemoglobin 8-14d g/l 15-30d g/l 31-60d g/l d g/l 6mån-7år g/l 8-11år g/l 12-17år (F) g/l 12-17år (M) g/l Kvinnor: g/l Män: g/l B-Erytrocyter, volymfraktion(evf) B-MCV 8-14d 0,37-0,50 L/L 15-30d 0,37-0,46 L/L 31-60d 0,32-0,44 L/L d 0,34-0,43 L/L 6mån-7år 0,30-0,39 L/L 8-11år 0,32-0,42 L/L 12-17år (F) 0,33-0,45 L/L 12-17år (M) 0,36-0,49 L/L Kvinnor: 0,35-0,46 L/L Män: 0,39-0,50 L/L 8-14d fl 15-30d fl 31-60d fl d fl 6mån-7år fl 8-11år fl 12-17år (F) fl 12-17år (M) fl Vuxna: fl

10 sida 10 (17) B-MCH MCHC 8-14d pg 15-30d pg 31-60d pg d pg 6mån-17år pg Vuxna: pg 8dag-11år g/l 12-17år F g/l 12-17år M g/l Vuxna g/l B-Trombocyter CRP-B 8-14d /L 15-30d /L 31-60d /L d /L 6mån-10år /L 11-17år /L Vuxna /L Barn och vuxna: < 10 mg/l CRP Barn och vuxna: < 5 mg/l Referensurvalsgrupp Vuxna Blodstatus: För respektive celltyp av leukocyter: Medicine kandidater under perioden kvinnor män antal åldersintervall TRC: NORIP:s värden, där medelvärdet används för både män och kvinnor, vilket stämmer med vårt tidigare (medicine kandidater). NORIP skiljer mellan män och kvinnor. Hb: NORIPS övre värden, de låga är WHO:s anemikriterier.

11 sida 11 (17) CRP: Labboken 2003, Klin kem lab, Universitetssjukhuset Lund. Övriga kommer från NORIP:s rekommenderade värden, något avrundade. Barn Utrustning Reagens Kalibrering Falun projekt omräknat enlig Soldin, se Hänvisningar. Instrument Microsemi CRP Kemikalier / Kit Allt material beställs direkt ifrån Triolab. CRP Unit 50 R1 (hemolysreagens), R2 (Trisbuffert)och R3 (latexreagens, latexpartiklar klädda med polyklonala CRP-antikroppar). Öppnad förpackning är hållbar i 2 månader i instrumentet eller i kylskåp. ABX Minidil LMG (isoton koksaltlösning) Fysiologisk koksaltlösning som innehåller <0,1% natriumacid. Öppnad förpackning är hållbar i rumstemperatur i 2 månader. ABX Lysebio (lyseringsreagens). Organisk buffert och rengöringsmedel. Innehåller 1-3% Dodecyltrimethylammonium chloride. Öppnad förpackning är hållbar i rumstemperatur i 2 månader. ABX Miniclean (tvättlösning). Enzymatiskt rengöringsmedel. Öppnad förpackning är hållbar i rumstemperatur i 2 månader. ABX Minoclair (rengöringsmedel) Natriumhypoklorit 4%, natriumhydroxid 0,26%. Öppnad förpackning skall förslutas väl och är hållbar 3 månader eller tills klorlukten försvinner. Iakttag stor försiktighet, mycket frätande reagens. Riskbedömning Inga speciella skyddsåtgärder krävs. KKF Kalibrering utförs efter samråd med Medicinskt ansvarig. Instrumentet kalibreras mot masterinstrument på KKF. Använd formulär Microsemi, kalibrering.

