hcg i urin Analyskod i labdatasystemet NPU-kod Referenser Medicinsk bakgrund Mätprincip Reagens Provtagning Kalibrering Kontroller Utförande

Transkript

1 Upprättat datum: (7) Division Diagnostik Revisionsnr: 8 Giltigt t.o.m.: Laboratoriemedicin Metodansvarig: Alice A Fröjdh Medicinskt ansvarig: Lars Olof Artur L Hansson Upprättare: Annelie B Ravstis Strömbäck Granskare: Maria Andersson Fastställare: Lars Hansson hcg i urin Innehållsförteckning Analyskod i labdatasystemet NPU-kod Referenser Medicinsk bakgrund Mätprincip Reagens Beställningsinformation Kvantitets och Beredningsbeskrivning Provtagning Kalibrering Kontroller Utförande Avläsning Reaktionsplatta Svarsrutiner Verifiering Riktighet Interferens och felkällor Begränsningar Revideringar

2 2(7) Analyskod i labdatasystemet HCGH NPU-kod NPU10394 Referenser Batzer FR. Hormonal Evaluation of early Pregnancy Fertil. Steril 1980: 34 (1): 1-13 Catt KJ, ML Dufau, JL Vaitukaitis Appearance of hcg in pregnancy plasma following the initiation of implantation of the blastocyte, J.Clin Endocrinol. Metab. 1975;40(3): Laurells klinisk Kemi i praktisk medicin 7:de upplagan Medicinsk bakgrund Humant koriongonadotropin (hcg) är ett glykoprotein som består av två subenheter en - och en -kedja.den specifika biologiska aktiviteten finns i -kedjan. Hormonet kan upptäckas i serum och urin redan nio dagar efter konceptionen. Hormonets huvudfunktion är att vidmakthålla steroidproduktionen från corpus luteum under den tidiga delen av graviditeten(luteotrop funktion). Sekretionen av hcg når sitt maximum efter dagar och minskar därefter allteftersom placentans trofoblastceller minskar i antal. Från denna tidpunkt är den luteotropa funktionen av mindre betydelse, placentan producerar nu själv nödvändigt progesteron. Efter 140 dagar (20:e veckan)är hcg-produktionen konstant. HCG eller hcg-liknande substanser produceras också i endokrint aktiva tumörer, såsom trofoblasttumörer(mola hydatidosa), dysgerminom, samt teratom och seminom även hos män. Förhöjda nivåer kan även ses vid ektopisk graviditet, hotande abort vid intag av p-piller och avbruten graviditet. Mätprincip Detta hcg-test är ett snabbt immunokromatografiskt test för kvalitativ mätning av humant koriongondotropin i urin för att stödja ett tidigt påvisande av graviditet. Testet använder två linjer för att indikera resultatet. Testlinjen använder en kombination av antikroppar, däribland en monoklonal hcg-antikropp för selektiv mätning av förhöjda värden av hcg. Kontrollinjen är sammansatt av polyklonala antikroppar från get och kolloidala guldpartiklar. Testet utförs genom att urinprov droppas ned i provbrunnen, och därefter observeras uppkomsten av färgade linjer. Urinprovet sugs med hjälp av kapillärverkan genom membranet och reagerar med det färgade konjugatet. Positiva prover reagerar med det specifika antikropps-hcg-färgkonjugatet och skapar en färgad linje i testregionen på membranet. Om testlinjen inte uppstår indikerar det ett negativt resultat. Som en procedurkontroll uppstår alltid en färgad linje i kontrollregionen. Kontrollstrecket indikerar att rätt volym har tillsatts till membranet och att det sugit korrekt.

3 3(7) Reagens Beställningsinformation Produktnamn Best nr Fabrikat Leverantör ColibriCheck hcg FHC 102 Colibri Medical AB Alere toxicologi AB Liquichek Urine Chemistry Control 1 12 x 10 ml(delas med Cobas) 397 Bio Rad Bio Rad Liquichek Urine Chemistry Control 2 12 x 10 ml (delas med Cobas) 398 Bio Rad Bio Rad Kvantitets och Beredningsbeskrivning ColibriCheck hcg Innehåll Varje kit innehåller: 20 reaktionsplattor 20 engångspipetter av plast Hållbar i rumstempratur till utgångsdatum på förpackningen. Förvara testkassetterna i den förseglade foliepåsen fram till användning. Får inte frysas Låt reaktionsplattan uppnå rumstemperatur innan den tas ur påsen och används Liquichek Urine Chemistry Control LU1 och LU2 (delas med Cobas) Färdig kontroll 12x10 ml Förvara i kyl Hållbar obruten flaska i kyl till utgångsdatum (om ej annat anges) öppnad flaska i kyl 30 dagar Provtagning Alla typer av urinprov kan användas för analys, men morgonurin rekommenderas Urinprovet taget i ett rent och torrt provtagningskärl kan förvaras upp till 48 timmar i kyl Ytterligare förvaring skall ske vid under -20 C Rumstemperera alltid urinprover före analys Tina frysta prov och blanda väl före analys Centrifugera grumliga urinprov före analysering Användning av konserveringsmedel rekommenderas ej Kalibrering ColibriCheck hcg är standardiserat mot WHO 3:e IS 7 med en detektionsgräns på 25 IU/L

