BARB. Control Set DAT I PreciNeg DAT Set I (2 x 10 ml) Control Set DAT Clinical PreciNeg DAT Clinical (2 x 10 ml)

Transkript

1 Beställningsinformation Analysinstrument på vilket (vilka) cobas c pack kan användas ONLINE DAT Barbiturates Plus 200 tester System id Roche/Hitachi cobas c 311, cobas c 501/ Preciset DAT Plus I calibrators CAL 1 6 (6 x 5 ml) Koder C.f.a.s. DAT Qualitative Plus (6 x 5 ml) C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical (3 x 5 ml) Kod Control Set DAT I PreciPos DAT Set I (2 x 10 ml) Control Set DAT I PreciNeg DAT Set I (2 x 10 ml) Control Set DAT Clinical PreciPos DAT Clinical (2 x 10 ml) Control Set DAT Clinical PreciNeg DAT Clinical (2 x 10 ml) Svenska Systeminformation För analysinstrumenten cobas c 311/501: BA2QP: ACN 572: för kvalitativ analys BA2SP: ACN 573: för semikvantitativ analys BA2QC: ACN 788: för kvalitativ analys; med hjälp av C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical För analysinstrumentet cobas c 502: BA2QP: ACN 8572: för kvalitativ analys BA2SP: ACN 8573: för semikvantitativ analys BA2QC: ACN 8788: för kvalitativ analys; med hjälp av C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical Användningsområde Barbiturates Plus () är en in vitro-diagnostisk analys för kvalitativ och semikvantitativ bestämning av barbiturater i humanurin på Roche/Hitachi cobas c-system vid en cutoff-koncentration på 200. Semikvantitativa analysresultat kan erhållas som gör det möjligt för laboratorier att bedöma analysprestanda som en del av ett kvalitetskontrollprogram. Semikvantitativa analyser är avsedda att bestämma en lämplig spädning för bekräftelse av provmaterialet genom en bekräftelsemetod, t.ex. gaskromatografi/masspektrometri (GC/MS). Barbiturates Plus ger endast ett preliminärt analytiskt analysresultat. En mer specifik alternativ kemisk metod måste användas för att erhålla ett bekräftat analytiskt resultat. GC/MS är den bekräftelsemetod som föredras. 1 Kliniskt beaktande och professionellt omdöme ska gälla vid varje testresultat för missbruksmedel, särskilt när preliminära positiva resultat används. Sammanfattning Barbituraterna, en grupp läkemedel som erhållits från barbitursyra (malonylurea), är sedativa hypnotika med en lugnande verkan på centrala nervsystemet (CNS). 1,2,3,4,5,6 Som varande CNS depressiva klassificeras de i relation till sin verkningstid (ultrakort, kort, medel och långverkande). De har använts medicinskt som sedativa för att minska emotionell spänning och som sömnmedel och vid vissa typer av epilepsi minskar de anfallsfrekvensen genom att höja anfallströskeln. Höga doser kan orsaka försämrad motorisk koordinering (sluddrigt tal, försämrad balans), perceptuella förändringar (felbedömning, överskattad egen prestationsförmåga) och disinhibitionseufori. Överoser kan resultera i dvala, koma och död. Den kombinerade användningen av barbituraterna med alkohol, opiater eller andra CNS depressiva kan resultera i livshotande, tillstötande andningsdepression. Trots att deras användning som sedativ hypnotiska substanser till stor del har ersatts av bensodiazepinerna, bibehåller barbituraterna fortfarande en viktig roll som anestetiska och antikonvulsiva läkemdel. Oralt intag är mest vanligt men barbituraterna kan injiceras intravenöst eller intramuskulärt. Efter intag absorberas de snabbt från magen och går in i cirkulationen. Deras slutliga distribution och koncentration i olika vävnader beror till stor del på lipidlösligheten och de proteinbindande egenskaperna hos de olika barbituraterna; fettdepåer och proteinrika vävnader ackumulerar den högsta koncentrationen. De flesta barbituraterna metaboliseras av levern