12 sida 12 (17) PV Kalibrering utförs i samråd med Kvalitetssamordnare i PV som vid behov kontaktar metodansvarig läkare inom KKF. Instrumenten kalibreras mot hematologiinstrument på KKF. Använd formulär Mall vid kalibrering och Uträkning ny faktor PV, dessa finns hos Kvalitetssamordnare i PV. Spårbarhet Kvalitetskontroll Se angiven information för KKFs instrument. Internkontroll Minotrol CRP KKF: 2 nivåer (låg och normal) dagligen. PV: normal nivå dagligen. Hållbar i kylskåp till utgångsdatum. Öppnad förpackning är hållbar minst 14 dagar i kylskåp. Externkontroll KKF Korrelationstest för blodstatus görs mot masterinstrument 1 gång/mån. Korrelationstest för CRP görs mot masterinstrument var 3:e månad. Bedömning sker av driftsansvarig läkare. PV Equalisprogrammet 10 ggr/år. Svar skickas ut till utförande lab och kvalitetssamordnare. Vid behov skickas split sample till KKF. Indikation/Medicinsk betydelse/användningsområde Alla blodceller har sitt ursprung i multipotenta stamceller i benmärgen. Dessa i sin tur ger upphov till två utvecklingslinjer, den ena för lymfopoesen och den andra för erytropoesen, myelopoesen och trombopoesen. I poesen representeras övergången mellan den multipotenta stamcellen och cirkulerande mogna celler av ett antal generationer av mognadsstadier. Regleringen av erytropoesen sker huvudsakligen via erytropoietin, ett hormon som syntetiseras av njurarna. Regleringen av myelopoesen sker via ett komplex av tillväxtfaktorer. Hb Mätning av hemoglobinkoncentrationen i blod är framförallt indicerat vid misstanke om blodbrist (anemi), men även vid polycytemimisstanke och för att följa förändringar i vätskefördelningen mellan intraoch extracellulära rummen. Blodbrist kan uppkomma av flera orsaker t ex blödning, järnbrist, brist på vitaminerna kobalamin (B12) och/eller folsyra, hemolytiska anemier, nedsatt erytropoietinbildning vid njurinsufficiens, tumörsjukdom mm. Symptomen vid blodbrist är ospecifika och undersökningen är indicerad som ett led i utredningen av många både akuta och kroniska sjukdomstillstånd.

13 sida 13 (17) Mätning av hemoglobinkoncentrationen i blod är ett allmänt rutinprov i både akut och elektiv vård. Blodbrist kan uppkomma på olika nivåer. Störning av poesen på stamcellsnivå ger upphov till aplastisk anemi, medan störning av enbart en erytropoeslinje på förstadienivå är ett specialfall, det kallas för PRCA (pure red cell aplasia). Brist på speciellt betydelsefulla mognadsfaktorer leder till nedsatt erytropoes. Järnbrist leder till mikrocytär anemi, medan brist på vitaminerna folsyra och kobalamin (B12) leder till ineffektiv erytropoes och makrocytär anemi. Erytropoietinbrist vid njurinsufficiens leder till normocytär anemi. Förträngning av erytronet i benmärgen ses vid maligna sjukdomar och metastaser, leukemi och myelom, men också vid infiltrat av tbc eller svampar. Den förträngningen leder till nedsatt erytropoes med anemi. Polycytemi är en annan viktig indikation för mätning av hemoglobinkoncentrationen. Polycytemi kan vara absolut, med en absolut ökning av totala hemoglobinmängden, eller vanligare en relativ ökning som en följd av en låg plasmavolym. Absolut polycytemi kan uppkomma som primär, s k polycytemia rubra vera, eller sekundär. Sekundär polycytemi kan orsakas av bl a lungsjukdomar, vissa hemoglobinopatier, eller vid ickeproportionell överproduktion av erytropoietin, t ex vid vissa njursjukdomar eller vissa tumörer. Relativ polycytemi kan orsakas av tobaksrökning eller vid plasmaförlust, exempelvis via brännskador eller tarmen. Diskriminering mellan primär polycytemi och sekundär polycytemi sker via bestämning av erytropoietinnivån, varvid den sekundära polycytemin alltid åtföljs av en förhöjd erytropoietinnivå, medan polycytemia (rubra) vera aldrig uppvisar förhöjda erytropoietinvärden. ERC, EVF, MCV, MCH, MCHC Bestämning av dessa parametrar är av värde dels i alla fall med ett lågt hemoglobinvärde och där anemiorsaken ej är omedelbart klar, dels när man trots ett normalt hemoglobinvärde misstänker en störning i erytropoesen. LKC Cirkulerande vita blodkroppar består av granulocyter (neutrofila, eosinofila, basofila), monocyter och lymfocyter. Bildningen av vita blodkroppar sker i benmärgen. Lymfocyter bildas också i den lymfatiska vävnaden. De två dominerade leukocyttyperna, neutrofila granulocyter och lymfocyter, utgör skilda organsystem med separat reglering, distribution och reaktion vid sjukliga tillstånd. Förändringar i totalantalet leukocyter avspeglar oftast förändringar i antalet neutrofila granulocyter, vilka dels utgör % av blodleukocyterna, dels uppvisar störst variation både under fysiologiska och sjukliga tillstånd. Bestämning av totalantalet leukocyter har därför störst värde när man misstänker sänkt respektive ökat antal neutrofila granulocyter. Om det totala antalet leukocyter är förhöjt eller sänkt bör en klassificering utföras för att utröna i vilket/vilka cellsystem en rubbning föreligger.

