Klinisk kemi Sid 1(6) Semikvantitativ urinanalys, Combur testremsor, Urisys 1100 U-pH (NPU02415) U-Glukos (NPU04207) U-Ketoner (NPU10504) U-Leukocyter (NPU03987) U-Nitrit (NPU10506) U-Protein (NPU17997) U-Erytrocyter (NPU04208) Bakgrund, indikation och tolkning Testremsan är ett semikvantitativt påvisande av glukos, ketoner, leukocyter, nitrit, protein och erytrocyter i urin samt ph-värdet. Den kan avläsas manuellt men bör för att minska felkällor avläsas maskinellt. Urintestremsor används för screening av urin vid diagnostik av infektion eller inflammation i njurar och urinvägar, vid misstanke på hematuri samt kontroll vid diabetes och hypertoni [1,2]. ph: Vanligtvis är urinen sur med ett ph-värde runt 6, men värdena kan variera från 5 upp till 8,5. Låga nivåer ses efter nattens fasta och höga efter måltider. Högsta ph-värden ses hos vegetarianer. Glukos: Prerenal glukosuri förekommer normalt vid övergående höga glukosnivåer i plasma och sänkt tröskel för glukosutsöndring. Det kan också ses vid diabetes mellitus och vid tubulusskada. Ketoner: Utsöndring av ketoner i urinen mindre än 0,2 mmol/l är normalt. Ketonuri uppstår vid ketonemi, dvs. ketonkroppar samlas i blodet. Ketonkropparna, acetättiksyra, 3-hydroxismörsyra och aceton bildas i leverns mitokondrier från fria fettsyror vid svält och framför allt vid obehandlad diabetes. Lätt förhöjda nivåer ses ofta vid olika sjukdomstillstånd och vid fasta. Vid hyperketonemi med ketonuri, ketos, uppkommer förlust av katjoner och acidos. U-leukocyter: Förhöjd halt av leukocyter i urin, speciellt i kombination med hematuri, är ett tecken vid på njurinflammation eller urinvägsinfektion. Leukocyter i urin är i de flesta fall neutrofila granulocyter. Nitrit: Vissa bakteriekulturer omvandlar nitrat som finns i urin till nitrit. Efter blåsinkubation kan förhöjda nivåer nitrit detekteras som tecken på urinvägsinfektion. Protein (Albumin): Albuminuri kan orsakas av ökad permeabilitet för proteiner i glomeruli, nedsatt reabsorption i tubuli och läckage av proteiner distalt om glomeruli. Testremsan kan inte användas för att spåra eller följa låggradig s.k. mikroalbuminuri eller för att upptäcka proteiner av annan typ, t ex lätta immunoglobulinkedjor. Erytrocyter: Makroskopisk hematuri, som oftast upptäcks av patienter och verifieras av testremsa, är nästan alltid förenad med kliniska sjukdomstillstånd som sten, tumör eller inflammation och skall alltid utredas. Mikroskopisk hematuri på grund av ökat antal erytrocyter kan påvisas i urin från 1-5% friska individer men ses också vid glomerulomefrit, infektion och malignitet. Prevalensen allvarliga sjukdomar (framför allt malignitet) är mindre än en procent i denna grupp [1,2,3].
