Identifiering av päronsorter med hjälp av DNA-markörer

Relevanta dokument
Frukt i klonarkiven äpple, päron, plommon, söt- och surkörsbär

Laboration v.40 Detektion av Legionella pneumophilia med nestad PCR

Genetisk variation hos kulturrosor anpassade för svenskt klimat Dnr: /06, /07

Pressmeddelande den 29 maj 2015

Biologiskt kulturarv på kykogården

Centrum för genetisk identifiering Teknisk rapport Björnspillningsinventering 2015

Tillämpning av olika molekylärbiologiska verktyg för kloning av en gen

Kartering och nyttjande av genetisk mångfald hos svenska kulturrosor Dnr: /06, /07, /08, /09, /11

Skattning av brukbar diversitet hos äpplesorter anpassade för svensk klimat: resistens mot fruktträdskräfta (Neonectria ditissima)

Centrum för genetisk identifiering Teknisk rapport Björnspillningsinventering 2016

Centrum för genetisk identifiering Teknisk rapport Björnspillningsinventering 2015

Polymerase Chain Reaction

Beskrivning av fruktsorter i Krusenstiernska trädgården i Kalmar

Här bevaras våra svenska fruktsorter. POM Programmet för Odlad Mångfald


Fruktträdskräfta (European canker) Fruktträdskräfta: en utmaning för äppelträd och forskare. Svampen skadar även frukt under lagring

DNA-ordlista. 16S: Egentligen 16S rrna. Mitokondriell gen med förhållandevis liten variation som ofta används för att artbestämma DNA från däggdjur.

Resistens mot fruktträdskräfta i äpple

ChromoQuant In vitro diagnostiskt test kit för analys av vanligen förekommande aneuploidier i kromosomerna 13, 18 och 21 samt i X och Y.

DNA-ordlista. Amplifiera: Att kopiera och på så sätt mångfaldiga en DNA-sekvens med hjälp av PCR.

Framtida tekniker MLPA (Multiplex Ligation Probe Amplification) med tillämpning inom Talassemi. Dick Nelson Klinisk kemi, Labmedicin Skåne

/LGM. Amplifiering och analys av humant mitokondrie-dna med hjälp av PCR teknik och agarosgelelektrofores

JANINA WARENHOLT Molekylär patologi LUND

Centrum för genetisk identifiering Teknisk rapport Björnspillningsinventering 2017

Minskade arealer för äpplen och päron. Cecilia Branzén,

ChromoQuant In vitro diagnostiskt test kit för analys av vanligen förekommande aneuploidier i kromosomerna 13, 18 och 21 samt i X och Y.

5 Trädgårdsodling. Sammanfattning. Om statistiken. Trädgårdsodling

DNA-analyser: Introduktion till DNA-analys med PCR och gelelektrofores. Niklas Dahrén

Ökande äppel- och päronodling

5 Trädgårdsodling Trädgårdsodling

BJÖRNSPILLNING. - insamling till DNA-analyser

Molekylärbiologisk diagnostik av tarmparasiter

Centrum för genetisk identifiering Fisk, kräftor och musslor som edna metod och fältprover

Roland von Bothmer Svalbard Global Seed Vault SLU och NordGen

Rosuppropet. Kulturrosor odlade före POM i samarbete med Svenska Rosensällskapet

5 Trädgårdsodling Trädgårdsodling

Laboration DNA. Datum:16/11 20/ Labgrupp: 11 Laboranter: Johanna Olsson & Kent Johansson

5 Trädgårdsodling. Sammanfattning. Om statistiken. Trädgårdsodling

Genresursarbete i Sverige. Vårt nationella kulturarv

Linköpings Universitet. Lägesspecifik Mutagenes av proteiner

5 Trädgårdsodling 87 5 Trädgårdsodling Kapitel 5 innehåller information om Frilandsarealer Växthus- och bänkgårdsytor Skördar av köks- och trädgårdsvä

Rapport avseende DNA-analys av spillningsprover från järv och lo

Projekttitel: DNA-kartläggning av svenska mandatsorter av äpple

Sorter, sortutveckling och bevarande. Begreppet bevarandesort.

Delredovisning 2014 U Carlson-Nilsson et al

Cirkulerande cellfritt DNA

Typning av Legionella på Folkhälsomyndigheten

Slutrapport - Förstudie om Alternariaförekomst i potatis och behandlingseffekter 2013 i Mellansverige.

