Calcium på Cobas c 501 Innehållsförteckning

Transkript

1 Upprättat datum: (10) Division diagnostik Revisionsnr: 8 Giltigt t.o.m.: Laboratoriemedicin Metodansvarig: Emma C Göransson Medicinskt ansvarig: Lars Olof Artur L Hansson Upprättare: Emma C Göransson Granskare: Charlotte Erikanders Fastställare: Lars Olof Artur Hansson Calcium på Cobas c 501 Innehållsförteckning Analyskod i labdatasystemet NPU-Kod Referenser Medicinsk bakgrund Indikationer Mätprincip Instrument och tillbehör Reagens Beställningsinformation Beredningsbeskrivning Reagens: Calcium Gen.2, CA2 Kalibrator: C.f.a.s. Calibrator Kontroller: Liquid Multiqual 1 och 2 Kontroller: Liquichek Urine Control 1 och 2 Spädningslösning: Natriumklorid, NaCl Provtagning Kalibrering Kontroller Utförande Beräkning Svarsrutiner Referensintervall Verifiering Imprecision Riktighet Mätområde Angiven mätosäkerhet

2 2(10) Interferens och felkällor Revideringar

3 3(10) Analyskod i labdatasystemet CA Urin UCA Dialysat DICA NPU-Kod NPU01443 NPU04160 NPU17172 CA UCA DICA Referenser Connerty HV, Briggs AR. Determination of serum calcium by means of orthocresolftalein complexone. Am J Clin Path, 1966;45: Larsson L, Öhman S. Serum ionized calcium and corrected total calcium in borderline hyperparathyroidism. Clin Chem 1978;24: Laurells KLINISK KEMI i praktisk medicin ISBN Peter Nilsson-Ehle, Maria Berggren Söderlund, Elvar Theodorsson och Studentlitteratur 1970, Nionde upplagan. Laboratorie Accreditation Compliance Sheet (L.A.C.S.), Boehringer Diagnostics v. 1.01, Jan Metodbeskrivning för S-Ca från Huddinge sjukhus. Information från SFKK och Equalis AB: Införande av gemensamma referensintervall (NORIP) i Sverige, version Liquichek Urine chemistry Control 1 och 2 bipacksedel, Bio-Rad, CA2, Calcium Gen.2, Cobas c 501, Roche Diagnostics, , V 3.0 Sv

4 4(10) Medicinsk bakgrund Calcium förekommer i flera olika former i cirkulationen, dels som joniserat kalk, dels i komplex med olika anjoner och dels som proteinbundet calcium. Det joniserade calcium (fria calciumjoner) är den aktiva formen och den föreligger i jämvikt med calciumjoner i komplex och proteinbunden form. Calcium förekommer i cirka 1000 gånger högre koncentration extracellulärt än intracellulärt och koncentrationen av det joniserade calcium extracellulärt är mycket noggrant reglerad. Calciumjonerna är av stor betydelse för cellaktiviteter som nervledning, muskelkontraktion, cellpermeabilitet och dessutom fungerar calcium som en s k second messenger i cellerna. Vid mätningen av serumcalcium mäter man totalnivån, d v s alla former av calcium i cirkulationen. Som framgår under INDIKATIONER är tillstånd såväl med låg (hypocalcemi) som hög serumcalciumnivå (hypercalcemi) av stor medicinsk betydelse. Calcium utsöndras med urinen beroende på, dels koncentrationen av fritt calcium i cirkulation, dels njurclearance för calcium, som beror såväl på glomerulär som tubulär funktion. Parathormon, PTH, från bisköldkörtlarna påverkar njurtubuli och därvid också återresorptionen av calcium. Indikationer Misstanke på rubbad calciumomsättning, t ex utredning av skelettsjukdom, endokrin sjukdom, utredning och uppföljning av D-vitaminbrist, malabsorption, sarkoidos, myelom, uremi, recidiverande njurstenssjukdom och recidiverande magsår och pankreatit. På grund av de diffusa symptomen i samband med förändrade calciumnivåer är analysen också motiverad vid symtomutredningar såsom vid huvudvärk, förstoppning, stora urinmängder och vid kramper. Bedömning av calciumutsöndringen i urinen kan vara av intresse i samband med utredning av njurstenssjukdom eller ibland vid bedömning av olika rubbningar av calciumnivån i blodet. Vid metabolisk screening, då upprepade prov är nödvändiga för att utesluta eller verifiera hyperkalcemi. Mätprincip Calciumjoner reagerar med 5-nitro-5 -metyl-bapta (NM-BAPTA) under alkaliska förhållanden och bildar ett komplex. Detta komplex reagerar i det andra steget med EDTA. alkaliskt ph Ca 2+ + NM-BAPTA calcium-nm-bapta-komplex calcium-nm-bapta-komplex + EDTA NM-BAPTA + calcium-edta-komplex Ändringen i absorbans står i direkt proportion till calciumkoncentrationen och uppmäts fotometriskt.

