BRUKSANVISNING FÖR SIMPLE SIMON PT Produkt ZAF 101 Lot G185M2 Exp 2008-01 IVD

BRUKSANVISNING FÖR SIMPLE SIMON PT Produkt ZAF 101 Lot G185M2 Exp 2008-01 IVD ANVÄNDNINGSOMRÅDE Simple Simon PT (SSPT) är avsedd för patientnära analys av protrombintid uttryckt i INR (PT-INR). Analyten kallas även protrombinkomplexaktivitet (PK) eller vävnadsfaktorinducerad koagulationstid. SSPT är ämnad för mindre laboratorier vid sjukhus, vårdcentraler, läkarstationer och läkarkontor. SSPT skall användas av vårdpersonal med lämplig utbildning. Ett tecken på lämplig utbildning och träning är att, i övningssammanhang, ett inomserie CV (variationskoefficient) som underskrider 3 % erhålls vid upprepad analys av ett prov med INR mellan 2 och 3. SSPT mäter specifikt aktiviteten av de K- vitaminberoende koagulationsfaktorerna II, VII samt X och är lämpad för övervakning av antikoagulationsbehandling med K-vitaminantagonister som warfarin, den aktiva substansen i läkemedel som Waran och Marvan. Behandling med antikoagulantia kallas även blodförtunning. SSPT är en in vitro (ex vivo) laboratoriediagnostisk produkt. SAMMANFATTNING OCH FÖRKLARING Simple Simon PT använder en våtkemisk analysprocedur som analyserar PT enligt Owrens metod (ref 1). Det vätskeformiga PT reagenset innehåller, förutom vävnadstromboplastin (membranbunden vävnadsfaktor eller tissue factor ), koagulationsfaktor V och fibrinogen. PT bestämningen blir därmed specifik för de K-vitaminberoende koagulationsfaktorer II, VII och X. Resultatet uttrycks i internationellt normaliserad ratio, INR, som är det PT uttryck som WHO (World Health Organisation) förordar. INR är kvoten mellan uppmätt PT och normalt PT. Kvoten harmoniseras med en exponent, ISI (internationellt sensitivitetsindex), till den som erhålls med en WHO referensprocedur. Tack vare innovativ metodologi, ref 4 & 5, är det möjligt att 1) använda samma analysprocedur för olika provsort som nativt blod, citratantikoagulerat blod och blodplasma, 2) utföra analysen vid rumstemperatur mellan 17 till 45ºC (läsaren behöver inte termostateras och reagens är redan temperaturekvilibrerade) och 3) skatta blodets erytrocytvolymfraktion (EVF eller hematokrit) genom optisk analys av reaktionsblandningen och automatiskt korrigera det bestämda PT-INR värdet. Värdet korrigeras till att överensstämma med vad som hade erhållits vid analys av blodets plasma med en typisk skandinavisk sjukhusmetod kalibrerad med referenssubstanser från EQUALIS, Uppsala och/eller DEKS, Roskilde. INTRODUKTION TILL ANALYSPROCEDUREN OCH LÄSARENS FUNKTION Sammanfattningsvis sker PT-INR analysen med Simple Simon PT så här: 1. En knapptryckning väcker läsaren ur ett tillstånd av minimal strömförbrukning. 2. En knapptryckning ger impuls till en automatisk kontroll av läsarens funktioner som, om de godkänns, leder till skriftlig uppmaning att placera ett reaktionsrör med 200 µl reagens i läsarens mätställe. Om reaktionsröret med dess reagensinnehåll godkänns går mätning vidare till + 10 µl reagens (Om bakgrundsljuset är högt - läsaren varnar för detta krävs att mätställets mynning skyddas med lock under vissa analysmoment, se nedan). 3. En knapptryckning och samtidig tillsats av 10 µl prov startar tidmätningen och ger uppmaning till att blanda. Efter 10 sekunder kommer uppmaning att avlägsna pipetten. Sex sekunder senare aktiveras läsarens optiska system för kontinuerlig övervakning av reaktionsblandningens optiska egenskaper. 4. Under de nämnda 6 sekunder placerar operatören läsarens lock över reaktionsrörets mynning (locket är oftast obehövligt men ger extra skydd mot optiska störningar från omvärlden). På läsarens skärm visas den tid som förflutit sedan provtillsats. 5. När läsaren uppmärksammar optiska förändringar förenliga med att blandningen börjar koagulera stannar tidmätningen och en analys av efterförloppet påbörjas. Om även detta efterförlopp är förenligt med koagulation tänds ett OK på skärmen, om inte tänds error. Efter en sekunds analyserande av efterförloppet kan det,

