sida 1 (7) Koder Rapportnamn B-HbA1c (IFCC) Beställningskod -BHBA1C Instrumentkod HbA1C NPU-kod / EDI-kod NPU27300 Provmaterial Utförande Patientförberedelser Vid kapillärprovtagning skall patientens hand vara varm och avslappnad. Typ av provmaterial Kapillärblod eller venblod. Typ av provrör och tillsatser Direkt i medföljande kapillärhållare, kapillärprovtagningsrör med EDTA-tillsats eller vacuumrör med EDTA-tillsats, heparin eller natriumfluorid. Provvolym Analysen kräver 1,5 µl helblod. Provberedning och förvaring Provet måste analyseras inom 2-3 minuter efter det att kapillären har fyllts. Venöst blod kan förvaras i upp till 10 dygn i kylskåp innan analys (ej natriumfluorid). Vid kapillärt taget prov 1. Testkassetten ska ha en temperatur mellan 18-30 C vid användning. 2. Öppna foliepåsen alldeles innan den ska användas. Testkassetten ska användas inom tio minuter från att folieförpackningen har öppnats. Använd handtagen för att hålla kassetten korrekt. 3. Genomför en kapillär blodprovstagning (vb se utförandebeskrivning för kapillärprovtagning). 4. Dra provtagningsenheten rakt upp ur testkassetten. 5. Håll provtagningsenhetens kapillär mot bloddroppen tills kapillären är helt fylld. Luftbubblor får ej förekomma. 6. Torka inte av kapillärens utsida. 7. Sätt omedelbart tillbaka provtagningsenheten i testkassetten.
sida 2 (7) 8. Analys måste påbörjas inom 2-3 minuter från att kapillären fyllts. 9. Tryck för att gå in i patientprovsfunktionen. Luckan öppnas automatiskt. Luckan får aldrig öppnas manuellt. 10. Sätt in testkassetten med streckkoden åt vänster. 11. Stäng luckan manuellt. 12. Tryck och skanna in LID nr. Tryck för att bekräfta. Provet analyseras, detta tar 3 min 15 sek. 13. Registrera resultatet. Tryck för att godkänna. Luckan öppnas automatiskt. 14. Ta ut testkassetten. HbA1c kassetterna ska till skillnad från CRPkassetterna innehålla rester av reagens när analysen är klar. Färgen på membranet motsvarar inte HbA1cnivån då resultatet mäts i röd och blå färgskala. 15. Kasta testkassetten. Stäng luckan manuellt. Vid venöst taget prov 1. Testkassetten ska ha en temperatur mellan 18-30 C vid användning 2. Öppna foliepåsen alldeles innan den ska användas. Testkassetten ska användas inom tio minuter från att folieförpackningen har öppnats. Använd handtagen för att hålla kassetten korrekt. 3. Dra provtagningsenheten rakt upp ur testkassetten. 4. Använd droppstift på provröret och applicera en droppe blod på en hydrofob yta. Fyll provtagningsenhetens kapillär. Torka inte av kapillärens utsida. 5. Sätt omedelbart tillbaka provtagningsenheten i testkassetten. 6. Analys måste påbörjas inom 2-3 minuter från att kapillären fyllts. 7. Tryck för att gå in i patientprovsfunktionen. Luckan öppnas automatiskt. Luckan får aldrig öppnas manuellt. 8. Sätt in testkassetten med streckkoden åt vänster.
sida 3 (7) Felkällor 9. Stäng luckan manuellt. 10. Tryck och skanna in LID nr från vakuumröret. Tryck för att bekräfta. Analysen tar 3min 15sek. 11. Registrera resultatet. Tryck för att godkänna. Luckan öppnas automatiskt. 12. Ta ut testkassetten. HbA1c kassetterna ska till skillnad från CRP kassetterna innehålla rester av reagens när analysen är klar. 13. Kasta testkassetten. Stäng luckan manuellt. Om provet har ett hemoglobinvärde under 60 g/l eller över 200 g/l ges inget testresultat utan en informationskod visas. Felkod # 103 innebär hemoglobin under 60 g/l Felkod # 104 innebär hemoglobin över 200 g/l Interferenser Ingen signifikant interferens (<5%) sågs upp till följande koncentrationer (enligt tillverkaren): Bilirubin 342 µmol/l Triglycerider 15,7 mmol/l Kolesterol 9,1 mmol/l Glukos 27,8 µmmol/l Fruktosamin 680 µmol/l Receptfria och receptbelagda läkemedel: Paracetamol 1,7 mmol/l Ibuprofen 1,8 mmol/l Acetylsalicylsyra 3,3 mmol/l Salicylsyra 4,3 mmol/l Glyburid 3,9 µmol/l Metformin 310 µmol/l Hemolys (in vitro) 5,0% För EDTA eller heparin i normala koncentrationer i venprovtagningsrör sågs ingen interferens. Svarsrutiner Resultat lämnas ut som heltal. Enhet mmol/mol. Om instrumentet är uppkopplat sker svarsöverföring automatiskt till FlexLab TEK där svaret godkänns eller underkänns. Obs! Värden över och under mätområdet visas ej som <20mmol/mol respektive >140mmol/mol utan med informationskoder: Felkod # 105 innebär att resultatet är <20mmol/mol Felkod # 106 innebär att resultatet är >140mmol/mol Dessa svar skall skrivas in manuellt i FlexLab. Vid manuell registrering i FlexLab kemi skrivs dessa resultat som <20 mmol/mol resp. >140 mmol/mol. Värdena läggs in som resultatersättande text.