5 5(10) Instrument och tillbehör Se Cobas 6000 Beskrivning Reagens Beställningsinformation Se Cobas 6000 Reagens Beredningsbeskrivning Se Cobas 6000 Reagens Reagens: Calcium Gen.2, CA2 Reagenskoncentrationer i kassetten R1 CAPSO a) 557 mmol/l NM-BAPTA 2 mmol/l ph 10.0 icke-reaktiv surfaktant konserveringsmedel R2 EDTA 7,5 mmol/l ph 7.3 icke-reaktiv surfaktant konserveringsmedel a) 3-[cyklohexylamino]-2-hydroxi-1-propansulfonsyra Hållbart till utgångsdatum (om inget annat anges) Förvara i kyl Hållbar i instrumentet i 6 veckor

6 6(10) Kalibrator: C.f.a.s. Calibrator Lyofilisat Förvaras ospädd i kyl spädd i frys 12 x 3 ml Tillsätt exakt 3,0 ml avjoniserat H 2 O Täck flaskan med svart plast och blanda i roterande vagga 30 minuter Fyll ca 400 µl i 5 ml rör (75 x 13 mm) med mikrocentrifugrör. Till tre flaskor c-fas behövs 22 rör, märk rören med aktuellt lotnummer Hållbarhet ospädd till utgångsdatum (om ej annat anges) i kyl Spädd 8 timmar i rumstemperatur 2 dagar i kyl 1 månad i frys Innehåller poolat frystorkat humanserum Varje enskild givarenhet är testad med avseende på förekomsten av HIV-antikroppar och hepatit B ytantigen Produkten skall trots detta behandlas med samma försiktighetsåtgärder som patientprover Kontroller: Liquid Multiqual 1 och 2 Färdig kontroll Förvaras i frys 12 x 10 ml Produkten innehåller poolat fryst humanserum Varje enskild givarenhet är testad med avseende på förekomsten av HIV-antikroppar och hepatit B ytantigen och hepatit C (HCV) Produkten skall trots detta behandlas med samma försiktighetsåtgärder som patientprov Hållbart otinad i frys till utgångsdatum (om ej annat anges) tinad i kyl 2 veckor Kontroller: Liquichek Urine Control 1 och 2 Färdig kontroll Förvaras i kyl 12 x 10 ml Produkten består av humanurin med tillsatser av humant och animaliskt ursprung, kemikalier, konserveringsmedel och stabiliseringsmedel. Sera från varje enskild givarenhet är testat med avseende på förekomsten av HIV-antikroppar och hepatit B ytantigen och hepatit C (HCV) Produkten skall trots detta behandlas med samma försiktighetsåtgärder som patientprov Hållbar obruten flaska i kyl till utgångsdatum (om ej annat anges) öppnad flaska i kyl 30 dagar

7 7(10) Spädningslösning: Natriumklorid, NaCl Används som spädningslösning för prov Provtagning 9 g/l 5 ml Li-heparinplasma med gel, mintgrön propp, är det rör som rekommenderas. EDTAplasma och citratrör får ej användas. Serum 5 ml venblod i rör med separationsgel, gul propp eller rör utan tillsats, röd propp Hållbart 7 dygn i rumstemperatur 3 dygn i kyl 8 månad i frys Serum eller plasma skall separeras från blodcellerna så snart som möjligt, då förlängd kontakt med koaglet kan orsaka lägre calciumvärden. Urin 8 ml urin, i plaströr, av välblandad dygnsmängd samlad i dunk med 20 ml HCL, 6 mol/l Mät och ange dygnsmängden på remissen Hållbart 2 dygn i rumstemperatur 4 dygn i kyl 3 veckor i frys Kalibrering Använd C.f.a.s och avjoniserat vatten som kalibreringsmaterial för 2-punktskalibrering 2-punktskalibrera vid lotbyte av reagens Kalibrera också om kontrollresultaten indikerar att en metodkalibrering är nödvändig Signera alla utskrifter av kalibreringsresultat och arkivera minst 2 år i pärm märkt KALIBRERINGSRAPPORTER Utförande Se Cobas 6000 Kalibratorer Kontroller Vid uppstart på morgonen analyseras MQ1, MQ2, LU1 och LU2, därefter MQ1 och MQ2 ytterligare 2 ggr/dygn, eftermiddag och kväll Analysera kontroller även efter kassettbyte och kalibrering. Instrumentet markerar L respektive H på kontroller utanför gränserna, som är desamma som finns i labdatasystemet För bedömning av kontrollresultaten används de gränser som finns inlagda i labdatasystemet

