COMPARATIVE STUDY OF HYDROLYSIS PERFORMED WITH MODERN MICROWAVE TECHNIQUE AND THE TRADITIONAL METHOD
|
|
- Vilhelm Mattsson
- för 8 år sedan
- Visningar:
Transkript
1 Institutionen för medicinsk biokemi och mikrobiologi Biomedicinska analytikerprogrammet Examensarbete, 15 hp COMPARATIVE STUDY OF HYDROLYSIS PERFORMED WITH MODERN MICROWAVE TECHNIQUE AND THE TRADITIONAL METHOD Seid Hosen Seid Tahir Ethos1 Gallenkamp Handledare: Bo Ek Institutionen för biokemi och organisk kemi 1
2 ABSTRACT Proteins are vital to all cells in the body. They consist of long chains of amino acids. To be able to study the amino acid composition of a protein it is necessary to hydrolyse it, followed by separation and quantification. When the protein is hydrolysed, in this case ß-lactoglobulin, the protein is divided into individual amino acids. The method that traditionally has been used to hydrolyse proteins takes hours to complete. Recently a new microwave heating technique was introduced. With the Ethos1 microwave oven it takes less than one hour to hydrolyse proteins. The objective of this study was to see if the result of the hydrolysis with the new microwave oven technique had the same quality as the previously used method. If the microwave technique can hydrolyse proteins with as good results as the old oven, then it will significantly reduce test turnaround times. The result of this study indicates that the microwave technique is just as reliable as the older method, and thus a good and time saving alternative. KEYWORDS: Hydrolysis; Amino acids; Protein; Microwave 2
3 1. INTRODUKTION Proteiner utgör, efter vatten, största delen av cellens innehåll. Namnet protein kommer från grekiskans proteios som betyder det första eller förnämsta (Nylander, 1997). Proteiner ingår i kroppens alla celler. Ofta beskrivs protein därför som en av kroppens byggstenar. De behövs för tillväxt och underhåll av kroppen. Proteiner är viktiga beståndsdelar i muskler, men har även andra viktiga funktioner. Nästan alla hormoner och alla enzymer är proteiner, vilka spelar roll i en mängd olika processer i kroppen. Flera ämnen måste vara bundna till proteiner för att kunna transporteras i blodet. Exempel på det är hemoglobin som transporterar syre och lipoproteiner som bär med sig fett. Protein har således nödvändiga uppgifter i kroppen som inte kan ersättas av andra ämnen. De kan också vara en energikälla, vid sidan av kalorier (energi) från kolhydrater och fett. Proteiner har alltså många uppgifter i kroppen och finns i nästan alla livsmedel. Kroppen behöver under en dag tillföras alla aminosyror den inte kan göra själv. Detta är de så kallade essentiella aminosyrorna och de är totalt åtta stycken. Resten kan kroppen göra själv efter behov och de kallas därför icke-essentiella. Proteiner är uppbyggda av långa aminosyrekedjor. Aminosyror är karboxylsyror innehållande minst en aminogrupp samt en R-grupp som ger aminosyran dess identitet. Aminosyror kopplas samman och bildar polypeptider. Ändarna på peptider kallas N-terminal (aminogrupp) och C-terminal (karboxylgrupp). Varje aminosyra är sammanfogad med nästa genom en peptidbindning. Peptidbindningen uppstår då karboxylgruppen på en aminosyra reagerar med aminogruppen på en annan aminosyra. På så vis utgörs polypeptidkedjan, proteinets ryggrad, av en α-kol bundet till en amidgrupp bundet till nästa α-kol etc. Ett protein består av en eller flera sådana polypeptidkedjor. För varje protein är sammansättningen av aminosyror och ordningsföljden av dessa unik. Proteiner delas in i fiberproteiner och 3
4 globulära proteiner. Fiberproteinerna har en trådig form och de globulära proteinerna har en rundare form. Aminosyraanalys betraktas som det säkraste sättet att koncentrationsbestämma proteiner och peptider. Det finns flera metoder t.ex. absorbansmätning inom UV-området, men metoden kräver ett relativt rent material eftersom t.ex. även nukleinsyror absorberar UVljus. Proteinets sammansättning kan också påverka vilken våglängd som måste användas. Lowry och BCA (Bicinchoninic acid) använder sig av kopparjoner och är beroende av mängden peptidbindningar och aromatiska aminosyror. Bradfordmetoden baseras på proteinbindning av Coomassie Brilliant Blue till främst arginin och lysin varvid absorbtionsmaximum ändras. För båda metoderna gäller att resultatet blir olika för varje protein, då de innehåller olika antal av nämnda aminosyror. En standardkurva med det protein man mäter och ett rent protein är nödvändiga för att få tillförlitliga resultat med de metoderna. Vid aminosyraanalys degraderas provet till aminosyror och mängden av varje komponent bestäms m.h.a. kromatografi. Den metoden har inte de begränsningar som ovanstående metoder har och är därför den mest noggranna metoden. Aminosyraanalys består av tre delar, hydrolysering av proteinet man vill studera, kromatografisk separation, samt detektion och kvantifiering av de fria aminosyrorna. Hydrolys är en nedbrytningsprocess där proteinet bryts ner när vattenmolekyler adderas. Den kan, när det gäller proteiner, antingen vara katalyserad av hydroxoniumjoner (syra) eller hydroxidjoner (bas). I den här studien användes syrakatalyserad hydrolys. För att en analys ska bli korrekt måste hydrolysen vara väl genomförd (Fountoulakis och Lahm, 1998), d.v.s. för att kunna lita på den påföljande aminosyraanalysen måste man veta att proteinet verkligen har hydrolyserats fullständigt eller att utbytet av de frisatta enskilda aminosyrorna är känt. Man vet t.ex. att utbytet av serin är 90% under standardbetingelser och kan då kompensera mätvärdet i motsvarande grad. 4
5 Ett viktigt område för aminosyraanalyser är halt- och renhetsbestämning av utgångsmaterial för peptidsyntes inom t. ex läkemedelsindustrin. Detta krävs i vissa fall av FDA (Federal Drug Agency) i USA, för att godkänna en produkt baserad på aminosyraderivat (Bo Ek, muntlig kommunikation, 2011). Ett annat användningsområde är möjligheten att mäta andelen bindningsmedel i kött- och charkuteriprodukter. Många europeiska länder har en gräns för hur mycket bindningsmedel kött- och charkuteriprodukter får innehålla. Proteinet kollagen utgör en stor del i de bindningsmedel som används och kollagen innehåller en hög halt av aminosyran hydroxyprolin. Andra muskelproteiner innehåller så gott som inget hydroxyprolin, vilket gör att man kan bestämma andelen bindningsmedel genom att analysera produkten för hydroxyprolin (Engelhart, 1990). Olika hydrolysmetoder används även för att ta hand om slam på ett så effektivt sätt som möjligt. Davidsson et al. (2008) har utvärderat olika hydrolysmetoder för ändamålet, men kunde inte utse en enskild metod som bättre än någon annan då det fanns flera variabler som påverkade resultatet. Olika hydrolysmetoder lämpade sig därför bäst vid olika förhållanden. Enzymatisk hydrolys av mjölkprotein har länge använts för att framställa t.ex. produkter för spädbarn med mjölkproteinsallergi eller medfödda metabola funktionsnedsättningar (Abu-Tarbush och Ahmed, 2005) t. ex. fenylketonuri (PKU), som är en medfödd metabol sjukdom orsakad av att enzymet fenylalaninhydroxylas inte fungerar. Som ett resultat av detta kan den essentiella aminosyran fenylalanin inte konverteras till tyrosin utan ackumuleras istället i kroppen (ten Hoedt et al., 2011). Enzymatisk hydrolys är vanlig inom livsmedelsindustrin för att spjälka ut protein ur växter, fördelen med enzymatisk hydrolys när det handlar om livsmedel är att det går att använda sig av enzymer som bryter peptidkedjorna på specifika ställen. På så vis förhindrar man att peptidkedjorna bryts ner i alltför små enheter eller blir till fria aminosyror. Små peptider kan nämligen ge en bitter smak som inte är önskvärd för livsmedel (Hrcková, 2002). Enzym kan inte användas när man vill 5