via oxidation och konjugation, kvävedealkylering, kvävehydroxylering och/eller desulfurering av tiobarbiturater. Omfattningen av levermetabolism är substansberoende; sekobarbital t.ex. oxideras till stor del till en serie av farmakologiskt inaktiva metaboliter, medan en relativt hög procent fenobarbital och barbital till största delen utsöndras oförändrade i urinen. Som en substansgrupp utsöndras barbituraterna som aktiva läkemedels-/metabolitblandningar, vars förhållanden och koncentrationer beror på det specifika barbituratet ifråga. Analysprincip Analysen är baserad på den kinetiska interaktionen av mikropartiklar i en lösning (KIMS) 7,8 som uppmätts genom ändringar i ljustransmission. Vid frånvaro av substansen binder fri antikropp till mikropartikelkonjugat av substansen och framkallar bildandet av partikelaggregat. Eftersom aggragationsreaktionen fortskrider vid frånvaro av provsubstans ökar absorbansen. När ett urinprov innehåller substansen ifråga konkurrerar denna substans med det partikelbundna substansderivatet för fri antikropp. Antikropp som är bunden till provsubstans finns inte längre tillgänglig för att framkalla partikelaggregation och det därpå följande bildandet av partikelgitter hämmas. Närvaron av provsubstans minskar absorbansökningen proportionellt mot substanskoncentrationen i provet. Provsubstansinnehåll bestäms i relation till det erhållna värdet för en känd cutoff-koncentration av substansen. Reagens arbetslösningar R1 R2 R3 Buffert; 0.09 % natriumazid Sekobarbitalantikropp (fårpolyklonal); buffert; bovint serumalbumin; 0.09 % natriumazid Konjugerat sekobarbitalderivatmikropartiklar; buffert; bovint serumalbumin; 0.09 % natriumazid R1 är i position B, R2 är i position C och R3 är i position A. Försiktighetsåtgärder och varningar För in vitro-diagnostisk användning. Iakttag de normala försiktighetsåtgärder som gäller för all hantering av laboratoriereagens. Allt avfall ska hanteras enligt lokala riktlinjer. Säkerhetsdatablad kan beställas av användare inom professionen. Reagenshantering Bruksfärdigt Vänd reagensbehållaren försiktigt flera gånger före användning för att säkerställa att reagenskomponenterna blandas. Förvaring och hållbarhet Hållbarhet vid 2 8 C: Vid användning och kyld i analysinstrumentet: Frys ej. Se utgångsdatum på etiketten för cobas c pack 8 veckor Provmaterial och beredning Endast provmaterialen nedan analyserades och befanns godtagbara. Urin: Samla upp urinprover i rena glas- eller plastbehållare. Nytagna urinprover kräver ingen särskild hantering eller förbehandling men försök ska göras att hålla pipetterade prover fria från grövre vävnadsrester. Prover ska ligga inom det normala fysiologiska ph-intervallet på 5 8. Inga tillsatser eller konserveringsmedel krävs. Rekommendationen är att urinprover förvaras vid 2 8 C och analyseras inom 5 dagar efter uppsamling. 9 1 / 5

2 För längre förvaring rekommenderas frysning av proverna. Centrifugera mycket grumliga prover före analys. Manipulering eller spädning av provet kan orsaka felaktiga resultat. Om manipulering misstänks ska ytterligare ett prov tas. Provvaliditetsanalys krävs för prover samlade under Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. 10 FÖRSIKTIGHET: Provspädningar ska endast användas till att tolka resultat av Calc.?- och Samp.?