sida 1 (11) Rapportnamn Provmaterial Utförande B-Hemoglobin Patientförberedelser Vid kapillärprovtagning skall patientens hand vara varm och avslappnad. Typ av provmaterial Ven-, kapillär- eller artärblod. OBS! Ej andra kroppsvätskor. Typ av provrör och tillsatser EDTA-rör (lila propp) eller Na/Li-heparin (mörkblå-svart/grön propp). Kapillärblod direkt till reagenskuvetten. Provvolym Reagenskuvetten kräver 10 µl helblod. Provberedning och förvaring Vakuumrör kan innan analys förvaras i rumstemperatur i 8 timmar och i kyl i 24 timmar. Kapillärblod fylls direkt i reagenskuvett och skall analyseras inom 10 min. Förberedelse 1. Sätt på instrumentet genom att trycka på knappen. 2. En startbild med information om instrumentet visas. Efter en liten stund visar skärmen Dra ut kuvetthållaren. 3. Dra ut kuvetthållaren till iläggningsläge. Detta markeras med ett distinkt stopp som ej får passeras. 4. Instrumentet gör en självtest som tar ca 20 sekunder. När detta är klart visar skärmen Ange Användar-ID. 5. Scanna eller knappa in ditt Användar-ID. 6. Tryck på bilden av en kuvett. 7. Scanna eller knappa in patient ID. Patient ID ska anges som ÅÅÅÅMMDDXXXX. Har du skrivit in patient-id så måste man trycka OK. 8. Kontrollera att patient ID är korrekt, tryck OK.
sida 2 (11) Venöst eller arteriellt blod från provrör eller spruta Blod från vakuumrör 1. Blodet skall ha antagit rumstemperatur före analys. 2. Blanda provet väl genom att vända röret minst 10 ggr. 3. Använd droppstift för hygienisk hantering. Tryck droppstiftet genom provrörets propp. 4. Droppa ut en droppe blod genom att trycka provrör med droppstift mot hydrofob yta, t ex insidan på kuvettförpackningen. Finns inget droppstift pipettera eller använd spruta för att få en droppe till den hydrofoba ytan. OBS spruta aldrig in blod i kuvetten. Kuvetten ska aldrig fyllas direkt från röret eftersom blodet som finns kvar i röret då inte kan användas för ytterligare analys. 5. Sätt kuvettspetsen i bloddroppens mitt och låt kuvetten fyllas helt i ett moment. 6. Torka av överskott av blod på kuvetten utsida. Se till att inget blod sugs ut ur kuvetten. Kontrollera att den blodfyllda kuvetten inte har några luftblåsor. 7. Lägg den fyllda kuvetten i släden och för in den helt till stopp. I avläsningsfönstret visas nu ett timglas, fotometern mäter. Mätningen tar 15-60 sekunder. 8. Värdet visas i displayen, tryck OK. Lägg mätaren i dockan så skickas svaren till Cosmic. 9. Tryck OK. Drag ut kuvetthållaren och kasta den avlästa kuvetten. Kuvetten kan mätas igen om det sker inom 10 minuter. Blod från spruta (heparintillsats) 1. Fyll "heparinsprutan" med blod. 2. Drag tillbaka sprutans kolv ca 1 cm så att blodet kan blandas väl. Observera att röret ej får användas för analys av blodgas efter detta. 3. Blanda provet väl genom att vända sprutan ca 10 ggr. Luftpelaren skall "vandra" fram och tillbaka genom hela provet. 4. Droppa ut en droppe blod på hydrofob yta, t ex insidan av en kuvettförpackning. 5. Sätt kuvettspetsen i bloddroppens mitt och låt kuvetten fyllas i ett moment. OBS spruta aldrig in blod i kuvetten.