alternativt, stå klart att ingen koagulation har börjat (de observerade förändringarna är av annan orsak) och letande efter koagulationens början fortsätter. Denna senare logiska funktion är för att minimera frekvensen felanalyser. 6. En knapptryckning vid nämnda OK ger provets INR. Antingen står det plasm INR. eller kap INR.. Om det är ett blodprov antar alltså läsaren att blodet är nativt (ej utspätt med citratlösning). 7. Om blodprovet är citratantikoagulerat krävs en knapptryckning för att ge det rätta svaret, ven INR. 8. En ytterligare knapptryckning visar koagulationstiden. Ytterligare en knapptryckning ger provets EVF. Ytterligare knapptryckningar visar inget av värde för en användare - utom möjligen temperaturen. Vidare knapptryckningar visar på nytt INR värden, klottingtid, EVF och så vidare i en oändlighet. 9. En förlängd knapptryckning om 2 sekunder sänker läsaren i det ovan nämnda tillstånd av minimal strömförbrukning. Till det tillståndet kommer läsaren även vid 10 minuters inaktivitet (brist på knapptryckningar). Läsaren startas alltid med en knapptryckning och senaste analysens resultat visas efter varandra, osv. Blankvärden visas istället för resultat om en ny analys har påbörjats (klockan startad) men aborterats. Med andra ord: Vid analys med Simple Simon PT tillsätts, med pipett och engångsspets, en volymsdel prov (10 µl) till 20 volymsdelar reagens (200 µl). Vid provtillsats är reagenset i ett genomsiktligt reaktionsrör som är placerat i läsarens sensorförsedda mätställe. Innan provtillsats bestäms reagensets ljusgenomsläpplighet, ett blankvärde. Tidpunkten för provtillsats indikeras med en knapptryckning. Tryckning ger också impuls till automatisk registrering av temperaturen. På läsarens skärm uppmanas operatören att med pipettspetsen bland det tillsatta provet med reagenset. Blandningsrörelserna registreras automatiskt och måste uppnå en viss nivå för att analysen skall fortsätta. Vid blandningstidens slut uppmanas operatören att avlägsna pipettspetsen. Strax efter den senare tidpunkten bestäms på nytt ljusgenomsläppligheten. De två ljusmätningarna tillåter automatisk bestämning av provets art, blod eller plasma, och för blod andelen blodceller, erytrocytvolymsfraktion (EVF). Tidmätningen fortsätter under automatisk övervakning av förändringar av ljusgenomsläppligheten. Tidmätningen upphör då förändringarna indikerar att blandningen har börjat koagulera, klotta. Tidsskillnaden mellan knapptryckningen och koagulationsregistreringen ger koagulationstiden. Även efter tidmätningens slut övervakas förändringarna i blandningens optiska egenskaper för att verifiera att koagulationen. I minnet hos läsarens datorenhet finns lotspecifika kalibreringskonstanter som tillsammans med de bestämda storheterna koagulationstid, temperatur och EVF ger provets PT-INR, se ref 4 & 5. INR värdet för blod eller plasma läsaren avgör automatiskt vilket uppträder på läsarens skärm efter en knapptryckning. Nativt och citratantikoagulerat blod - provsorter som inte är likvärdiga på grund av utspädning med antikoagulant - kan läsaren inte automatiskt särskilja. Informationen om blodsort tillförs med en knapptryckning. Vid analys av blod uppträder först INR värdet för nativt blod. Om blodet är citratantikoagulerat krävs en extra knapptryckning för att få INR värdet. Läsaren är kalibrerad tillsammans med produktens övriga komponenter - reagenset, reaktionsröret, pipetterna och pipettspetsarna och ska användas tillsammans med dessa. PRODUKTENS ANKOMST OCH MOTTAGNING Simple Simon PT, produkt ZAF 101, kan komma i olika förpackningar. - En förpackning är med läsaren, produkt ZAF 101-1. Läsaren kommer med två etiketterade, fasta pipetter, en grön och en vit för 200 µl respektive 10 µl. Läsaren med sina pipetter förvaras vid rådande rumstemperatur (15-35ºC). - En annan förpackning är med förbrukningsmaterial av plast, ZAF 101-4 101-9. Dessa förvaras vid rumstemperatur. - En förpackning är märkt i rött med förvaras i kyl, kylförvaring eller liknande. Den innehåller den torra reagenskomponenten, ZAF 101-2, och buffertkomponenten, ZAF 101-3. Denna förpackning, som kan ligga inuti förpackningen med förbrukningsmaterial, skall så snart som möjligt efter ankomst placeras i kyla (2-8ºC). Produkten i sin helhet eller dess komponenter ska inte förvaras eller användas i direkt