-larm eller vid beräkning av koncentration vid beredning för GC/MS. Spädningsresultat är inte avsedda för patientvärden. Spädningsprocedurer ska valideras när de används. Medföljer förpackningen Se Reagens arbetslösningar avsnittet för reagens. Nödvändiga material (som ej medföljer) Se avsnittet Beställningsinformation Allmän laboratorieutrustning Analys Följ anvisningarna för det aktuella analysinstrumentet som finns i detta dokument för optimalt utförande av analysen. Analysinstrumentspecifika analysinstruktioner finns i användarhandboken. Roche ansvarar ej för applikationer som definierats av användaren och ej validerats av Roche. Applikation för urin Välj bort Automatic Rerun för dessa applikationer i menyn Utility, fönstret Application, fliken Range. Analysdefinition för cobas c 311 Semikvantitativ Kvalitativ Analystyp 2 Point End 2 Point End Reaktionstid/mätpunkter 10/ /26 53 Våglängd (sub/main) /505 nm /505 nm Reaktionsriktning Ökning Ökning Enhet mabs Reagenspipettering R1 59 µl R2 59 µl R3 52 µl Spädningslösning (H 2 O) Provvolymer Prov Provspädning Prov Spädn.lösning (NaCl) Normal 2.5 µl Minskad 2.5 µl Ökad 2.5 µl Analysdefinition för cobas c 501/502 Semikvantitativ Kvalitativ Analystyp 2 Point End 2 Point End Reaktionstid/mätpunkter 10/ /40 65 Våglängd (sub/main) /505 nm /505 nm Reaktionsriktning Ökning Ökning Enhet mabs Reagenspipettering Spädningslösning (H 2 O) R1 59 µl R2 59 µl R3 52 µl Provvolymer Prov Provspädning Prov Spädn.lösning (NaCl) Normal 2.5 µl Minskad 2.5 µl Ökad 2.5 µl Kalibrering Kalibratorer Kalibrering K Factor Kalibreringssätt Kalibreringsfrekvens Semikvantitativ applikation S1 4: Preciset DAT Plus I calibrators, (CAL 1 4) 0, 100, 200, 400 Kvalitativ applikation S1: C.f.a.s. DAT Qualitative Plus, C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical eller Preciset DAT Plus I calibrator CAL Substanskoncentrationerna för kalibratorerna har verifierats med GC/MS. För in K Factor som för den kvalitativa applikationen i menyn Calibration, skärmen Status, fönstret Calibration Result. Semikvantitativ applikation Result Calculation Mode (RCM) a Kvalitativ applikation Linear Full (semikvantitativ) eller blank (kvalitativ) kalibrering - efter byte av reagenslot - vid behov i enlighet med kvalitetskontrollrutiner a) Se avsnittet Resultat. Spårbarhet: Denna metod har standardiserats mot en primär referensmetod (GC/MS). Kvalitetskontroll Vid kvalitetskontroll ska du använda de kontrollmaterial som anges i avsnittet Beställningsinformation. Därutöver kan annat lämpligt kontrollmaterial användas. Kontrollintervallen och -gränserna ska anpassas till varje laboratoriums egna krav. De erhållna värdena ska hamna inom angivna gränser. Varje laboratorium bör fastställa åtgärder som ska vidtas om värdena hamnar utanför de angivna gränserna. Läkemedelskoncentrationer av Control Set DAT I och Clinical har verifierats med GC/MS. Följ gällande statliga regler och lokala riktlinjer vid kvalitetskontroll. Resultat För den kvalitativa analysen används cutoff-kalibratorn som en referens för att skilja mellan preliminärt positiva och negativa prover. Prover som ger ett absorbansvärde som är positivt eller 0 anses vara preliminärt positiva. Preliminärt positiva prover flaggas med >Test. Prover som producerar ett negativt absorbansvärde betraktas som negativa. Negativa prover föregås av ett minustecken. Semikvantifiering av preliminära positiva resultat ska endast användas av laboratorier för att bestämma en lämplig spädning för bekräftelse av provmaterialet genom en bekräftelsemetod, t.ex. GC/MS. Laboratoriet kan även fastställa kvalitetskontrollrutiner och bedöma kontrollfunktionen. 2 / 5

