sida 1 (5) Koder Rapportnamn B-Leukocyter Beställningskod FlexLab - Lkc NPU-kod NPU02593 Provmaterial Utförande Patientförberedelser Leukocytantalet påverkas av fysisk aktivitet vilket innebär att patienterna bör sitta 15 minuter före provtagning. Typ av provmaterial Kapillär eller venblod. Typ av provrör och tillsatser Venöst prov i vacuumrör med EDTA(K2)tillsats Kapillärt direkt i kuvett alt i kapillärrör med EDTA tillsats. Provvolym Minsta acceptabla mängd är 20 % fyllnadsgrad vilket motsvarar 0,75 ml i rör från Vacuette respektive 1 ml i rör från BD. Kuvetten rymmer 10µL. Provberedning och förvaring Analys på venöst blod ska göras inom 48 timmar. Analys ska alltid göras på rumstempererat prov. Start av instrument 1. Tryck och håll ned knappen tills avläsningsfönstret aktiveras. 2. Instrumentet utför ett självtest och efter ca tio sekunder visas tre blinkande streck i avläsningsfönstret tillsammans med HemoCue symbolen. Detta anger att instrumentet är klart att användas. Kapillärt prov 1. Dra ut kuvetthållararmen så att tre blinkande streck visas i displayen. 2. Ta fram en kuvett.
sida 2 (5) Felkällor 3. Utför kapillärprovtagning. Kuvetten ska fyllas från spetsen och den bör hållas i ca 45 graders vinkel mot bloddroppen. Kuvetten ska fyllas i ett enda moment, den får aldrig efterfyllas. 4. Torka bort överskottsblod från kuvettens utsida med en ren, luddfri tork. Vidrör inte kuvettens öppna ände. 5. Kontrollera att den fyllda kuvetten inte innehåller luftblåsor, kassera kuvetter med luftblåsor. 6. Placera kuvetten i hållaren och stäng denna försiktigt inom 40 sekunder från att kuvetten fyllts. 7. Efter ca 3 minuter visas antalet leukocyter. 8. Kuvetten får ej mätas om. Venöst prov Om provet förvarats i kyl ska det rumstempereras och blandas på vagga i minst 3 max 10 minuter. 1. Dra ut kuvetthållararmen så att tre blinkande streck visas i displayen. 2. Ta fram en kuvett. 3. Använd ett droppstift eller en pipett för att placera en droppe blod på en hydrofob yta. Provet skall alltid vara rumstempererat och välblandat. 4. Kuvetten ska fyllas från spetsen och den bör hållas i ca 45 graders vinkel mot bloddroppen. Kuvetten ska fyllas i ett enda moment, den får aldrig efterfyllas. 5. Torka bort överskottsblod från kuvettens utsida med en ren, luddfri tork. Vidrör inte kuvettens öppna ände. 6. Kontrollera att den fyllda kuvetten inte innehåller luftblåsor, kassera kuvetter med luftblåsor. 7. Placera kuvetten i hållaren och stäng denna försiktigt inom 40 sekunder från att kuvetten fyllts. 8. Efter ca 3 minuter visas antalet leukocyter. 9. Kuvetten får ej mätas om. Prover med kärnförande erytrocyter kan ge falskt förhöjda värden. Övervaggning av prov kan påverka värdet. Interferenser Interferensstudier har av utförts av tillverkaren. Följande substanser interfererar inte med HemoCue WBC systemet. Högsta undersökta koncentrationen eller procenttal anges inom parentes. Paracetamol (20 mg/dl), askorbinsyra (6 mg/dl), ibuprofen (50 mg/dl), koffein (308 µmol/l), kreatinin/urea (2200µmol/L/83mmol/L), salicylsyra (60 mg/dl), tetracyklin (30 mg/dl), okonjugerat bilirubin(342 µmol/dl), konjugerat bilirubin (380 µmol/l) dextran 40
sida 3 (5) Svarsrutiner (30g/L), osmolalitet (167 mosmol/kg) HbCO (30%) methemoglobin (50%), trombocyter (2000 x 10 9 g/l ), Lipider motsvarande triglycerider (10,5 mmol/l), hemoglobin (30-250 g/l), retikulocyter(258 x10 9 /L) HbAS, omogna leukocyter och trombocytaggregat har inte visat sig interferera. PH-värden mellan 6,8-8,0 interfererar inte med systemet. Enhet antal/l Skriv som analyskommentar Analyserat med HemoCue Lkc. Resultat <2,0 och > 30,0x 10 9 /L skickas till KKF för verifiering. Gör då enligt följande: 1. Rapportera ut uppmätt resultat. Lägg in analyskommentar Provet skickas till KKF för verifiering. 2. Skapa en ny beställning i Cosmic med samma provtagningstid. 3. Skriv ut etiketter och märk om röret. 4. Skicka till KKF för verifiering. Referensintervall <1 månad 8,0-15,0 x 10 9 /L <1 år 6,5-14,5 x 10 9 /L <7 år 5,5-11,5 x 10 9 /L <16 år 4,5-10,5 x 10 9 /L vuxna 3,5-9,0 x 10 9 /L Nyfödda kan ha upp till 30,0 x 10 9 /L utan att det behöver vara patologiskt. Utrustning Reagens Referensurvalsgrupp Medicine kandidater under perioden 930923-980217 kvinnor män 219 267 21 41 år 21 47 år Instrument HemoCue WBC analyzer. Kemikalier / Kit HemoCue WBC microkuvettes, beställs från KD på Blankett beställning av ej avtalade / rabattavtalade artiklar. Leverantörens artikelnummer är: 113002. HemoCue Cleaner beställs från KD med art nr 47326. Kuvetterna förvaras i rumstemperatur. Öppnad burk är hållbar i tre månader, märk med datum och signatur när burken öppnas.