6 bryta alla peptidbindningar, varför syrakatalyserad hydrolys som ger större andel fria aminosyror användes i det beskrivna arbetet. På Aminosyraanalyscentralen vid Uppsala Universitet görs bestämningar av mängden eller halten av olika aminosyror i olika typer av proteinhaltiga prover. För att frigöra aminosyrorna så att de kan analyseras hydrolyseras först provet. Hydrolys sker traditionellt enligt en beprövad metod, i 6M HCl under 24 timmar i luftevakuerade rör för att minimera risken för oxidation av aminosyrorna. Det gamla klassiska sättet, på vilket man utfört proteinhydrolys under de senaste 50 åren, innebär att proverna upphettas till 110 o C under timmar i närvaro av saltsyra (HCl), som är den vanligaste metoden. Hydrolys kan dock även utföras i närvaro av en basisk lösning (vanligast NaOH eller KOH) eller med en enzymatisk nedbrytningsmetod (Fountoulakis och Lahm, 1998). Efter analysens slutförande kan man jämföra mängden faktiska aminosyror i provet med den kända sammansättningen av aminosyror och således kan man räkna fram mängden av exempelvis ett protein eller en peptid i utgångsprovet, vilket är det tillvägagångssätt som vi valt i den här studien. 24-timmars hydrolys är en mycket tidskrävande process och proverna hanteras manuellt ett och ett. Därför vore en alternativ, effektivare, metod mycket värdefull. Genom att använda sig av mikrovågor vid upphettningen av provet och dessutom hetta upp till en högre temperatur kan man förkorta hydrolystiden från 24 timmar till under en timme, vilket skulle spara mycket arbetstid. Proteinhydrolys för aminosyreanalys med hjälp av mikrovågsteknik rapporterades för första gången 1987 och har utvecklats sedan dess. Mikrovågstekniken har i tidigare studier visat sig vara jämförbar eller överlägsen den traditionella 24-timmars hydrolystekniken (Engelhart, 1990 och Margolis et al., 1991). Andra studier visar att mikrovågstekniken inte håller samma standard som den traditionella metoden (Weiss et al., 6
7 1998). Syftet med denna studie var att undersöka om man får samma resultat med mikrovågsteknik som med den traditionella 24-timmars proteinhydrolysen som hittills använts vid Aminosyraanalyscentralen vid Uppsala Universitet. För den nya mikrovågsbaserade analysen användes ett kommersiellt instrument kallat Ethos1 som är relativt nytt på marknaden. Proteinet som valdes till analys i den jämförande metodanalysen var ß-lactoglobulin. ß-Laktoglobulin är det vanligast förekommande vassleproteinet i komjölk. Det tillhör lipocalin-proteinfamiljen och är en av de huvudsakliga allergenerna i mjölk (Rytkönen et al., 2006) samtidigt som det har ett högt näringsvärde jämfört med andra protein, eftersom det har ett högt innehåll av essentiella aminosyror och är relativt lättsmält (Sindayikengera and Xia, 2006). ß-Laktoglobulin är dock inte helt lätt att hydrolysera (Rytkönen et al., 2006), anledningen till valet var att dess sammansättning av aminosyror är välkänd och man vet hur utbytet av respektive aminosyra ser ut. 7
8 2. MATERIAL OCH METODER 2.1 Hydrolys med den äldre metoden. Vid analys enligt den äldre metoden började man med att rista namn på glasrören med en tandläkarborr. Sedan vägdes 5,0 mg ß-laktoglobulin upp och fördes försiktigt över till röret och den exakta vikten antecknades. Proteinet blandades med 2 ml 6M HCl och 1000 nmol norleucin. Proven vortexades tills de blev grumliga, då var proven riktigt blandade med saltsyran. En gasolbrännare användes för att smälta provrörshalsarna som sedan drogs ut som i figur 1. Figur 1 Figuren illustrerar hur man drar ut en provrörshals med svetslåga. Proverna frystes till is med hjälp av kolsyreis vid - 78,5 C, därefter inkuberades provrören i vakuum i 10 minuter. När alla provrören var luftevakuerade slutsvetsades de utan att luft släpptes in (figur 2). 8
9 Figur 2 Ett slutsvetsat provrör. Till slut placerades de slutsvetsade provrören i ugnen för hydrolys i 24 timmar vid 110 o C. Efter exakt 24 timmar öppnades rören genom att en skåra ristades ca 1 cm från toppen (se figur 3). En glasstav värmdes och sattes mot skåran så att röret sprack. Figur 3 Illustrerar hur man ristar en skåra runt ett provrör efter hydrolys. 9
10 När provröret öppnats smältes den vassa kanten på den översta delen av röret så att den blev rund. När alla dessa moment var klara så var hydrolysen klar, men för att veta vad man har i provröret så måste man utföra en analys i en aminosyraanalysator. Innan man kan göra den analysen måste proverna vara totalt fria från saltsyra (HCl), och därför genomfördes en evakuering (indunstning) av saltsyra Indunstning av saltsyra med Rotavapor RE 111 Vid indunstning av saltsyra kontrollerades att vattenbehållaren var fylld med vatten, inställd på 55 o C samt att det fanns is i isbehållaren. Provrören monterades i munstycket med sex provrörsplatser (se figur 4). Figur 4 Evakuering av saltsyra. Sedan öppnades tryckluftkranen helt, vattenpumpen startades och därefter stängdes luften långsamt så att proverna inte stötkokade. Proverna indunstades till torrhet. Nästa steg innefattade att lösa proverna i buffert för analys i aminosyraanalysatorn. 10
11 2.1.2 Upplösning av proven Proverna löses i en lämplig volym provbuffert. Provbufferten utgjordes av 0,2M natriumcitratbuffert, ph 2,2. I de presenterade analyserna löstes proverna i 2ml buffert och centrifugerades i 2 minuter vid 450g. Proverna överfördes till vialer och centrifugerades i 4 minuter på 16000g. Därefter laddades aminosyraanalysatorn Biochrom med prov, och det efterföljande analyssteget tog ca 1 timme per separation. 2.2 Hydrolys med Ethos1 Ett hydrolysprotokoll för prover som är rena proteiner enligt MODDE experimentdesign användes (se tabell 1). Programmet MODDE experimentdesign används dels för att få en optimal körningslista och dels för att analysera resultat så att optimala betingelser kan utvärderas och reproducerbarhet kontrolleras. De fyra viktiga faktorerna vid aminosyraanalys är vikt (mg), temperatur ( o C), volym (ml) och tid (minuter). Jag genomförde elva analyser (N1 till N11) där värdena för volym, tid och temperatur varierades (se körningslistan i Tabell 1). Tre av körningarna är dubbletter: N9, N10 och N11. Dubblett görs för att se reproducerbarhet d.v.s. om ett prov som körs under samma betingelser genererar samma resultat vid flera tillfällen har metoden hög reliabilitet. 11
12 Tabell 1 Schema från MODDE experimentdesign. Numme r Namn Analysordning Vikt (mg) Temper atur ( o C) Tid (mi n) Volym (ml) 1 N1 10 0, ,2 2 N N3 6 0, N ,2 5 N5 2 0, N ,2 7 N7 5 0, ,2 8 N N9 7 2, N10 3 2, N11 1 2, , 5 32, 5 32, 5 1,1 1,1 1,1 Vakuumpumpen förbereddes genom att kolsyreis tillsattes behållaren med alkohol. Ett provrör i taget preparerades enligt schemat i tabell 1. Proteinet blandades med 2ml 6M HCl och 1000 nmol norleucinbuffert. Proverna vortexades tills de blandats med saltsyra. Vid användning av mikrovågsugnen Ethos1 behövde glasrören inte smältas ihop, utan korkades bara igen. Därefter förbereddes behållare A med 3ml 6M HCl. Provrören placerades i behållare B som har 8 platser. Därefter placerades behållare B i behållare A och monterades i 12