! A' C1!! '! CD!2C C A C4!!2 2,7/(?3(? C.C C!!!'!!' 2 A ' ' C4! '!! E!E? C"!'! 2! '! A!! 0 A'?!! ' C ' '!!! C!!! '!C0! ' C

Akademin för Teknik och Miljö

Framtagning av nytt hybridiseringsmaterial för ökad bladmögelresistens i ekologisk potatisodling

Kodnummer: 1) Beskriv processerna som sker i replikationsgaffel (eng. replication fork)? (3)

Skattning av brukbar diversitet hos Svenska mandatsorter av äpple

Ladokkod: TK151C Tentamen ges för: Bt3. Namn: Person nummer: Tentamensdatum: 17/ Tid: 09:00-13:00. Hjälpmedel

Tillämpning av olika molekylärbiologiska verktyg för kloning av en gen

DNA-sekvenserings utskick Carola Andersson KMP-lab Sahlgrenska Universitetssjukhuset

Artbildning och utdöende

Fisk, kräftor & musslor som edna Patrik Bohman, SLU Aqua Sötvattenslaboratoriet

Familjär hyperkolesterolemi med NGS-analys

Marie Nyman. bioscience explained Vol 8 No 1. GMO eller inte GMO? Nya tekniker sätter lagstiftningen på prov. Gentekniknämnden, Stockholm, Sverige


Förordning nr 765/2002, benfria styckningsdelar av nötkött, exportbidrag [2241]

Så blir en årgångsglögg till.

En samling fårskallar

Sammanfattning Arv och Evolution

Det nordiska samarbetet

Digital sekvensinformation och Nagoyaprotokollet

Metodutveckling för detektion av jordbundna sjukdomar för optimering av platsspecifik produktion av vete, ärt och oljeväxter

Optimerat NGS-flöde för rutintypning av bakterier

Syfte? Naturliga populationer i Trollsvattnen. Otoliter för åldersbestämning. Vävnadsprover för genetisk analys

Separation av plasmaproteiner med elektrofores, HYDRAGEL PROTEIN(E) K20

Utvärdering av BD MAX enteric parasite panel på ett kliniskt laboratorie

Självständigt arbete (examensarbete), 15 hp Kandidatexamen i biomedicinsk laboratorievetenskap VT 2017

De nya äppelsorterna produceras nu och är salufärdiga hösten Våra nya ÄPPLEN. Produktion:

Preparation och spektroskopisk karakterisering av Myoglobin

Inger Åhman Inst. för växtförädling BLADLUS/RÖDSOTVIRUS- RESISTENS I HÖSTVETE BLADFLÄCKSJUKE- RESISTENS I KORN

Forskningsområdet i Sverige och utlandet, idag och i framtiden. Per Hofvander, Lund, 11 November 2015

Linköpings Universitet. Lägesspecifik mutagenes av proteiner

Växtförädling och forskning kring äpple på Balsgård

DNA-labb / Plasmidlabb

MSB PROJEKT: MOBIL RESURS VID MISSTÄNKT FARLIG SMITTA. Tobias Lilja

Utveckling av multiplex realtids PCR metod för detektion av kalvdiarrévirus hos nöt

Ohälsosamma ämnen i kulturhistoriska samlingar

Undersökning av några svenska päronsorters känslighet mot päronpest

Användning av PCR i växtodlingen. Anders Jonsson, SLU/ JTI, Skara

Skrivning för biolog- och molekylärbiologlinjen, genetik 5p.

Jämförelse och utvärdering av två kommersiella PCR kit för detektion av HLA-B*27

ÅR: 2013 Tillsynsrapport från Läkemedelsverket

Droplet Digital PCR Ny metod för identifiering och kvantifiering av HTLV

Arvet och DNA. Genetik och genteknik

ELEMENTÄR - SVÅRARE FÄRGGENETIK. Del 3

Tidiga erfarenheter av arvets mysterier

Realtids-PCR. icycler BioRad, mikrotiterplattor. LightCycler Roche, kapillärer. ABI Prism 7000 Applied Biosystem mikrotiterplattor

Moderna verktyg i hybridförädlingen

Kunskap om mångfald. Verksamhetsberättelse För POM Rapport 2008:18. Foto: Mats Pettersson