sida 3 (11) 6. Torka av överskott av blod på kuvettens utsida. Se till att inget blod sugs ut ur kuvetten. Kontrollera att den blodfyllda kuvetten inte har några luftblåsor. 7. Lägg den fyllda kuvetten i släden och för in den helt till stopp. I avläsningsfönstret visas nu ett timglas, fotometern mäter. Mätningen tar 15-60 sekunder. 8. Värdet visas i displayen, tryck OK. Lägg mätare i dockan så skickas svaren till Cosmic. 9. Tryck OK. Drag ut kuvetthållaren och kasta den avlästa kuvetten. Kuvetten kan mätas igen om det sker inom 10 minuter Kapillär blodprovstagning Dubbelprov skall alltid analyseras! Vid kapillärprovtagning skall patientens hand vara varm och avslappnad. 1. Förbered 2 kuvetter och lämplig lancett. 2. Desinficera och lufttorka dina händer, tag på dig handskar. 3. Välj stickområde på lång- eller ringfinger. Desinficera stickområdet. Låt torka. 4. Pressa med tummen och pekfingret på sista fingerleden upp mot fingerblomman. Stick inte för nära nageln och ej uppe på fingertoppen utan mitt emellan. Gör ett djupt instick med lancetten så att blodet rinner spontant. 5. Torka av de tre första bloddropparna med torr papperstork. Stasa mycket försiktigt (det är inte tillåtet att krama fram blod ur fingret om blodflödet är dåligt). 6. Se till att bloddroppen är tillräckligt stor för att fylla kuvetten helt. Håll kuvetten i den bakre delen och för kuvettens spets till bloddroppens mitt. Fyll kuvetten helt och hållet i ett enda moment. 7. Torka av överskott av blod på kuvettens utsida. Se till att inget blod sugs ut ur kuvetterna. Kontrollera att den blodfyllda kuvetten inte har några luftblåsor. Torka bort resterna av bloddroppen och låt en ny droppe komma fram. Upprepa med nästa framtagna kuvett = dubbelprov.
sida 4 (11) 8. Lägg den fyllda kuvetten i släden och för in den helt till stopp. I avläsningsfönstret visas nu ett timglas, fotometern mäter. Mätningen tar 15-60 sekunder. 9. När resultatet visas i displayen trycker du på bilden med två kuvetter. 10. Angivet personnummer visas i displayen. Tryck OK. 11. Dra ut kuvetthållaren 12. Lägg kuvett nr två i släden och för in den till stopp. 13. När den andra kuvetten är analyserad kommer instrumentet att räkna om skillnaden mellan kuvetterna är <8g/L. Värdet är då ok att använda. 14. Om skillnaden mellan kuvetterna är >8g/L kommer instrumentet att varna att skillnaden är för stor. Värdena får då ej användas. Prov måste tas om venöst prov rekommenderas. 15. Lägg instrumentet i dockan så förs godkända svar över till Cosmic. Observera att det är värdet från den 1:a kuvetten som förs över till journalen om dubbelproverna är godkända. Medelvärdet mellan 1:a och 2:a kuvetten som visas i displayen förs alltså inte över till journalen. Underkänna analysresultat Om ett färdigt resultat av någon orsak inte ska föras över till Cosmic kan överföringen stoppas genom att göra så här: 1. Lägg inte instrumentet i eller i närheten av dockan. 2. När resultatet syns i displayen, innan resultatet sparas med OK, trycker man på bilden av ett anteckningsblock. 3. Klicka på Lägg till - Lägg till OK OK Underkänn OK. Akuttest Om ett prov måste analyseras när patient ID inte finns eller om instrumentet blivit låst (tex om kontrollerna inte godkänts) kan ett Akuttest utföras. Ange Användar-ID som vanligt och klicka på ambulansen. Klicka på OK två gånger (Patient ID krävs ej). Provtagning och analys utförs enligt något av alternativen ovan. Akuttest ska endast användas då analysen är akut. Man kan analysera max 2 kapillära eller 4 venösa patientprover som akuttest innan instrumentet kräver ett prov med patient ID eller att kontroller körs. Prov som körs som Akuttest förs inte över till patientjournalen.
