100 (20 5) tests 71110 Passivt partikelagglutinationstest för detektion av HIV-1- och/eller HIV-2-antikroppar i humant serum eller plasma IVD Tillverkarens kvalitetskontroll Alla reagens tillverkas och marknadsförs i enlighet med ett fullständigt kvalitetssystem, från mottagandet av råmaterial till slutlig marknadsföring av produkt. Varje parti genomgår en kvalitetskontroll och släpps endast ut på marknaden om det överensstämmer med acceptanskriterierna. Handlingar som hör samman med produktion och kontroll av varje enskilt parti sparas inom vårt företag. 111
INNEHÅLLSFÖRTECKNING 1. ANVÄNDNINGSOMRÅDE 2. TESTPRINCIP 3. INNEHÅLL I SFD HIV 1/2 PA KIT 4. NÖDVÄNDIG MEN EJ BIFOGAD MATERIAL 5. FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRDER 6. HÄLSO- OCH SÄKERHETSANVISNINGAR 7. REKONSTITUERING AV REAGENS 8. VALIDITET - FÖRVARING 9. PROVBEREDNING 10. TESTFÖRFARANDE 11. VALIDERING OCH TOLKNING AV RESULTAT 12. ABSORPTIONSFÖRFARANDE 13. TESTRESULTAT 14. TESTETS BEGRÄNSNINGAR 15. BIBLIOGRAFI 112
1. ANVÄNDNINGSOMRÅDE SFD HIV 1/2 PA är avsett att användas som ett verktyg för detektion av HIV-1- och/eller HIV-2-antikroppar och som hjälp vid diagnos av infektion av HIV-1 och/eller HIV-2. Testet passar utmärkt för undersökning av blodgivare och högriskpopulationer. Testet kan utföras på plasma- eller serumprover. 2. TESTPRINCIP SFD HIV 1/2 PA är ett in vitro diagnostiskt test för detektion av HIV-1- och/eller HIV-2-antikroppar. Testet använder gelatinpartiklar, sensibiliserade med rekombinant HIV-1-antigen (HIV-1/gp 41 och HIV-1/p 24) och HIV-2-antigen (HIV-2/gp 36). SFD HIV 1/2 PA (partikelagglutination) baseras på principen att sensibiliserade partiklar agglutineras med HIV-1- och/eller HIV-2-antikroppar i humant serum/plasma. 3. INNEHÅLL I SFD HIV 1/2 PA Alla reagens som ingår i testet är avsedda för in vitro diagnostiskt bruk. Reagenserna räcker till 100 kvalitativa test. Varje kit innehåller följande reagens och tillbehör: Maximalt antal test screening 100 (20 5) Rekonstitueringslösning (flytande) (A) 10 ml 1 flaska Prov-spädningsvätska (flytande) (B) 20 ml 1 flaska Reagens Sensibiliserade partiklar (frystorkat) (C) 0,6 ml* 5 ampuller Kontrollpartiklar (frystorkat) (D) 1,0 ml* 5 ampuller Positiv kontroll (flytande) (E) 0,5 ml 1 flaska * Efter rekonstituering (rekonstituera med den volym som anges = * av A-lösning) Tillbehör: Dropprör: 2 st ( µl) A. Rekonstitueringslösning (flytande) används till r e k o n s t i t u e r i n g a v s e n s i b i l i s e r a d e p a r t i k l a r o c h kontrollpartiklar. Reagensen innehåller 0,1 % (vikt/volym) natriumazid som konserveringsmedel. B. Prov-spädningsvätska (flytande) används vid spädning av testprover. Reagensen innehåller 0,1 % (vikt/volym) natriumazid som konserveringsmedel. 113
C. Sensibiliserade partiklar (frystorkat) frystorkad beredning av gelatinpartiklar, sensibiliserade med rekombinant HIV-1-antigen (gp 41 och p 24) och HIV-2-antigen (gp 36), rekonstituerat genom tillsats av angiven mängd r e k o n s t i t u e r i n g s l ö s n i n g ( e n l i g t t a b e l l e n o v a n ). Rekonstituerad reagens innehåller 1 % gelatinpartiklar, sensibiliserade med rekombinant HIV-1/2-antigen och 0,1 % (vikt/volym) natriumazid som konserveringsmedel. D. Kontrollpartiklar (frystorkat) rekonstituerade genom tillsats av angiven mängd rekonstitueringslösning (enligt tabell ovan). Rekonstituerade partiklar innehåller 1 % gelatinpartiklar, sensibiliserade med E. Coli-extrakt och 0,1 % natriumazid som konserveringsmedel). E. Positiv kontroll (flytande) flytande beredning som innehåller monoklonala mus-hiv-1-antikroppar och monoklonala mus-hiv-2-antikroppar. Kontrollen ger en 1:128 (± 1 spädning) antikroppstiter vid slutspädning enligt testförfarandet för positiv kontroll (se tabell 2). Reagensen innehåller 0,1 % (vikt/volym) natriumazid som konserveringsmedel. De två dropprören ( µl) som ingår i kitet är endast avsedda att användas till fördelning av rekonstituerade sensibiliserade partiklar eller kontrollpartiklar. Alla reagens innehåller normalt kaninserum. 