Nya biomarkörer för diagnostik av tidig ovarialcancer; studier på cystvätskor och blod Karin Sundfeldt Docent Kvinnokliniken Sahlgrenska Akademin vid Göteborgs Universitet
Ovarialcystor/cancer Diagnostik Gynekologisk undersökning Vaginalt ultraljud Blodprov CA125 Risk Malignity Index (RMI) CT / MR
Ovarial cystor
Ovarial cancer
Historia 2002 Lancet; 359, 572-77, Petricoin et. al. Mass spektrometri av serum 50+50 Data algoritmer fann mönster inom varje grupp Validering av algoritmen i 66+50 nya prover Specificitet 95%, sensitivitet 100% 2001 uppstart Sahlgrenska Etiskt tillstånd godkänt 2000 för enskilda markörer Tillägg 2006 - analys av hela proteomet i samarbetet med Vermillion Inc., CA, USA
Upplägg av studien Steg 1 Alla patienter som opereras för ovarialcysta på Kvinnokliniken, Sahlgrenskas avdelning för gynekologisk tumörkirurgi Cystvätska/Blod/Serum Tumör/Vävnads biopsi Fryses i -80 Avidentifieras efter säkert PAD + CA-125 svar
Metod svårigheter När ta proverna Hur lång tid tar det innan det fryses Reproducerbarhet Gruppstorlek
Varför cystvätskor? Outforskad källa för nya biomarkörer Närmast själva patologin Mycket höga nivåer av proteiner jämfört med serum Lätt tillgängligt men inte tillåtet? Nya mål för molecular imaging
Plasma Proteomet Albumin Apolipo-A1* IgG Transferrin* Fibrinogen IgA α2 macroglobulin IgM α1-at C3 Comp factor Haptoglobulin 10% Apolipo-B AGP Lipoprotein A Factor H Ceruloplasmin C4-Comp factor Comp factor B Pre-albumin C9-Comp factor C1q-Comp factor C8-Comp factor 1% Deep Proteome 1000-tals proteiner i små mängder H.J. Issaq, 2003 M.F. Lopez, 2000
Arbetsplan nya biomarkörer Steg 1 insamling av material 2002-2006 Steg 2-2006 Seldi-Tof MS Surface Enhanced Laser Desorption and Ionization Time Of Flight Mass Spectrometry Immunocapture MS Steg 3 - Utvärdering och intern validering Steg 4 - Extern validering prospektiv studie Steg 5 - Randomiserad kontroll studie
Specimen SELDI-ToF Mass Spectrometry Surface Enhanced Laser Desorption and Ionization Time Of Flight Mass Spectrometry Denature and dilute r 1 r 2 r 3 r 4 r 5 r 6 Robotics IMAC30 Q10 H50 CM10 Wash Internally mass calibrate, baseline subtract, and intensity normalize Spectral Analysis Protein peaks generated
SELDI ToF-MS Surface Enhanced Laser Desorption and Ionization Time Of Flight Mass Spectrometry Proteins are extracted from the ProteinChip Array by Laser Desorption/Ionization Ionized proteins are detected and their mass accurately determined by Time-of of-flight Mass Spectrometry Laser TOF-MS Intensity Detector Molecular Mass (Da)
Ovarian cancer in the proteomics era CM Annunziata, N Azad, AS Dhamoon, G Whiteley, EC Kohn Int. Journal of Gynecological Cancer 2008, Volume 18, supplement 1 Review
Patientdata - 2006 första omgången 220(207) patienter Benign Borderline EOC Germ Cell Tumor Other Cancer Number 130 16 48 3 10 Age (median, IQ range) 42 (30-52) 47 (40-61) 45 (32-51) 46 (20-73) 49 (27-52) Stage I 12 21 Stage II 1 2 Stage III 2 21 Stage IV 3
Resultat Steg 2-2006 700 toppar (arean under kurvan) signifikant (p<0.05) skilda mellan benigna cystor och ovarialcancer Baserat på signifikans nivå har 57 toppar valts ut för fortsatt analys Bland dessa var 7 stycken (p<10-10) högre i benign cystvätska och 2 stycken (p<10-10 ) mindre i benign cystvätska
Resultat Steg 2-2006 Patentansökan 60/908,670, 28 mars 2007 och bekräftad juni 2008. Titel: Methods for diagnosing ovarian cancer
Vad händer just nu Steg 3 Utvärdering och intern validering Analys av enskilda toppar/proteiner Re-analys av cystvätskor Analys i serum och tumörvävnad
Pågående diskussion Enskild biomarkör, flera markörer eller algoritm grupperingar TRIAGE test markörer och u-ljud och CA125
TACK för visat intresse Björg Kristjansdottir Doktorand Pernilla Dahm-Kähler Janusz Marcickiewicz Mats Brännström