sida 5 (11) Svarsrutiner Svaren skickas till Cosmic automatiskt, överföringen tar några minuter. Observera att inget svar förs över om kapillärt tagna dubbelprover skiljer mer än 8 g/l eller om provet analyserats som ett Akuttest. Enhet g/l. Heltal. Referensintervall Ålder Analysresultat kvinnor: 120-150 g/l män: 130-170 g/l 8 14 dagar: 130-180 g/l 15 30 dagar: 128-164 g/l 31 60 dagar: 112-158 g/l 61 180 dagar: 116-154 g/l 6 mån 7 år: 107 134 g/l 8 11 år: 118 148 g/l flickor 12 17 år: 112 158 g/l pojkar 12-17 år: 126-170 g/l Referensurvalsgrupp Utrustning Vuxna: NORIPS övre värden, de låga är WHO:s anemikriterier. Barn: 1 vecka 5 mån: se referens nr 1 6 mån 17 år: se referens nr 2. Instrument Hemocue B-Hemoglobin Fotometer 201DM Dockningsstation Reagenskuvetter Lancetter Papperstork Klorhexidinsprit 5 mg/l Underhåll Fotometerns princip är att ljus transmitteras genom kuvettens öga. Ljuskällan i mätenheten består av två lysdioder. Fotometern är konstruerad för att fungera under lång tid utan direkt service. Inget förebyggande underhåll krävs för elektroniken i fotometern. Vid felaktig användning kan blod stänka på optiken inne i fotometern och hindra ljusvägen, detta meddelas med felkoder. Detta kan åtgärdas genom att använda en rengöringsspatel (HemoCue Cleaner).
sida 6 (11) Docka När instrumentet är dockat överförs resultaten till Cosmic och batteriet laddas. Instrumentet ska inte ligga med scannerdelen för nära dockningsstationen, då kan instrumentet försöka ha kontakt med dockan hela tiden och instrumentet riskerar att låsa sig. Lägg instrumentet vid sidan om eller vänd det så att scannern inte är vänd mot dockan. Om instrumentet är låst tas batteriet ut ur instrumentet för att bryta strömmen. Rengöring av fotometern Fotometern rengörs vid behov när felkod ges, se ovan. 1. Stäng av instrumentet. 2. Tag ut kuvettsläden ur fotometern genom att med en penna trycka ned spärren uppe till höger på kuvetthållaren. Dra ut släden ur instrumentet. 3. Tag ut en rengöringsspatel ur förpackningen och öppna den. Är spateln för blöt, krama ur den med en pappersservett innan den används. 4. För in rengöringsspateln i mätenheten och rengör den genom att föra spateln fram och tillbaka 5-10 gånger. 5. Kontrollera att spateln är ren. Är den smutsig, upprepa rengöringen med en ny spatel. Kasta spateln, den kan ej återanvändas. 6. Rengör kuvettsläden, se nedan Rengöring av kuvettsläde. 7. Vänta fem minuter så att mätenheten blir helt torr. 8. Sätt tillbaka kuvettsläden. Det är viktigt att den är helt torr innan den sätts tillbaka i fotometern. 9. Kontrollera fotometern genom att sätta på instrumentet 10. Anteckna åtgärden, ange även datum och signatur i protokollet Kvalitetssäkring i loggboken. Primärvården skriver en loggboksanteckning. Rengöring av kuvettsläden Rengör kuvettsläden dagligen samt vid behov. 1. Tag ut kuvettsläden ur fotometern genom att med en penna trycka ned spärren uppe till höger på kuvetthållaren. Dra ut släden ur instrumentet. Rengör släden med desinfektionsmedel. Släden tål autoklavering om detta anses nödvändigt. 2. Det är viktigt att släden är helt torr innan den åter sätts på plats i fotometern.
sida 7 (11) Reagens Reagenskuvett: Kuvett B-Hemoglobin 201+, 25 test/fp Mediq art nr 47077 Leverantörens art nr 111717 OBS! Endast enstycksförpackade kuvetter ska användas Kvalitetskontroll Hemo-Trol LÅG: Hemoglobin-nivå, 80 g/l. (2 flaskor/förpackning) Mediqart nr 85021, leverantörens art nr 130158 Hemo-Trol NORMAL: Hemoglobin-nivå 120 g/l (2 flaskor/förpackning) Mediq art nr 85616, leverantörens art nr 130159 Extramaterial Rengöringsspatel (5 st/förpackning). Mediq art nr 47326,Leverantörens art nr 139123 Droppstift, T ex diffsafe från BD(100 st/förpackning). Mediq art nr 45587, Leverantörens art nr 366005 Kvalitetssäkring Kvalitetssäkringssystemet kan indelas i tre delar: 1. Apparatkontroll. 2. Internkontroll (kvalitetskontrollmaterial med känt värde), 1 gång/vecka samt då patientresultat ifrågasätts. 3. Extern kvalitetssäkring (kvalitetskontrollmaterial med okänt värde). Apparatkontroll Apparatkontroll utförs automatiskt när instrumentet startas. Internkontroll Kontroll av hela systemet fotometer, hantering (analyssteget), och reagenskuvetter. Använd Eurotrol-kontroll, två nivåer ska köras varje vecka. Euro-Trol förpackningarna (HemoTrol står det på varuförsörjningen) innehåller 2 flaskor vilket motsvarar 2 månaders förbrukning. Hållbarhet: Oöppnad flaska till utgångsdatum i kylskåp. Öppnad flaska 1 månad i kylskåp. Var noga med att öppna en flaska/nivå i taget, datera flaskan vid öppnandet. Analys av internkontroll 1. Tag fram kontrollmaterialet (flaskan) ur kylskåpet, låt den anta rumstemperatur (ca 15 minuter).