4. NÖDVÄNDIG MEN EJ BIFOGAD MATERIAL Destillerat vatten Natriumhypoklorit (blekmedel) och natriumbikarbonat Engångshandskar Mikroplattor med runda brunnbottnar ( U -formade FASTEC-typ) Mikropipetter med spetsar för fördelning och spädning av µl. Volumetriska pipetter för fördelning av 1,0 ml och 5,0 ml för partikelrekonstituering Brickmixer (tillval): Automatisk vibrationsblandare (ej rotationsmixer) för noggrann blandning av innehåll. 114
Brickgranskare (tillval): För avläsning Behållare för smittfarligt avfall Obs! Endast högkvalitativa, rigida U -formade mikroplattor (t.ex. FASTEC-plattor från Fujirebio) ska användas i testet. Mjuka plattor rekommenderas inte eftersom deras yta ej är jämn, vilket kan påverka testresultatet negativt. Återanvändning av mikroplattor rekommenderas ej. Om en mikroplatta trots det återanvänds är det viktigt att rengöra mikroplattan mycket noggrant innan den återanvänds. Reaktionen kan annars påverkas negativt. Se till att inte lämna några desinficerings- eller diskmedelsrester på plattan. 5. FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRDER Resultatens kvalitet är beroende av att god laboratoriesed (GLP) tillämpas: Använd ej reagens efter passerat bäst före-datum. Blanda ej reagens från olika partier inom en bestämd testkörning. Låt reagenserna anta rumstemperatur (15-30 C) före användning (ca 30 min). Späd noggrant reagenserna och undvik kontamination. Använd glasvaror som har tvättats grundligt och sköljts i destillerat vatten eller använd helst engångsmaterial. Använd en ny pipettspets för varje prov. Kontrollera exakthet, precision och funktion av pipetter och använda apparater. Ändra inte testförfarandet. 6. HÄLSO- OCH SÄKERHETSANVISNINGAR Alla reagens i kitet är avsedda för in vitro -diagnostik. Använd engångshandskar när du hanterar reagens och prov. Tvätta händerna noggrant efter hanteringen. Munpipettera ej! Eftersom ingen känd metod med säkerhet kan garantera frånvaron av HIV, HBV, HCV eller andra smittsamma agens, bör patientprover betraktas som potentiellt smittsamma och hanteras enligt sedvanliga rutiner. 115
Betrakta allt material i direktkontakt med prover som kontaminerat material och hantera det som sådant. Undvik spill! Nedstänkta ytor skall rengöras med klorblekmedel utspätt till 10 %. Om det smittsamma materialet är en syra, skall de nedstänkta ytorna först neutraliseras med bikarbonat, för att sedan rengöras med hjälp av klorblekmedel och avtorkas med absorberande papper. Material som använts för rengöring skall kastas i en specialbehållare för smittat avfall. Prover, reagens av humant ursprung samt material och smittade produkter skall kastas efter sanering, antingen genom blötläggning i klorblekmedel i slutgiltig koncentration av 5 % natriumhypoklorit (1 volym klorblekmedel för 10 volymer smittad vätska eller vatten) i 30 minuter eller autoklaveras vid 121 C i minst 2 timmar. Autoklavering är den bästa metoden för inaktivering av HIV och HBV. VARNING! PLACERA INGA LÖSNINGAR INNEHÅLLANDE NATRIUMHYPOKLORIT I AUTOKLAVEN. Glöm ej att neutralisera och/eller att autoklavera flytande lösningar eller all vätska innehållande biologiska prover innan de kastas i vasken. Ett säkerhetsdatablad kan erhållas på begäran. Hantering och avlägsnande av kemiska produkter skall genomföras enligt rutiner för god laboratoriesed (GLP). Vissa reagens innehåller natriumazid som konserveringsmedel. Natriumazid kan bilda explosiva koppar- eller blyazider i avloppsledningar. För att undvika ansamling av azider, skall ledningarna spolas med rikligt med vatten om reagens slås ut i avloppet. 