13 sin tur i behållare C (se figur 5). Sedan skruvades locket på ordentligt och termostaten monterades på plats. Figur 5 Ethos1s olika behållare. A är behållaren där man häller i saltsyra och sedan placeras den i behållare B. B är behållaren för proverna och slutligen placeras behållare A+B i behållare C där själva hydrolysen sedan äger rum. Ethos1 har en touch screen där man kan programmera körningar efter tid och temperatur. Vid programmering av Ethos1 ställdes starttiden in på 10 minuter och temperaturen på 180 o C vilket innebar att temperaturen gick från rumstemperatur till 180 o C på 10 minuter. Körningstiden programmerades till 45 minuter i 180 o C. Innan hydrolysen startades evakuerades luften. Vakuumpumpen startades och när all luft evakuerats startades programmet. Under hydrolysens gång kunde körningen följas genom att temperaturen och hur lång tid som var kvar av hydrolystiden visades på displayen (se figur 14). När hydrolysen var klar kyldes proverna snabbt ner genom att vattenkranen som fanns monterad till Ethos1 öppnades. När 13
14 temperaturen visade under 70 o C var det klart att öppna och ta ut proverna. Hydrolysen var därmed klar och nästa steg var att evakuera saltsyran. Enligt tillverkaren skall man kunna torka proverna till torrhet i Ethos1 genom att programmera ett tredje steg för torkning. I denna studie torkades dock inte proverna i Ethos1, utan alla prover indunstades som beskrivs i stycke Separation av aminosyror i Biochrom Biochrom 3a användes för att analysera samtliga prov, både de som hydrolyserats med den äldre metoden och de som hydrolyserats med mikrovågstekniken. Aminosyranalysen utfördes med postkolumnderivering av aminosyrorna med hjälp av ninhydrin, vilket är en pålitlig metod (Klotz och Higgins, 1991). Metoden bygger på katjonbyteskromatografi och absorbansen mättes vid två våglängder, 440 nm och 570 nm då prolin detekteras bäst vid 440 nm medan övriga aminosyror detekterades vid 570 nm. Jonbytaren i aminosyraanalysatorn regenerererades genom att 0,4 molar NaOH i 90 C pumpades igenom så att hela systemet tvättades rent. Steg två kallas för jämviktning då buffert 1 (startbuffert) fylldes på i alla buffertbehållare och analysatorn kördes med bara buffert, så att systemet nollställdes. Här blandas nivåerna. 0,4M NaOH körs vid varje kromatografi för att säkerställa att kolonnen är ren. Varje set av analyser innehåller en blankkörning, en standard och sedan prover. Vid steg tre kördes analysatorn med en standard för att kalibrera systemet. I standarden ingår en känd koncentration av alla aminosyror. Slutligen analyserades β- laktoglobulinproverna från de båda olika hydrolysmetoderna. 14
15 mvolts mvolts 3. RESULTAT Vid jämförelsen mellan mikrovågstekniken och den äldre metoden för bestämning av aminosyrakonposition i β-laktoglobulin visade den äldre hydrolysmetoden förväntade resultat, vilket ses i Tabell 2, där aminosyrorna som detekterades i provet presenteras, samt jämförs med mängden av respektive aminosyra som angetts av tillverkaren som ska leda till/bli en databas typ SwissProt. Aspargin hydrolyserades totalt till asparaginsyra och glutamin till glutaminsyra men aminosyrorna isoleucin, valin och några till blev inte hydrolyserade till 100%. Dessa kräver upp till 72 timmar när man använder den äldre 24-timmars metoden (Irvine, 1994) (se även figurerna 6-8) Cys A Nle NH (Mes02) Pro Gly Cys Met Thr Ser Ala Ile Glukosamin/B-ala Tyr Phe Galaktosamin S-Bzl-Cys Hy-Lys Trp His Arg Val Asp Lys Glu Leu nm N5 B-lac Seid Name Retention Time Minutes Figur 6 Ett kromatogram av hydrolyserat β-laktoglobulin med 570nm detektion, 24 timmars hydrolys med äldre metod.
16 mvolts mvolts Gly Ala NH3 Thr Ser Ile Leu Nle Tyr Phe Arg Cys A Asp MeSO2 Glu Pro Val Met mvolts mvolts His Lys Cys nm std Name Figur 7 Ett kromatogram av hydrolyserat β-laktoglobulin med 440nm detektion, 24-timmars hydrolys med äldre metod. Minutes Cys A Mes Val Pro (Glukosamin/B-ala) (Galaktosamin) (S-Bzl-Cys) (Hy-Lys) (Trp) NH Arg Ala Glu Gly Tyr Phe Nle Thr Ile Leu Asp Ser Cys Lys Met His nm std1 Name Retention Time Minutes Figur 8 Ett kromatogram av standardblandning av aminosyror, 24-timmars hydrolys med äldre metod.
17 Tabell 2 Analysresultatet från Biochrom för β-laktoglobulin, 24-timmars hydrolys med äldre metod β-laktoglobulin Norleucin Tillverkarens Analyserade 5 mg Normaliserat värde Avvikelse aminosyror Värde (mg) (mg) (mg) Aspargin 9,51 15, ,64 Treornin 4,90 8,06 8 0,06 Serin 4,12 6,77 7-0,23 Glutamin 16,40 26, ,98 Glycin 2,54 4,17 4 0,17 Alanin 9,73 16, ,00 Cystein 0,15 0,25 5 4,75 Valin 5,55 9,12 9 0,12 Metionin 2,43 4,00 4 0,00 Isoleucin 5,41 8, ,11 Leucin 14,20 23, ,35 Tyrosin 2,47 4,07 4 0,07 Fenylalanin 2,55 4,20 4 0,20 Histidin 1,20 1,98 2-0,02 Lysin 9,43 15, ,50 Arginin 1,82 3,00 3 0,00 Antal aminosyror i nmol, korrekt värde enligt proteinets tillverkare och, i de två sista kolumnerna, den uträknade skillnaden mellan analysvärdet och tillverkarens uppgivna värde.
18 mvolts mvolts Ethos1 mikrovågsmetod gav likvärdiga resultat, vilket visas i Tabell 3. Där kan man se vilka aminosyror som finns och hur mycket av dem man har. Figur 9 visar topparna på de flesta av aminosyrorna vid 570 nm och figur 10 visar topparna på prolin vid 440 nm. Figur 11 visar standarden. Ju högre toppar det blev desto större andel av den aminosyran fanns i proteinet som hydrolyserats Cys A NH3 Pro Gly Thr Ser Cys Nle Met Asp Ile Glu Ala Val Leu Tyr Glukosamin/B-Ala Phe Galactosamin His Trp Arg Lys nm N6 B-lac2 Seid d871.dat Name Retention Time 570nm buffert D494.dat Minutes Figur 9 Kromatogram av β-laktoglobulin med 570 nm detektion, efter hydrolys med Ethos1.
19 mvolts mvolts Minutes Figur 10 Ett kromatogram av hydrolyserat β-laktoglobulin med 440nm detektion, med Ethos Cys A Mes Val Pro (Glukosamin/B-ala) (Galaktosamin) (S-Bzl-Cys) (Hy-Lys) (Trp) NH Arg Ala Glu Gly Tyr Phe Nle Thr Ile Leu Asp Ser Cys Lys Met His NH3 Cys A (MeSO2) Gly Thr Ser Pro Ala Met Ile Nle Cys Val mvolts Asp Leu mvolts Glu (Glukosamin/B-Ala) Tyr Phe (Galactosamin) (S-Bzl-Cys) (Hy-Lys) His (Trp) Arg Lys nm N6 B-lac2 Seid d871.dat Name nm std1 Name Retention Time Minutes Figur 11 Ett kromatogram av standardblandning av aminosyror, med Ethos1.
20 Tabell 3 Analysresultatet från Biochrom för hydrolys av β-laktoglobulin med mikrovågsteknik β-laktoglobulin Norleucin Tillverkar Analyserade 5 mg Normaliserat ens värde Avvikelse aminosyror Värde (mg) (mg) (mg) Aspargin 9,55 15, ,92 Treonin 4,42 7,37 8-0,63 Serin 3,51 5,86 7-1,14 Glutamin 15,34 25, ,57 Glycin 1,78 2,97 4-1,03 Alanin 8,51 14, ,82 Cystein 1,75 2,91 5-2,09 Valin 5,44 9,06 9 0,06 Metionin 2,40 4,00 4 0,00 Isoleucin 4,81 8, ,97 Leucin 13,18 21, ,03 Tyrosin 2,28 3,80 4-0,2 Fenylalanin 2,34 3,90 4-0,1 Histidin 1,08 1,79 2-0,21 Lysin 8,80 14, ,33 Arginin 1,62 2,71 3-0,29 Antal aminosyror i nmol, korrekt värde enligt proteinets tillverkare och, i de två sista kolumnerna den uträknade skillnaden mellan analysvärdet och tillverkarens uppgivna värde.
