CanAg Free PSA EIA Prod. No. 350-10 Bruksanvisning Enzymimmunometriskt test kit. 2006-10 För 96 bestämningar. AVSEDD ANVÄNDNING CanAg Free PSA EIA är avsedd för kvantitativ bestämning av Fri PSA (Prostata Specifikt Antigen) i humant serum. SUMMERING OCH FÖRKLARING AV TESTET PSA är ett ensträngat glykoprotein med molekylvikt 32 kda. Proteinet, ett serinproteas med chymotrypsinlik specificitet, utsöndras normalt i seminalvätskan av prostatakörtelns sekretoriska epitel. Dess funktion är att klyva proteiner från vesicula seminalis vilket medverkar till likvefiering av seminalkoagel (1, 2). PSA nivåerna i blodet är normalt låga och förhöjda nivåer indikerar prostatasjukdom såsom benign prostatahyperplasi och prostatacancer. Bestämning av PSA används allmänt för upptäckt och behandlingsuppföljning av patienter med prostatacancer och anses vara en överlägsen markör för prostatacancer (3). Man har funnit att PSA bildar stabila komplex med olika anti-proteaser och den dominerande fraktionen av PSA i serum föreligger som komplex med α 1 -antichymotrypsin (PSA-ACT) (4). Det är dock stora individuella skillnader i relationen fritt PSA och PSA-ACT komplex. Ett stort antal studier har visat att proportionen fritt PSA är högre vid benign prostatasjukdom jämfört med prostatacancer (4, 5). CanAg Free PSA EIA är ett test för specifik bestämning av Fritt PSA utan korsreaktivitet med PSA-ACT komplex (6). METODPRINCIP CanAg Free PSA EIA är en icke kompetetiv, fast-fas baserad immunoassay baserad på den direkta sandwich tekniken. Kalibratorer, kontroller och patientprover inkuberas tillsammans med en biotinylerad anti-fri PSA monoklonal antikropp samt pepparotsperoxidas-märkt anti-fri PSA monoklonal antikropp i Streptavidin beklädda mikrostrips. Efter tvätt tillsätts buffrat Substrat/Chromogen reagens (väteperoxid 1
och 3, 3, 5, 5 tetra-methylbenzidin) till varje brunn. Under enzymreaktionen utvecklas blå färg om antigen finns närvarande. Färgintensiteten är proportionell mot mängden Fritt PSA i provet och bestäms i en mikroplatteläsare vid 450 nm. Kalibreringskurvor konstrueras för varje testomgång genom att plotta absorbansvärdet mot koncentrationen för respektive kalibrator. Patientprovets koncentration av Fritt PSA avläses sedan från kalibreringskurvan. REAGENS Varje CanAg Free PSA EIA kit innehåller reagens för 96 tester. Kitets utgångsdatum är angivet på kit-boxens utsida. Använd ej kitet efter angivet utgångsdatum. Blanda inte reagens från olika kit-batcher. Förvara kitet vid 2 8 C. Får ej frysas. Öppnade reagens är stabila enligt tabellen nedan förutsatt att de inte kontamineras och att de efter första öppnandet förvaras i återförsluten originalförpackning samt hanteras enligt anvisning. Placera kitet i 2-8 C omedelbart efter användning. Komponent Mängd Förvaring och hållbarhet efter öppnande Streptavidin Microplatta 1 platta 2 8 C till utgångsdatum angivet på plattan 12 x 8 avbrytbara streptavidinbelagda brunnar. Oanvända brunnar placeras tillsammans med torkmedlet i foliepåsen som noga återförsluts för att hålla brunnarna torra. Fri PSA Kalibratorer 6 flaskor 2 8 C till utgångsdatum angivet på flaskorna 0 μg/l 1 x 0.75 ml 0.3 μg/l 1 x 0.75 ml 1 μg/l 1 x 0.75 ml 2 μg/l 1 x 0.75 ml 5 μg/l 1 x 0.75 ml 10 μg/l 1 x 0.75 ml 2
