U-Proteinprofil ger bl.a. en uppfattning om nivå av albumin och protein HC i urinen samt huruvida tecken på Bence-Jones proteinuri föreligger.

Transkript

1 1(5) S/U-Proteinprofil Bakgrund, indikation och tolkning S-Proteinprofil ger främst en uppfattning om akutfasreaktionen och immunglobulinmönstret hos patienten. Indikationerna är utredning av förhöjd SR, utredning av inflammatoriska tillstånd, utredning av leversjukdomar, misstanke om monoklonalt immunglobulin (ses t.ex. vid myelom, lymfom, AL-amyloidos och andra lymfoproliferativa sjukdomar) och uppföljning av känt monoklonalt immunglobulin (M-komponent). U-Proteinprofil ger bl.a. en uppfattning om nivå av albumin och protein HC i urinen samt huruvida tecken på Bence-Jones proteinuri föreligger. I analysen S-proteinprofil ingår separation av proteiner i serum m h a kapillärelektrofores som presenteras i form av en absorbanskurva ett s.k. elektroferogram. Även kvantitativa immunkemiska bestämningar av de specifika proteinerna albumin, alfa-1-antitrypsin, orosomukoid, haptoglobin, CRP, IgG, IgA och IgM ingår. Elektroferogrammet och de kvantitativt bestämda proteinerna tolkas utifrån tillgänglig information på remissen och ett skriftligt svar utformas. I analysen U-proteinprofil ingår albumin, IgG, kappa, lambda, protein HC och kreatinin. De kvantitativt bestämda proteinerna tolkas utifrån tillgänglig information på remissen och ett skriftligt svar utformas. Vid U-proteinprofil beställd på samma remiss som S-Proteinprofilen inkluderas de kvantitativa värdena på urinproteiner i samma svar som S-proteinprofilsvaret och en samlad bedömning görs [1,2]. Immunfixation är en kompletterande analys till S/U-proteinprofil som kan utföras på såväl serum som urin. Den används bl.a. för att typ-bestämma nyupptäckta M-komponenter men även för att bekräfta frånvaro/närvaro av mindre M-komponenter. Immunfixation beställs av den som bedömer proteinprofilen på laboratoriet. Beställningen grundar sig på såväl tillgänglig remissinformation som aktuellt proteinmönster. I proteinprofilutlåtandet framgår om immunfixation är utfört. I analysen S- Fria lätta Ig-kedjor (FLC) ingår koncentrationsbestämning av fria kappa- och fria lambda-kedjor, dessutom beräknas och presenteras kvoten dem emellan. Beställs S- Frialätta-Ig-kedjor på samma remiss som S/U-proteinprofil kommenteras analysen i proteinprofil-

2 2(5) utlåtandet. Ibland kan analys av S-Fria lätta Ig-kedjor underlätta tolkningen av proteinprofilen och efterbeställs då av den som tolkar proteinprofilen på laboratoriet. För mer information om S-Fria lätta Ig-kedjor se separat information för denna analys i analysportalen. Observera: Frågeställning och klinisk information om patienten kan påverka beslut om huruvida kompletterande immunfixation och/eller analys av fria-lätta Ig-kedjor ska utföras, såväl som hur resultaten tolkas. Frågeställning och klinisk information anges på remiss Special 1 genom att markera vid förtryckta alternativ och/eller genom att skriva fri text. De förtryckta alternativen är valda utifrån relevans. Konsultremiss går att använda vid behov. Nedan följer några exempel på då frågeställning/klinisk information förbättrar möjligheterna till ett för patienten relevant svar. - Vid utredning av oligosekretoriska myelom och lättkedje-amyloidos kan det vara av värde att utföra immunfixation av såväl serum och urin samt analys av fri-lätta-kedjor i serum oavsett vad den kapillärelektroforetiska separationen visar. - Infusion av läkemedel som består av monoklonalt immunglobulin kan visa sig som en liten monoklonal fraktion (M-komponent) i proteinprofilen. - Graviditet är ett fysiologiskt tillstånd som påverkar nivån av flera plasmaproteiner. Analysprincip Sebia Capillarys 2: Proteinerna separeras i kiselbeklädda kapillärer och detekteras med absorbansmätning vid 200 nm vilket motsvarar den våglängd där huvudsakligen peptidbindningen absorberar ljus. Separationen sker vid hög spänning och med en alkalisk buffert. Laddade molekyler separeras enligt deras elektroforetiska mobilitet. Användning av sebias HR-buffert medför att ett normalt proteinmönster har åtta olika fraktioner, albumin, orosomukoid (alfa-1- acid-glykoprotein), alfa-1-antitrypsin, haptoglobin, alfa-2-makroglobulin, beta-1-fraktionen (innehåller huvudsakligen transferrin), beta-2-regionen (innehåller huvudsakligen C3), gammaregionen (innehåller huvudsakligen immunglobuliner) [2,3].