solljus! PRODUKTEN OCH DESS FÖRVARING Kalibrerad läsare, reagenskomponenter, reaktionsrör, proppar, pipettspetsar och pipetter levereras som en produkt. Produkten och dess komponenter har samma lotnummer och utgångsdatum. Utgångsdatumet dikteras av den minst stabila produktkomponenten, den torra reagenskomponenten. Likväl är ingen av produktenheterna användbar efter det att utgångsdatumet passerats och kan följaktligen inte, utan att tillverkareansvaret komprometteras, användas vid laboratoriediagnostisk PT-INR bestämning. Det förutsätts att samtliga produktkomponenterna förvaras enligt de anvisningar som finns på produktkomponenternas individuella inneslutningar. Den torra reagenskomponenten ska förvaras i kyla, 2-8ºC. Buffertkomponenten skall också långtidsförvaras i kyl. Emellertid kan buffertkomponenten under någon eller några, högst två, månader förvaras i rumstemperatur (15-35ºC). Det kan vara fördelaktigt då bufferten måste vara rumstempererad, inte kall, då den tillförs den torra reagenskomponenten. Alternativt värms buffertkomponenten till rumstemperatur i samband med att den används. De övriga produktkomponenter, de som är av plast, har ringa temperaturkänslighet och förvaras vid godtycklig rumstemperatur, 10-45ºC. Det är inte att rekommendera att förvara produktkomponenterna av plast i kyla då det kan bildas kondens på dem när de tas fram för att användas. För upplöst reagens se Förberedelser nedan. VARNINGAR OCH FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRD Bufferten, ZAF 101-2, och följaktligen det bruksfärdiga reagenset innehåller natriumazid för att förhindra bakterieväxt och för att överföra hemoglobin till en form som tillåter riktig och precis EVF bestämning. Azid är ett snabbverkande gift som i likhet med cyanid hämmar kroppens syretransport. Drick inte, eller på annat sätt förtär, bufferten eller bruksfärdigt reagens! Spola med rikligt med vatten om buffert eller bruksfärdigt reagens hälls i avlopp. - Förtär inte buffert, produkt ZAF 101-3 eller brukfärdigt reagens, produkt ZAF 101-2. - Häll inte nämnd buffert eller bruksfärdigt reagens i avlopp som har rörelement av bly eller koppar. Azid förenar sig med nämnda metaller till explosiva föreningar.

ALLMÄNT OM REAGENS, LÄSARE OCH PROVMATERIAL Reagens till Simple Simon levereras i två portionerade komponenter; en torr komponent som innehåller biokemikalier i en lagringsbeständig form och en vätskekomponent som används till att lösa den torra. Då en portion torr komponent har lösts i en portion vätskeformig uppstår ett PT-reagens som innehåller avsedd mängd tromboplastin från kaninhjärna samt fibrinogen och koagulationsfaktor V från nötblod. PT-reagenset innehåller också avsedda halter fria kalcium joner, buffertsubstanser och albumin. PT-reagenset återtar först efter någon tid sina mer beständiga egenskaper. Dessa egenskaper består sedan i en månad vid kylskåpsförvaring. Läsaren till Simple Simon PT är en batteridriven enhet som optisk bestämmer koagulationstid och EVF. Läsaren mäter temperatur med en termistorbrygga. Med hjälp av lagrade kalibreringsvärden sammanväger läsaren de uppmätta storheterna till INR värden, se ovan under Introduktion till analysproceduren och läsarens funktion, Produkten och dess förvaring samt ref 4 & 5. Läsarens tre batterier av storlek AAA är förbrukade efter cirka 1500 analyser, vilket är en punkt då läsarens två pipetter närmare sig en grad av förslitning som gör dem mindre pålitliga. Slutet på batteriernas kapacitet utmärks av mattad texten på läsarens skärm och indikerar att läsaren med sina pipetter ska bytas mot ny från tillverkaren. Provmaterial till Simple Simon PT är citratantikoagulerad plasma, citratantikoagulerat blod eller kapillärblod. För anvisningar och rutiner för uppsamling av citratantikoagulerat blod (venblod) lämpligt för PT-INR bestämning hänvisas till de som gäller för den sjukvårdsorganisation inom vilken produkten används. Samma gäller för punktering av patients skinn på finger, öra, tå, häl eller annan kroppsdel och uppsamlande av blod (kapillärt blod) till PT-INR bestämning. Se de lokala provtagningsanvisningar som gäller och som bör innehålla anvisningar om