Jämförelse mellan 5 patientnära D-Dimer metoder och standard metod på laboratoriet - erfarenhet från ett center

Transkript

1 Jämförelse mellan 5 patientnära D-Dimer metoder och standard metod på laboratoriet - erfarenhet från ett center Jovan P. Antovic MD, PhD Doc. Koagulationsforskning, Inst Mol Med Kir, Karolinska Institutet Leg. Läk, Klinisk kemi, Karolinska Universitetslaboratoriet Karolinska Universitetssjukhus, Stockholm, Sverige Kristina Höög Hammarström Gunilla Forslund Jaak Eintrei Margareta Sten-Linder

2 D-dimernivåerna är förhöjda vid djup ventrombos lung emboliembolism Mätning av D-dimer bidrar till att utesluta, inte bekräfta, förekomst av venös tromboembolism (högt negativt (upp till 100 %) men sämre positivt prediktionsvärde) Kombinationen av låg klinisk sannolikhet (med poängbaserat diagnostikstöd Wells score) och negativ D-dimer utesluter med hög sannolikhet förekomst av venös tromboembolism främst hos icke inneliggande patienter 2 JPA POCT D-D EQUALIS

3 3 JPA POCT D-D EQUALIS

4 Det skulle vara idealisk att ha möjlighet att säkert utesluta VTE i primärvård i majoritet av patienter och på det sättet undvika remittering till sjukhuset och minska kostnader 4 JPA POCT D-D EQUALIS Buller et al Ann Intern Med 2009

5 Snabb analysering av D-dimer kan reducera tiden på akuten och minska icke-nödvändiga inläggning av patienter på sjukhus 5 JPA POCT D-D EQUALIS Lee-Lewandrowski et al Am J Clin Pathol 2009

6 Cobas h232 Pathfast POCT (PNA) D-dimer utvärdering April December 2008 Nycocard Stratus CS 6 JPA POCT D-D EQUALIS Jämförelsemetod SYSMEX 1500 Tina-quant Roche (referensintervall <0,25 mg/l) minividas Analys av prover from totalt 60 patienter har gjorts på Kemi i Solna i samarbete med akuten (komplettering för Cobas h232 på Kronans VC)

7 Pathfast Helblod eller plasma som tagits i litiumheparinrör eller Na-citrat Reagenset är bruksfärdigt och förvaras i kylskåp 2 kalibratorer som analyseras i duplikat Analysprincip baserad på CLEIA och Magtration. Flera prover kan analyseras samtidigt, analystid 15 min 7 JPA POCT D-D EQUALIS

8 8 JPA POCT D-D EQUALIS Fukuda et al Thromb Res 2007

9 Pathfast Pathfast n=53 regression <1,0 ug/ml referensområde Pathfast <0,5 2 n=30 1,5 1 n=4 n=38 0,5 n=11 n= ,25 0,5 0,75 1 SYSMEX 9 JPA POCT D-D EQUALIS

10 Cobas h232 (Roche) Endast hepariniserat venöst helblod Pipetteringssteget Kassetter förvaras i kyla Inga kalibratorer. Instrumentet läser automatiskt in lotspecifika kalibreringsdata från kodchipet Analysprincip: två monoklonala antikroppar -intensiteten hos signallinjen är i proportion till D-dimer-koncentrationen Ett prov i taget, 5-6 prov/h 10 JPA POCT D-D EQUALIS

11 11 JPA POCT D-D EQUALIS Legnani et al Thromb Res 2003

12 cobas h232 cobas h232 n=56 referensområde cobas h232 <0,4 µg/ml n=5 1,2 0,8 n= 2 0,4 n= ,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4 SYSMEX 12 JPA POCT D-D EQUALIS

13 Stratus CS Helblod eller plasma som tagits i litiumheparinrör Reagenset är bruksfärdigt och förvaras i kylskåp En kalibrator som analyseras i triplikat Analysprincip två plats sandwichanalys, baserad på Radial Partition Immunoassay teknik (RPIA) i fast form Ett prov i taget, analystid ca 20 min 13 JPA POCT D-D EQUALIS

14 14 JPA POCT D-D EQUALIS Reber et al Blood Coag Fibrinolys 2004

15 Stratus CS Stratus CS D-Dimer n=52 regression <2000 ng/ml n= n=1 n= n=11 n=0 0 0,000 0,250 0,500 0,750 1,000 Sysmex 15 JPA POCT D-D EQUALIS

16 minividas Plasma som tagits i natriumcitratrör Prover måste centrifugeras Reagensstrips förvaras i kylskåp, bruksfärdiga 2 kalibratorer som analyseras i duplikat Analysprincip: tvåstegs enzymatisk immunanalys av sandwichtyp med en slutlig fluorescensdetektion (ELFA) 2 strips analyseras samtidigt, analystid 15 min 16 JPA POCT D-D EQUALIS

17 17 JPA POCT D-D EQUALIS Van der Graaf et al Thromb Haemost 2000

18 minividas 2,00 minividas n=40 regression <2,0ug/mL referensområde minividas <0,5 n=21 1,50 n=1 n=32 1,00 0,50 0,00 n=7 n=0 0 0,25 0,5 0,75 1 SYSMEX 18 JPA POCT D-D EQUALIS

19 NycoCard Plasma som tagits i natriumcitratrör Reagenset är bruksfärdigt och förvaras i kylskåp Manuell pipettering av prov och reagens Inga kalibratorer. Manuell vitkalibrering utförs på metoden vid varje uppstart Analysprincip: immunometrisk genomflödes princip, membranet rödfärgas med en färgintensitet proportionell till D-dimer koncentrationen Kapacitet: ett prov i taget, analyseringstid 10 min 19 JPA POCT D-D EQUALIS

20 20 JPA POCT D-D EQUALIS Larsen et al J Int Med 2002

21 NycoCard NycoCard n=27 regression <2,0 2,00 1,60 n=4 1,20 0,80 n=0 n=20 0,40 n=2 n=5 0,00 0,00 0,25 0,50 0,75 1,00 1,25 1,50 1,75 2,00 Sysmex 21 JPA POCT D-D EQUALIS Total CV 41%

22 Key messages to take home D-dimer är unik markör för fibrinnedbrytning D-dimer stiger i olika kliniska tillstånd och därför PPV är låg Känslighet och NPV av ELISA och kvantitativa turbidimetriska metoder är utmärkt och negative D-dimer kan därför användas för att utesluta VTE POC D-dimer metoder har analytisk profil jämförbart med vanliga laboratoriska metoder och kan därför användas för förbättra turnround-tid och sänka kostnader Pathfast D-dimer, Cardiac D-dimer och Stratus CS D-dimer kan användas för säker och adekvat uteslutning av VTE i polikliniska patienter Problem av POC D-dimer kvalitetskontroll måste lösas i samarbete med central lab 22 JPA POCT D-D EQUALIS