Humant Fritt PSA i Tris-HCl buffrad saltlösning innehållande bovint serumalbumin, en inert gul färg samt 0.01% methyl-isothiazolone (MIT) som konserveringsmedel. Färdig att använda. Komponent Mängd Förvaring och hållbarhet efter öppnande Fri PSA kontroller 2 flaskor 2 8 C till utgångsdatum angivet på flaskorna 1 x 0.75 ml 1 x 0.75 ml Humant Fritt PSA i Tris-HCl buffrad saltlösning innehållande bovint serumalbumin samt 0.01% methylisothiazolone (MIT) som konserveringsmedel. Färdig att använda. Biotin Anti-Fri PSA 1 x 15 ml 2 8 C till utgångsdatum angivet på flaskan Biotin Anti-Fri PSA monoklonal antikropp från mus, ca. 1.5 µg/ml. Innehåller fosfatbuffrad saltlösning (ph 7.2), bovint serumalbumin, bovint immunoglobulin, blockerare, Tween 20, en inert blå färg samt 0.01% methyl-isothiazolone (MIT) som konserveringsmedel. Färdig att använda. Tracer, HRP Anti-Fri PSA 1 x 0.75 ml 2 8 C till utgångsdatum angivet på flaskan Stamlösning av HRP Anti-Fri PSA monoklonal antikropp från mus, ca. 20 µg/ml. Innehåller konserveringsmedel. Skall blandas med Biotin Anti-Fri PSA före användning. TMB HRP-Substrat 1 x 12 ml 2 8 C till utgångsdatum angivet på flaskan Innehåller buffrad väteperoxid och 3, 3, 5, 5 tetramethyl-benzidin (TMB). Färdig att använda. Stopplösning 1 x 15 ml 2 8 C till utgångsdatum angivet på flaskan Innehåller 0.12 M saltsyra. Färdig att använda. Tvättkoncentrat 1 x 50 ml 2 8 C till utgångsdatum angivet på flaskan 3
Tris-HCl buffrad saltlösning med Tween 20. Innehåller Germall II som konserveringsmedel. Skall spädas med vatten 25 gånger innan användning. Tecken på instabilitet TMB HRP-Substrat skall vara färglöst eller svagt blåaktigt. Blåfärgning indikerar att reagenset har kontaminerats och skall kasseras. VARNINGAR OCH FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRDER För in vitro diagnostisk användning. Endast för professionellt bruk. Konsultera US Department of Health and Human Services (Bethesda, Md., US) publikation No. (CDC) 88-8395 eller annat tillämpligt nationellt regelverk för anvisningar om laboratoriesäkerhet. Hantera alla patientprover som potentiellt smittsamma. Följ lokala riktlinjer för bortskaffande av avfall. Varning Material med humant ursprung har testats och befunnits negativt för HIV-1 och 2 antikroppar, HCV antikroppar samt hepatit B ytantigen (HBsAg). Eftersom inget test fullständigt kan utesluta ev. blodsmitta skall hantering och bortskaffande av humant material från denna produkt ske som om den vore potentiellt infektiös. PROVTAGNING OCH PROVHANTERING CanAg Free PSA EIA är avsedd att användas med serum. Samla venöst blod och avskilj serum enligt gängse metodik. Prover kan förvaras vid 2 8 C under 24 timmar och vid -20 C under 12 månader. För längre tids lagring skall prover förvaras vid -70 C eller lägre. Prover skall ej förvaras i självavfrostande frys. Låt prover tina långsamt, företrädelsevis vid 2 8 C över natt och låt sedan provet anta rumstemperatur före analys. Prostatamanipulering ger normalt förhöjda nivåer av Fritt PSA varför blodprov bör tas innan digital rektal undersökning. Efter kirurgiska ingrepp på prostata såsom nålbiopsi eller transurethral resektion rekommenderas en väntetid > 6 veckor innan prov tas för bestämning av Fritt PSA (7). BPHbehandling med Finasteride har visats orsaka sänkta nivåer av Fritt PSA (7). 4
PROCEDUR Nödvändigt material och utrustning utöver kitets innehåll 1. Mikroplatteskak Skakfrekvens skall vara moderat till kraftig. Longitudinell skakning med ca 200 slag/min, oscillation 700-900/min. 2. Mikroplattetvätt Använd antingen en automatisk mikroplattetvätt med kapacitet för 1 resp. 6 tvätt-cykler eller en semiautomatisk tvätt ansluten till en vakuumpump eller vattensug med anslutande vätskefälla för uppsamling av vätska Som alternativ till automatisk tvätt rekommenderas den manuella tvättaren Nunc Immuno-8. 3. Mikroplattespektrofotometer Läsare för våglängd 450 nm och absorbansområde 0 till 3,0. 4. Precisionspipetter Med engångsspetsar för dispensering av mikro- resp. millilitervolymer. En 8-kanalspipett eller repeterpipett med engångsspetsar för 100 µl är fördelaktigt men ej nödvändigt. 