8 8(10) Utförande Se Cobas 6000 Kontroller Utförande Se Cobas 6000 Provhantering Beräkning Instrumentet beräknar resultatet med hjälp av blankens och kalibratorns absorbanser. Resultat från prov som analyserats med minskad eller ökad provmängd, som instrumentet själv utfört, beräknas automatiskt Beräkna tu-calcium i mmol/d i labdatasystemet när uppgift om dygnsmängd finns Beräkningsformel: U-Ca (mmol/l) x Dygnsmängd (L) = tu-ca (mmol/d) Skriv in dygnsmängden och tryck Beräkna Svarsrutiner Svaret anges med 2 decimaler i mmol/l Resultat < 0,20 besvaras < 0,20 mmol/l Urin Svaret anges med 1 decimal i mmol/d Resultat < 0,20 besvaras < 0,20 mmol/l Referensintervall < 6 mån 6 mån -1år 1-18 år > 18 år Urin 2,5-8,0 mmol/d 1,70-2,75 mmol/l 2,45 2,75 mmol/l 2,30-2,70 mmol/l 2,15-2,50 mmol/l Referenser: Laboratoriemedicin Analysförteckning Provtagningsanvisningar, 1998, från Sydvästra Skånes sjukvårdsdistrikt, Klinisk kemisk avdelning MALMÖ/TRELLEBORG Information från SFKK och Equalis AB: Införande av gemensamma referensintervall (NORIP) i Sverige, version Lund Faluprojektet 2012

9 9(10) Verifiering Imprecision Inom serie: 1H5 Mätningen utförd: Provmaterial Nivå Antal mätningar SD CV % Patientprov 1,20-3, ,02 0,97 Inomserie imprecision beräknad på dubbelbestämningar enligt formel d2 / 2n x 100 = CV% X Mellan serie: 1H5, 1H6, 2H3, 2H4, 6H3 Mätningarna gjorda mellan: Provmaterial Lot nr Nivå Antal mätningar SD CV % MQ ,4 25 0,021 1,46 MQ ,4 25 0,047 1,95 Riktighet Calcium kalibreras med ett av Roche åsatt värde på C.f.a.s Spårbarhet: Metoden är standardiserad mot referensmaterialet SRM 956 c Level 2. S-Calcium och U-Calcium ingår i Equalis Kemikontroll, extern kvalitetssäkring för laboratoriemedicin i Sverige Protokoll för bedömning av Equalis samt avvikande mätresultat arkiveras i pärmar märkta EQUALIS som står på Kemi Lab. Equalis mätresultat sparas online på Mätområde Lägsta mätbara koncentration 0,20 mmol/l Högsta mätbara koncentration 5,00 mmol/l Urin Lägsta mätbara koncentration 0,20 mmol/l Högsta mätbara koncentration 7,5 mmol/l med normal provvolym och 37,5 mmol/l med minskad provvolym Vid resultat > tekniska gränsen begär spädning i citm Alternativt späd manuellt med NaCl, 9g/L Skriv in värdet och spädningsfaktorn manuellt i labdatasystemet och tryck Tab Angiven mätosäkerhet Se dokumentet Ackrediteringens omfattning Klinisk Kemi

10 10(10) Interferens och felkällor Hemolys Ikterus Lipemi H-index g/l I-index µmol/l L-index Magnesium: Ingen signifikant interferens vid en koncentration på upp till 15 mmol/l Serum från patienter som får EDTA-behandling mot hypercalcemi är olämpliga för analys. Högre koncentrationer av intravenöst administrerade kontrastmedia för MRI kan ge interferens vid analys av serumcalcium och urincalcium I sällsynta fall kan förekomst av M-komponent, i synnerhet av IgM-typ, ge otillförlitliga resultat Revideringar Datum Revisionsnr Orsak Provtagningsanvisningar, interferenser Ändrat till angiven mätosäkerhet Ändrat under angiven mätosäkerhet Ny applikation vilket medför ett flertal ändringar. Lagt till NPU-kod samt länkat till andra beskrivningar Uppdaterat referenser, provtagning, referensintervall samt interferenser Tagit bort text om albuminkorrigerat calcium i och med nedläggning av beräkningen Uppdaterat länkar och layout över reagens