sida 4 (7) Utrustning Värden under/över mätintervallet, dvs <20 mmol/mol och >140 mmol/mol för HbA1c ska skickas till Klinisk kemi och farmakologi för kontroll av mätvärdet. Gör då enligt följande: 1. Rapportera ut uppmätt resultat. Lägg in analyskommentar Provet skickas till KKF för verifiering. 2. Skapa en ny beställning i Cosmic med samma provtagningstid. 3. Skriv ut etiketter och märk om röret. 4. Skicka till KKF för verifiering. Referensintervall 6 mån 17 år: 28 39 mmol/mol <50 år: 27-42 mmol/mol 50 år: 31-46 mmol/mol Ej könsrelaterat. Instrument Afinion TM AS100 Analyzer. Instrumentet får ej utsättas för stötar. Vid all förflyttning skall instrumentet vara avstängt. Instrumentet ska stängas av vid arbetsdagens slut, dygnet-runt-verksamheter slår av instrumentet en gång/dygn. OBS! Luckan får aldrig öppnas manuellt. Underhåll Dagligt Stäng av och sätt på instrumentet. Display Vid behov torkas displayen med medföljande putsduk. OBS! Använd ingen vätska då skärmen innehåller elektronik som inte tål fukt. Ytterhölje Vid behov torkas utsidan av med en lätt fuktad trasa. Använd vatten eller DAX-ytdesinfektion. Instrumentet skall vara avstängt och elkontakten utdragen innan rengöring. Kassettkammare Kassettkammaren ska rengöras omedelbart om material eller vätskor runnit ner i kassettkammaren. För normalt underhåll (damm etc) ska kassettkammaren rengöras en gång per månad. 1. Tryck för att öppna luckan. 2. Ta ur elkontakten. 3. Fukta en rengöringspinne med 3 droppar vatten eller ytdesinfektion. Pinnen ska inte vara blöt. 4. Torka försiktigt bort stänk och smutspartiklar i kassettkammaren med hjälp av den fuktade pinnen.
sida 5 (7) Reagens Kalibrering 5. För att desinfektera kassettkammaren måste ytan i kammaren vara exponerad för desinfektionsmedlet i minst 10 minuter. 6. Torka bort all kvarvarande vätska från kassettkammaren med ny torr rengöringspinne. 7. Stäng luckan. 8. Sätt i elkontakten och starta instrumentet. Felsökning Se den svenska användarmanualen för Afinion TM AS100 Analyzer. Kemikalier / Kit Afinion TM testkassett 15-pack från Alere, art nr 54070, leverantörens art nr 1116065. Kontroll låg/hög nivå art nr 54071 leverantörens art.nr 1116067. Rengöringspinne, Art nr 43637, leverantörens art nr 1116048. Förvaring och hantering Testkassetterna är hållbara till utgångsdatum vid förvaring i 2-8 C. Testkassetterna måste uppnå rumstemperatur innan de används, det tar ca 15 minuter. Testkassetterna kan förvaras i oöppnade foliepåsar i 15-25 C i 90 dagar. Notera datum på förpackningen när den tas ur kylskåpet. Testkassetterna får inte frysas och inte utsättas för direkt solljus. Testkassetterna skall användas inom 10 min från det foliepåsen öppnats. Riskbedömning Inga farliga ämnen, i angivna koncentrationer. Spårbarhet Alere Afinion TM HbA1c kan spåras till IFCC:s referensmetod för bestämning av HbA1c. Kvalitetskontroll Internkontroll Internkontroll körs en gång per vecka, vid oväntade misstänkt felaktiga resultat samt ev vid instrumentproblem. Använd en nivå i taget och använd C1 och C2 flaska varannan gång. Öppnad kontrollflaska är hållbar 2 månader. Låt kontrollmaterialet anta rumstemperatur och skaka flaskan kraftigt i 30 sek innan analys. Utför analys som vid venös provtagning Kontrollresultatet registreras i FlexLab Kemi. Externkontroll Primärvården använder Equalis kontrollprogram som skickas ut 10 ggr/år. Om resultatet avviker > 10 % skall laboratoriesamordnare kontaktas på telefon 018-6114203 val 1. Klinisk kemi och farmakologi använder Equalis kontrollprogram.