NGS för övervakning och utbrottshantering av livsmedelsburna bakterier

Genetisk variation hos Tåmeharr

Matsvinn innebär: ekonomiska förluster för odlarna en belastning på miljön bidrar till klimatförändringar

Validering av en multiplex realtids-pcr för direkt detektion av Herpes simplex virus och Varicella zoster virus

Bruksanvisning för SURVEYOR Scan NRAS Kit Exons 2, 3 & 4 CE IVD

Transkript:

Identifiering av päronsorter med hjälp av DNA-markörer Bakgrund Förutsättningar för framgångsrik forskning och sortframställning, både i dag och i framtiden, är tillgång på ett genetiskt variabelt växtmaterial. Ett stort antal länder har därför inrättat program för att samla in, bevara och karaktärisera genetiska resurser av viktiga nyttoväxter. I Sverige ligger detta ansvar på POM, som i samarbete med Nordiska genbanken bevarar 'mandatsorter' av exempelvis frukt och bär, dvs sorter som uppkommit i Sverige eller haft en lång och viktig odlingshistoria här. Hittills har 57 olika päronsorter fått status av mandatsort. Flertalet av dessa bevaras i något av de 11 klonarkiven runt om i landet. Desutom finns det en större samling av päronsorter, nämligen på Balsgård-SLU, med totalt ca 140 namngivna sorter varav 29 mandatsorter. Inom ECPGR (European Community for Plant Genetic Resources) har man tillsatt en kommitté speciellt för utarbetande av ett gemensamt system för DNA-markörer. Ett ökande antal pärongenbanker har också redan börjat utnyttja DNA-markörernas fördelar; sålunda har alla 500 päronsorterna i National Fruit Collection på Brogdale Farm i England analyserats med 12 mikrosatellit DNA-markörer, liksom flertalet av päronsorterna i USDA genbanken i Corvallis, Oregon, USA. Medel erhölls 2008 (210000:-) från POM/SJV för att påbörja DNA-baserad identifiering av mandatsorterna av päron i Sverige. Material Bladprover samlades in från 29 sorter på Balsgård: Rödköttigt päron (= Blodpäron?), Bonne Louise, Carola, Cecilia, Clapps favorit röd (trol. somatisk mutation av vanlig Clapps favorit), Clara Frijs, Comice, Conference, Esperens Herre, Filip, Fritjof, Furstligt grönt taffelpäron, Gansels bergamott, Gråpäron, Gränna rödpäron (= Grännapäron?, två olika träd analyserades), Göteborgs diamant, Herzogin Elsa, Holländskt fikonpäron, Hovrådspäron, Hovsta, Höstbergamott, Ingeborg, Johantorp, Kejsarinnepäron, Lybeckerbergamott, Moltke, Pierre Corneille, Tysk nationalbergamott (två olika träd analyserades) och Windsor (två olika träd analyserades). Från klonarkiven har vi fått kvistar under tidig vår. Dessa kvistar har vi sedan drivit fram i växthus tills de producerat tillräckligt med blad för DNA-extraktioner; Aspa hushållspäron och Kanelpäron från Alntorps Ö, Bergamott från Skälby kungsgård, Blodpäron, Clapps favorit, Grännapäron och Leabo långpäron från Brunstorp, Gernandtspäron, Påskpäron och Skånskt sockerpäron från Fredriksdal, Fulleröpäron, Lundströms bonchretien och Wennströms päron från Linnés Hammarby, Augustipäron från Bergianska, Klockhammar, Södermanlandspäron, Teda, Trogsta, Vingåkers kanel och Äleby från Julita och Lindhultspäron från Munkagårdsgymnasiet, dvs 21 sorter varav tre troligen är identiska med sorter som togs med även från Balsgård. Sammanlagt bör vi således ha fått tag i material från 48 olika sorter. Vi har försökt få tag på bladprover även från de resterande 10 sorterna men hitills har inget av de tillfrågade klonarkiven kunnat bidra med material.