3 3(5) Referensintervall Sebia Capillarys 2: Referensintervall saknas. Metodkarakteristika Interferenser och felkällor Inga absoluta kontraindikationer föreligger för att utföra analysen proteinprofil. Vid eventuella tveksamhet om analysen skall utföras rådfrågas den som skall tolka den aktuella proteinprofilen. Kapillär elektroforetisk separation med Sebia Capillarys 2 [2]: Hemolyserade prov medför att hemoglobin/haptoglobinkomplex induceras som migrerar mot alfa-2-makroglobulin-fraktionen. Det innebär att aktuell haptoglobinkoncentration är svårt att uppskatta från elektroferogrammet. Hemopexin kan ge en puckel i beta-1-fraktionen (på alfa-2-makroglobulinsidan). Betalipoproteiner kan ge en liten topp mellan alfa-2-makroglobintoppen och beta-1- fraktionen. Ju äldre ett prov är desto mer modifieras beta-1 och beta-2 fraktionerna vilket medför att det blir svårare att bedöma dessa fraktioner. Plasmaprover eller ofullständigt fibrionogenfällda plasmaprover kan bli svåra att bedöma då fibrinogenet hamnar på samma plats som CRP-fraktionen. En M-komponent skall misstänkas vid följande felmeddelanden Warning: Migration centering is out of range eller när det elektroferogrammet är försenat eller på annat sätt förvrängt. Prover skall då reduceras och analyseras igen: Späd beta-merkaptoethanol (BME eller 2-merkaptoethanol) till 20% i H2O genom att 80µL β-merkapto blandas med 320 µl dest H2O. 10 µl 20 % merkapto lösning blandas med 190 µl serum.

4 4(5) Vänta i minst 15 minuter och max 30 minuter innan provet körs in i kapillären. Se till att instrumentet är tomt på prov så att den aktuella racken körs med en gång. Mätområde Se respektive metodbeskrivning för de kvantitativa immunkemiska proteinanalyserna. Detektionsgräns Capillarys 2: Lägsta detektionsnivå för ett monoklonalt immunglobulin ligger i koncentrationsområdet mg/l [2]. Detektionsnivån av en M-komponent påverkas bl.a. komponentens mobilitet och halter av övriga proteiner i den elektroforetiska separationen och kan således vara påtagligt högre än den ovan angivna [2]. Kvantitativa immunkemiska metoder: Se respektive metodbeskrivning. Mätosäkerhet Capillarys 2: Reproducerbarheten för den relativa ytan under albumin-, alfa-1-antitrypsin-, orosomukoid- respektive haptoglobinfraktionen är god med en CV <5%. Detta gäller så väl inom som mellan serie och mellan lot [2]. Spårbarhet Capillarys 2: Saknas Ackreditering Metoden är ackrediterad.

5 5(5) Referenser 1. Nilsson-Ehle Peter (red) Laurells Klinisk Kemi I praktisk medicin. Åttonde upplagan 2003 sid Insert. Capillarys HR, REF2004, 2009/ Capillarys 2, Operatörsmanual, REF1222, 2006/ Instrumenthandledning