sida 6 (7) Indikation/Medicinsk betydelse/användningsområde Metodprincip HbA1c speglar medelnivån av blodglukos under de senaste 2-12 veckorna före provtagningstillfället. Analysen används främst för att monitorera diabetesbehandling. Ett lägre HbA1c-värde minskar riskerna för ögon-, njur- och nervskador samt hjärtkärlsjukdomar. Hba1c är sedan 1 jan 2014 kompletterande metod för diagnostik av typ 2 diabetes hos icke-gravida vuxna. Nytillkomna diagnoskriterier är två HbA1c-värden 48 mmol/mol alternativt ett HbA1c-värde 48 mmol/mol och samtidigt P-Glukos (fastande eller efter glukosbelastning) över gränsen för diabetes. Vi rekommenderar att verifierande HbA1c-analys utförs av sjukhuslaboratorium på venöst taget prov (ej kapillärt prov på patientnära instrument) innan diabetesdiagnos ställs. HbA1c <48 mmol/mol utesluter inte diabetes. Metoden är ett automatiserat boronat-affinitetstest. Testkassetten innehåller alla reagens som behövs för bestämning av HbA1c. Provet blandas med HEPES-buffrad natriumklorid med tillsats av komponenter som hemolyserar och frisätter hemoglobin från erytrocyten samt fäller ut hemoglobin. Provblandningen överförs till ett blåfärgat borsyrekonjugat som binds till cis-diol-konfigurationen på glykerat hemoglobin. Denna reaktionsblandning sugs genom ett membran. Allt utfällt hemoglobin, både konjugatbundet och obundet blir kvar på membranet. Överskott av färgat konjugat sköljs bort av en tvättlösning. Med en reflektionsmätning bestäms blå (glykerat hemoglobin) och röd (totalt hemoglobin) färgintensitet. Förhållandet mellan dessa är proportionellt mot % HbA1c i provet. Mätintervall 20-140 mmol/mol Storhet Mätosäkerhet Bra att veta Andel HbA1c av totalt Hb, relativ substanskoncentration. Rutiner för hur mätosäkerheten tas fram beskrivs i Verksamhetshandboken kapitel 6. Mätosäkerhet vid två nivåer finns angivet i ett separat dokument för hela KKF. Glykosylerat (eller glykerat) hemoglobin (hemoglobin A1c,Hb A1c) är en form av hemoglobin som primärt används för att mäta plasmaglukoskoncentrationen över längre tidsperioder. Det bildas icke-enzymatiskt genom exponering för glukos. Diabetespatienter med hemolys och en del patienter med leversjukdom har en kortare erytrocytlivslängd. De kan få lägre HbA1c nivåer än vad de skulle ha fått med normal erytrocytomsättning.
sida 7 (7) Hänvisningar Bilagor Valideringar Referenser 1. Afinion användarmanual, Användarmanual, Alere 2. Laurells Klinisk kemi i praktisk medicin, 9:e uppl, sid 366-69 3. Lilja et al (2013) HbA1c blir kompletterande metod för diagnostik av diabetes. Samordnat införande i Sverige januari 2014. Läkartidningen 110, 2247-2248. 4. Kvalitetsmål för HbA1c-metoder som används för diagnostik av typ 2 diabetes. Rekommendation Equalis; www.equalis.se Validering av metoden som är gjord i samband med regionupphandling är en sammanvägd bedömning av spårbarhet till referensmetod, resultat av externkontroller hos Equalis och en jämförelse av metoden som gjordes vid upphandlingen. Kopia på metodjämförelsen finns hos kvalitetsansvarig KKF. Dokumenthistorik Version Orsak / ändring Senast ändrad av 1 Ny metod efter upphandling Kicki Palmberg