7. REKONSTITUERING AV REAGENS Obs! Låt reagenserna uppnå rumstemperatur (15-30 C) före användning. a) Reagens färdiga att använda: Reagens A : Rekonstitueringslösning Reagens B : Prov-spädningsvätska Reagens E : Positiv Kontroll b) Reagens för rekonstituering: 116
Reagens C : Sensibiliserade partiklar För rekonstituering med följande volym rekonstitueringslösning (reagens A): - 0,6 ml för 100 test-kitet Reagens D : Kontrollpartiklar För rekonstituering med följande volym rekonstitueringslösning (reagens A): - 1 ml för 100 test-kitet Obs! SUSPENSIONEN AV SENSIBILISERADE PARTIKLAR OCH KONTROLLPARTIKLAR MÅSTE HOMOGENISERAS GENOM ATT FÖRSIKTIGT SKAKA OCH VÄNDA UPP OCH NED STRAX FÖRE FÖRDELNING. 8. VALIDITET FÖRVARING Förvara testet vid +2-10 C. När förpackningen öppnats kan varje reagens förvaras vid +2-10 C fram till det bäst föredatum som anges på förpackningen (med förbehåll för särskilda anvisningar): R(C) och R(D): Frystorkade reagens som ingår i kitet ska helst användas samma dag som rekonstitueringen görs. De är dock hållbara i 14 dagar efter rekonstituering om de förvaras på rätt sätt (+2-10 C) och testas enligt anvisningarna på bipacksedeln. 9. PROVBEREDNING Tag blodprov enligt sedvanlig praxis. Testen ska genomföras med ospädda serum- eller plasmaprover (insamlade med antikoagulantia såsom EDTA, heparin, citrat). Avskilj serum eller plasma från blodprovet så fort som möjligt för att undvika hemolys. Utpräglad hemolys kan inverka på testets prestationer. Prover som visar aggregat skall renas genom centrifugering före testet. Partiklar eller fibrinaggregat kan ge falskt positiva resultat. Proverna kan förvaras vid +2-8 C om testet utförs inom 7 dagar, eller djupfrysas vid -20 C. Undvik upprepad nedfrysning och upptining. Om proverna skall transporteras, förpacka dem enligt sedvanliga regler för transport av etiologiska ämnen. 117
118 Inaktivering av serumprover kan utföras med hjälp av standardinaktivering, 56 ºC i 30 minuter. ANVÄND EJ KONTAMINERADE, HYPERLIPEMISKA ELLER HYPERHEMOLYSERADE SERUM- ELLER PLASMAPROVER. O b s! I n g e n i n t e r f e r e n s h a r o b s e r v e r a t s f ö r bilirubinkoncentrationer upp till 215mg/L, för hemoglobin upp till 5,6g/L och för kylomikrongrumlighet upp till 2 300. 10. TESTFÖRFARANDE Inledande kommentarer: 1. Prover som visar sig vara positiva med SFD HIV 1/2 PA kvalitativt test, skall testas om i duplikat. Om det ena eller båda upprepade testen är positiva eller obestämbara ska proverna testas semi-kvantitativt. 2. När det semi-kvantitativa testet utförs är det inte ovanligt med prover som har titrar bortom brunn nr 12. Det kan vara nödvändigt att späda proverna ytterligare innan de fördelas på mikroplattan, för bestämning av slutpunkt i det semi-kvantitativa testet. 3. Ett reagenskontrolltest för kvalitativa och semi-kvantitativa test rekommenderas (se tabell 1). Tabell 1 Utgångsläge för reagenskontrolltest Brunn 1 2 Prov spädningsvätska (µl) Kontrollpartiklar (µl) Sensibiliserade partiklar (µl) Blanda med en brickblandare (automatisk vibrationsblandare), täck plattan och inkubera i 2 timmar Tolkning Kvalitativ testmetod (tabell 2) a. Använd en mikropipett och applicera 75 µl (3 droppar a µl) av prov-spädningvätska i brunn nr 1 på en mikroplatta, och µl (1 droppe a µl) i var och en av brunnarna nr 2 och 3.