3 För den semikvantitativa analysen konstruerar analysinstrumentdatorn en kalibreringskurva från absorbansmätningar av de standarder som använder en 4-parameters logit log-passningsfunktion (RCM). Logit log-funktionen passar en mjuk linje genom datapunkterna. Analysinstrumentdatorn använder absorbansmätningar av prover för att beräkna substans- eller substansmetabolitkoncentration genom interpolation av logit logpassningsfunktionen. OBS! Om ett resultat av Calc.?- eller Samp.?-larm erhålls ska du gå igenom Reaction Monitor-data för provet och jämföra med Reaction Monitor-data för den högsta kalibratorn. Den mest troliga orsaken är en hög koncentration av analyten i provet, där absorbansvärdet för provet kommer att vara lägre än värdet för den högsta kalibratorn. Gör en lämplig spädning av provet med 0 -kalibratorn och kör om provet. En normal substansfri urin kan bytas ut mot 0 kalibratorn om urinen och metoden har validerats av laboratoriet. För att säkerställa att provet inte var för mycket utspätt måste det spädda resultatet, före multiplicering med spädningsfaktorn, vara minst halva cutoff värdet för analyten. Upprepa provet med mindre spädning om det utspädda resultatet ligger lägre än hälften av cutoff-värdet för analyten. En spädning som ger ett resultat närmast analyt-cutoffen är den mest precisa beräkningen. Multiplicera resultatet med den tillämpliga spädningsfaktorn för att beräkna det preliminärt positiva provets koncentration. Spädningar ska endast användas till att tolka resultat av Calc.?- eller Samp.?-larm, eller vid beräkning av koncentration vid beredning för GC/MS. Var försiktig vid rapportering av resultat, då flera olika faktorer kan påverka ett urinanalysresultat, t.ex. vätskeintag och andra biologiska faktorer. Liksom med varje känsligt test för missbruksmedel på automatiserade klinisk-kemiska analysinstrument finns det en risk för analyt-carry over från ett prov med en extremt hög koncentration till ett normalt (negativt) som kommer omedelbart efter. Bekräfta alla preliminärt positiva resultat med ytterligare en metod. Interferenser 11 I avsnittet Särskilda prestandadata i detta dokument finns information om de substanser som testats med denna analys. Möjligheten föreligger att andra substanser och/eller faktorer kan interferera med analysen och orsaka felaktiga resultat (t.ex. tekniska eller procedurmässiga misstag). Ett preliminärt positivt resultat med denna analys anger närvaron av barbiturater och/eller deras metaboliter i urin. Det mäter inte graden av förgiftning. Interfererande substanser tillsattes till substansfri urin vid koncentrationen som anges nedan. Till dessa prover berikades sedan till 200 med hjälp av en sekobarbitalmoderlösning. Prover analyserades trefaldigt (n = 3) på ett Roche/Hitachi cobas c 501-analysinstrument. Medianen av % återfinnanden beräknades och anges nedan. Substans Koncentration Analyserad % Barbiturater Återfinnande Aceton 1 % 97 Askorbinsyra 1.5 % 93 Bilirubin 0.25 mg/ml 98 Kreatinin 5 mg/ml 100 Etanol 1 % 100 Glukos 2 % 100 Hemoglobin 7.5 g/l 101 Humant albumin 0.5 % 99 Oxalsyra 2 mg/ml 104 Natriumklorid 0.5 M 105 Natriumklorid 1 M 110 Urea 6 % 103 Vid diagnostisk användning ska resultaten alltid bedömas tillsammans med patientens anamnes, kliniska undersökningar och andra resultat. ÅTGÄRD KRÄVS Speciell tvättprogrammering: Användningen av speciella tvättsteg är obligatorisk när vissa testkombinationer körs tillsammans på Roche/Hitachi cobas c-system. Den senaste versionen av listan över tester med risk för carry over återfinns med metodbladet NaOHD/SMS/Multiclean/SCCS eller NaOHD/SMS/SmpCln1+2/SCCS. Mer information hittar du i användarhandboken. Analysinstrumentet cobas c 502: All särskild tvättprogrammering som krävs för att undvika carry over finns tillgänglig via cobas link. Manuell hantering krävs ej. Vid behov måste speciell tvätt-/carry over-evasionsprogrammering implementeras före resultatrapportering för denna analys. Referensvärden Kvalitativ analys Resultaten från denna analys urskiljer endast preliminärt positiva ( 200 ) från negativa prover. Mängden substans som påvisats i ett preliminärt positivt prov kan inte beräknas. Semikvantitativ analys Resultat av denna analys ger endast ungefärliga kumulativa koncentrationer av substansen och dess metaboliter (se avsnittet Analytisk specificitet ). Särskilda prestandadata Representativa prestandadata på analysinstrument Roche/Hitachi anges nedan. Resultat som erhållits i individuella laboratorier kan variera. Precision Precisionen bestämdes i ett internt protokoll genom att köra en serie kalibratorer och kontroller (repeterbarhet n = 20, intermediär precision n = 100). Följande resultat erhölls på ett Roche/Hitachi cobas c 501-analysinstrument: Semikvantitativ precision Repeterbarhet Medelvärde SD Nivå Nivå Nivå Intermediär precision Medelvärde SD Nivå Nivå Nivå Kvalitativ precision Cutoff (200) Antal testade Korrekta resultat Konfidensnivå 0.75x > 95 % negativ avläsning 1.25x > 95 % positiv avläsning Testets nedre detektionsgräns 5.1 Den nedre detektionsgränsen motsvarar den lägsta mätbara analytnivån som kan urskiljas från noll. Den beräknas som det värde som ligger 2 standardavvikelser över den lägsta standarden (standard SD, repeterbarhet, n = 21). Noggrannhet 100 urinprover som erhållits från ett kliniskt laboratorium, där de screenades som negativa i en testpanel för läkemedel, utvärderades med Barbiturates Plus-analysen. 100 % av dessa normala urinprover var negativa relativt till en cutoff på prover som erhållits från ett kliniskt laboratorium, där de screenades som preliminärt positiva med en kommersiellt tillgänglig immunanalys och därefter bekräftades med GC/MS, utvärderades med Barbiturates Plus-analysen. 100 % av dessa prover var positiva relativt till en cutoff på 200. Därutöver späddes 10 prover till en barbituratkoncentration på cirka % av cutoff koncentrationen och 10 prover späddes till en barbituratkoncentration på cirka % av cutoff koncentrationen. Data från noggrannhetsstudierna beskrivna ovan som hamnade inom nära cutoff-värdeintervallen kombinerades med data som erhållits från de spädda positiva urinproverna. Följande resultat erhölls med Barbiturates Plus-analysen på analysinstrumentet Roche/Hitachi 917 relativt till GC/MS-värdena. CV % CV % 3 / 5

4 Barbiturates Plus klinisk korrelation (cutoff = 200 ) Negativa prover GC/MS-värden () Nära cutoff > 7500 Analysinstrumentet Roche/Hitachi Ytterligare kliniska prover utvärderades med denna analys på ett Roche/Hitachi cobas c 501-analysinstrument och ett Roche/Hitachi 917-analysinstrument. 100 urinprover som erhållits från ett kliniskt laboratorium, där de screenades som negativa i en testpanel för läkemedel, utvärderades med Barbiturates Plus-analysen. 100 % av dessa normala urinprover var negativa relativt till analysinstrumentet Roche/Hitachi urinprover som erhållits från ett kliniskt laboratorium, där de screenades som preliminärt positiva med en kommersiellt tillgänglig immunanalys och därefter bekräftades med GC/MS, utvärderades med Barbiturates Plus-analysen. 100 % av proverna var positiva på både analysinstrumentet Roche/Hitachi cobas c 501 och analysinstrumentet Roche/Hitachi 917. Barbiturates Plus korrelation (cutoff = 200 ) Analysinstrumentet Roche/Hitachi Analysinstrumentet cobas c Analytisk specificitet Specificiteten för denna analys för vissa vanliga barbiturater och strukturellt lika substanser bestämdes genom att generera inhiberingskurvor för varje substans på listan och bestämma den ungefärliga kvantiteten av varje substans som motsvarar i analysreaktivitet en cutoff på 200 för