5. Destillerat eller avjoniserat vatten För beredning av Tvättlösning. Anvisningar 1. Grundlig förståelse av denna bruksanvisning är nödvändig för korrekt användning av CanAg Fri PSA EIA kit. Reagensen i kitet är avsedda att användas som en integrerad enhet. Blanda inte reagens från kit med olika lotnummer. Använd inte kitet efter det utgångsdatum som finns angivet på kitboxens utsida. 2. Reagensen skall anta rumstemperatur (20 25 C) innan användning. För korrekt resultat skall testet utföras vid 20 25 C. Frysta prover bör långsamt tinas till rumstemperatur och därefter omsorgsfullt blandas. 3. För att underlätta identifiering av prover under och efter analysen är det tillrådligt att märka mikrostripsen innan pipettering av kalibratorer, kontroller och prover påbörjas. 4. Omsorgsfull tvättning av mikrostripsen är av avgörande betydelse för analysresultatet. Tillse att varje brunn fylls fullständigt samt att uppsugning av vätska från brunnarna mellan och efter tvättstegen är fullständig så att brunnarna blir helt tömda på vätska. Om vätska ändå kvarstår skall plattan vändas upp och ner och omsorgsfullt knackas mot ett absorberande papper. 5. Automatisk mikrostrip-tvätt: Följ tillverkarens anvisningar för underhåll och tvätta angivet antal tvättcykler före och efter varje inkubering. Lämna inte tvättapparaten med Tvättlösning i systemet under längre tider eftersom nålarna då kan sättas igen med försämrad funktion som följd. 5. TMB HRP-Substrat är mycket känsligt för kontaminering. För optimal stabilitet rekommenderas att substratet hälls over till en noggrant rengjord behållare alt. engångsbehållare i syfte att undvika kontaminering. Använd endast rena pipettspetsar. 5
6. Använd rena engångsspetsar och en korrekt pipetteringsteknik vid hantering av prover och reagens. Undvik carry-over genom att hålla pipettspetsen strax ovanför mikrobrunnen och undvik att nudda plast- eller vätskeytan. Korrekt pipetteringsteknik är speciellt viktigt vid hantering av TMB HRP- Substrat. Beredning av reagens Stabilitet, beredda reagens Tvättlösning 2 veckor vid 2 25 C vid förvaring i försluten behållare Bered buffrad Tvättlösning genom att hälla upp Tvättkoncentratet (50 ml) i en ren behållare och späda 25 gånger med 1200 ml destillerat eller avjoniserat vatten. Antikroppslösning 3 veckor vid 2 8 C Bered önskad mängd Antikroppslösning genom att blanda 50 µl Tracer, HRP-Anti Fri PSA med 1 ml Biotin Anti-Fri PSA per mikrostrip (se tabellen nedan samt Protokollbladet). Antal Tracer, HRP Anti-Fri PSA Biotin Anti-Fri PSA Strips (µl) (ml) 1 50 1 2 100 2 3 150 3 4 200 4 5 250 5 6 300 6 7 350 7 8 400 8 9 450 9 10 500 10 11 550 11 12 600 12 Använd en ren plast- eller glasflaska för beredning av Antikroppslösning. Alternativ: Häll over hela innehållet från Tracer, HRP Anti-Fri PSA till flaskan med Biotin Anti-Fri PSA och blanda försiktigt. OBS: Antikroppslösning är stabil under 3 veckor vid 2 8 C. Bered endast den mängd antikroppslösning som åtgår under denna period och lagra under korrekta betingelser. TESTMETODIK Analysera kalibratorer, kontroller och patientprover i duplikat. En kalibreringskurva skall köras vid varje testtillfälle. Alla reagens och prover skall vara rumstempererade (20 25 C) innan användning. 1. Börja med att bereda Tvättlösning samt Antikroppslösning. Det är viktigt att använda rena behållare. Följ anvisningarna noga. 6