Vi har även rekvirerat bladprover från 8 speciella referensträd, som finns i samlingarna på Brogdale i England. Dessa referenser har valts ut av ECPGR under ledning av Kate Evans (East Malling, England) så att man ska erhålla internationellt jämförbara resultat och därmed kunna framställa en gemensam internationell databas för päronsorter från olika länder. Metoder DNA isolering Bladproverna förvarades i -80 C tills användning. DNA isolerades från alla bladproverna (51 prover från mandatsorter och 8 prover från referenssorter). För extraktion av DNA användes DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen) och tillverkarens eget laborationsprotokoll. DNA amplifiering Vi köpte in specialbeställda primerpar för 12 olika mikrosatellit DNA loci, som hade valts ut inom ECPGR, och som redan använts för att bl a screena pärongenbankerna på Brogdale i England samt på Corvallis i USA. För DNA amplifieringen användes fyra olika recept (Tabell 1). Gemensamt för alla recepten är 1X buffert, 0.2 mm dntp och 0.25 U Taq Polymeras (Thermo Fisher Scientific, Surrey, UK). Total volym är 12.5 µl med ca 6.25 ng DNA per prov. För primerpar GD96 användes recept 4, för primerpar4 EMPc11 recept 3, för primerpar CH05c06, CH01d08 och CH04e03 recept 2, och för resterande primerpar användes recept 1. PCR programmen kördes på en PX2 Thermal Cycler. För verifiering av att korrekt amplifiering hade sket, testades ca 10 slumpmässigt utvalda prover, för varje primer, på en agaros gel. Då erhålles ett band (eller ibland två) men dessa är inte tillräckligt skarpa och kan därför inte användas för en korrekt storleksidentifiering av de enskilda DNA-banden. Tabell 1. Fyra olika PCR recept användes för de 12 utvalda primerparen. Mastermix MgCl 2 (mm) Primer forward (µm) Primer reverse (µm) 1. 1.0 0.5 0.5 2. 1.0 1.0 1.0 3. 1.0 1.5 1.5 4. 1.5 1.0 1.0 DNA fingeravtryck För att erhålla skarpa DNA-band, som kan storleksbestämmas ner på enskilda baspar, måste PCR produkterna separeras med en sekvenseringsutrustning. Vi sände våra prover till DNAanalysavdelningen på Malmö Allmänna Sjukhus, där de analyserades på en 3730 DNA Analyzer (Applied Biosystems). Bandens storlek fatställdes sedan baserat på en intern standard (500ROXTM Size Standard (Applied Biosystems)) med datorprogrammet GeneMarker Software v 1.75 (Softgenetics). För varje primerpar har åtta referensprover, med kända bandstorlekar, analyserats tillsammans med mandatsorterna. Dessutom har 3 av proverna dubblerats som en kontroll av reproducerbarhet.

Tabell 2. Analyserade päronprover, lokal där bladproverna vuxit, samt data (bandstorlek uttryckt i antal baspar) för 6 mikrosatellit DNA loci. Bandstorlek inom parentes för referenssorterna anger värden rapporterade av ECPGR Nr. Namn Lokal CH05c06 EMPc11 EMPc117 GD147 CH01 d08 CH0 4e03 01. Ref 1, 1951-105 UK 88:92 144:151 115:117 Z Y Y AbbeFetel (87:91) (142:149) (113:115) 02. Ref 2, 1996-106 UK 98:108 146:172 90:107 Z Y Y Chantecler (97:107) (144:171) (88:105) 03. Ref 3, 1973-200 UK 88 151:155 115 Z Y Y Comice (87) (149:153) (113) 04. Ref 4, 1973-199 UK 88:98 140:151 X Z Y Y Conference (87:97) (138:149) (115:117) 05. Ref 5, 1985-003 UK 83:104 X 92:105 Z Y Y Hosui (83:103) (140:143) (91:103) 06. Ref 6, 1975-195 UK 88:108 151 99:115 Z Y Y PasseCrassane (87:107) (149) (97:113) 07. Ref 7, 1996-105 UK X 124 91:101 Z Y Y Pendula (114:117) (123) (91:99) 08. Ref 8, 2001-099 UK 88:92 151 115 Z Y Y Williams (87:91) (149) (88:113) 1. Skånskt Fred. (81):92:96? 151:155 115:119 Z Y Y sockerpäron 2. Påskpäron Fred. 88:94 144:151 99:113 Z Y Y 3. Tedapäron Jul. 92:100 138:142 111:115 Z Y Y 4. Trogsta Jul. 98:110 142:144 111:115 Z Y Y augustipäron 5. Äleby päron Jul. 92:100 144:155 113:115 Z Y Y 6. Leabo långpäron Brun. 88:100 138:144 113:115 Z Y Y 7. Gränna rödpäron Bals. 88:92 138:144 99??:(136) Z Y Y 8. Blodpäron Brun. 88:92 140:142 113:115 Z Y Y 9. Clapp s favorit Brun. 90:92 151 115:119 Z Y Y 10. Bergamott Skäl. 90:92 155 117:119 Z Y Y 11. Furstligt Bals. 88:92 138:144 87:127 Z Y Y taffelpäron 12. Fritiof Bals. 88:92 151 117:119 Z Y Y 13. Lindhults päron Mun. 94:100 144:151 111:113 Z Y Y 14. Augustipäron Berg. 102:110 146:151 105:107:(136) Z Y Y 15. Aspa Alnt. 92:96 151 109:111 Z Y Y hushållspäron 16. Gernandtspäron Fred. 94:100 144:151 111:113:(136: Z Y Y 138) 17. Klockhammarspäron Jul. 85:92 138:155 113:115 Z Y Y 18. Vingåkers kanel Jul. 83:92 138:155 113:115 Z Y Y 19. Kanelpäron Alnt. 83:88:110? X 115:117:119? Z Y Y 20. Windsor träd 1 Bals. 94:112 140:155 99:113 Z Y Y 21. Ingeborg Bals. 88:98 140:151 115:117 Z Y Y