b. Tillsätt µl serum-/plasma-prov i brunn nr 1 med en mikropipett. Blanda innehållet i brunn nr 1 genom att fylla och tömma mikropipetten 5-6 gånger. Överför sedan µl av den spädda lösningen från brunn nr 1 till brunn nr 2 med en mikropipett. Blanda innehållet i brunn nr 2 på samma sätt som beskrivs ovan och överför µl till brunn nr 3. Gör på samma sätt, blanda innehållet i brunn nr 3 och kassera sedan µl av den lösning som återstår i pipetten efter blandning. c. Använd ett av de medföljande dropprören och applicera µl (1 droppe) rekonstituerade kontrollpartiklar i brunn nr 2. Använd det andra droppröret och placera µl (1 droppe) rekonstituerade sensibiliserade partiklar i brunn nr 3. d. Blanda innehållet i brunnarna noggrant med hjälp av en brickblandare (automatisk vibrationsblandare) eller, om det inte finns någon blandare, genom att knacka hårt på plattans fyra hörn med fingret 5-6 gånger. Täck plattan och ställ den på en vibrationsfri yta. Låt den st å i rumstemperatur (15-30 C) i 2 timmar innan du avläser mönstren. Tabell 2 Kvalitativ test, förfarande Brunn nr: 1 2 3 Prov-spädningsvätska (µl) 75 Prov (µl) Kasta Provspädning 1:4 1:8 1:16 Kontrollpartiklar (µl) Sensibiliserade partiklar (µl) Slutlig spädning 1:16 1:32 Blanda med hjälp av brickblandaren (automatisk vibrationsblandare), täck plattan och inkubera i 2 timmar Tolkning Semi-kvantitativ testmetod (tabell 3) För en korrekt utvärdering rekommenderas att prover som uppvisar upprepat positiva reaktioner i det kvalitativa testet testas om med semi-kvantitativt test. a. Använd en mikropipett och applicera 75 µl (3 droppar a 119
µl) prov- spädningsvätska i brunn nr 1 på en mikroplatta och µl (1 droppe med µl) i brunnarna nr 2 till 12. b. Tillsätt µl serum-/plasma-prov i brunn nr 1 med en mikropipett. Blanda innehållet i brunn nr 1 genom att fylla och tömma mikropipetten 5-6 gånger. Överför sedan µl av den spädda lösningen från brunn nr 1 till brunn nr 2 med mikropipetten och blanda innehållet, enligt ovan. Gör en tvåfaldig titrering genom att upprepa samma blandningsoch överföringsprocedur för resten av brunnarna, från brunn nr 3 till 12, enligt tabell 3. För att kontrollera precisionen, skall positiv kontroll köras parallellt med proverna som testas. Resultatet för den positiva kontrollen ska vara 1:128, plus eller minus en spädning. c. Använd ett av de medföljande dropprören och placera µl (1 droppe) rekonstituerade kontrollpartiklar i brunn nr 2. Använd det andra droppröret och applicera µl (1 droppe) sensibiliserade partiklar i varje brunn, från brunn nr 3 till 12. d. Blanda innehållet i brunnarna noggrant med hjälp av en brickblandare (automatisk vibrationsblandare) eller, om det inte finns någon blandare, genom att knacka hårt på plattans fyra hörn, 5-6 gånger med fingret. Täck plattan och ställ den på en vibrationsfri yta. Låt den stå i rumstemperatur (15-30 C) i 2 timmar innan mönstren avläses. 120