4 4(7) Kontroller Analysera LU1 (negativ) och LU2 (positiv) kontroll när en ny lot påbörjas. Dokumentera på Protokoll för Lotkontroll ColibriCheck hcg Kontroll av att tillräcklig provvolym satts till plattan och att rätt teknik använts finns inbyggd i analysplattan Analysera Equalis kontroll var fjärde månad Utförande Låt urinprov/kontroll och reaktionsplatta uppnå rumstemperatur Öppna förpackningen med reaktionsplattan och placera den på plant och torrt underlag Dispensera 3 droppar (ca 100 µl) urin i provbrunnen (S) med engångspipetten som medföljer kitet. Undvik att bubblor samlas i provbrunnen OBS! Analysera inte på makroskopiskt blodig urin

5 5(7) Avläsning Avläsningen ska ske efter 3 men före 10 minuter Vid låga hcg-koncentrationer kan det förekomma en svag röd testlinje i testfönstret (T) efter en längre tid Strecket för tekniskt godkännande (C) i resultatfönstret måste bli rosa/rött Två streck, ett vid T och ett vid C visar att provet innehåller mer än 25 IU/L hcg Endast ett streck vid C visar att provet innehåller mindre än 25 IU/L hcg Om endast strecket vid T framträder är testet ogiltigt Analysera om provet Kontakta processansvarig om provet fortfarande är ogiltigt Reaktionsplatta Prov med hcg-koncentration av ca 25IE/L ger en knappt synlig provlinje, som uppträder sent Vid ökad hcg-koncentration blir provlinjen tydligare Svarsrutiner Positiv Två röda streck i resultatfönstret visar ett positivt prov Strecken kan variera i färgstyrka beroende på hur hög hcg-koncentrationen är Svara med en ersättande kommentar UHCG+ (Positivt Koncentrationen av U- hcg är >25 IU/L) Negativ Ett rött streck i resultatfönstrets kontrollområde visar ett negativt prov Svara med en ersättande kommentar UHCG- (Negativt Koncentrationen av U-hCG är <25 IU/L) Analysera om provet om ingen kontrollinje ses.

6 6(7) Verifiering Riktighet U-hCG ingår i EQUALIS program för Urintestremsa, extern kvalitetssäkring för laboratoriemedicin i Sverige Provmaterialet består av sterilfiltrerad urin och analyseras fyra gånger per år Mätresultat och utvärdering arkiveras i pärm märkt EQUALIS Urintestremsa. Interferens och felkällor Följande potentiellt interfererande ämnen har enligt firman tillsatts hcg-positiva prov och negativa prov Acetaminofen 200 mg/l Koffein 200 mg/l Acetylsalicylsyra 200 mg/l Gentiansyra 20 g/l Askorbinsyra 200 mg/l Glukos 20 g/l Atropin 200 mg/l Hemoglobin 10 mg/l Bilirubin 20 mg/l Inget av ämnena interfererade med testet Ett antal tillstånd utöver graviditet kan ge ökade hcg-nivåer i urin och kan således ge falskt positiva resultat. Dessa tillstånd inkluderar trofoblastiska sjukdomstillstånd och vissa icketrofoblastiska neoplasier såsom testikeltumörer, prostatacancer, bröstcancer och lungcancer. Därför skall närvaro av hcg i urin endast användas för att diagnosticera graviditet om dessa tillstånd uteslutits. Begränsningar Testet är mycket känsligt och påvisande av graviditet (positivt prov) kan ses redan före utebliven menstruation Det är relativt vanligt med tidiga missfall som sker före eller kring tidpunkten för nästa menstruation (upp mot 25 % av alla graviditeter) Det är ej önskvärt att påvisa en graviditet för att sedan behöva informera modern om ett sannolikt missfall Detta gör att analysen bara skall göras på prov som är lämnade minst 10 dagar efter utebliven menstruation om det ej är medicinskt nödvändigt Falskt positiva resultat kan bero på andra tillstånd än graviditet, t ex trofoblastisk sjukdom, icke trofoblastiska neoplasmer, bröstcancer och lungcancer

7 7(7) Revideringar Datum Revisionsnr Orsak Nytt fabrikat på teststicka. Nytt kontrollförfarande. Lagt till interferenser Tagit bort prefix i rubrik och skrivit in NPU-kod samt ny bild på testplatta Nytt fabrikat på produkten, ändrat svarshanteringen, ny leverantör, nytt best nr Ändrat under rubrik medicinsk bakgrund Bytt logotype