provtagningsteknik, provets hållbarhet och förvaring. VARNING! Blodprover kan vara bärare av smitta. Använd alltid handskar vid provtagning och analys. FÖRBEREDELSER FÖR PT-INR ANALYS MED SIMPLE SIMON PT Upplösning (rekonstitution) av frystorkat (lyofiliserat) reagens. Eftersom upplöst reagens inte omedelbart intar sin mer beständiga form, den form som kalibreringen förutsätter, måste reagens upplösas en dag innan det används. Vid beredning av 8 ml reagens hämtas en flaska torr reagenskomponent från lagringsplatsen i kyla, 2-8ºC, och en flaska vätskeformig reagenskomponent (buffert) från sin lagringsplats. Bufferten måste hålla rumstemperatur då den används. Sedan bufferten är överförd försluts omedelbart reagensflaskan med buffertflaskans skruvlock och vänds livigt upp och ner upprepade gånger under minst 20 sekunder tills allt tidigare torrt material är löst. Gummipropp och skruvlock till flaskan med den torra reagenskomponenten kastas (proppen får i vilket fall inte längre plats), likaså den tomma buffertflaskan. Datum antecknas på reagensflaskan. Reagenset ska vara homogent och utan synliga icke upplösta partiklar eller klumpar. Det är dock något opakt. En del av opaciteten består av små luftbubblor från de frystorkade biokemikalierna och försvinner efter någon timme. Den bestående opaciteten utgörs av svävande, mikrometerstora tromboplastinpartiklar - membranfragment med ytbunden vävnadsfaktor. Nyupplöst reagens ska förvaras, tillåtas att mogna, minst 20 timmar (20 till 30 timmar) i rumstemperatur innan det portioneras i reaktionsrör (se nedan) som försluts. Förvaring är i kyla (2-8ºC) i högst en månad. Portionering och förvaring av upplöst, bruksfärdigt reagens. Den rekommenderade hanteringen av upplöst reagens är, som nämnts ovan, att portionera reagenset i 200 µl portioner i reaktionsrören så snart reagenset har mognat ut (alternativt kan reagenset portioneras strax efter upplösning och tillåtas mogna i reaktionsrören innan det ställs på förvaring i kyla). Vid portionering ordnas 40 reaktionsrör per reagensflaska i rörställ. Reagens portioneras med den gröna, etiketterade, fasta 200 µl pipett som medföljer läsaren. Reaktionsrören med reagens försluts med rena, blå proppar och hela stället med stående, proppade rör flyttas till ett kylutrymme, t.ex. ett kylskåp som håller 2-8ºC. Enligt ovan ska reagenset inte vara nyupplöst då det placeras i kylskåp, det ska först ha mognat i rumstemperatur (15-35º). Reagensets återgång till de nämnda, mer beständiga egenskaperna hämmas i kyla. I kyla (2-8 C) blir reagenset först efter flera dagar som det var vid kalibreringstillfället. Reagenset ska alltså först förvaras i rumstemperatur (15-35ºC) en kortare tid (20 till 30 timmar) och sedan lagras i kyl (2-8ºC) i högst en månad. Undvik att förorena reagenset, speciellt inte med blod eller blodplasma. Reagenset är till sin natur mycket känsligt för koagulationsfaktorer. Fibrin bildas och reagensegenskaperna förändras - reagenset blir oanvändbart. Reagenshantering i anslutning till analys. För att försäkra att reagenset i reaktionsrören har samma temperatur som läsaren registrerar, ska reaktionsrör med reagens, innan de används till analys, stå i minst 15 minuter i läsarens aluminiumblock. BRUKSANVISNING Förberedelser i korthet - för utförliga instruktioner se ovan under Förberedelser.. : 1. Rekonstituera PT-reagens, ZAF 101-2, genom att tillsätta 8 ml rumstempererad (15-35ºC) buffert, ZAF 101-3, till reagensflaskan. Vänd reagensflaskan upp och ner upprepade gånger under 20 sekunder. 2. Låt reagensflaskan med reagens mogna i rumstemperatur i minst 20 timmar, dock högst 30 timmar. 3. Förvara reagenset i kyl (2-8 C) i proppade reaktionsrör. Reagenset portioneras i upprättstående reaktionsrör, ZAF 101-7, 200 µl i varje, med grön pipett, ZAF 101-5 och pipettspets, ZAF ZAF 101-6. Rören proppas med blå proppar, ZAF 101-8. Upplöst reagens kan förvars en månad i kyla (2 8ºC) men högst två dagar i rumstemperatur (15-35ºC). 4. I samband med analys placeras önskat antal proppade reaktionsrör med reagens i aluminiumblockets hål på läsarens baksida. Rören ska vara i aluminiumblocket under minst 15 minuter innan de används.

