Albumin Imm. på Cobas c Klinisk kemi Innehållsförteckning

Transkript

1 Metodbeskrivning 1(12) Fastställandedatum: Revisionsnr: 16 Giltigt t.o.m.: Upprättare: Emma C Göransson Fastställare: Lars Hansson Albumin Imm. på Cobas c Klinisk kemi Innehållsförteckning Analyskod i labdatasystemet NPU-kod Referenser Medicinsk bakgrund Mätprincip Instrument och tillbehör Reagens Beställningsinformation Beredningsbeskrivning Reagens: ALBT2, Tina-quant Albumin Gen.2 Kalibrator: C.f.a.s. PUC kalibrator Kontroller: Liquichek Urine Control 1 och 2 Kontroller: Liquid Multiqual 2 och 3 Spädningslösning: Natriumklorid, NaCl 9 g/l Provtagning Kalibrering Kontroller Utförande Beräkning Svarsrutiner Plasma och diverse Urin CSV Dialysat Referensintervall Verifiering Imprecision Riktighet vätskor

2 Mätområde Angiven mätosäkerhet Interferens och felkällor Revideringar Metodbeskrivning 2(12)

3 Metodbeskrivning 3(12) Analyskod i labdatasystemet P-Albumin P-Albumin till elektrofores U-Albumin U-Albumin/Kreatinin kvot U-Albumin, dygnsmängd Albumin i Csv Csv/P, S-Albuminkvot P-Albumin till Csv/P-Albuminkvot Albumin i diverse vätskor Albumin i ascites Albumin i ledvätska Albumin i pleura Albumin i dialysat NPU-kod Albumin i serum/plasma Albumin i urin U-Albumin/Kreatinin kvot Albumin i csv Albumin i ascites Albumin i ledvätska Albumin i pleura Albumin i dialysat ALB ALBE UA UAKR TUAL SPAL ALBK PSALB DALB DALBA DALBL DALBP DIAL SWE05155 NPU19676 NPU28842 NPU19663 NPU19674 NPU19675 NPU19674 NPU27387 Referenser Laurells KLINISK KEMI i praktisk medicin ISBN Peter Nilsson-Ehle, Maria Berggren Söderlund, Elvar Theodorsson och Studentlitteratur 1970, Nionde upplagan. Weichselbaum: AM. J. Clin. Path Studentlitteratur 1997: , , Kitinsert C.f.a.s. PUC Kalibrator, Roche Liquichek Urine Chemistry Control, bipacksedel, Bio Rad, Kit insert från Roche Diagnostics, Cobas c 501, ALBT2 Tina-quant Albumin Gen 2, , v 11.0 Svenska.

4 Metodbeskrivning 4(12) Medicinsk bakgrund Albumin syntetiseras i levern och är det viktigaste proteinet i plasma, spinalvätska och urin. U-albuminanalys används som mått på grad av glomeruluskada. Albuminförlusterna med urinen används för att bedöma sjukdomens förlopp. Mängden albumin i urinen kan vara stor, flera g/dygn. Om albuminförlusterna i urin är mg/l kallas det mikroalbuminuri. Den normala albuminurin är < 20 mg/l eller 30 mg/dygn. Spinal-Albumin Blod-hjärnbarriären uppkommer genom att kapillärerna i CNS har ett mycket tätt kärlendotel. Fettlösliga ämnen har en god förmåga att penetrera blod-hjärnbarriären och passerar därför obehindrat från blodet in i CNS. Exempel på detta är etanol, nikotin, narkosmedel och heroin. Vattenlösliga proteiner t ex albumin har mycket begränsad passage över blod-hjärnbarriären. Trots detta kommer mer än 80 % av proteinmängden i liqvor från blodet via denna passage. Blod-hjärnbarriären fungerar som ett filter, det bildas en koncentrationsgradient mellan serum och liqvor. Som mått på denna gradient används albuminkvoten. Ökad albuminkvot ses t ex vid infektioner, tumörer, trauma, cerebrovaskulära sjukdomar och vid avflödeshinder för liqvor. Diverse vätskor Orsaken till Ascites, dvs en ökad ansamling av vätska i bukhålan (> 100 ml) kan vara såväl generella som lokala. Ex på generella orsaker är hjärtinkompensation och nefrotiska syndrom. Lokala orsaker kan vara levercirros ett avflödeshinder i levern, inflammatoriska reaktioner eller tumörer i hela eller begränsade delar av bukhålan. I pleurahålan finns normalt endast en mycket liten mängd vätska och orsakerna till ökning av denna är i princip detsamma som för bukhålan. Man försöker skilja på transudat där man har en normal relativt låg konc. av protein < 25 g/l och exsudat med en proteinhalt som mer liknar plasmans (inflammation eller tumörväxt). Ledvätska (synovia) är ett filtrat av plasma med tillsats av hyaluronsyra. Proteinkoncentrationen i ledvätska är ~ 20 g/l dvs. samma som i intercellulärvätska. Fibrinogen saknas nästan helt i normal ledvätska och koagulerar därför inte. Mätprincip Immunturbidimetrisk analys. Anti-albuminantikroppar reagerar med antigenet i provet och bildar antigen/antikroppskomplex vilka efter agglutination kan bestämmas turbidimetriskt. Instrument och tillbehör Se Cobas 6000 Beskrivning - Klinisk Kemi Reagens Beställningsinformation Se Cobas 6000 Reagens - Klinisk Kemi

