Ylva Hedeland Niclas Rollborn Anders Larsson. Analys av HbA1c metodjämförelse mellan några sjukhuslabb i Sverige

Transkript

1 Ylva Hedeland Niclas Rollborn Anders Larsson Analys av HbA1c metodjämförelse mellan några sjukhuslabb i Sverige

2 Analys av glycerat hemoglobin (HbA1c) Capillarys 3 Tera- instrumentering och metodprincip Utvärdering mot tidigare metod i drift Interlaboratoriejämförelse för HbA1c 2

3 Capillarys 3 Tera Instrumentering 12 Kapillärer Kapacitet: 70 prover/timme Mätintervall: mmol/mol 3

4 Analysmetod HbA1c Provblanding 34 C Piercing av lock Detektion vid 415 nm 20 µl prov Injektion < 1nL Hemolys (1:6) 4

5 5 Exempelelektroferrogram HbA1c (blå), HbA0 (rosa) och HbA2 (gul)

6 Exempelelektroferrogram Blodprov innehållande HbF eller annan Hb variant *Atypisk profil 6 Från Capillarys HbA1c.pdf s (

7 HbA1c-utvärdering Capillarys 3 Tera God överensstämmelse mellan de 12 kapillärerna 2, Prov Medelvärde SD CV (mmol/mol) (mmol/mol) (%) Kontroll 1 31,8 0,58 1,8 Kontroll 2 62,9 0,51 0,8 Patient 1 33,0 0,74 2,2 Patient 2 71,6 0,90 1,3 Patient 3 95,1 1,08 1,1 Patient 4 105,6 1,00 0,9 Total CV 2% vid 32 mmol/mol 1% vid 63 mmol/mol 2 Rollborn N et al Scand J Clin Lab Invest 77 (2016)

8 Cobas HbA1c-utvärdering jämförelse mot Cobas immunologiska metod God överensstämmelse, medelskillnad mellan resultaten 2,3% 120 Cobas (Y) / Capillarys 3 (X) 100 y = 0,9823x + 0,9752 R² = 0, N= Capillarys 3 Tera 8 Rollborn N et al Scand J Clin Lab Invest 77 (2016)15-18

9 mmol/mol HbA1c-utvärdering Equalisutskick (2015) Svenska Mono S referenslaboratoriet Tre ERL referensmetoder (Menarini, Trinity Biotech och Sebia) Instand IFCC referensmetod -- kvalitetsmål Equalis x åsatt värde Capillarys 3 Relativt stor spridning mellan referensmetoderna 9

10 Metodjämförelse HbA1c Roche Cobas, Immunologisk metod Total Hb mäts fotometriskt. HbA1c-bestämningen är baserad på en kompetitiv turbidimetrisk inhiberingsimmunoassay (TINIA). Abbott, Architect, Enzymatisk metod Hemoglobin oxideras till methemoglobin. Koncentrationen Hb mäts. Proteaser tillsätts och väteperoxid bildas då glykosileringen avspjälkas. Mängden glycerat Hb bestäms. Capillarys3, Kapillärelektrofores Absorbansmätning av elektroforetisk separerade komplex (storlek/laddning). HPLC, jonbyteskromatografi Absorbansmätning av kromatografisk separerade komplex (affinitet till fast fas). Bio-Rad Variant II, Tosoh G8 (dock kalibrerad enligt Mono S ) Mono S 10

11 Metodjämförelse HbA1c Laboratorium och HbA1c-metoder Uppsala Roche Cobas, Capillarys 3 Gävle Bio-Rad, Variant II Falun Tosoh, G8 Stockholm, Huddinge Bio-Rad, Variant II Malmö Bio-Rad, Variant II Göteborg Mono S Uddevalla Abbott, Architect Provhantering ~ 70 prover analyserade på hemmahörande instrument. Skickade med normal kyltransport till Uppsala Målsättning: alla analyser utförda inom 2-3 dygn. 11

12 HPLC-system, mmol/mol Metodjämförelse HbA1c Bio-Rad Variant II, MonoS och Tosoh G8 vs Capillarys 160 HPLC, Jonbyteskromatografi 140 y = 0,9413x + 3,8509 R² = 0, y = 0,916x + 3,3967 R² = 0,9649 y = 0,9632x + 3,8947 R² = 0,9963 Positivt intercept Lutning mindre än Capillarys 3, mmol/mol Bio-Rad MonoS Tosoh 12 Rollborn et al (2017) Poster Vårmöte i Klinisk kemi Jämförelse mellan HbA1c analyser utförda i Sverige med kapillärelektrofores, HPLC, immunologiska och enzymatiska metoder

13 Metodjämförelse Bio-Rad Variant II vs D-100 (Benny Larsson, MAS) D-100 skiljer mer från Capillarys 3 än vad Variant II gör. 13

14 mmol/mol Metodjämförelse HbA1c Roche Cobas och Abbott Architect vs Capillarys3 TINIA / Enzymatisk Cobas Architect Cobas och Architect ger: Intercept närmare 0 Lutningen närmare y = 0,9823x + 0,9752 R² = 0,9944 y = 0,9824x + 1,0645 R² = 0, Capillarys 3, mmol/mol 14 Rollborn et al (2017) Poster Vårmöte i Klinisk kemi Jämförelse mellan HbA1c analyser utförda i Sverige med kapillärelektrofores, HPLC, immunologiska och enzymatiska metoder

15 Metodjämförelse HbA1c Beräknade värden vid olika nivåer jämfört mot Cap3 6,0 Bias (mmol/mol) 4,0 2,0 0, ,0 Kvalitetsmål (enl. Equalis): 1.5 mmol/mol * * HbA1c värdet ±3 mmol/mol vid 37 mmol/mol ±5 mmol/mol vid 85 mmol/l -4,0-6,0 Capi3, Cobas, Arch Tosoh Bio-Rad MonoS Kvalitetsmål 15

16 Slutsatser Capillarys 3 Tera Snabb metod med bra riktighet och precision Korsvalidering God överensstämmelse med Cobas Metodjämförelse Bra överensstämmelse mellan alla testade metoder i det kliniskt viktiga intervallet (50-70 mmol/mol). Under och över detta intervall hamnar metoderna i två grupper. Capillarys överensstämmer bäst med Cobas och Architect. 16

17 Referenser Analysis of HbA1c on an automated multicapillary zone electrophoresis system. Scand J Clin Lab Invest 77 (2016)15-18 Niclas Rollborn, Torbjörn Åkerfeldt, Gunnar Nordin, Xiao Yan Xu, Aleksandra Mandic-Havelka, Lars-Olof Hansson och Anders Larsson Jämförelse mellan HbA1c analyser utförda i Sverige med kapillärelektrofores, HPLC, immunologiska och enzymatiska metoder. Poster Vårmöte i Klinisk kemi Niclas Rollborn, Gunnar Nordin, Aleksandra Mandic-Havelka, Maria Lohmander, Anders Elmgren, Christin Sisowath, Torbjörn Åkerfeldt, Benny Larsson, Maria Vallée, Lars-Olof Hansson och Anders Larsson. (finns även i manusform) Rådata från Benny Larsson, Skåne och Britta Landin, KS Provstabilitet: Capillarys Hb A1c using the capillarys 2 flex-piercing instrument.pdf s 31 ( 17

18 HbA1c Capillarys 3 Tera