Utförande: 1. Tryck på knappen för att starta (aktivera) läsaren. Läsaren visar de senaste analysresultaten och aktuellt lotnummer. Kontrollera att reagens och övriga produktkomponenter bär samma lotnummer. 2. Tryck på knappen, läsaren utför då autocheck. Om checken godkänns visas +200 µl reagens på skärmen. Alternativt kan läsaren larma om oanvändbar temperatur, högt bakgrundsljus eller lågt ljus (blockerad strålgången). Med bakgrundsljus menas det ljus som finns i läsarens omgivning och som genom mätställets mynning tar sig till läsarens ljusdetektorer. Om detta bakgrundsljus är så högt att det äventyrar läsarens funktioner, larmar läsaren genom att omväxlande visa högt bakg-ljus och använd lock. Locket, det som med en kedja är fäst till läsaren, måste då placeras över mätställets mynning. Om inte så går inte analysen vidare utan nämnda meddelanden fortsätter att omväxlande visas. Då locket sätts på plats eller bakgrundsljuset av andra skäl minskar fullbordar läsaren sin självtest (autocheck) och kommer, vid lyckad testutgång, till det tillstånd där skärmen meddelar 200 µl reagens. Det är att veta, att har läsaren under dessa tidiga delar av analysförfarandet någon gång noterat hög bakgrund så kommer läsaren också senare att uppmana operatören till att använda lock. 3. Placera ett reaktionsrör i läsarens mätställe när 200 µl reagens visas på skärmen. Reaktionsröret fästs med bajonettfattning och dess propp avlägsnas. Om reaktionsröret med dess innehåll har lämpliga optiska egenskaper (ett tomt reaktionsrör eller ett med koagel har inte det) visas OK och 12 sek på skärmen. Den angivna tiden räknar ner mot 0 sek varefter processen går vidare. För att raska på processen, tryck på knappen inom de tolv sekunderna för att komma till analysens nästa skede. Om knapptryckningen uteblir, kommer detta nästa skede med automatik vid nedräkningens slut. Tryck inte på knappen just då nedräkningen når 0 sek, ty då blir nästa skede i analysen överhoppad. Det blir då aldrig något läge för tillsats av prov och läsaren kommer förgäves att söka efter tecken på blandning. Här som vid annan oönskad utveckling av analysprocessen kan analysen aborteras genom att hålla knappen intryckt i två sekunder. Detta försätter läsaren i det inaktiva läge som krävs för att börja om från början. Vid förflyttning av ett reaktionsrör från aluminiumblocket till mätstället ska röret hållas i den blå proppen. Undvik att beröra rörens nedre delar eftersom fingervärme påverkar reagensets temperatur. Meddelandet 10 µl prov & mix måste blinka på skärmen för att analysen ska kunna gå vidare. 4. Sätt en pipettspets, ZAF 101-6, på den vita pipetten, ZAF 101-4. Förankra spetsen väl med en liten vridrörelse. Då prov ska sugas in i spetsen ska luft först pressas ut genom att tycka ner pipettens kolv med tummen. Sedan förs spetsens mynning ner under provets yta och kolven tillåts, med en kontrollerad rörelse, återgå till sitt ursprungsläge. Att först föra pipettspetsens mynning under provets yta och sedan trycka ner kolven så att luft bubblar genom provet är fel då det inte överensstämmer med förfarandet som användes vid kalibrering. Av samma anledning är det fel att röra kolven upp och ner sedan spetsen mynning är under ytan. Vid uppsugning av blod från ett finger eller annan kroppsdel, håll spetsen i vinkel mot skinnet så att inte spetsens mynning blockeras. 