21 Stapeldiagrammet i figur 12 visar en jämförelse mellan värdena från respektive hydrolysmetod; den äldre metoden och den nya mikrovågstekniken, samt de värden som enligt tillverkaren är korrekta. De olika metoderna visar att mikrovågsugnen Ethos1 har hydrolyserat proteinet lika bra eller bättre än den äldre 24-timmarsmetoden. Figur 12 Stapeldiagrammet som visar resultatet efter hydrolys av β-laktoglobulin med rutinmetoden (blå), Ethos1 (röd) och tillverkarens angivna värde (grön).
22 4. DISKUSSION Under de senaste 50 åren har aminosyraanalys varit en tidskrävande process med många manuella moment samt en lång hydrolys om 24 timmar. Med mikrovågstekniken kan processen förenklas betydligt, både genom att vissa av de manuella momenten inte behöver genomföras samt att hydrolysen endast tar en timme med mikrovågsteknik. Målet med studien var att utvärdera effektivitet för mikrovågsugnen Ethos1 jämfört med den äldre 24-timmarsmetoden. Bedömningskriterierna var om Ethos1 uppfyller kvalitetskraven för hydrolysen och om tidsvinsten var tillräckligt stor. Resultatet från aminosyraanalys efter hydrolys med den äldre metoden, se tabell 2, visade låg variation mellan korrekt värde enligt proteintillverkaren och norleucin-normaliserat värde för de flesta aminosyrorna. Hydrolys med Ethos1 visade lika bra resultat som med den äldre metoden, se figur 12, och uppvisade också god överensstämmelse med värdet som proteinets tillverkare angivit. Mikrovågsmetoden resulterade dock i betydligt högre värden av cystein än den äldre 24-timmars metoden (figur 12). Cystein har ansetts vara alltför instabil under syrahydrolys för att kunna haltbestämmas genom automatisk aminosyraanalys (Inglis och Teh-Yung Liu, 1970). Den kortare hydrolystiden med mikrovågstekniken förhindrar att cystein sönderfaller i samma utsträckning som när hydrolysen tar 24 timmar, med den äldre metodiken, sannolikt är cystein känsligt för värme under en längre tid vilket kan förklara skillnaden i resultat mellan de olika metoderna. Så här långt är resultatet alltså positivt, särskilt med tanke på att man kör hydrolys med Ethos1 på 45 minuter medan samma hydrolys tar 24 timmar med den äldre metoden. Utöver hydrolystidsvinsten så är det en hel del tidskrävande och riskfyllda arbetsmoment som inte behövs när man använder sig av Ethos1, som dem illustrerade i figur 1-4.
23 En annan fördel med Ethos1 är att man kan följa hydrolysen under processens gång (figur 13), en funktion som saknas vid användande av den äldre metoden. Figur 13 Skärmdump från displayen på Ethos1, där man kan följa hydrolysen. Det fanns flera moment som jag kunde ha utfört för att få ett exaktare resultat enligt tillverkaren av Ethos1 rekommendationer, men tid saknades. Trots detta producerade hydrolys med Ethos1 resultat som var lika bra som de vi fick med den äldre hydrolysmetoden. Allt talar för att Ethos1 är en klart användbar metod för hydrolys - snabb, enkel och säker.
24 5. REFERENSER Abu-Tarbush, H.M. och Ahmed, S.B. (2005). Characterization of hydrolysates produced by enzymatic hydrolysis of camel casein and protein isolates of Al-Ban (Moringa peregrina) and Karkade (Hibiscus sabderiffa) Seeds. Journal of Saudi Society for Agricultural Science, Vol. 4(2), pp Davidsson, Å., Jönsson, K., la Cour Jansen, J. och Särner, E. (2008) Metoder för slamhydrolys, Svenskt Vatten Utveckling Rapport, Vol. 09, pp Engelhart, W. G. (1990). Microwave hydrolysis of peptides and proteins for amino acid analysis. American Biotechnology Laboratory, Vol. 8(15), pp Fountoulakis, M. och Lahm, H-W, (1998). Hydrolysis and amino acid composition analysis of proteins. Journal of Chromatography A, Vol. 826, pp Hrcková, M., Rusnáková, M. och Zemanovic, J. (2002) Enzymatic hydrolysis of defatted soy flour by three different proteases and their effect on the functional properties of resulting protein hydrolysates. Czech Journal of Food Science, Vol. 20, pp Inglis, A. S. och Teh-Yung Liu. (1970). The stability of cysteine and cystine during acid hydrolysis of proteins and peptides. Journal of Biological Chemistry, Vol. 245(1), pp Klotz, A.V. och Higgins, B.M. (1991). Deamidation and succinimide formation by gamma-nmethylasparagine: potential pitfalls of amino acid analysis. Archives of Biochemistry Biophysics, Vol. 291(1), pp Margolis, S. A., Jassie, L. och Kingston, H. M. (1991). The hydrolysis of proteins by microwave technology, Journal of Automatic Chemistry, Vol. 13(3), pp Rytkönen J, Valkonen K, Virtanen V, Foxwell RA, Kyd JM, Cripps AW och Karttunen TJ. (2006) Enterocyte and M-cell transport of native and heat-denatured bovine β-lactoglobulin: Significance of heat denaturation, Journal of Agricultural and Food
25 Chemistry, Vol. 54, pp Sindayikengera, S. och Xia, W-S. (2006). Nutritional evaluation of caseins and whey proteins and their hydrolysates from Protamex, Journal of Zhejiang University SCIENCE B, Vol. 7(2), pp ten Hoedt, A. E., Maurice-Stam, H., Boelen, C. C. A., Rubio-Gozalbo, M. E., van Spronsen, F. J., Wijburg, F. A., Bosch, A. M. och Grootenhuis, M. A. (2011) Parenting a child with phenylketonuria or galactosemia: implications for health-related quality of life, Journal of Inherited Metabolic Disease, Vol. 34 (2), pp Weiss, M., Manneberg, M., Juranville, J-F, Lahm, H-W och Fountoulakis, M. (1998). Effect of the hydrolysis method on the determination of the amino acid composition of proteins, Journal of Chromatography A, Vol. 795(2), pp
Organisk kemi / Biokemi. Livets kemi
Organisk kemi / Biokemi Livets kemi Vecka Lektion 1 Lektion 2 Veckans lab Läxa 41 Kolhydrater Kolhydrater Sockerarter Fotosyntesen Bio-kemi 8C och D vecka 41-48 42 Kolhydrater Fetter Trommers prov s186-191
Läs merProtein en livsviktig byggsten
Protein en livsviktig byggsten Ingvar Bosaeus Enheten för klinisk nutrition Sahlgrenska universitetssjukhuset Göteborg KSLA 2015-02-19 Aminosyra Alpha Amino- grupp Fredrik Bertz Karboxyl- grupp 20 aa
Läs merFöreläsning 17. Karbonylkolets kemi II Kapitel 17 F17
Föreläsning 17 Karbonylkolets kemi II Kapitel 17 1) Introduktion 2) Addition av starka nukleofiler 3) Estrar 4) Amider 5) Nitriler 6) Syraklorider 7) Praktisk användning 1. Introduktion Aldehyder och ketoner
Läs merVI-1. Proteiner VI. PROTEINER. Källor: - L. Stryer, Biochemistry, 3 rd Ed., Freeman, New York, 1988.