5 Beredningsbeskrivning Metodbeskrivning 5(12) Se Cobas 6000 Reagens - Klinisk Kemi Reagens: ALBT2, Tina-quant Albumin Gen.2 Reagenskoncentrationer i flaskor R1 Tris(hydroxymetyl) aminometan, ph 8,0 50 mmol/l Polyetylenglykol (PEG) 4,2 % EDTA 2,0 mmol/l Konserveringsmedel R2 Polyklonala Anti-human albuminantikroppar (får) beroende på titer Tris-buffert, ph 7,2 100 mmol/l Konserveringsmedel R3 Reagens för antigenöverskottskontroll Albumin utspätt i serum (humant) NaCl 150 mmol/l Fosfatbuffert, ph 7,0 50 mmol/l Konserveringsmedel Förvara i kyl I kyl I instrumentet hållbara till utgångsdatum 12 veckor Kalibrator: C.f.a.s. PUC kalibrator Bruksfärdig kalibrator Förvara i kyl 5 x 1 ml Hållbar oöppnad förpackning till utgångsdatum i kyl öppnad förpackning 1 månad i kyl Kontroller: Liquichek Urine Control 1 och 2 LU1 och LU2/ SPAL (LU2) Färdig kontroll Förvaras i kyl 12 x 10 ml Hållbar obruten flaska i kyl till utgångsdatum (om ej annat anges) öppnad flaska i kyl 30 dagar Kontroller: Liquid Multiqual 2 och 3 MQ 2 och MQ 3 Färdig kontroll Förvaras i frys 12 x 10 ml

6 Metodbeskrivning 6(12) Produkten innehåller poolat fryst humanserum. Varje enskild givarenhet är testad med avseende på förekomsten av HIV-antikroppar och hepatit B ytantigen och hepatit C (HCV). Produkten skall trots detta behandlas med samma försiktighetsåtgärder som patientprov. Hållbart otinad i frys till utgångsdatum (om ej annat anges) tinad i kyl 2 veckor Spädningslösning: Natriumklorid, NaCl 9 g/l Används som spädningslösning för prov Provtagning Serum/Plasma Plasma: 5 ml Li-heparinplasma med gel, mintgrön propp är det rör som rekommenderas. K2-EDTA plasma kan användas. Serum: 5 ml venblod i rör med separationsgel, gul propp eller rör utan tillsats, röd propp kan också användas. Hållbart 3 dygn i rumstemperatur 5 månader i kyl Flera år i frys Urin 10 ml urin, i plaströr, av välblandad dygnsmängd, spontan-, dygnsurin eller andra morgonurinen. U-Alb/U-Krea kvot: Morgonurin eller stickprov från annan tid på dygnet. Centrifugera urinen vid 800 g. Hållbart 3 dygn i rumstemperatur 1 månad i kyl 6 månader i frys Csv Centrifugera csv före analys Hållbart 3 dagar i kyl 6 månader i frys Dialysat Analyseras obehandlat. Diverse vätskor Na- eller Li-Heparinrör utan gel, grön propp. Centrifugera provet före analys.