Tabell 3 Semi-kvantitativ testmetod Brunn n 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Provspädningsvätska (µl) Prov eller positiv kontroll (µl) 75 Provspädning 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:6 1:512 1:1024 1:2048 1:4096 1:8192 Kontrollpartiklar (µl) Sensibiliserade partiklar (µl) Slutlig spädning 1:16 1:32 1:64 1:128 1:6 1:512 1:1024 1:2048 1:4096 1:8192 1:16384 Fortsätt med provspädning från brunnarna 2 12 Blanda med en brickblandare (automatisk vibrationsblandare), täck plattan och inkubera i 2 timmar Tolkning kassera 11. VALIDERING OCH TOLKNING AV RESULTAT Testvalidering: a. För semi-kvantitativ och kvalitativ test ska du bekräfta att reaktionen för varje prov och kontrollpartikel (1:16 slutlig spädning) är negativ (-) b. Med reagenskontrolltestet ska blandningen av provspädningsvätska, både med rekonstituerade sensibiliserade partiklar och kontrollpartiklar, ej ge någon reaktion (-) vid någon körning (reagenskontroll) c. För semi-kvantitativ test ska du bekräfta att titern av positiv kontroll är 1:128 (± 1 spädning) vid slutlig spädning enligt det testförfarande som beskrivs i tabell 3. Avläsning och tolkning av agglutination: Agglutination kan tolkas visuellt eller genom att försiktigt placera mikroplattan på en optisk brickgranskare med indirekt ljus, och jämföra agglutinationsmönstren med reagenskontrollens mönster. Använd kriterierna som visas i tabell 4 när resultat utvärderas. 121
Tabell 4 Avläsning och tolkning av agglutination Partikelmönster Avläsning Tolkning Partiklarna är koncentrerade i form av en knapp i mitten av brunnen. Ytterkanten är jämn och rund. Partiklarna är koncentrerade i form av en kompakt ring med en jämn och rund ytterkant. Partiklarna formar en stor ring med en ojämn mångformad ytterkant. Perifer agglutination inträffar. Starkt agglutinerade partiklar är utspridda och täcker brunnens botten jämnt (-) Negativt (+) (+) (++) Obestämbart (se under Obs! nedan) Positivt Obs! Prover som uppvisar obestämbara resultat (±) ska testas om enligt testförfarandet i tabell 3 (Semi-kvantitativ testmetod). Upprepat obestämbara (±) eller reaktiva resultat ska bekräftas med andra metoder för en korrekt utvärdering. Mer information finns i 14. TESTETS BEGRÄNSNINGAR nedan. Tolkningskriterier: Ett prov som uppvisar negativ reaktion med kontrollpartiklar (slutspädning 1:16) men uppvisar agglutination med sensibiliserade partiklar (slutspädning 1:32 eller mer) betraktas som uppvisande en positiv reaktion för HIV. Prover som uppvisar positiv reaktion med kontrollpartiklar och negativ reaktion med sensibiliserade partiklar betraktas som uppvisande en negativ reaktion för HIV. Det arbetsblad som tillhandahålls separat skall användas för att tolka resultaten. Kontakta leverantören av testet för att få arbetsbladet. 122
Tabell 5 Tolkningskriterier Kontrollpartiklar Sensibiliserade partiklar Bedömning - + Positivt - - Negativt + - Negativt + + Obestämbart Efter absorption med kontrollpartiklar* - + Positivt - - Negativt * Vissa prover kan kräva 2 absorptioner 12. ABSORPTIONSFÖRFARANDE Om ett prov orsakar agglutination (± eller positiv) med både kontroll- och sensibiliserade partiklar ska det testas om enligt följande: a. Applicera 350 µl rekonstituerade kontrollpartiklar i ett litet provrör. b. Tillsätt 50 µl av provet i provröret och blanda noggrant med en vortexmixer. Inkubera i rumstemperatur (15 30 C) i minst 20 minuter. c. Centrifugera i 5 minuter vid 2 000 rpm. Ta därefter 50 µl av supernatanten (absorberad 1:8-provspädning) och applicera det försiktigt i brunn nr 2 (se tabell 3). d. Tillsätt µl prov-spädningsvätska i brunn nr 3 t.o.m. 12. Överför sedan µl absorberat prov från brunn nr 2 till brunn nr 3 och blanda väl enligt instruktionerna för semi-kvantitativt test. Gör en tvåfaldig titrering genom att upprepa samma procedur för brunn nr 3 t.o.m. 12 (se tabell 3). 13. TESTRESULTAT Känslighet Känslighetsstudier för SFD HIV1/2 PA har utförts på dokumenterade prover från HIV-infekterade patienter. 123