Proteiner VI. PTEINE VI-1 Källor: - L. Stryer, Biochemistry, 3 rd Ed., Freeman, New York, 1988. VI-2 Molekylmodellering VI.1. Aminosyra En aminosyra (rättare: α-aminosyra) har strukturen som visas i figur
Läs merP-U-Csv-Aminosyror på Biochrom 30+
1(6) P-Aminosyror (NPU09011) U-Aminosyror/Krea (NPU14178) Csv-Aminosyror (NPU09013) Bakgrund, indikation och tolkning Bakgrund: Medfödda metabola sjukdomar är ovanliga genetiska sjukdomar men eftersom
Läs merP-U-Csv-Aminosyror på Biochrom 30+
1(5) P-Aminosyror (NPU09011) U-Aminosyror/Krea (NPU14178) Csv-Aminosyror (NPU09013) Bakgrund, indikation och tolkning Bakgrund: Medfödda metabola sjukdomar är ovanliga genetiska sjukdomar men eftersom
Läs merElektron-absorbtionspektroskopi för biomolekyler i UV-VIS-området
Elektron-absorbtionspektroskopi för biomolekyler i UV-VIS-området Principer Koncentrationsmätning Detektion Kromoforer, kolorimetriska assays DNA Komparativ analys Proteinrening Jonbindning Peptidgruppens
Läs merVI MÅSTE PRATA MED VARANDRA CELLENS KOMMUNIKATION
VI MÅSTE PRATA MED VARANDRA CELLENS KMMUNIKATIN CELLENS KMMUNIKATIN MÅL MED DETTA AVSNITT När vi klara med denna lektion skall du kunna: Förklara följande begrepp: replikation, translation, transkription,
Läs merFöreläsning 5. Stereokemi Kapitel 6
Föreläsning 5 Stereokemi Kapitel 6 1) Introduktion 2) Definition av begrepp 3) Stereokemi i verkligheten 4) Nomenklatur 5) Flera stereocenter 6) Ringsystem 7) Kirala molekyler utan stereocentra 1. Introduktion
Läs merSläktskap mellan människa och några ryggradsdjur
Övning: Släktskap mellan människa och några ryggradsdjur sid 1 Övning Släktskap mellan människa och några ryggradsdjur En manuell jämförelse mellan hemoglobinets aminosyrasekvenser hos några organismer
Läs mer30. Undersökning av aminosyror i surkål
30. Undersökning av aminosyror i surkål VAD GÅR LABORATIONEN UT PÅ? Du ska l ära dig tekniken vid tunnskiktskromatografi, TLC undersöka vad som händer med proteinerna och polysackariderna vid mjölksyrajäsning
Läs merProteinernas uppbyggnad, funktion och indelning. Niklas Dahrén
Proteinernas uppbyggnad, funktion och indelning Niklas Dahrén Proteiner ü Namnet protein härstammar från det grekiska ordet protos som betyder den första. ü Anledningen 5ll namnet är a6 proteiner 7digt
Läs merRapport utfärdad av ackrediterat laboratorium. Report issued by Accredited Laboratory. Analysrapport ± 8% SS-EN ISO 13903: g/kg. 21.
Rapport utfärdad av ackrediterat laboratorium Report issued by Accredited Laboratory Eurofins Food & Agro Testing Sweden AB Box 887 Sjöhagsg. 3 SE-53119 Lidköping www.eurofins.se Tlf: +46 10 490 8310 Sveriges
Läs merTABELLSAMLING ATT ANVÄNDA I SAMBAND MED PROV I KEMI B
TABELLSAMLIG ATT AVÄDA I SAMBAD MED PRV I KEMI B ågra fysikaliska konstanter Atommassenheten 1u = 1,66 10 27 kg Elektronens massa m = 9,1096 10 31 kg Protonens massa m p = 1,6726 10 27 kg eutronens massa
Läs merElektron-absorbtionspektroskopi för biomolekyler i UV-VIS-området
Elektron-absorbtionspektroskopi för biomolekyler i UV-VIS-området Principer Koncentrationsmätning Detektion Kromoforer, kolorimetriska assays DNA Komparativ analys Jonbindning Spektroskopisk analys av
Läs merProteiner 2012-10-22. Äggvitan består av proteinet ovalbumin. Farmaceutisk biokemi. Insulin är ett proteinhormon. Gly. Arg. Met. Cys. His. Gly.
Proteiner Farmaceutisk biokemi Gly Arg His Ala Lys His Met Gly Asn Pro Cys Phe Lys Maria Norlin Kjell Wikvall Insulin är ett proteinhormon Äggvitan består av proteinet ovalbumin Image: Simon Howden / FreeDigitalPhotos.net
Läs merProteinets potential i produktion av foder
Proteinets potential i produktion av foder Robin Kalmendal, AgrDr Produktchef och Försäljningschef, Fjäderfäfoder Innehåll Fodermarknadens kännetecken: igår, idag och i framtiden Proteinets betydelse i
Läs merPreparation och spektroskopisk karakterisering av Myoglobin
Datum på laborationen: 2010-11-16 Handledare: Alexander Engström Preparation och spektroskopisk karakterisering av Myoglobin Namn/Laborant: Jacob Blomkvist Medlaborant: Emmi Lindgren Antonia Alfredsson
Läs merProtein. Struktur. Enzymer. Transport. kanaler och pumpar PROTEINER. Hormoner. syrabasbalans. Antikroppar. Vätskebalans
Proteiner Protein Struktur Transport Enzymer kanaler och pumpar PROTEINER Hormoner syrabasbalans Vätskebalans Antikroppar Proteinbehov hos idrottare Ökad muskeltillväxt, både b styrkeidrotter och uthållighet
Läs merDifferensen mellan EU:s import och export i areal 39 M Ha
Differensen mellan EU:s import och export i areal 39 M Ha Differensen består av Fodergrödor m.a.o soja Här tröskas soja Soja-importen till EU Är värd 200 Miljarder kr per år vilket är en kostnad för jordbruket
Läs merInstitutionen för laboratoriemedicin Bilaga 2 Biomedicinska analytikerprogrammet Analytisk Kemi och Biokemisk metodik Ht 2010, Termin 3
Institutionen för laboratoriemedicin Bilaga 2 Biomedicinska analytikerprogrammet Analytisk Kemi och Biokemisk metodik Ht 2010, Termin 3 Laborationsdatum: 17 22 november 2010 Grupp: 2 Projekt: Rening och
Läs merFINLANDS FÖRFATTNINGSSAMLING
FINLANDS FÖRFATTNINGSSAMLING Utgiven i Helsingfors den 24 februari 2014 141/2014 Jord- och skogsbruksministeriets förordning om ändring av handels- och industriministeriets förordning om modersmjölksersättning
Läs merFrå n åminosyror till proteiner
Frå n åminosyror till proteiner Table of Contents Generellt om aminosyror... 2 Struktur och klassificering av aminosyror... 2 Alifatiska... 2 Aromatiska... 2 Polära, oladdade... 2 Positivt laddade... 2
Läs merÄter jag rätt när jag tränar?
Kostens betydelse för prestation Äter jag rätt när jag tränar? Eva Blomstrand Individens allmänna kostvanor Intag före träning Intag under träning Intag efter träning Åstrandlaboratoriet, Gymnastik- och
Läs merAnvändningen av ProShape vid fysisk aktivitet
Hur du använder den patenterade aminosyrakombinationen MAP TM för att få ut mer av din fysiska träning. MAP utvecklades av International Nutrition Research Center och är nu tillgänglig genom Royal BodyCare
Läs merEuropeiska unionens råd Bryssel den 12 maj 2016 (OR. en)
Europeiska unionens råd Bryssel den 12 maj 2016 (OR. en) 8540/16 ADD 1 REV 1 DENLEG 34 AGRI 222 SAN 162 FÖLJENOT från: inkom den: 10 maj 2016 till: Europeiska kommissionen Rådets generalsekretariat Komm.
Läs merProdukter för medfödda metabola sjukdomar
Produkter för medfödda metabola sjukdomar Barn och vuxna December 2011 Nutricia Nordica AB är ett nutritionsföretag med fokus på klinisk nutrition för barn och vuxna. Vår ambition är att med god service
Läs merBestämning av fluoridhalt i tandkräm
Bestämning av fluoridhalt i tandkräm Laborationsrapport Ida Henriksson, Simon Pedersen, Carl-Johan Pålsson 2012-10-15 Analytisk Kemi, KAM010, HT 2012 Handledare Carina Olsson Institutionen för Kemi och
Läs merFrån DNA till protein, dvs den centrala dogmen
Från DNA till protein, dvs den centrala dogmen DNA RNA Protein Biochemistry, kapitel 1 5 samt kapitel 29 31. Kapitel 2 5 samt 29 31 berörs även i kommande föreläsningar. ph, kapitel 1, gås igenom i separata
Läs merÖvningstentafrågor i Biokemi, Basåret VT 2012
Övningstentafrågor i Biokemi, Basåret VT 2012 1. Förklara kortfattat följande ord/begrepp. (4p) - gen - genom - proteom - mutation - kofaktor - prostetisk grupp - ATP - replikation Celler: 2. Rita en eukaryot
Läs merUppgift 3.1. Varför har man gjort den här undersökningen? (5 p innehåll, 1 p språk, totalt 6 p)
Inträdesprov till livsmedelsvetenskap 19.5.2017 Modellsvar Uppgift 3.1. Varför har man gjort den här undersökningen? (5 p innehåll, 1 p språk, totalt 6 p) Behovet av mat och komplettering av kosten Befolkningstillväxten
Läs merProteinkvalitet i fodersäd. Bengt Lundegårdh Global Organic Sweden AB
Proteinkvalitet i fodersäd Bengt Lundegårdh Global Organic Sweden AB Essentiella aminosyror Vilka är mest begränsande i foder från spannmål % av totalt mängd protein Aminosyra Gris Värphöns Vete Korn Råg
Läs merProteinersättningar vid medfödda metabola sjukdomar
Proteinersättningar vid medfödda metabola sjukdomar BARN OCH VUXNA APRIL 2015 INNEHÅLL Fenylketonuri (PKU) PKU Anamix Infant... 4 PKU Anamix First Spoon... 4 PKU Anamix Junior... 5 PKU Anamix Junior LQ...
