Johan Benesch. Null Ellipsometry and Protein Adsorption to Model Biomaterials

HTML
DOWNLOAD

Storlek: px

Starta visningen från sidan:

Download "Johan Benesch. Null Ellipsometry and Protein Adsorption to Model Biomaterials"

Jakob Nilsson
för 9 år sedan
Visningar:

1 Johan Benesch Null Ellipsometry and Protein Adsorption to Model Biomaterials

2 Biokompatilitet Förmågan hos ett material att fungera med en väl avvägd värdrespons i en specifik tillämpning. Duffin 1991

3 Biomaterial Ett material som är avsett att gränsa till biologiska system för att utvärdera, läka, förstärka eller ersätta vävnad, organ eller kroppsfunktion.

4 Implantat. Nobel Biocare

5 Thomsen & Ericson 1991

6 Två frågor: Hur mycket? Vad? Γ -mängd d - tjocklek Serum eller plasma Biomaterialyta plasma = blod utan celler serum = plasma utan fibrinogen I, II, III & IV II & IV

7 Nollellipsometri Ljus, λ Polarisator Kompensator Analysator Prov Ljusets polarisationstillstånd

8 övergången från tjocklek till adsorberad mängd ej väl studerad 0-10nm 0-100nm

9 Arbete I Johan Benesch, Agneta Askendal och Pentti Tengvall Quantification of Adsorbed Human Serum Albumin: A Comparison between Radioimmunoassay and Simple Null Ellipsometry Colloids and Surfaces B: Biointerfaces 18(2):71-81, 2000

A Comparison between Radioimmunoassay and Simple Null

10 125 I och ellipsometri

11 Effekt av fryslagring

12 Slutsats - I N film ca 1.5 ger en bra uppskattning av adsorberad mängd protein upp till ett monolager. Fryslagring av isotopmärkta proteiner kan leda till en överskattning av mängden adsorberade proteiner, framför allt på hydrofoba ytor.

13 Arbete II Johan Benesch, Agneta Askendal och Pentti Tengvall The Determination of Thickness and Surface Mass Density of Mesothick Immunoprecipitate Layers by Null Ellipsometry and Protein 125 Iodine Labelling Journal of Colloid and Interface Science 249, 84-90, 2002

Immunoprecipitate Layers by Null Ellipsometry and Protein 125

14 AFM HSA 22 gånger anti-hsa N film = 1.5

15 125 I och ellipsometri Hög korrelation - dålig överensstämmelse!

16 Överensstämmelse adsorberad mängd (µg/cm 2 )

17 Slutsats - II N film = 1.5 ger en bra uppskattning av tjockleken på proteinfilmerna. N film = 1.5 i Cuypers formel ger inte en bra uppskattning av den adsorberade mängden. Orsaken till detta är oklar.

18 Thomsen & Ericson 1991

19 Komplement Klassisk IgG C1qrs Lektin MBL Alternativa Sackarider Del av: Immunförsvar Sårläkning Funktion: - Kemoattraktion - Anafylatoxiner - Opsoniserar celler - Lyserar celler C4 C2 MASP C3b C5b C6 C7 C8 C9 MAC D B P Förstärkningscykel

Kemoattraktion - Anafylatoxiner - Opsoniserar celler -

20 Tioester i C3 Hydrolys C3b C3 C3b O C S O C SH OH O C3b C SH NH O C3b C SH O Ytbunden C3b: Opsonin Komplementaktivering Amin Hydroxyl

21 Kontaktaktivering av koagulation Fibrinnätverk FXII flera steg! PKK KK Förstärknings loop (Autoactivation) FXIa FXI HMW K a FXIIa Negativt laddad yta HMW K a

22 Arbete III Johan Benesch, Sofia Svedhem, Stefan C T Svensson, Ramūnas Valiokas, Bo Liedberg och Pentti Tengvall Protein Adsorption to Oligo(Ethylene Glycol) Self Assembled Monolayers: Experiments with Fibrinogen, Heparin Plasma and Serum Journal of Biomaterials Science Polymer Edition 12 (6): , 2001

23 Tiol-alkan-amid-etylenglykol H HS ( ) 15 O N ( ) O H n Sofia Svedhem SAM Guldyta

24 Protein adsorption

25 Stark inbindning av C3 till yta? C3b O C SH O

26 Slutsatser - III Studier för att avgöra om en biomaterialyta är resistent mot proteinadsorption bör inte göras med en-protein-system! Få protein från fibrinogen-lösning fastnar, mycket proteiner från serum och plasma, dessutom kan då komplement aktiveras eller opsonisera ytan!

27 Arbete IV Johan Benesch och Pentti Tengvall Blood Protein Adsorption onto Chitosan Biomaterials 23 (12) , 2002

28 Kitosan - Kitin OH O HO O NH O HO NH 2 O OH O GlcN β (1-4) GlcNAc

29 ph studie Kitosan på yta

30 Serum

31 Anti-C3c

32 Plasma

33 Anti-fibrinogen

34 Slutsats - IV Acetylerad kitosan är en stark aktivator av den alternativa komplentkaskaden. Fibrinogen från plasma binder in till kitosan, dock inte då det är acetylerat. Genom att styra graden av acetylering kanske aktiveringen av komplement och adsorptionen av fibrinogen kan moduleras!

35 Jag vill rikta ett särskilt tack till er som varit nära involverade i mina projekt. Pentti Tengvall Agneta Askendal Sofia Svedhem Stefan Svensson Bo Liedberg Ramunas Valiokas

36 Till alla här idag: Skoj att ni kunde komma!