14 sida 14 (17) Klassificering kan även utföras vid normalt antal leukocyter om misstanke finns om ett förändrat antal av något särskilt cellslag eller mognadsform. TRC Räkning av trombocytantalet är obligat i utredningar avseende såväl oklara hematologiska fall som oklar blödningsbenägenhet. Låga värden, trombocytopeni, kan orsakas av nedsatt produktion, ökad perifer destruktion eller ökad poolning i mjälten. Pseudotrombocytopeni måste uteslutas. Detta tillstånd beror på aggregering av trombocyter i närvaro av EDTA, eller efter intag av abciximab ( ReoPro). Höga värden (oftast > 1000 x 10 9 /L), trombocytos=trombocytemi, kan vara en idiopatisk, s k essentiell trombocytemi, som karakteriseras av en unilinjär proliferation. Essentiell trombocytos ingår i gruppen myeloproliferativa sjukdomar. Trombocytos kan emellertid också vara sekundär eller reaktiv. Reaktiv trombocytos kan ses vid pågående blödning, eller direkt efter splenektomi. Den kan också ses i abstinensfasen efter alkoholmissbruk (under själva alkoholmissbruket ses oftast en trombocytopeni). Det är viktigt att observera att räkning av trombocytantalet ger information om kvantitativa rubbningar, dock inte kvalitativa defekter i trombocyterna. B-CRP/CRP Metodprincip CRP är cyklisk pentamer som produceras i levern. Den binder sig till bakterier och sönderfallna celler och aktiverar komplementsystem. Detta serumprotein, är ett akutfasprotein, med en snabb ökning vid inflammation (6 12 timmar) och en kort halveringstid (18 timmar). Bakterieinfektion och/eller svår vävnadsskada/inflammation ger ökad CRP-nivå. Används för uppföljning av behandlingsresultat vid bakteriella infektioner, samt för urtitrering av minsta terapeutiska steroiddos vid kollagenoser. Upprepade CRP analyser är ett viktigt hjälpmedel för att upptäcka postoperativa komplikationer. Kan anses ersätta B-SR i många, dock inte alla fall. Instrumentet Microsemi CRP är ett helautomatiserat analyssystem för kvantifiering och differentiering av celler i blod. Genom att utvärdera olika mätdata erhålles en bild av patientens hematologiska status, uttryckt i mätvärden för analytiska variabler och som larm för olika typer av atypier. Inom bestämda områden accepteras de instrumentella resultaten, men vid mer uttalade avvikelser (instrumentlarm eller kurvutseende) analyseras proverna på KKFs hematologiinstrument. Hemoglobin (Hb) Provet späds med Minidil och därefter med Lysebio för att hemolysera erytrocyterna, absorbansen mäts sedan vid 550 nm (Drabkins metod).