Detektion av konfirmerade HIV-positiva prover har utvärderats på följande: 486 HIV-1 grupp M-prover, med 134 serotypade prover (subtyperna A, B, C, D, E, F, G). Känsligheten var 100 % för dessa prover. 24 HIV-1 grupp O-prover. Alla har befunnits vara positiva. 173 HIV-2-prover. Alla har befunnits vara positiva. Tidig detektion har utvärderats på följande: SFTS (French society of Blood Bank) serokonversioner och kommersiella (BBI, NABI) paneler har testats. Resultaten motsvarar nästan de EIA-test som är kända för att ha den bästa antikroppskänsligheten. SFTS-panel: 10 av 11 prover för per-serokonversion befanns vara positiva med SFD HIV 1/2 PA. 31 kommersiella paneler har testats med SFD HIV1/2 PA. I följande tabell visas det först detekterade provet i varje panel. Panel Först detekterade provet Panel Först detekterade provet Panel Först detekterade provet BBI S 2 BBI AH 2 NABI 211 C BBI T 2 BBI AI 2 NABI 241 D BBI U 2 BBI AJ 7 NABI 1 F BBI W 10 BBI AK 6 NABI 261 D BBI X 6 BBI AL 6 NABI 271 C BBI Y 5 BBI AM 3 BBI Z 5 BBI AS 6 BBI AB 3 BBI AT 5 BBI AC 2 BBI AW 2 BBI AD 6 BBI AY 5 BBI AE 3 BBI BA 6 BBI AF 6 BBI BB 4 BBI AG 4 BBI BD 7 Specificitet Specificiteten på 5 041 slumpvis valda blodgivare var 99,74 %. 124
418 prover, positiva för andra markörer (HTLV-1, HSV, VZV) eller från gravida kvinnor och patienter med reumatoid artrit testades. Endast ett prov var reaktivt. Följaktligen var specificiteten för den här populationern 99,76 %. Precision Precisionsstudier inom testet har utförts på 3 HIV-1-positiva prover (P-1, 2, 3) som har testats 5 gånger i rad med 3 testkit från olika partier enligt testförfarandena. Alla resultat befanns ligga inom en brunns variation (en dubbel spädning). Parti 1-930126 Parti 2-930408 Parti 3-930422 prov P-1 P-2 P-3 P-1 P-2 P-3 P-1 P-2 P-3 1 1 :1024 1 :6 1 :64 1 :2048 1 :512 1 :128 1 :1024 1 :6 1 :64 2 1 :1024 1 :6 1 :64 1 :2048 1 :512 1 :128 1 :1024 1 :6 1 :64 3 1 :1024 1 :6 1 :64 1 :2048 1 :512 1 :128 1 :1024 1 :128 1 :64 4 1 :1024 1 :6 1 :64 1 :2048 1 :512 1 :128 1 :1024 1 :6 1 :64 5 1 :1024 1 :6 1 :128 1 :2048 1 :512 1 :128 1 :1024 1 :6 1 :64 Medelvärde 1 :1024 1 :6 1 :64 1 :2048 1 :512 1 :128 1 :1024 1 :6 1 :64 Variation +/- 0 sp +/- 0 sp +1 sp +/- 0 sp +/- 0 sp +/- 0 sp +/- 0 sp - 1 sp +/- 0 sp Precisionsstudier inom testet har utförts på 10 HIV-1- eller HIV-2-positiva prover som har testats av 3 olika användare enligt testförfarandena. Alla resultat befanns ligga inom en brunns variation (en dubbel spädning). A B C Metod Variation prov 1 1 :1024 1 :1024 1 :1024 1 :1024 +/- 0 sp prov 2 1 :6 1 :6 1 :6 1 :6 +/- 0 sp prov 3 1 :6 1 :6 1 :6 1 :6 +/- 0 sp prov 4 1 :64 1 :64 1 :32 1 :64-1 sp prov 5 1 :32 1 :32 1 :32 1 :32 +/- 0 sp prov 6 1 :2048 1 :2048 1 :2048 1 :2048 +/- 0 sp prov 7 1 :512 1 :512 1 :6 1 :512-1 sp prov 8 1 :512 1 :512 1 :512 1 :512 +/- 0 sp prov 9 1 :128 1 :128 1 :128 1 :128 +/- 0 sp prov 10 1 :128 1 :128 1 :128 1 :128 +/- 0 sp 1