sida 4 (5) Kalibrering Enligt leverantören är instrumenten fabrikskalibrerat och kräver ingen ytterligare kalibrering. Spårbarhet Tillverkarenas uppgift: Instrumentet är spårbart till mikroskopisk teknik för räkning av Lkc. Dessutom har HemoCue utfört jämförelser mot vanligt förekommande automatiska cellräknare. Egen studie (n=27) visar acceptabel överensstämmelse med Celldyn Sapphire (y = 0,8821x + 0,374; R 2 = 0,9829). Kvalitetskontroll Varje gång instrumentet startas kontrolleras mätprestandan automatiskt. Externkontroll En gång per vecka ska patientjämförelse mot cellräknare göras. Analysera Lkc på ett prov som skall skickas till KKF. Resultaten dokumenteras i loggbok, i Internkotroll Lkc. Accepterad avvikelse är mindre än 15% Vid avvikelse större än den accepterade ska Primärvårdens kvalitetssamordnare kontaktas. Indikation/Medicinsk betydelse/användningsområde Metodprincip Cirkulerande leukocyter består av granulocyter (neutrofila, eosinofila, basofila), monocyter och lymfocyter. Bildningen av leukocyter sker i benmärgen. Lymfocyter bildas också i den lymfatiska vävnaden. De två dominerande leukocyttyperna, neutrofila granulocyter och lymfocyter, utgör skilda organsystem med separat reglering, distribution och reaktion vid sjukliga tillstånd. Förändringar i totalantalet leukocyter avspeglar oftast förändringar i antalet neutrofila granulocyter, vilka dels utgör 50-75 % av blodleukocyterna, dels uppvisar störst variation både under fysiologiska och sjukliga tillstånd. Bestämning av totalantalet leukocyter har därför störst värde när man misstänker sänkt respektive ökat antal neutrofila granulocyter. Om det totala antalet leukocyter är förhöjt eller sänkt bör en klassificering utföras för att utröna i vilket/vilka cellsystem en rubbning föreligger. Klassificering kan även utföras vid normalt antal leukocyter om misstanke finns om ett förändrat antal av något särskilt cellslag eller mognadsform. Ett hemolyseringsmedel lyserar erytrocyterna i mikrokuvetten och ett färgmedel färgar leukocyterna. En bild tas av leukocyterna och antalet leukocyter räknas genom bildanalys i instrumentet.
sida 5 (5) Mätintervall 0,3-30,0 x10 9. Resultat under mätområdet visas som LLL. Resultat över mätområdet visas som HHH. Storhet Mätosäkerhet Antalskoncentration. Ej tillämpligt. Bra att veta Hänvisningar Metoden är inte specifik för leukocyter utan retikulocyter och erytroblaster kan ge falskt förhöjda svar! Därför skall höga värden kontrolleras med annan teknik. Ordinerande läkare måste vara medveten om metodens begränsningar vid bedömning. Referenser KKF metodbeskrivning Blodstatus, Eos, Celler klassificering, B- (Cell- Dyn 3200, Ruby och Sapphire). HemoCue WBC bruksanvisning. Osei-Bimpong A, Jury C, McLEan R, Lewis S M. Point-of-care method for total white cell count: an evaluation of the HemoCue WBC device. Int J Lab Hematol 2008; Aug 26. E-publ Blackwell. Valideringar Egen validering maj 2008: HCue_WBC_valid.xls. Beräkning av mätosäkerhet: HCue_imprec_Dubbelprov_080501.xls Mätosäkerhet enligt tillverkaren; Ca 5,4 % vid nivå 2,5 x 10 9 /L Ca 3,5 % vid nivå 7,2 x 10 9 /L Ca 1,9 % vid nivå 19,0 x 10 9 /L Dokumenthistorik Version Orsak / ändring Senast ändrad av 1 Ny metod Kicki Palmberg