Rapport från 2018 års ringtest för kliniska mastiter SAMMANFATTNING I år deltog 50 arbetsplatser vilket glädjande nog är högsta deltagandet hittills. Vi fick in svar från nästan 100 deltagare och 41 arbetsplatser. Överlag var resultaten mycket bra men variationen var stor, troligtvis på grund av att flera deltagare haft problem med blandflora. Förvånansvärt många, 34 procent, svarade fel på Staphylococcus aureus med dubbelhemolys och gult omslag på saltmannitol. Återigen kan vi konstatera att Cefinasetesten är svårt att tolka och ger falskt negativa resultat. Tyvärr har flera deltagare haft problem med blandfloror i proverna vilket har försvårat bedömningen. ALLMÄNT Ringtesten bestod av fem simulerade mjölkprover (frystorkade ampuller och rör med mjölk) innehållande mastitpatogener. Proverna skickades ut till 50 arbetsplatser och 235 deltagare. Totalt svarade 97 deltagare från 41 arbetsplatser. PROV 1 - STAPHYLOCOCCUS AUREUS, PC+ Stammen var en penicillinresistent Staphylococcus aureus med dubbelhemolys som växte med gult omslag på saltmannitol. Stammen verkar enligt svaren ha gett dåligt utslag på agglutinationstester för Stapylococcus aureus. 66 procent svarade mycket riktigt att det var en Staphylococcus aureus och 13 procent att det var en koagulasnegativ stafylokock. Staphylococcus species gav 1 poäng och Staphylococcus aureus 2 poäng. 1
Betahemolysen syns när man vinklar plattan mot ljuset. Svarsfördelning prov 1 - Staphylococcus aureus 4% 4% 2% 2%1% Staphylococcus aureus 8% 13% 66% KNS Streptococcus species Enterococcus species Övrig Jäst 2
Prov 1 - Cefinase-test 54 procent av de som utförde cefinasetesten svarade mycket riktigt att stammen var positiv och 46 att den var negativ. Cefinasetesten var otydlig och syntes bara som små prickar. Det här visar återigen hur svårt det är att tolka cerinasetesten och att många stammar tyvärr blir falskt negativa. Det man kan göra för att öka testens känslighet är att alltid inkubera testen i 60 minuter innan slutavläsning och att ha med en positiv och negativ kontroll för att jämföra med. Rätt svar gav 1 poäng. Svarsfördelning, cefinase-test 54% 46% Penicillinas negativ Penicillinas positiv 3
PROV 2 ESCERICHIA COLI Prov två innehöll en Escherichia coli som kolonimässigt var lite mer Klebsiellaliknande än de brukar vara. Stammen växte med rosa kolonier och grumling av MacConkey-agarn. Hela 87% svarade mycket riktigt E coli. 13 procent hade svarat att stammen var en Klebsiella. Rätt svar E coli gav 2 poäng och Klebsiella gav 1 poäng. Svarsfördelning prov 2 - Escherichia coli 8% 2% 2%1% Escherichia coli Klebsiella spp 87% Staphylococcus species 4
PROV 3 BACILLUS CEREUS Tredje provet innehöll Bacillus cereus som är en grampositiv bakterie som enbart växer på blodagarfältet. Kolonierna blir ofta utflytande och matta med oregelbunden kant och klar hemolys. 48 procent hade svarat Bacillus species och hela 21 procent hade svarat jästsvamp. Jäst växer ofta helt utan hemolys och med mindre kolonier oftast vitare kolonier. Bacillus species gav 2 poäng. Bacillus - utflytande matta kolonier med oregelbunden kant och ofta klar hemolys. Svarsfördelning prov 3 - Bacillus species Bacillus species 4% 4% 2% 2% 1%1% Jäst Övrig 11% 6% 48% Klebsiella spp Streptococcus species 21% Trueperella pyogenes (fd Arcanobacterium) Enterococcus species Pasteurella species 5
PROV 4 STAPHYLOCOCCUS SIMULANS (KNS), PC- Prov nummer fyra innehöll en penicillinkänslig Staphylococcus simulans som är en koagulasnegativ stafylokock. Staphylococcus simulans är en av de KNS-arter som inte är helt ovanliga i samband med kliniska mastiter. Stammen växte med gult omslag på saltmannitol men hade ingen hemolys och har mycket vitare kolonier än var Staphylococus aureus brukar ha. 62 procent hade angivit rätt svar, KNS, och 10 procent svarade Enterococcus species. Staphylococcus species gav 1 poäng och koagluasnegativ stafylokock ytterligare 1 poäng. Den här stammen av Staphylococcus simulans växte med gult omslag på saltmannitol. S simulans har mycket vitare kolonier än Staphylococcus aurues och saknar i stort sett alltid hemolys. 6
Svarsfördelning prov 4 - Staphylococcus simulans 6% 4% 1%1%1% Koagulasnegativ stafylokock Enterococcus species 6% Jäst Streptococcus species 9% 10% 62% Staphylococcus aureus Escherichia coli Övrig Svarsfördelning, cefinase-test 5% Prov fyra - Cefinase-test Stammen var penicillinasnegativ och det svarade mycket riktigt 95% av de som utförde testen. Rätt svar gav 1 poäng. 95% Penicillinas negativ Penicillinas positiv 7
PROV 5 - STREPTOCOCCUS DYSGALACTIAE Prov nummer fem innehöll en av de vanligaste mastitstreptokockerna Streptococcus dysgalactiae. Stammen växer bara på blodagar och med alfahemolys. 80% svarade att det vare en streptokock och av dem angav 55% mycket riktigt att det var en Streptococcus dysgalactiae. I fält är det svårt att skilja mellan olika streptokocker och poängen blev därför 1 poäng för Streptococcus species och 1 poäng för svar S dysgalactiae, S uberis, S övrig men inga poäng för betahemolyserande streptokock eller S agalactiae. Dysgalactiae växer ofta med distinkta kolonier omgivna av alfahemolys. De kan ge ett orent intryck och blir ofta navlade efter två dagars odling. Svarsfördelning prov 5 - Streptococcus dysgalactiae 2%1%1%1% 2% 2% Streptococcus species 5% 6% Staphylococcus species Escherichia coli Klebsiella spp Enterococcus species 80% Pasteurella species Trueperella pyogenes (fd Arcanobacterium) 8
Antal deltagare Svarsfördelning inom streptokocker 9% 1% Streptococcus dysgalactiae 15% Övrig streptokock Streptococcus uberis 55% Betahemolyseran de streptokock 20% Streptococcus agalactiae RESULTAT Varje prov kunde ge två poäng. För både streptokocker och stafylockocker gällde att man fick en poäng för att det var en stafylokock alternativt streptokock och ytterligare en poäng om man kunde typa den ytterligare. Godkända penicillinadstester kunde ge ytterligare 1 poäng vardera. Den totala poängsumman som gick att få var 12 poäng. Hela 14 deltagare hade alla rätt och tyvärr hade flera deltagare ganska låga poäng mycket till följd av att det har varit problem med blandfloror i proverna. Fördelning av poäng mellan de som har svarat: Resultatfördelning 18 12 13 14 9 8 7 2 3 2 4 4 0 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Totalpoäng 9