sekobarbitalanalysen. Följande resultat erhölls på ett Roche/Hitachi 917-analysinstrument. Substans Motsvarar 200 sekobarbital Ungefärlig % korsreaktivitet Cyklopentobarbital Aprobarbital Butalbital Allobarbital Butabarbital Pentobarbital Amobarbital Fenobarbital p Hydroxifenobarbital Barbital ,3 Dimetylbarbitursyra > Mefobarbital > < 0.1 Barbitursyra > < 0.01 Hexobarbital > < 0.01 Difenylhydantoin > < 0.02 Glutetimid > < 0.04 Substansinterferens Följande substanser tillsattes i alikvoter av poolad normal urin för att ge en slutlig koncentration på Ingen av dessa substanser gav värden i analysen som var högre än % korsreaktivitet. Acetaminofen Isoproterenol Acetylsalicylsyra Aminopyrin Amitriptylin d Amfetamin I Amfetamin Ampicillin Askorbinsyra Aspartam Atropin Bensokain Bensoylekgonin (kokainmetabolit) Bensfetamin Koffein Kalciumhypoklorit Klordiazepoxid Klorokin Klorfeniramin Klorpromaxin Kokain Kodein Desipramin Dextrometorfan Dextropropoxifen Diazepam Difenhydramin Dopamin Doxepin Ekgonin Ekgoninmetylester d Efedrin d,i Efedrin I Efedrin Epinefrin Erytromycin Östriol Fenoprofen Furosemid Gentisinsyra Guajakolglyceroleter Hydroklortiazid p Hydroxiamfetamin Ibuprofen Imipramin Ketamin Lidokain LSD MDA MDMA Melanin Meperidin Metadon d Metamfetamin I Metamfetamin Metakvalon Metylfenidat Metyprylon Morfin Naloxon Naltrexon Naproxen Niacinamid Noretindron I Norpseudoefedrin Nortriptylin Oxazepam Penicillin G Fencyklidin ß Fenetylamin Fentiazin Fentermin Fenylbutazon d Fenylpropanolamin d,i Fenylpropanolamin Prokain Prometazin d Pseudoefedrin I Pseudoefedrin Kinidin Kinin Sulindac Tetracyklin Δ 9 THC 9 karboxylsyra Tetrahydrozolin Trifluoperazin Trimipramin Tyramin Verapamil Referenser 1 Karch SB, ed. Drug Abuse Handbook. Boca Raton, FL: CRC Press LLC Wesson DR, Smith DE. Barbiturates: Their Use, Misuse, and Abuse. New York, NY: Human Sciences Press / 5

5 3 Robinson AE, McDowall RD. The distribution of amylobarbitone, butobarbitone, pentobarbitone and quinalbarbitone and the hydroxylated metabolites in man. J Pharm Pharmacol 1979;31: Hardman JG, Limbird LE, Gilman A, eds. Goodman and Gilman s The Pharmacological Basis of Therapeutics. 10th ed. New York, NY: McGraw Hill Pub Co Baselt RC. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man. 7th ed. Foster City, CA: Biomedical Publications Barbiturates - A Medical Dictionary, Bibliography, and Annotated Research Guide to Internet Reference. San Diego, CA: ICON Group International Inc Armbruster DA, Schwarzhoff RH, Pierce BL, et al. Method comparison of EMIT II and ONLINE with RIA for drug screening. J Forensic Sci 1993;38: Armbruster DA, Schwarzhoff RH, Hubster EC, et al. Enzyme immunoassay, kinetic microparticle immunoassay, radioimmunoassay, and fluorescence polarization immunoassay compared for drugs-ofabuse screening. Clin Chem 1993;39: Toxicology and Drug Testing in the Clinical Laboratory; Approved Guideline. 2nd ed. (C52-A2). Clinical and Laboratory Standards Institute 2007;27: Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. Fed Regist 2008 Nov 25;73: Data on file at Roche Diagnostics. I detta metodblad används alltid punkt som decimalavgränsare för att markera gränsen mellan hela tal och decimaler i ett decimaltal. Tusentalsavgränsare används inte. Symboler Roche Diagnostics använder följande symboler och tecken, utöver de som anges i ISO-standarden Innehåll i förpackning Volym efter spädning eller blandning Viktiga tillägg eller ändringar anges med ett ändringsstreck i marginalen. 2013, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim Distribution i USA av: Roche Diagnostics, Indianapolis, IN US Customer Technical Support / 5