PATOGEN REDUCERING MED INTERCEPT: TEORI OCH PRAKTIK ERFARENHETER FRÅN KAROLINSKA Per Sandgren
Bakgrund The OrbiSac system (a Swedish invention). First prototype 1998. Evaluated at Karolinska University Hospital (Larsson, Sandgren, Gulliksson) PI (BC-trc) implementerat i rutin febr-2015
Varför patogen inaktivering??
Bacterial Contamination of Platelets: ~1:250 Per Patient Risk The Wall Street Journal (Laura Landro) July 30, 2012 ~1 in 1500 platelet units are estimated to contain bacteria, even after culture testing* Death of a pediatric patient after transfusion of a PLT unit contaminated with Klebsiella pneumoniae in Geneva (February 2009)
Patogen inaktivering (PI) av blodkomponenter: Patogen inaktivering (PI) bör helst vara billig Skall döda ett brett spektrum av patogener (virus,bakterier) förhindra tex sepsis Skall ej vara giftigt (bieffekt) Skall ej påverka trombocyters kvalité negativt PI behandling bör minska behovet av ytterligare patogen testning, (bakterier, parasiter, etc) Bör ta bort behovet av annan testning (t.ex. CMV serologi, ebds etc) och gammastrålning)
INTERCEPT mechanism of action
Balansen mellan effektiv patogen reducering och acceptabel trombocytkvalite är kritiskt...
Inactivation capacity INTERCEPT & Mirasol Bacteria 7 6 5 4 3 2 1 0 INTERCEPT Mirasol
Trombocytfunktion
The platelet storage lesion Platelet SEM image. Sandgren, Hultenby 2007
Platelet TEM image. Sandgren and Hultenby 2010
FL2 Log % SS Log Count A FACS plots (JC-1 dye); mitochondrial membrane potential (MMP) Reference PLT (day 7) INTERCEPT DD (day 7) Positive control (apoptosis induced PLTs) B INTERCEPT DD (day 7) vs. Positive Control FS Log JC-1 87.69% 92.32% 17.10% 17.10 % 100 80 60 40 JC-1 12.11% 7.61% 81.96% 81.96% 20 0 2 5 7 Days Sandgren and Diedrich Vox Sanguinis (2015) 108, 340-349
Sandgren: preservation of mitochondrial function in (n=100) routine produced INTERCEPT-treated units; presented at ISBT, London 2015
Platelet additive solution in combination with platelet concentrates prepared from pooled buffy coats (1). BUFFY COAT BUFFY COAT BUFFY COAT BUFFY COAT BUFFY COAT BUFFY COAT PAS clamp clamp Pooling container
PAS in combination with platelet concentrates prepared from pooled buffy coats (2). Sampling bag Leukocyte filter Clamp Clamps Platelet-rich supernatant Red and white blood cells Pooling container Storage container
8BC Pool
Double dose PLTs from 8BCs SSP+ INTERCEPT
Precedure workflow Day 0 Day 1 Day 2 TIME 8 10 12 14 16 18 20 22 00 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 00 2 4 6 8 10 12 Control Collection Overnight Rest 7 days storage TEST Collection Overnight Rest PI CAD S 7 days storage Collection Collection PI Serology/NAT S sampling PI INTERCEPT treatment
Trombocytframställning dubbeldos
Buffy Coat specifikation 5 Bc pool Dubbel dos PC Volym 45-48 42-45 Mindre total volym i alla BCs Hct 40-50 34-38 TPK 80-120 90-120 RBC 18-22 16 18 Lägre hematokrit i alla BCs Plasma 21-29 26-30
Dubbeldostrombocyt; specifikation Pool Dubbel Trombocyt Slask/ Rest Volym (ml) EVF (%) 600±20 375 420-18 -20 - - TPK (10 9 /L) >600 500-800 100 Plasma (%) - 32 47 -
Platelet dose breakdown through production; Estimate range of Platelet content per split Intercept product; precount>1900 6.8 8.4 x 10 11 BC pool Donation 450 500 ml 20% lost filtration pooling centrifugation 5.5 6.7 x 10 11 Platelet conc. Buffy-coat PLT ; 0.9 1.2 x 10 11 10% lost IBS treatment 5.0 6.0 x 10 11 Intercept Platelet conc. Intercept Split 1 Intercept Split 2 2.5 3.0 x 10 11 2.5 3.0 x 10 11
Felaktig hantering av dubbeltrc
OrbiSac platelet production
INTERCEPTtrombocytenhet; specifikation INTERCEPT trombocytkoncentrat Volym (ml) ~180 ml TPK (10 9 /enhet) 200 LPK (10 6 /enhet) <1.0
Omställning till INTERCEPT har resulterat i en Produktionsökning/BC >20% V5 Tisdag Onsdag Torsdag Fredag Lördag Total n producerade Pooler 12 18 18 26 12 86 Tromb konc 24 36 36 52 24 172 Orbisac 19 28 28 41 19 135 V6 Tisdag Onsdag Torsdag Fredag Lördag Total n producerade Pooler 18 20 20 28 7 93 Tromb konc 36 40 40 56 14 186 Orbisac 28 32 32 45 11 148
SEK OrbiSac/eBDS vs INTERCEPT Dubbeldos vs OrbiSac/INTERCEPT enkeldos (n=9000) 16100000 14100000 12100000 OrbiSac/eBDS 10100000 8100000 INTERCEPT/ Man Dubbeldos 6100000 4100000 2100000 OrbiSac/INTERCEPT enkeldos 100000 Kit SSP+ Wafer ebds/ic DD/IC E Total kostnad
On going; INTERCEPT Ca 90% av trombocytproduktionen på Karolinska kommer från BC-trc Ca 10 % från aferesproduktion From febr 2015; INTERCEPTbehandlas BC-trc till 100% Pågående projekt att även INTERCEPT-behandla aferes-trc som DD-dos concept
60 INTERCEPT-treated Apheresis platelets: response to different agonists (PAC-1 expression) Unstim. PLTs 50 ADP stim 40 Unstim. PLTs ( % ) 30 Collagen stim 20 Unstim. PLTs 10 0 Day 2 Day 5 Day 7 Days of storage Thrombin stim Sandgren unpublished data, on going validation 2015
Conclusion Photochemical pathogen inactivation OF DOUBLE DOSE BUFFY-COAT PLATELET CONCENTRATES with INTERCEPT Blood System had no influence on the platelet in vitro viability over the 7 day of storage Implementering av INTERCEPT på Karolinska Universitetssjukhuset; Ökad patientsäkerhet Ekonomisk vinning Bibehållen eller förbättrad trombocytkvalite
Stort Tack till! CERUS Eleonore Tennby Hans Vermeij Marius Witsoe Dr. Johannes Irsch Dr. Oras Mistafa All personal på Blodkomponenten Huddinge, speciellt Mazen Al-Waili Sandra Valencia
Tack för uppmärksamheten!!!