2. Placera önskat antal mikrostrips i en strip-ram. Placera genast resterande strips i foliepåsen med torkmedel och förslut omsorgsfullt. Tvätta varje strip en gång med Tvättlösning. Tvätta endast det antal strips som kan hanteras inom 30 minuter. 3. Pipettera 50 µl av respektive Fri PSA Kalibrator (CAL 0, 0.3, 1, 2, 5, 10), Kontroll (C1, C2) och patientprov (unknowns-unk) i mikrostripbrunnarna enligt schema nedan: A B C D E F G H 1 2 3 4 5 6 7 etc Cal Cal Unk1 0 5 Cal Cal Unk1 0 5 Cal Cal Unk2 0.3 10 Cal Cal Etc. 0.3 10 Cal C1 1 Cal C1 1 Cal C2 2 Cal C2 2 4. Tillsätt 100 µl Antikroppslösning med hjälp av en 100 µl precisionspipett eller en 8-kanals 100 µl precisionspipett. Undvik carry-over genom att hålla pipettspetsen något ovanför vätskeytan samt genom att undvika att beröra plastytan. 5. Inkubera ramen med mikrostrips under 1 timme (± 10 min) vid rumstemperatur (20 25 C) med konstant skakning på en mikroplatteskak. 6. Tvätta varje strip 6 gånger (se tvättprocedur under anvisningar, punkt 4). 7. Tillsätt 100 µl TMB HRP-Substrat till varje brunn (procedur, se punkt 4 ovan). TMB HRP-Substrat skall tillsättas så snabbt som möjligt och tidsskillnaden mellan första och sista brunnen bör inte överstiga 5 min. 8. Inkubera 30 min (± 5 min) vid rumstemperatur med konstant skakning. Undvik exponering för direkt solljus. 9. Tillsätt 100 µl Stopplösning. Blanda och läs absorbans vid 450 nm i en mikroplattespektrofotometer inom 15 minuter från tillsats av Stopplösning. Mätområde CanAg Free PSA EIA mäter koncentrationer mellan 0,03 and 10 µg/l. Om det är förväntat att koncentrationen Fri PSA överstiger mätområdet rekommenderas att provet späds med normalt manligt serum före analys. OBS: Det serum som används för spädning skall också analyseras för bestämning av den endogena koncentrationen fri PSA (se under Beräkning av resultat ). 7
Kvalitetskontroll Fri PSA Kontroll 1 och 2 bör användas för validering av varje testomgång. Det förväntade resultatområdet finns angivet på respektive flasketikett. Om värden utanför det förväntade området erhålls bör en fullständig genomgång av reagensen samt läsarens prestanda utföras och analysen sedan upprepas. Laboratoriet kan som komplement tillverka egna serum-preparationer på olika nivåer, vilka kan användas som interna kontroller för att säkerställa testets precision. Referensmaterial 1 st International Standard 96/668 kan användas som referensstandard. Angivna koncentrationer för Fri PSA Kalibratorer och kontroller har åsatts genom kalibrering mot en intern uppsättning referensstandarder, spårbara till den Internationella standarden 96/668. BERÄKNING AV RESULTAT Vid användande av mikroplatteläsare med inbyggt beräkningsprogram hänvisas till läsarens bruksanvisning för programmering och resultatberäkning utgående från koncentrationerna angivna på respektive etikett Fri PSA Kalibrator. För automatisk beräkning av Fri PSA resultat rekommenderas följande metoder: Cubic spline kurvanpassningsmetod. Kalibrator 0 skall ingå i kurvan med värde 0 µg/l. Spline smoothed kurvanpassningsmetod. Kalibrator 0 skall användas som plattblank. Interpolering med punkt-till-punkt utvärdering. Kalibrator 0 skall inkluderas i kurvan med värde 0 µg/l. Quadratic kurvanpassningsmetod. Kalibrator 0 skall ingå i kurvan med värde 0 µg/l. OBS: 4-parametric eller linjär regression skall inte användas. För manuell utvärdering konstrueras en kalibreringskurva genom att plotta absorbansen (A) för respektive kalibrator mot motsvarande Fri PSA koncentration (i µg/l), se bild nedan. Okända koncentrationer Fri PSA kan sedan avläsas från kurvan baserat på uppmätt medel-absorbans för respektive prov. Exempel Prov Kalibrator Medel abs Fri PSA värden värde (A) μg/l CAL PSA 0 0 µg/l 0.054 CAL PSA 0.3 0.3 µg/l 0.148 CAL PSA 1 1 µg/l 0.369 CAL PSA 2 2 µg/l 0.683 CAL PSA 5 5 µg/l 1.580 CAL PSA 10 10 µg/l 2.930 Prov A 0.522 1.480 Prov B 2.181 7.147 8