7 Metodbeskrivning 7(12) Tillsätt hyalas vid behov, se beskrivning för Leukocyter i ledvätska, pleuravätska och ascites - Klinisk kemi Hyalasbehandlat prov ska centrifugeras innan analys. Hållbart 3 dygn i rumstemperatur 5 månader i kyl Flera år i frys Kalibrering Använd H 2 O och C.f.a.s. PUC som kalibreringsmaterial för 6-punktskalibrering. Gör en 6-punktskalibrering vid lotbyte av reagens. Kalibrera också om kontrollresultaten indikerar att en metodkalibrering är nödvändig Uteslut först andra felkällor Signera alla utskrifter av kalibreringsresultat och arkivera minst 2 år i pärm märkt Kalibreringsrapporter Utförande: se Cobas 6000 Kalibratorer - Klinisk Kemi Kontroller Analysera MQ2, MQ3, LU1, LU2 och SPAL enligt kontrollschema för respektive ort: Kontrollschema för Cobas 6000 Gävle - Klinisk Kemi Kontrollschema för Cobas 6000 Hudiksvall - Klinisk Kemi Kontrollschema för Cobas 6000 Bollnäs - Klinisk Kemi Analysera kontroller även efter kassettbyte och kalibrering. Instrumentet markerar L respektive H på kontroller utanför gränserna, som är desamma som finns i labdatasystemet. För bedömning av kontrollresultaten används de gränser som finns inlagda i labdatasystemet. Utförande: se Cobas 6000 Kontroller - Klinisk Kemi Utförande Se Cobas 6000 Provhantering - Klinisk Kemi Beräkning Instrumentet beräknar resultatet med hjälp av kalibratorernas absorbanser Beräkningar av kvoter Csv/P - Albuminkvo t U - Albumin/U - Kreatininkvot alb i Csv- vätska alb i plasma U - Albumin U - Kreatinin

8 Metodbeskrivning 8(12) Svarsrutiner Plasma och diverse vätskor Svaret anges utan decimal i g/l Resultat < 3 g/l besvaras < 3 g/l Urin U-Alb Svaret anges utan decimal i mg/l. Resultat < 3 mg/l besvaras < 3 mg/l. Visuellt blodiga uriner svaras ut med kompleterande kommentar, kortkod KE53: Osäkert värde på grund av blod i urin. tu-albumin Svaret anges utan decimal i mg/d. Resultat < 3 mg/d besvaras < 3 mg/d Skriv in ersättande kommentar PR7 på resultat där U-Alb är < 3 mg/l: Kan ej beräknas pga. U-Alb < 3 mg/l. U-Albumin/U-Kreatininkvot Svaret anges med 1 decimal i g/mol. Ersättande kommentar: Kan ej beräknas pga. U-Alb < 3 mg/l läggs automatisk på resultat där U-Alb är < 3 mg/l. CSV CSV-Albumin Svaret anges utan decimal i mg/l. Resultat < 36 mg/l besvaras < 36 mg/l. Csv/P-Albuminkvot Svaret anges med 1 decimal. För beräkning av Csv/P-Albuminkvot se Cobas 6000 Provhantering - Klinisk Kemi Dialysat Svaret anges med 3 decimaler i g/l. Referensintervall Plasma Albumin < 6 månader g/l 6 månader 12 år g/l år g/l år g/l > 40 år g/l

9 Metodbeskrivning 9(12) Urin U-Albumin < 20 mg/l tu-albumin < 30 mg/d U-Albumin/U-Kreatininkvot Referensintervall saknas. U-alb/U-kreakvot är individberoende och används för att följa en patient. Csv Csv-Albumin år < 280 mg/l år < 320 mg/l > 50 år < 390 mg/l Csv/P-S Albuminkvot år < 5,7 x år < 6,2 x år < 7,2 x år < 8,9 x 10-3 > 60 år < 9,0 x 10-3 Diverse Albumin i dialysat eller diverse vätskor är ej tillgängligt. Referenser: Referensintervallen för vuxna är det gemensamma nordiska (Klinisk kemi i Norden 1993;5:13-17) CRM 470. Information från SFKK och Equalis AB; Införande av gemensamma referensintervall (NORIP) i Sverige, version Faluprojektet 2012 Barnreferensintervall. U-Albumin och tu-albumin Laurells Klinisk kemi i praktisk medicin. Sjunde upplagan, Lund: Studentlitteratur, U-Albumin/U-Kreatininkvot Equalis expertgrupp Verifiering Imprecision Inom serie: Mätningen utförd: Provmaterial Lot nr Nivå Antal mätningar SD CV % MQ ,043 3,09 MQ ,972 2,32 Inomserieimprecision beräknad på seriebestämningar enligt formel CV = s x 100 x s ( x x) 2 n 1