Läs merBASÅRET KEMI B BIOKEMI VT 2012. PROTEINER OCH ENZYMER 174-190 (sid. 140-156)
BASÅRET KEMI B BIOKEMI PROTEINER OCH ENZYMER 174-190 (sid. 140-156) Hur lätt blir det fel i strukturen? ganska stora skillnader i sekvens - ganska lika strukturer proteinerna är bara identiska i 27 av
Läs merTitrera. Pär Leijonhufvud
Titrera Pär Leijonhufvud 2018-02-21 Titrering är en grupp metoder för att bestämma en mängd av något. Den vanligaste formen i skolan är en volymetrisk titrering, när man blandar två ämnen och noggrant
Läs merKe2. Proteiner. Pär Leijonhufvud. Förstå proteinernas och aminosyrornas kemi och betydelse i levande organismer (och samhället) (alanin)
Ke2 Proteiner Pär Leijonhufvud CC $\ BY: 26 februari 2014 C Kurs: Ke2, Åre gymnasium VT 2014 Ämne/område: Proteiner Mål: Förstå proteinernas och aminosyrornas kemi och betydelse i levande organismer (och
Läs merTranskription och translation. DNA RNA Protein. Introduktion till biomedicin 2010-09-13. Jan-Olov Höög 1
Från DNA till protein, dvs den centrala dogmen DNA RNA Protein Biochemistry, kapitel 1 (delvis), kapitel 2 (ingående) samt kapitel 3 (delvis, kommer att behandlas mer) Transkription och translation Informationsflödet
Läs merHållbara foder och välfärd för fisk och människa
Hållbara foder och välfärd för fisk och människa Kristina Snuttan Sundell och Eva Brännäs Zoologisk institutionen och Vattenbrukscentrum Väst Göteborgs Universitet Institutionen för vilt, fisk och miljö
Läs merLabbrapport 1 Kemilaboration ämnens uppbyggnad, egenskaper och reaktioner. Naturkunskap B Hösten 2007 Av Tommy Jansson
Labbrapport 1 Kemilaboration ämnens uppbyggnad, egenskaper och reaktioner. Naturkunskap B Hösten 2007 Av Tommy Jansson Försök 1: Beskriv ämnet magnesium: Magnesium är ett grundämne (nummer 12 i det periodiska
Läs merFelveckning och denaturering av proteiner. Niklas Dahrén
Felveckning och denaturering av proteiner Niklas Dahrén Felveckning av proteiner Strukturen är helt avgörande för proteinets funktion ü E# protein är helt beroende av sin struktur för a& kunna fullgöra
Läs merLivsmedelsverkets författningssamling
Livsmedelsverkets författningssamling ISSN 1651-3533 Föreskrifter om ändring i Livsmedelsverkets föreskrifter (LIVSFS 2008:2) om modersmjölksersättning och tillskottsnäring; (H 373:1) Utkom från trycket
Läs merBASÅRET KEMI B BIOKEMI VT 2012. METABOLISM 224-249 (sid. 192-219)
BASÅRET KEMI B BIOKEMI METABOLISM 224-249 (sid. 192-219) Glukos har en central roll i metabolismen ett universalt bränsle för många olika organismer Protein Många vävnader är nästan helt beroende av glukos
Läs merA G M K. Supplemental Figure S1.
G A G M K F I D I G G G L G Supplementl Figure S1. CADC1 MPALGCCVDATVSPPLGYAFSSDSSLPTPEFFSSGVPPMTNAAAGHSHWSPDLSSALYRVD 61 Tocco ADC MPALGCCVDAAVVSPPLSYAFSRDSSLPAPEFFASGVPPTNSAAASHWSPDLSSALYGVD 6 Aridopsis
Läs merIsomerer. Samma molekylformel men olika strukturformel. Detta kallas isomeri. Båda har molekylformeln C 4 H 10
Isomerer Samma molekylformel men olika strukturformel. Detta kallas isomeri Båda har molekylformeln C 4 10 rganiska syror Alla organiska syror innehåller en karboxylgrupp (C) C = m man oxiderar en alkohol
Läs merFrån DNA till protein, dvs den centrala dogmen
Från DNA till protein, dvs den centrala dogmen DNA RNA Protein Biochemistry, kapitel 1 5 samt kapitel 29 31. Kapitel 2 5 samt 29 31 berörs även i kommande föreläsningar. Transkription och translation Informationsflödet
Läs merLivsmedelsverkets författningssamling
Livsmedelsverkets författningssamling ISSN 1651-3533 Livsmedelsverkets föreskrifter om kompletta kostersättningar för viktkontroll; beslutade den 30 maj 2016. LIVSFS 2016:11 Utkom från trycket den 9 juni
Läs merLivsmedelsverkets författningssamling
Livsmedelsverkets författningssamling ISSN 1651-3533 Livsmedelsverkets föreskrifter om kompletta kostersättningar för viktkontroll; (H XX) Utkom från trycket beslutade. Med stöd av 2,6 och 7 livsmedelsförordningen
Läs merBaljväxtakademin. Lund 18 april 2012. Nutritionist Ulla Johansson www.idunmatochnaringskonsult.se
Baljväxtakademin Lund 18 april 2012 Nutritionist Ulla Johansson www.idunmatochnaringskonsult.se Baljväxter, värda sin vikt i guld? Johannesbrödsträdets grekiska namn keration har gett namn åt måttet carat,
Läs merÄter jag rätt när jag tränar?
Äter jag rätt när jag tränar? Eva Blomstrand Styrketräning Ökning i muskelmassa syntes av kontraktila proteiner (aktin och myosin) Ökning i maximal styrka Uthållighetsträning Ökad oxidativ kapacitet (enzym
Läs merBILAGOR. till KOMMISSIONENS DELEGERADE FÖRORDNING (EU)
EUROPEISKA KOMMISSIONEN Bryssel den 25.9.2015 C(2015) 6507 final ANNEXES 1 to 5 BILAGOR till KOMMISSIONENS DELEGERADE FÖRORDNING (EU) om komplettering av Europaparlamentets och rådets förordning (EU) nr
Läs merEuropeiska unionens officiella tidning
L 230/8 SV 25.8.2016 KOMMISSIONENS FÖRORDNING (EU) 2016/1413 av den 24 augusti 2016 om ändring av förordning (EU) nr 432/2012 om fastställande av en förteckning över andra godkända hälsopåståenden om livsmedel
Läs merPRODUKTRESUMÉ. 1 LÄKEMEDLETS NAMN Vamin 14 g N/l elektrolytfri infusionsvätska, lösning
PRODUKTRESUMÉ 1 LÄKEMEDLETS NAMN Vamin 14 g N/l elektrolytfri infusionsvätska, lösning 2 KVALITATIV OCH KVANTITATIV SAMMANSÄTTNING 1000 ml innehåller: Glycin Asparaginsyra Glutaminsyra Alanin Arginin Cystein
Läs merVilka pollen har högt näringsvärde för bin och pollinerande insekter? - en litteraturstudie
Vilka pollen har högt näringsvärde för bin och pollinerande insekter? - en litteraturstudie Ingemar Fries Ekologiska institutionen SLU, Uppsala Vilka pollen har högt näringsvärde för bin och pollinerande
Läs merGlukosdehydrogenas. Laktos och Galaktos. Enzymatisk bestämning i livsmedel
Glukosdehydrogenas Laktos och Ga. Enzymatisk bestämning i livsmedel Innehållsförteckning 1. Ändamål och Användningsområde...1 2. Princip...1 3. Reagens...1 3.1 Citratbuffert...1 3.2 NAD-Citratbuffert...2
Läs mer- livsmedel avsedda att användas i energibegränsad kost för viktminskning;
Livsmedelsverkets föreskrifter om vissa livsmedel avsedda att användas i energibegränsad kost för viktminskning; 1 1 (H 376) Detta dokument har sammanställts i informationssyfte. Kontrollera därför alltid
Läs merUTTAGNING TILL KEMIOLYMPIADEN 2013 TEORETISKT PROV nr 1. Läkemedel
UTTAGNING TILL KEMIOLYMPIADEN 2013 TEORETISKT PROV nr 1 Provdatum: torsdagen den 15 november Provtid: 120 minuter Hjälpmedel: Räknare, tabell- och formelsamling. Redovisning görs på svarsblanketten som
Läs merProteiner. Biomolekyler kap 7
Proteiner Biomolekyler kap 7 Generna (arvsanlagen) (och miljön) bestämmer hur en organism skall se ut och fungera. Hur? En gen är en ritning för hur ett protein skall se ut. Proteiner får saker att hända
Läs merVilka ämnen finns det i maten och hur använder kroppen dem?