3,5 3 2,5 Prov B A 450 nm 2 1,5 1 Prov A 0,5 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Fri PSA (μg/l) Exempel (använd inte denna kurva för beräkning av verkliga resultat). Beräkning av resultat för spädda prover Om prover vid inledande analys ger högre koncentration Fri PSA än 10 µg/l skall proverna spädas 1/10 med normalt manligt serum och återanalyseras för bestämning av korrekt koncentration Fri PSA. OBS: Provet som används för utspädning skall också analyseras för bestämning av dess endogena koncentration av Fri PSA. Koncentration Fri PSA i det ospädda provet beräknas sedan enligt nedan: Spädning 1/10: 10 x ([Fri PSA] Spätt prov -(0. 9x[Fri PSA] normalt manligt serum )) METODENS BEGRÄNSNINGAR Halt Fri PSA skall inte användas som bevis för närvaro eller frånvaro av malign sjukdom. Testresultat skall tolkas endast mot bakgrund av andra undersökningar och procedurer för diagnos och omhändertagande av patienten. Test för Fri PSA skall inte ersätta etablerade kliniska undersökningar. Kalibratorerna som ingår i kitet CanAg Free PSA EIA skall inte användas för metodstudier för recovery. Här rekommenderas istället användning av ett förhöjt patientprov. Förekomst av anti-reagens antikroppar (human anti-mouse antibody (HAMA) eller heterofila antikroppar) i patientprovet kan interferera med testet trots att bufferten innehåller tillsats av specifika blockerande substanser. FÖRVÄNTADE RESULTAT Bestämning av Fri PSA bör utföras som komplement till ett ekvimolärt test för total PSA (CanAg PSA EIA, 340-10) varefter kvoten Fri PSA/Total PSA beräknas. Serum prov från 52 män med objektivt diagnostiserad benign prostata hyperplasi (BPH) samt 77 män med diagnos prostatacancer (PCa) analyserades med CanAg PSA EIA samt CanAg Free PSA EIA: 9
Diagnos n Median FPSA/TPSA kvot Min. Max. Medel FPSA/TPSA kvot Standard avvikelse 95% konfidens intervall BPH 52 0.18 0.04 0.42 0.19 0.08 0.17 0.21 PCa 77 0.09 0.02 0.53 0.12 0.09 0.10 0.14 Val av cut-off för kliniskt bruk beror på vilken klinisk applikation det gäller dvs. om metodens sensitivitet eller specificitet skall optimeras. Sensitivitet (% PCa korrekt detekterad) och Specificitet (% BPH korrekt detekterad) när olika FPSA/TPSA kvoter används som cut-off, visas nedan: FPSA/TPSA kvot Klinisk specificitet ( BPH > cut-off) Klinisk sensitivitet ( PCa < cut-off) cut-off n % 95% konfidensintervall n % 95% konfidensintervall 0.23 14(52) 27% 16 41 % 69(77) 90% 81 95 % 0.16 36(52) 69% 55 81 % 64(77) 83% 73 91 % 0.08 48(52) 92% 81 98 % 30(77) 39% 28 51 % Vi rekommenderar att varje laboratorium undersöker överförbarheten av här redovisade förväntade värden till sin egen patientpopulation och testprestanda (7). KARAKTÄRISTISKA PRESTANDA Dos-respons och precisionsprofil En typisk kalibreringskurva och precisionsprofil erhållen med CanAg Free PSA EIA visas nedan. Precisionsprofilen är baserad på analys av slumpmässigt placerade kalibratorer i en mikroplatta, n=8. Precision profile Free PSA EIA A 450 nm 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0.0 A 450 nm CV% 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Free PSA µg/l 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 CV% Precision Totalprecision beräknades enligt NCCLS riktlinje EP5-A (8) baserat på analyser av fruset humanserum med tillsatt Fri PSA på fyra olika nivåer och med användande av sex olika CanAg Free PSA EIA 10
reagenskombinationer. Varje prov pipetterades på slumpmässigt utvalda platser på plattan (n=2/analys) och analyserades två gånger per dag under totalt 20 dagar. Prov Replicat Medel (µg/l) Within-day SD (µg/l) Within-day CV % Between-day SD (µg/l) Between-day CV % Free PSA 1 80 0.38 0.01 1.9 0.01 3.0 Free PSA 2 80 1.44 0.02 1.6 0.04 2.6 Free PSA 3 80 3.46 0.05 1.6 0.08 2.3 Free PSA 4 80 6.91 0.09 1.3 0.12 1.8 Detektionsgräns Detektionsgränsen för CanAg Free PSA EIA är < 0,03 µg/l definierat som koncentrationen motsvarande medelabsorbans för PSA kalibrator 0 plus två standardavvikelser enligt formeln: 2 x SD CAL 0 OD CAL 0,3-OD CAL 0 x 0,3 μg/l Utbyte (recovery) Spetsade serumprover tillverkades genom att tillsätta portioner av prover med förhöjd halt fri PSA till normalt manligt serum. Det analyserade utbytet av tillsatt antigen var inom + 15% av förväntat. OBS: Utbytesstudier skall inte utföras med kitets kalibratorer. Hook Ingen hook har noterats för prover upp till > 5000 µg/l. Linjäritet Patient prover späddes med normalt manligt serum och analyserades. Erhållna värden var inom + 10 % av förväntade värden. Specificitet CanAg Free PSA EIA är baserad på två monoklonala antikroppar från mus, PSA30 och PSA66, riktade mot två olika epitoper exponerade på fri PSA. Denna kombination av antikroppar genererar ett test som är specifikt för Fri PSA med <1 % korsreaktivitet med PSA-ACT komplex (6). NCCLS riktlinje EP7-P (9) användes för att bestämma möjliga källor till interferens. Följande substanser och koncentrationer testades och befanns ej interfererande: Koncentration utan signifikant (± 10%) interferens Lipemia (Intralipid ) Bilirubin, unconjugated Hemoglobin 10 mg/ml 0.4 mg/ml 5 mg/ml 11
Metodjämförelse CanAg Free PSA EIA (Prod. No. 350-10) jämfördes med två-stegs metoden CanAg Free PSA EIA (330-10). Serumprover från 137 män med värden mellan 0 9 µg/l analyserades och linjär regressionsanalys av resultaten visade: [Fri PSA] Prod. No. 350-10 = 1.02 x [Fri PSA] Prod. No. 330-10 0.06 r =0.99 GARANTI Här redovisade prestanda erhölls med den angivna testmetodiken. Alla förändringar eller modifieringar av testmetodiken som ej rekommenderats av Fujirebio Diagnostics kan påverka testresultaten och Fujirebio Diagnostics frånsäger sig allt ansvar för sådan användning av produkten. REFERENSER 1. Wang MC, Valenzuela LA, Murphy GP, Chu TM (1979). Purification of a human prostate specific antigen. Invest Urol 17: 159 163. 2. Lilja H. (1985). A kallikrein-like serine protease in prostatic fluid cleavesthe predominant seminal vesicle protein. J Clin Invest 76: 1899 1903. 3. Haese A., Becker C., Diamandis E., and Lilja H., (2002) Adenocarcinoma of the Prostate In: Tumor Markers. Phusiology, Pathobiology, Technology, and Clinical applications. Eds. Diamandis et al., AACC Press, Washington, pp. 193-238. 4. Lilja H., Christensson A., Dahlén U., Matikainen M-T., Nilsson O., Pettersson K., Lövgren T. (1991). Prostate-specific antigen in serum occurs predominantly in complex with α 1 -antichymotrypsin. Clin Chem 37: 1618 1625. 5. Christensson A., Björk T., Nilsson O., Dahlén U., Matikainen M-T., Cockett ATK, Abrahamsson PA, Lilja H. (1993). Serum prostate specific antigen complexed to α 1 -antichymotrypsin as an indicator of prostate cancer. J Urology 150: 100 105. 6. Nilsson O., Peter A. Andersson I., Nilsson K., Grundström B., and Karlsson B. Antigenic determinants of prostatespecific antigen (PSA) and development of assays specific for different forms of PSA. Br J Cancer 75(6):789 797, 1997. 7. Price C. P., Allard J., Davies G., Dawnay A., J Duffy M., France M., Mandarino G., Milford Ward A., Patel B., Sibley P. and Sturgeon C. (2001) Pre-and post-analytical factors that may influence use of serum prostate specific antigen and its isoforms in a screening programme for prostate cancer. Ann Clin Biochem; 38: 188 216. 8. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices. Approved Guideline EP5-A (1999). 9. National Committee for Clinical Laboratory Standards, National Evaluation Protocols for Interference Testing, Evaluation protocol Number 7, Vol. 6, No 13, August (1986). 12
CanAg är ett varumärke av registrerat av Fujirebio Diagnostics AB Fujirebio Diagnostics AB Majnabbeterminalen SE-414 55 Göteborg Sweden Phone + 46 31-85 70 30 Fax + 46 31-85 70 40 info@fdab.com www.fdab.com CanAg Free PSA EIA Prod. No 350-10, SE, 2006-10. F5742, r2 13