15 sida 15 (17) Erytrocyter (ERC) och trombocyter (TRC) Provet späds med Minidil. Cellerna mäts med impedansmetod. Antalet celler bestäms genom räkning av antalet pulser. EVF Höjden av varje räknad puls från räkningen av erytrocyterna adderas ihop i en analogisk integrator och läses vid slutet av varje mätning. En matematisk process kompenserar sedan för coincident passage (sammanträffande av flera celler samtidigt genom aperturen). MCV, MCH, MCHC Beräknas av Microsemi CRP från Hb, ERC och EVF med följande formler. MCV(fL) = [EVF (L/L) / ERC (10 12 )] x 100 MCH (pg) = Hb (g/l) / ERC (10 12 /L) MCHC (g/l) = [Hb (g/l) / EVF (L/L)] Leukocyter (LKC) Leukocyter mäts med impedans i samma mätkammare som Hbmätning. Antalet celler bestäms genom räkning av antalet pulser. Differentiering av leukocyter Uppdelning av leukocyter sker genom att Lysebioreagenset förändrar (krymper) leukocyter olika mycket. Lymfocyter påverkas genom att membranet krymper helt in till kärnan och cytoplasman försvinner helt. Monocyter påverkas marginellt och behåller sin storlek i jämförelse med lymfocyter. Neutrofiler påverkas inte av hemolyseringsmedlet. Detta beror på att neutrofiler har en molekyl i sitt membran som stoppar påverkan från lyseringsmedlet. Detta ger en storleksfördelning där de olika cellerna kan separeras från varandra. Kurvans X-axel representerar storlek (volym) och Y-axeln antalet celler. CRP Immunturbidimetrisk metod. Erytrocyter lyseras och CRP binds till ett antikropp-latexkomplex och absorbansen mäts vid 850 nm. Absorbansen är proportionell mot koncentrationen. Mätintervall Hemoglobin g/l Erytrocyter 0,5-7, /L Leukocyter 0, /L Trombocyter /L EVF 0,05-0,65 L/L

16 sida 16 (17) CRP, helblod mg/l CRP, plasma/serum mg/l Resultat som överskrider mätintervallet kräver spädning av blodprovet. En reanalys av det spädda provet gör det möjligt att få fram ett korrekt analysresultat. Alternativet till spädning är att skicka provet till KKF. Observera att endast analysen som överskrider mätintervallet lämnas ut från spätt prov, övriga analyser lämnas ut från originalanalysen. Storhet Antalskoncentration: Massa: Masskoncentration: Volym: Mätosäkerhet Bra att veta Hänvisningar Volymfraktion: ERC, LKC, TRC, Neut, Monocyt, Lymfocyt MCH Hb, MCHC, CRP MCV EVF Rutiner för hur mätosäkerheten tas fram beskrivs i Verksamhetshandboken kapitel 6. Mätosäkerhet vid två nivåer finns angivet i ett separat dokument för hela KKF. Samma beställningskoder föreligger för Microsemi CRP och CellDyn / Architect. Vi anser att vi kan ha det så eftersom metoderna är väsentligen likvärdiga, dessutom skulle det försvåra för våra kunder om vi hade olika beställningskoder. Vilket instrument som använts kan spåras via FlexLab. Ändringar i kroppsläget påverkar snabbt fördelningen av vätska mellan de intra- och extravaskulära rummen. Hb, ERC och EVF är i medeltal 8 % högre hos uppegående än hos liggande individer. LKC kan öka till det dubbla efter en kraftig ansträngning. Referenser Karolinska laboratoriets provtagningsanvisningar Soldin, Brugnara, Wong, editors. Pediatric reference intervals, 6th edition. AACC Press Washington DC Valideringar Valideringar Microsemi CRP

17 sida 17 (17) Dokumenthistorik Version Orsak / ändring Senast ändrad av 1 Nytt instrument. Nya referensintervall. Helena Lekeby, Malgorzata Karawajczyk 2 Korrigerat mätintervall för EVF Helena Lekeby