22. Windsor träd 2 Bals. 92:96 144:151 113:115 Z Y Y 23. Tysk nationalbergamott Bals. 92:94 155:157 109:119 Z Y Y träd 1 24. Tysk nationalbergamott Bals. 92:94 155:157 109:119 Z Y Y träd 2 25. Rödköttigt päron Bals. 88:92:96? 140:142 113:115 Z Y Y 26. Bonne Louise Bals. 88:104 140:151 115:119 Z Y Y 27. Sörmlands päron Jul. 92:108 151:155 87:113:115 Z Y Y 28. Carola Bals. 88:94 151 115:117 Z Y Y 29. Cecilia Bals. (106):108:11 144:155 109.119 Z Y Y 0 30. Röd Clapp s Bals. 90:92 151 115:119 Z Y Y favorit 31. Filip Bals. 88:92 151:155 111:113 Z Y Y 32. Esperens herre Bals. 88 151 111:113:117? Z Y Y 33. Doyenne de Bals. 88 151:155 113:115 Z Y Y Comice 34. Conference Bals. 88:98 140:151 X Z Y Y 35. Clara Frijs Bals. 88 151 113:115 Z Y Y 36. Gansels bergamott Bals. 88:92 151:155 115:117:119 Z Y Y 37. Gråpäron Bals. 88:96:108 144:146:151 111:117:119 Z Y Y 38. Holländskt Bals. 90:92 151:155 87:117:119 Z Y Y fikonpäron 39. Herzogin Elsa Bals. 88:92 140:151 99:119 Z Y Y 40. Göteborgs Bals. 88:92 151:155 97 Z Y Y diamant 41. Gränna rödpäron Bals. 88:92 138:144 99 Z Y Y 42. Hofstapäron Bals. 88:92 151:155 113:119 Z Y Y 43. Höstbergamott Bals. 92 155 87:117:119 Z Y Y 44. Hovrådspäron Bals. 88:92 151:157 115:119 Z Y Y 45. Epargne Bals. 88:104 140:146:157 113.119 Z Y Y (Kejsarinnepäron)? 46. Greve Moltke Bals. 88 151:155 113:115 Z Y Y 47. Pierre Corneille Bals. 88:98 140 115:117:119 Z Y Y 48. Johantorp Bals. 88:94 144:151 109:117 Z Y Y 49. Lübecker Bals. 92:94 155:157 109:119 Z Y Y bergamott 50. Lundströms Linn. 92 144:155 111:115 Z Y Y Bonchrétien 51. Wennströmspäron Linn. 100:110 142 109:111 Z Y Y 52. Fulleröpäron Linn. 92:108 146:151 97:107 Z Y Y X=ej avläsbart, prov körs om Y=prov skickat för sekvensering, data ej erhållen än Z=prov måste spädas ytterligare Text i rött anger att utvärderingen ej är klar