10 Metodbeskrivning 10(12) Mellan serie: Mätningarna gjorda mellan: Provmaterial Lot nr Nivå Antal mätningar SD CV % MQ ,78 2,23 MQ ,87 2,03 Riktighet Albumin immunologisk metod kalibreras med av Roche åsatta värden på kalibratorerna. Metoden är standardiserad mot CRM 470. Albumin ingår i Equalis proteinkontroll, extern kvalitetssäkring för laboratoriemedicin i Sverige. Protokoll för bedömning av Equalis samt avvikande mätresultat arkiveras i pärmar märkta EQUALIS som står på Kemi Lab. Equalis mätresultat sparas online på Mätområde Serum/Plasma Lägsta mätbara koncentration 3 g/l Högsta mätbara koncentration 101 g/l vid normal provvolym 128 g/l vid utökad provvolym Vid resultat > tekniska gränsen späd manuellt med NaCl, 9g/L. Skriv in värdet och spädningsfaktorn manuellt i labdatasystemet och tryck Tab Urin Lägsta mätbara koncentration 3 mg/l Högsta mätbara koncentration 400 mg/l vid normal provvolym 4400 mg/l vid minskad provvolym Vid resultat > tekniska gränsen begär spädning i citm. Alternativt späd manuellt med NaCl, 9g/L. Skriv in värdet och spädningsfaktorn manuellt i labdatasystemet och tryck Tab Csv Lägsta mätbara koncentration 36 mg/l Högsta mätbara koncentration 4800 mg/l vid normal provvolym mg/l vid minskad provvolym Vid resultat > tekniska gränsen späd manuellt med NaCl, 9g/L. Skriv in värdet och spädningsfaktorn manuellt i labdatasystemet och tryck Tab Angiven mätosäkerhet Se dokumentet Ackrediteringens omfattning Klinisk Kemi

11 Interferens och felkällor Metodbeskrivning 11(12) Serum/plasma Hemolys Ikterus Lipemi H-index g/l I-index µmol/l L-index Rheuma faktorer < 1200 IU/mL interfererar ej. I sällsynta fall kan förekomst av M-komponent, i synnerhet av IgM-typ, ge otillförlitliga resultat. Urin Hemolys Ikterus Lipemi H-index g/l I-index µmol/l L-index Beroende på antigen excess i reagenset R3 kommer ingen oflaggad högdos hookeffekt att uppträda upp till en urin-albuminkoncentration på mg/l. Aceton 60 mmol/l Interfererar ej Ammoniumklorid 0,11 mol/l Kalcium 40 mmol/l Kreatinin 0,18 mol/l γ-globuliner 500 mg/l Glukos 0,19 mol/l Urea 0,8 mol/l Urinsyra 5,95 mmol/l Urobilinogen 378 µmol/l Csv Hemolys Ikterus Lipemi H-index g/l I-index µmol/l L-index Beroende på antigen excess i reagenset R3 kommer ingen oflaggad högdos hookeffekt att uppträda upp till en CSV albuminkoncentration på g/l. Revideringar Datum Revisionsnr Orsak Ändrat namn på dokument det hänvisas till.ändrat CSF till CSV Ändrat till angiven mätosäkerhet Ändrat under, analyskod, beräkning, svarsrutin, mätområde, angiven mätosäkerhet samt ändrat spinal och sp till Csv på flera ställen Lagt till information kring diverse vätskor och NPU-koder. Lagt till Laurells Klinisk kemi 9:e upplagan. Länkat beskrivningar. Ändrat

12 Metodbeskrivning 12(12) enhet på urin-albumin och Csv-albumin vilket medför uppdaterering av mätområde, referensintervall, svarsrutiner. Uppdaterat interferenser Uppdaterat logga och länkar Tagit bort referensintervall för U-alb/U-kreakvot samt justerat referensintervall för U-alb Länkat till Teknisk bedömning för beräkning av Csv/P-Alb kvot Justerat medicinsk bakgrund och lagt till att hyalasbehandlat prov ska centrifugeras Lagt till NPUkod för U-Albumin/Kreatinin kvot Uppdaterat provtagning. Lagt till Kortkod 53 för blod i urin under svarsrutiner Uppdaterat länkar och svarsrutiner Uppdaterat mätområde, spädning manuellt eller i citm