5. Vinkla pipetten snett uppåt och torka pipettspetsens yttre ytor med ett adsorberande papper för att avlägsna rester av prov. Akta själva mynningen så att papperet inte suger ut prov ur spetsens inre. 6. För ner pipettspetsen med 10 µl provinnehåll intill reagenset ytan i reaktionsröret. Samtidigt som ena handens tumme trycker ner pipettens kolv för att deponera provet i reagenset trycker andra handens pekfinger på knappen för att starta tidmätningen (läsarens knapp och pipettens pistong trycks alltså ner samtidigt). Skölj sedan omedelbart pipettspetsen genom att c:a 4 gånger föra pipettens kolven upp och ner. Fortsätt omedelbart att blanda prov och reagens genom att rotera, vispa, pipettspetsen i blandningen. En blandningsindikator visas på skärmen. När den visar cirka 100%, skölj spetsen igen genom att cirka 3 gånger föra pipettkolven upp och ner. Fortsätt sedan att rotera spetsen i blandningen tills meddelandet pipett ur uppenbaras på läsarens skärm. Töm pipettspetsen och avlägsna spetsen ur strålgången. Tömningen är inte väsentlig för analysresultatet utan för prydlighet. Det viktiga är att blandningen av prov och reagens blir homogen. Observera att blandningsindikatorn inte opererar om ljuset i omgivningen är för starkt. Vid sådana tillfällen byts blandningsindikatorn mot en tidsnedräkning från 10 sekunder. 7. Sedan pipettspetsen avlägsnats ur reaktionsblandningen placeras omedelbart, helst inom 6 sekunder, läsarens lock, den som är fäst till läsaren med en kedja, över mätställets mynning. 8. Läsaren registrerar tiden då blandningen av prov och reagens koagulerar, klottar. Den tiden är klottingtiden. 9. När blandningen har klottat är analysen färdig. Displayen visar klott samtidigt som en bild av efterförloppet växer fram på displayen under 8 sekunder. Upprepade svarta staplar indikerar att koagulation verkligen ägt rum. Ett blankt efterförlopp eller bara någon enstaka svart stapel indikerar att detektorn är lurad av någon störning. 10. Tryck på knappen. Displayen visar plasm INR om provet är ett plasmaprov, EVF<10%. Om provet är blod visas kap INR, svaret för ett nativt, kapillärt blod taget till exempel från ett fingerstick. Ett tryck på knappen visar ven INR, svaret för ett blod som är antikoagulerat med citratlösning, till exempel taget genom ett venstick. 11. Tryck på knappen och koagulationstiden visas. 12. Tryck återigen på knappen och provets EVF visas. EVF bestäms här med tillräcklig precision och riktighet för god anpassning av PT svaret. Bestämningen är inte avsedd för laboratoriediagnostiskt bruk. 13. Stäng av, inaktivera, läsaren när som under analysens gång genom att hålla knappen nedtryckt i 2 sekunder. Läsaren inaktiveras också automatiskt om ingen aktivitet noteras under 10 minuter. En ny analys kan då påbörjas. 14. Gör en rimlighetsanalys av provsvaret. Om det är orimligt eller otroligt, till exempel atypiskt för personen (patienten) från vilken provet är taget, eller om svaret är utanför det terapeutiska målområdet, oftast INR 2 till 3, upprepa analysen för att säkerställa svaret. En skillnad mellan två på varandra utförda analyser som är större än 10% påkallar ytterligare analyser.