sida 8 (11) 2. Blanda flaskan genom att vända den 5 ggr (får ej blandas för mycket). 3. Fyll inte kuvetten direkt från droppflaskan. Tryck ut en droppe på en hydrofob yta, ex insidan av kuvettförpackningen. För kuvettens spets i till droppens mitt. Låt kuvetten bli helt fylld. 4. Fyll kuvetten i ett moment och torka av utsidan. Tryck QC på displayen. För LOW trycker du nivå 1 och för normal trycker du nivå 2. 5. Lägg kuvetten i hållaren och stäng kuvetthållaren. 6. Scanna in den nivå du ska köra från inplastade Internkontroller Hemoglobin. 7. I displayen visas kontrollens resultat och om det är godkänt. Är värdet godkänt så kör nästa nivå på samma sätt. 8. Skriv kontrollernas värden i loggboken. 9. Om kontroll inte är godkänd, kontrollera att kontrollflaskan inte har varit öppen för länge och kör om kontrollen. Vid upprepade kontrollproblem kontaktas PNA support. Instrumentet ska inte användas om kontroll inte går in. Se även under Akuttest. 10. Torka av skruvlocket och droppflaskans gängor med en ren tork innan droppflaskan stängs. Se till att flaskan är ordentligt stängd. Ställ in kontrollflaskan i kylen Extern kvalitetssäkring För Akademiska sjukhuset och Enköpings lasarett 1. Kvalitetssäkringsmaterial från Klinisk kemi och farmakologi, varannan månad. Kvalitetssäkringsmaterialet är ett blodprov med för mottagaren okänd hemoglobinkoncentration. Provet analyseras som ett venöst akuttest (tryck på ambulansen) och resultatet fylls i på medföljande blankett. Blanketten skickas till Klinisk kemi och farmakologi. 2. Klinisk kemi och farmakologi skickar tillbaka en resultatrapport två gånger per år. Resultatrapporten innehåller; riktvärde, extern enhets resultat och avvikelse i %. 3. Allt är OK så länge resultatet avviker mindre än ± 10 % 4. När resultatet avviker mer än ± 10 % från riktvärdet skickas i första hand nytt kvalitetssäkringsmaterial ut, upprepa hanteringen enligt punkt 1 till 2. 5. Skulle resultatet fortfarande avvika mer än ± 10 % från riktvärdet skall instrument, reagenskuvetter och hantering ses över. PNAgruppen kontaktar avdelningen/mottagningen.
sida 9 (11) Mätintervall Felkällor För primärvården Equalis kvalitetssäkring med 10 utskick per år används. Provet analyseras på samma sätt som ett patientprov och resultatet rapporteras till Equalis. Hamnar resultatet utanför åsatta värden kontaktas laboratoriesamordnare på telefon 018-611 42 03 val 1. 0 256 g/l Imprecision I intervallet 50 180 g/l, CV ± 2 % I intervallet 181 256 g/l, CV ± 4 % 1. Kalla händer bör värmas (t ex i varmt vatten) före provtagningen för att öka blodcirkulationen. Handen skall vara varm och avslappnad. Undvik att mjölka eller massera fram blodet, då det lätt blir hemolys i provet och/eller en tillblandning av vävnadsvätska som späder ut provet. Gör ett djupt instick med lancetten så att blodet rinner spontant. Tänk på att av smärtan vid insticket drar kapillärerna ihop sig. Vänta med blodsamlingen tills smärttonus avklingat, då är blodflödet som bäst. 2. Provet taget direkt från första kapillärt tagna bloddroppen. De tre första bloddropparna ska torkas bort och därefter tas provet från nästa droppe. 3. Kapillärt taget blod där dubbelprov ej utförts. 4. Samma bloddroppe används vid fyllnad av båda kuvetterna. 5. Efterfylld kuvett. 6. Kuvett som inte analyseras inom 10 minuter. 7. Slås släden in i fotometern så skvätter blodet ut ur kuvetten och förorenar fotometern. Följ istället med släden in. Bra att veta HemoCue B-Hemoglobin kuvetter förvaras i rumstemperatur. Fuktskadad kuvett ger ett oljigt intryck. Hantera kuvetterna med rena händer så att inte reagenset (det gula i kuvettspetsen) förorenas. Ändringar i kroppsläget påverkar snabbt fördelningen av vätska mellan de intra- och extravaskulära rummen. B-Hb, B-Erytrocyter och B-EVF är i medeltal 8 % högre hos uppegående än hos liggande individer. Stora individuella skillnader föreligger därtill.
sida 10 (11) Hos friska individer nås ett jämviktsläge beträffande vätskefördelningen ca 30 minuter efter ändring av kroppsläget. Vid muskelarbete lämnar vätska cirkulationen, varigenom värdena stiger. Tillfälliga förändringar i kärltonus och flöde genom det kapillärområde, där provet tas, påverkar också resultatet av bestämningen. Allmänt kan påpekas att B-Hb-nivån är ett osäkert mått på förändringar i totala blodkroppsmassan. Indikation/medicinsk betydelse Mätprincip Referenser Mätning av hemoglobinkoncentrationen i blod är framförallt indicerat vid misstanke om blodbrist, men även vid polycytemimisstanke och för att följa förändringar i vätskefördelningen mellan intra- och extracellulära rummen. Blodbrist kan uppkomma av flera orsaker t ex blödning, järnbrist, brist på vitaminerna kobalamin (B12) eller folsyra, nedsatt erytropoietinbildning vid njurinsufficiens, tumörsjukdom mm. Symtomen vid blodbrist är ospecifika och undersökningen är indicerad som ett led i utredningen av många både akuta och kroniska sjukdomstillstånd. Natriumdesoxycholat hemolyserar erytrocyterna och hemoglobin frigörs. Natriumnitrit överför hemoglobin till methemoglobin, som med natriumazid ger azidmethemoglobin. Absorbansen mäts vid två våglängder (570 och 880 nm) för att kompensera för eventuell turbiditet av olika ursprung. 1. Soldin SJ, Brugnara C, Wong EC, eds. Pediatric reference intervals. 6th ed. Washington, DC: AACC Press, 2007. 2. Aldrimer M, Ridefelt P, Rödöö P, Niklasson F, Gustafsson J, Hellberg D. Population-based pediatric reference intervals for hematology, iron and transferrin. Scand J Clin Lab Invest 2013; 73: 253-61. 3. Laurells Klinisk Kemi i praktisk medicin. 8 upplagan. 4. HemoCue, B-Hemoglobin fotometer Instruktionsbok. 5. HemoCue, B-Hemoglobinfotometer Servicehandbok. Kunskapsansvarig läkare Malgorzata Karawajczyk Kontaktinformation Vid frågor och support kontaktar primärvården laboratoriesamordnare på telefon 018-611 42 03 val 1. Vid frågor och support kontaktar Akademiska sjukhuset och Enköpings lasarett PNA-support gruppen på telefon 018-611 42 03 val 2.
sida 11 (11) Dokumenthistorik Version Orsak/ändring Senast ändrad av 1 2 2007-12-19 Ny PNA-mall Tagit bort dubbelprov för venösa prover (felskrivet), kvalitetssäkringsutskick ändrat till varannan månad. Ingrid Wahlberg Ingrid Wahlberg 3 Tagit bort HemoCue Classic Saba Haile 4 Nytt barnrefrensintervall Saba Haile 5 Korrigerat för DM instrumenten. Saba Haile