ÄMNENA I MATEN 1 Vilka ämnen finns det i maten och hur använder kroppen dem? 2 varifrån kommer egentligen energin? Jo från början kommer den faktiskt från solen. Solenergi blir till kemisk energi genom
Läs merNamn: student x & student y Kurs: FAGBH0 Utförd: 090526
Laboration: Isolering av kinin Namn: student x & student y Kurs: FAGBH0 Utförd: 090526 Handledare: Patrik Holm 1 Innehållsförteckning Innehållsförteckning... 2 Sammanfattning... 3 Inledning... 3 Utförande...
Läs merTENTAMEN I STRUKTURBIOLOGI
Molekylär Cellbiologi TENTAMEN I STRUKTURBIOLOGI MÅNDAGEN DEN 26 MARS 2001 EFTERNAMN:... FÖRNAMN:... PERSONNUMMER:... POÄNGSUMMA: RESULTAT: Skriv namn och personnummer på ev. lösa blad. Tentamen innehåller
Läs merBipacksedel: Information till användaren. Vamin 14 g N/l elektrolytfri infusionsvätska, lösning
Bipacksedel: Information till användaren Vamin 14 g N/l elektrolytfri infusionsvätska, lösning Läs noga igenom denna bipacksedel innan du börjar använda detta läkemedel. Den innehåller information som
Läs merPRODUKTER. Distributors of Ultimate Nutrition Sweden and Finland.
PRODUKTER ULTIMATE N AMINO ACIDS ULTIMATE NUTRITION AMINO2002 100tabs 532014-020 Neutral 330tabs 532015-020 Neutral Rena aminosyror i en lättupptaglig form. Perfekt för dig som inte gillar proteindrinkar.
Läs merProteinsyntesen. Anders Liljas Biokemi och strukturbiologi Lunds universitet
Proteinsyntesen Anders Liljas Biokemi och strukturbiologi Lunds universitet Ett fundament i proteinsyntesen är strukturen av nukleinsyror. F. Crick, J. Watson & Wilkins Nobelpris i medicin 1962 Wikipedia
Läs merProvet kommer att räknas igenom under vt16 på torsdag eftermiddagar ca Meddelande om sal och exakt tid anslås på min kontorsdörr (rum419).
Ke2. Komvux, Lund. Prov 2. Övning. Provet kommer att räknas igenom under vt16 på torsdag eftermiddagar ca 1330-1500. Meddelande om sal och exakt tid anslås på min kontorsdörr (rum419). Övningsprovet innehåller
Läs merLaboratoriemetod för att manuellt rena DNA från ett prov på 0,5 ml
Laboratoriemetod för att manuellt rena DNA från ett prov på 0,5 ml För att rena genomiskt DNA från insamlingssatser tillhörande Oragene och ORAcollect -familjerna. Besök vår hemsida, www.dnagenotek.com,
Läs merImmunteknologi, en introduktion. Hur man använder antikroppar för att mäta eller detektera biologiska händelser.
Immunteknologi, en introduktion Hur man använder antikroppar för att mäta eller detektera biologiska händelser. Antikroppar genereras av b-lymphocyter, som är en del av de vita blodkropparna Varje ursprunglig
Läs merUTTAGNING TILL KEMIOLYMPIADEN 2006
UTTAGNING TILL KEMIOLYMPIADEN 2006 TEORETISKT PROV 2006-03-15 Provet omfattar 6 uppgifter, till vilka du ska ge fullständiga lösningar, om inte annat anges. Konstanter som inte ges i problemtexten, hämtas
Läs merJonbyteskromatografi
Jonbyteskromatografi Den mest frekvent använda proteinreningsmetoden Bygger på laddad interaktion mellan målproteinet i lösning och en fast matris. Beroende av:! Lösningens ph! Målproteinet och kontaminanternas
Läs merIsolering och rening av proteinet tiopurinmetyltransferas
Isolering och rening av proteinet tiopurinmetyltransferas Inledning och syfte Proteinet tiopurinmetyltransferas (TPMT) är ett humant enzym vars naturliga funktion ännu är okänd. Proteinet katalyserar överföring
Läs merBASÅRET KEMI B BIOKEMI VT 2012
BASÅRET KEMI B BIOKEMI IngMarie Nilsson Biokemi och biofysik Plan 4 Rum 425 Tel. nr: 08-162728 E-post: ingmarie@dbb.su.se LABBAR Lab 11. Amylas lab Rum: K232/242 Huvudansvarig: Gabriela Danielsson Grupp
Läs merNäringsämnena och matspjälkning
Näringsämnena och matspjälkning Näringsämnen De tre näringsämnen som vi behöver störst mängd av är: - Kolhydrater - Fett - Proteiner Näringsämnena behövs för att bygga upp cellerna och för att ge energi.
Läs merSå började det Liv, cellens byggstenar. Biologi 1 kap 2
Så började det Liv, cellens byggstenar Biologi 1 kap 2 Liv kännetecknas av följande: Ordning- allt liv består av en eller flera celler Ämnesomsättning Reaktion på stimuli (retningar) Tillväxt och utveckling
Läs merBipacksedel: Information till användaren. Aminoven 15 % infusionsvätska, lösning
Bipacksedel: Information till användaren Aminoven 5 % infusionsvätska, lösning Aminoven 10 % infusionsvätska, lösning Aminoven 15 % infusionsvätska, lösning Läs noga igenom denna bipacksedel innan du börjar
Läs merTotalt 10 uppgifter, vardera värd 10p (totalt 100p). För godkänt fordras minst 50p, för 4:a minst 66p och för 5:a minst 83p.
Tentamen i rganisk Kemi 2 (3B1760) måndagen den 29 maj 2006, kl. 08.00-14.00 Tillåtet hjälpmedel: molekylmodeller Periodiskt system och tabeller med bindingsstyrkor och pka-värden är bifogade efter frågorna
Läs merSupplementary Data. Figure S1: EIMS spectrum for (E)-1-(3-(3,7-dimethylocta-2,6-dienyl)-2,4,6-trihydroxyphenyl)butan-1-one (3d) 6'' 7'' 3' 2' 1' 6
Supplementary Data H 9'' ' 1' 1 ' ' '' 7'' 8'' 10'' H H Figure S1: EIMS spectrum for (E)-1-(-(,7-dimethylocta-,-dienyl)-,,-trihydroxyphenyl)butan-1-one (d) H 9'' ' 1' 1 ' ' '' 7'' 8'' 10'' H H Figure S:
Läs merSjukvårdsperspektivet
Sjukvårdsperspektivet Ulrika von Döbeln Centrum för Medfödda Metabola Sjukdomar, CMMS Karolinska Universitetssjukhuset Huddinge Sällsynta sjukdomar ställer speciella krav på sjukvården Diagnostik Behandling
Läs merBiologi 2. Cellbiologi
Biologi 2 Cellbiologi Frågor man kan besvara efter att ha läst cellbiologi Varför blir huden skrynklig om man ligger länge i badkaret? Varför dör man av syrebrist? Hur fäster celler till varandra i kroppen?