Resultat och Diskussion Såväl isolering av DNA som optimering av PCR-amplifieringarna visade sig vara mera komplicerat än vi hade förutsett. Päron är betydligt svårare att arbeta med än exempelvis äpple. Efter at ha testat några olika DNA-isoleringsmetoder, visade det sig att den dyrbaraste metoden (Qiagen) också var den bästa. Hittills har proverna analyserats med 6 primerpar men utvärderingarna av dessa bandmönster pågår fortfarande (Tabell 2). Ännu finns det bara data för tre loci. Trots detta kan man redan göra en del intressanta iakttagelser. Referensmaterial Jämförelseer mellan referensmaterial av Comice respektive Conference samt prov från Balsgårds träd av samma sorter, tyder på att dessa träd är identiska med de träd som växer i referenssamlingen på Brogdale i England. Uppenbarligen är dock våra DNA band 1-2 baspar större än banden som angivits av ECPGR men detta kommer att kompenseras för inför den slutgiltiga redovisningen och databasinläggningen. Dylika skillnader i bandstorlek uppkommer mycket ofta när resultat från olika laboratorier jämförs, sannolikt beroende av skillnader både i kemikalier och i den tekniska utrustningen som använts. I de fall där två träd av förment samma sort i de svenska samlingarna analyserades, blev bandmönsterna identiska utom för Windsor där ytterligare bladprover från träd i andra klonsamlingar måste kontrolleras. Synonymer Clapps favorit från Brunstorp tycks vara identisk med röd Clapps favorit från Balsgård vilket var väntat eftersom den senare troligen bara är en röd mutant av den förra. Likaså visar det sig att Blodpäron från Brunstorp troligen är identiskt med Rödköttigt päron från Balsgård. Dessa två sorter skiljer sig däremot tydligt från de två (sinsemellan identiska) träden av Grännapäron från Balsgård. Även Lindhults päron från Munkagårdsskolan och Gernandtspäron från Fredriksdal har identiska bandmönster i de tre loci som hittills utvärderats. Resultatet från de fortsatta analyserna kommer säkert att visa om dessa träd är identiska eller ej. Kromosomtalsnivå I teorin förväntar man sig att varje primerpar ska producera två band eftersom flertalet päronsorter är diploida, med kromosomtalet 2n = 34. I liket med äpple, torde emellertid päron vara en s.k. 'ancient polyploid' vilket innebär att arten ursprungligen uppstått genom hybridisering mellan två arter på lägre kromosomtalsnivå; t ex en art på 2n = 14 och en på 2n = 20, samt en åtföljande kromosomtalsfördubbling. Detta innebär att vissa primerpar amplifierar inte band för bara ett locus utan för två, och man får alltså totalt upp till fyra band per sort och primerpar. Vissa sorter, som har tre band i flera loci, exempelvis Gråpäron, är däremot nästan säkert triploida. Dylika sorter bör i framtiden analyseras med flödescytometri (mäter DNAinnehållet i cellkärnor) för att fastställa kromosomtalsnivån eftersom denna har stor betydelse vid framtida forskning och eventuell användning inom praktisk växtförädling. Dessutom är triploider dåliga pollenproducenter och speciell hänsyn måste tas vid samplantering.

Fortsatta analyser Under 2009 kommer vi att fortsätta dels utvärderingarna av övriga loci i Tabell 2, och dels både laborativt arbete och utvärderingar av följande loci: CH03g07, CH01f07a, CH02b10, CH01d09, GD96 och CH03d12. När sedan dessa data också erhållits, kommer vi att lägga in basdata (exakt storleksangivelse för varje band erhållet med de 12 primerpar som analyserats, samt korrigerat så att samma skala används som för övriga ECPGR databaser) i SESTO, och dels göra en del beräkningar rörande synonymik, släktskapsgrad etc. Såväl vetenskaplig som populärvetenskaplig publicering kommer också att ske. Vi kommer även att komplettera växtmaterialet under 2009 med ytterligare en del mandatsortsträd, som finns ute i de olika klonarkiven. Härigenom kan vi sedan säkerställa att alla mandatsorter, oberoende av i vilken sortsamling de står, är korrekt bestämda. Balsgård 2009-02-26 Hilde Nybom och Jasna Sehic