Utförande vid högt bakgrundsljus Vid tillfällen när omgivningens ljusintensitet är hög kan läsarens funktion störas. Om läsaren registrerar höga niver av bakgrundsljus instruerar den använd lock vid flera analysmoment. Ett av dessa är vid övergången mellan 200 L reagens och +10 L prov & mix! (läsaren registrerar där ett blankvärde). Ett annat är under sökandet efter koagel, ett läge som hur som ska ske med locket på. Vid högt bakgrundsljus är det ytterligare viktigt att använda lock. Därtill kommer en tidig registrering av högt bakgrundljus göra att läsarens program väljer att inaktivera rörelseindikatorn och ersätta den med en tio sekunders nedräkning. Det är naturligtvis lika viktig som alltid att blanda väl. Att tänka på: Reagens och läsare måste ha samma temperatur för att analysen ska bli korrekt. Därför ska reaktionsrör med reagens förvaras en god tid före analys, minst 15 minuter, i rörstället, aluminiumblocket, på läsarens baksida. Hantering av reaktionsrör bör ske med temperaturjämvikt i åtanke. Undvik att reagensröret är utan kontakt med läsaren under längre tid och undvik att överföra fingervärme till den del av reaktionsröret där reagenset finns. Ordentlig blandning av prov och reagens är en förutsättning för riktiga provsvar. Använd därför hela den tid som tillåts i mätningens början till en ordentlig blandning av prov och reagens. Blandning ska vara till homogenitet. Det är alltid möjligt att stänga av och starta om läsaren om något går fel under analysen. Håll knappen nertryckt i 2 sekunder. Om fel inträffar efter provtillsats är analysen räddningslöst förlorad och måste göras om från början. Läsaren måste stängas av, inaktiveras, och åter startas, aktiveras, mellan analyser. Håll knappen nertryckt i 2 s. När läsaren startas, aktiveras, skall strålgången vara tom. BEGRÄNSNINGAR Analys kan ej utföras utanför temperaturgränserna inte utanför temperaturområdet 17 till 45 C. Undvik direkt solljus. TOLKNING AV RESULTAT PT, protrombintid, uttrycks lämpligast i INR (Internationellt Normaliserad Ratio). INR är kvoten mellan klottingtiderna för prov och normal upphöjt till procedurens ISI-värde, se ref 1. PT enligt Owrens metod kallas även protrombinkomplexaktivitet och uttrycks i procent av normal. De två uttrycken är interkonvertibla, se ref 3. REFERENSVÄRDEN Normalområde, INR 0,92-1,20 (70-130%). Optimalt område vid blodförtunnande trombosprofylax, INR 2-3 (15-25%), ref 2. MÄTPRESTANDA Simple Simon PT mäter protrombintid med likartad noggrannhet som de metoder som används vid sjukhuslaboratorier. Känslighet för heparin och andra koagulationshämmande läkemedel i terapeutiska nivåer är begränsad, men inte noll. Typiskt är att PT-INR uppmätt i prover med terapeutiska nivåer av koagulationshämmare visar 10% högre nivåer än de PT-INR metoder som används på sjukhuslaboratorier. Interferenser är annars av samma typ och styrka som hos motsvarande sjukhusmetoder. STANDARDISERING Simple Simon PT levereras kalibrerad. Produkten kalibreras direkt eller indirekt med nationella kalibratorer från EQUALIS (ref 3). Kalibreringsförfarandet följer de rekommendationer som ges i Analyscertifikat för kalibratorer och kontrollmaterial för P-protrombinkomplex (INR) enligt Owren (EQUALIS Version 2.0). Vid indirekt kalibrering har använts citratantikoagulerade blodprover vars PT-INR värden är kända genom analys av provernas plasma med en sjukhusmetod som är kalibrerad med kalibreringsmaterial från EQUALIS eller DEKS. KONTROLLMATERIAL Kontrollmaterial till Simple Simon PT kan vara frystorkade kontrollplasmor, jämförande plasma eller blodkontroller. Kontroller kan typiskt vara av samma sort som ingår i laboratoriets ordinarie kvalitetssäkringssystem. Referenser 1. Besselaar A M H P van den. 1991. The significance of the International Normalized Ratio (INR) for oral anticoagulation therapy. JIFCC 3; 146-53. 2. Schulman S et al 1995. A comparision of six months of oral anticoagulant therapy after a first episode of venous thromboembolism. New Eng J Med 332; 1661. 3. Lindahl TL et al. INR calibration of Owren-type prothrombin time based on the relationship between PT% and INR utilizing normal plasma samples. Thromb Haemost. 2004 Jun; 91(6):1223-31. 4. Ranby M. Coagulation tests at ambient temperature. Patent applicant ZAFENA AB. International Application Number PCT/SE2004/000910, International Publication Number WO 2004/111656. 5. Ranby M. Hematocrit and analyte concentration determination. Patent applicant ZAFENA AB International Application Number PCT/SE2004/001798. Borensberg, 25 september 2006.