Läs merAbsorbansmätningar XXXXXX och YYYYYY
Umeå Universitet Biomedicinska analytikerprogrammet Absorbansmätningar XXXXXX och YYYYYY Årskull: Laborationsrapport Laborationsdatum: Inlämnad Godkänd Handledare: Moment I: Ljusabsorption i kyvetter 1)
Läs merNäringsämnen. Kolhydrater, fetter och proteiner
Näringsämnen Kolhydrater, fetter och proteiner By Scott Bauer, USDA ARS Public Domain, https:// commons.wikimedia.org/w/index.php? curid=33614 Kolhydrater Vår huvudsakliga energikälla i maten Frön, grönsaker,
Läs merKyvett-test LCK 380 TOC Totalt organiskt kol
Kyvett-test Princip Totalt kol () och totalt oorganiskt kol () omvandlas genom oxidation () eller surgörning () till koldioxid (CO 2 ). Koldioxiden överförs från uppslutningskyvetten via ett membran, till
Läs merNutrition & hälsa. Research Institutes of Sweden Elinor Hallström
Nutrition & hälsa Research Institutes of Sweden Elinor Hallström 1 Vad är hälsa? 3 Kosten viktigaste parametern för vår hälsa Vi behöver näringsämnen av två anledningar Energi Byggstenar Energi Vad behöver
Läs merCellen och biomolekyler
Cellen och biomolekyler Alla levande organismer är uppbyggda av celler!! En prokaryot cell, typ bakterie: Saknar cellkärna Saknar organeller En eukaryot djurcell: Har en välavgränsad kärna (DNA) Har flera
Läs mer2003-06-03. 24-hour Metabolism. Ett arbete i Biokemi kursen vt. 2003. Sofia Bertolino Annlouise Mickelsen
2003-06-03 24-hour Metabolism Ett arbete i Biokemi kursen vt. 2003 Sofia Bertolino Annlouise Mickelsen Handledare: Tom Taylor Supervisor: Stefan Knight Inlämnat: Den 3 juni 2003 24-hour metabolism, Vad
Läs merPRODUKTRESUMÉ. 1 LÄKEMEDLETS NAMN Glavamin, infusionsvätska, lösning. 2 KVALITATIV OCH KVANTITATIV SAMMANSÄTTNING 1000 ml infusionsvätska innehåller:
PRODUKTRESUMÉ 1 LÄKEMEDLETS NAMN Glavamin, infusionsvätska, lösning 2 KVALITATIV OCH KVANTITATIV SAMMANSÄTTNING 1000 ml infusionsvätska innehåller: Aktiva innehållsämnen Kvantitet, g L-Alanin 16,00 L-Arginin
Läs merSortimentsguide för Specialprodukter
Sortimentsguide för Specialprodukter Barn och vuxna Mars 2012 Nutricia Nordica AB är ett nutritionsföretag med fokus på klinisk nutrition för barn och vuxna. Vår ambition är att med god service och hög
Läs merNr L 55/22 [Jv Europeiska gemenskapernas officiella tidning
Nr L 55/22 [Jv Europeiska gemenskapernas officiella tidning 6. 3. 96 KOMMISSIONENS DIREKTIV 96/8/EG av den 26 februari 1996 om livsmedel avsedda att användas i energibegränsade dieter för viktminskning
Läs merAtt göra i ordning en byrett för titrering
Att göra i ordning en byrett för titrering Utrustning Byrett, liten tratt, dekanterglas, byretthållare, stativ. Utförande Sätt fast byretthållaren i stativet, se figuren. Skölj byretten med lite av titrerlösningen
Läs merSkrivning i termodynamik och jämvikt, KOO081, KOO041,
Skrivning i termodynamik och jämvikt, K081, K041, 2008-12-15 08.30-10.30 jälpmedel: egen miniräknare. Konstanter mm delas ut med skrivningen För godkänt krävs minst 15 poäng och för VG och ett bonuspoäng
Läs merSyntes av acetylsalicylsyra (aspirin)
1 Syntes av acetylsalicylsyra (aspirin) Acetylsalicylsyra har länge varit ett av de mest använda läkemedlen och marknadsförs under många handelsnamn. Det lanserades 1899 under namnet Aspirin av det tyska
Läs merEnzymatisk hydrolys av glutenprotein
Enzymatisk hydrolys av glutenprotein Institutionen för livsmedelsteknik Livsmedelsteknisk högskoleutbildning vid Campus Helsingborg Ida Persson Examensarbete 2009 Copyright Ida Persson Institutionen för
Läs merFöreläsning 3. Substituerade kolväten Kapitel 5
Substituerade kolväten Kapitel 5 Föreläsning 3 1) Introduktion 2) eteroatomer 3) Nomenklatur 4) Krafter mellan molekyler 5) Syrastyrka 6) Exempel på molekyler Det afrikanska mirakelbäret har en del spännande
Läs merMatkemi Kemin bakom matens näringsämnen
Matkemi Kemin bakom matens näringsämnen Kolhydrater Sockerarter (enkla och sammansatta) Stärkelser Cellulosa Bilden visar strukturformler för några kolhydrater. Druvsocker (glukos) Kolhydrater monosackarider
Läs merBiochemistry 201 Advanced Molecular Biology (
Biochemistry 201 Advanced Molecular Biology (http://cmgm cmgm.stanford.edu/biochem201/) Bioinformatics: Discovering Function from Sequence Doug Brutlag Departments of Biochemistry June 4, 1999 Discovering
Läs merSe till att barnet är hungrigt när det ska prova första gången. Ha tålamod. Det kan behövas flertalet försök innan barnet vänjer sig vid en ny smak.
ATT BÖRJA MED NUTRAMIGEN AA Eftersom Nutramigen AA inte är baserad på mjölkprotein så skiljer den sig i lukt och smak från vanlig modersmjölksersättning. Nedan följer några tips på hur du kan vänja ditt
Läs merKromatografi. Den kromatografiska processen. Fördelar med HPLC - (utförs under högt tryck ca 400 Bar) Vätskekromatografi. Olika former av LC
Kromatografi Den kromatografiska processen Separationsmetod, där komponenterna som ska separeras, fördelas mellan två faser, en stationär fas och en mobil fas. Injektion 0 min Vätskekromatografi vätska
Läs merFrån gen till protein. Niklas Dahrén
Från gen till protein Niklas Dahrén Innehållet i denna undervisningsfilm: Vad är skillnaden mellan kromosom, DNA- molekyl, gen och protein? Hur kan vårt DNA avgöra hur vi ser ut och fungerar? Proteinernas
Läs merHastighet HOCH 2. *Enzymer är Katalysatorer. *Påverkar inte jämvikten
Enzymer, Katalys och Kinetik MNXA10/12 Hans-Erik Åkerlund Hastighet Reglerbarhet *Enzymer är Katalysatorer Påskyndar reaktioner utan att själv förbrukas. Kan ingå i delreaktioner men återbildas alltid
Läs merSvenska Foders strategi för proteinförsörjning. Lars Hermansson Foderchef, Svenska Foder AB Tel 046-325851
Svenska Foders strategi för proteinförsörjning Lars Hermansson Foderchef, Svenska Foder AB Tel 046-325851 Svenska Foders strategi för proteinförsörjning Varför köper Sverige soja från Brasilien? Vår självförsörjningsgrad
Läs merSluttentamen Biokemi KE7001p3, 15:e mars 2007, 09 15-15 00 Max poäng = 76 p. Slutlig gräns för godkänd = 36 p (47 %).
Sluttentamen Biokemi KE7001p3, 15:e mars 2007, 09 15-15 00 Max poäng = 76 p. Slutlig gräns för godkänd = 36 p (47 %). Öppna inte kuvertet förrän klartecken ges och allt lagts undan, utom tillåtna hjälpmedel
Läs merPå samma sätt ges ph för en lösning av en svag bas och dess salt av:
Kemiska beräkningar HT 2008 - Laboration 2 Syrabastitrering Syftet med den här laborationen är att ge laboranten insikt i användandet av phmeter vid ph-titreringar, samt förstå hur titrerkurvor för starka,
Läs mer