14. TESTETS BEGRÄNSNINGAR Testet är endast avsett att användas för detektion av HIV-relaterade antikroppar i serum-/plasmaprover. Det detekterar dock inte HIV direkt. Konsekvens: Även om testet är negativt och indikerar att det testade provet inte innehåller antikroppar mot HIV, kan man ej utesluta exponering för en HIV-infektion. Kliniska symptom och annan information ska användas i den kliniska diagnosen. Därför indikerar ett positivt eller negativt testresultat inte en slutlig HIV-infektionsdiagnos eller brist på sådan. En bred bedömning av patientens tillstånd bör innefatta den noggranna analysen av patientens kliniska symptom och utvärdering av resultat från tillgängliga test för sjukdomen. Vid en klinisk diagnos, skall prover som uppvisar positiva resultat med SFD HIV 1/2 PA testas om vid olika tidsintervall och resultaten jämföras. Konfirmerande test måste om möjligt utföras på alla prover som är positiva med det semi-kvantitativa testet. Vibrationer (orsakade av exempelvis en centrigfug) kan påverka resultatens kvalitet. Prozon-fenomen kan i sällsynta fall inträffa i starkt positiva prover men har ej observerats under utvärderingarna. Användning av andra mikroplattor än U -formade kan påverka resultatens kvalitet och till och med förhindra agglutination. 126
15. BIBLIOGRAFI BARRE-SINOUSSI F., CHERMANN J.C., REY F. et al. Isolation of a T. lymphotropic retrovirus from a patient at risk for acquired immunodeficiency syndrome (AIDS). Science, 1983, 220, 868-871 ALIZON M., SONIGO P., BARRE-SINOUSSI F. et al. Molecular cloning of lymphadenopathy associated virus. Nature, 1984, 312, 757-760 CLAVEL F., GUYADER M., GUETARD D. et al. Molecular cloning and polymorphism of the human immune deficiency virus type 2. Nature, 1986, 324, 691-695 McKEATING J.A., WILLEY R.L. Structure and function of the HIV envelope. AIDS, 1989, 3, S35-S41 ZAAUER H.L., EXEL-OEHLERS P.V., KRAAUEVELD T. et al. Early detection of antibodies to HIV1 by third-generation assays. Lancet, 1992, 340, 770-772
CONSTANTINE N.T., VAN DER GROEN G., BELSEY E.M. et al. S e n s i t i v i t y o f H I V a n t i b o d y a s s a y s d e t e r m i n e d b y seroconversion panels. AIDS, 1994, 8, 1715-1720 WASI C. et al. Evaluation of two screening tests for anti-hiv : ELISA versus particle agglutination. Virus Information Exchange Newsletter, 1988, 5, 92 Sng E.H. et al. Comparative evaluation of a particle agglutination test for human immunodeficiency virus antibody, Genitourin Med, 1988, 64, 266-269 OHYA K. et al. Screening of blood donors for antibody to human immunodeficiency virus type I by sensitive particle agglutination assay. Vox Sang, 1988, 55, 148-151 SEKIGUCHI S. et al. An automated screening test for antibodies to human immunodeficiency virus 1. Transfusion, 1988, 28, 581-585 YOSHIDA T. et al. Evaluation of passive particle agglutination test for antibody to human immunodeficiency virus. J Clin Microbiol, 1987,, 1433-1437 SPIELBERG F. et al. Field testing and comparative evaluation of rapid, visually read screening assays for antibody to human immunodeficiency virus. Lancet, 1989, i, Mar.18, 580-584 HEALY D.S. et al. Detection of anti-hiv immunoglobulin M by particle agglutination following acute HIV infection. AIDS 1989, 3, 301-304 HENDLER H. et al. Estudio comparativo de las technicas de aglutinacion de particulas (AP) enzimoinmunoenzay o (EIE) en la deteccion de anticuerpos anti-virus de immunodeficiencia humana tipo 1 (VIHA) en donantes de sangre. Revista Argentina de Transfusion, 1989, XV, 165-168.
FUJIREBIO Inc. FR Bldg., 62-5 Nihonbashi- Hamacho 2-chome, Chuo-ku, Tokyo 103-0007, Japan Tel. : +81 3 5695 9200 Fax : +81 3 5695 9230 EC REP Bio-Rad 3, Bd Raymond Poincaré 92430 MARNES LA COQUETTE FRANCE Tél : 33 1 47 95 60 00 Fax : 33 1 47 41 91 33 0123 code : MZ03T 05/2009