Klinisk kemi Sid 2(6) Tolkning Vid diagnostisk användning ska resultaten alltid bedömas i samband med patientens anamnes, kliniska undersökningar och andra fynd. Kunskap om effekten för läkemedel eller deras metaboliter på testremsans olika testfält är inte fullständig [4]. Analysprincip Urisys 1100 instrumentet är utrustat med dioder som sänder ut ljus med bestämd våglängd anpassad för varje analys. En detektor mäter ljusintensiteten och skickar en elektrisk signal via en analog-digitalomvandlare till en mikroprocessor, som beräknar koncentration av respektive ämne. ph: Testfältet innehåller en kombination av tre indikatorer; metylrött, fenolftalein och bromtymolblått som reagerar specifik med väte joner. I ph-området 5-9 går färgen från orange över gulgrön till blå. Glukos: Beta-D-glukos reagerar med luftens syre och katalyseras av enzymet glukosoxidasperoxidas och bildar delta-d-gluconolactone och väteperoxid. Väteperoxiden oxiderar indikatorn TMB med hjälp av peroxidas till en blå färg. Det gula fältet går gradvis mot grönt och blir mörkare beroende på glukosmängden i urin. Ketoner: Acetoacetat och aceton reagerar med nitroprussidnatrium och glycin i alkalisk miljö och bildar ett violett färgkomplex. Leukocyter: De leukocyter som utsöndras i urin är nästan uteslutande neutrofila granulocyter, vars esterasaktivitet upptäcks i testfältet. Testfältet innehåller substanser med kväve-estrar som klyvs av granulocyt-esterase och bildar ett violett färgämne. Nitrit: I närvaro av nitritbildande bakterier i urinblåsan reduceras nitrat till nitrit. I testfältet reagerar sulfanilamid med nitrit i sur miljö och bildar ett diazoniumsalt som i sin tur kopplar på en substans och bildar en röd azofärg. Den röda färgens intensitet är proportionell mot nitritkoncentrationen. Protein (Albumin): Testfältet innehåller en buffertblandning som genomgår en färgförändring från gult till grönt i närvaro av albumin. Erytrocyter: Organisk väteperoxid och en indikator, tetrametylbensidin, bildar i närvaro av hemoglobin eller myoglobin en blågrön färg. Denna färg blir grön på det gula testfältet. Enstaka till täta gröna punkter anger intakta erytrocyter. Hemoglobin visas som en homogen grönfärgning av testfältet [4,5].
Klinisk kemi Sid 3(6) Referensintervall Analys (morgonurin med blåstid minst 4 timmar) Arbiträr enhet U-pH 5-8 U-Glukos U-Ketoner U-Leukocyter U-Nitrit U-Protein U-Erytrocyter [5] Metodkarakteristika Interferenser och felkällor Mörk eller färgad urin kan ge falskt positiva resultat. På grund av fysisk aktivitet, som till exempel löpträning, kan erytrocyt- och proteinvärdena vara förhöjda, utan att detta är tecken på sjukdom. Graviditet, feber och ålder påverkar också flera av parametrarna. ph: ph värdet i urinen kan lätt förändras med diet. Gammal urin blir alkalisk pga bakterienedbrytning av urea. Glukos: Falskt positivt resultat kan ses vid rester av rengöringsmedel eller kraftigt oxiderande desinfektionsmedel i provtagningskärlet. Glukos kan bli falskt för lågt vid längre förvaring och hög bakteriehalt då bakterierna förbrukar glukos. Ketoner: Falskt positivt resultat kan ses vid intag av läkemedel innehållande sulfhydrylgrupper. Fenylketoner och ftaleinföreningar kan ge en röd färg, vilken tydligt skiljer från ketonkropparnas violetta färg, men bör vara ett observandum vid visuell avläsning. Leukocyter: Formaldehyd (konserveringsmedel) och behandling med antibiotika som innehåller imipenem, meropenem eller klavulanssyra kan ge falskt positiva resultat. Falskt låga värden kan ses vid proteinkoncentrationer >5 g/l och hög glukoskoncentration. Även cefalexin och gentamycin administrerat i höga doser kan ge falskt negativt resultat. Vid kraftigt färgade prov pga höga bilirubinhalter kan reaktionsfärgen maskeras. Nitrit: Falskt positivt resultat kan ses vid intag av fenazopyridin (inte registrerat i Sverige). Falskt negativt resultat kan erhållas vid intag av stora doser vitamin C samt vid otillräcklig blåsinkubation. Även kost med lågt nitratintag kan ge falskt negativt resultat. Protein (Albumin): Falskt positivt resultat kan ses vid rester av rengöringsmedel, bl a klorhexidin, eller kraftigt oxiderande desinfektionsmedel i provtagningskärlet. Falskt positivt resultat kan även ses vid intag av fenazopyridin (inte registrerat i Sverige) och vid infusion med polyvinylpyrrolidon (blodersättningsmedel). Erytrocyter: Falskt positivt resultat kan ses vid rester av rengöringsmedel eller kraftigt oxiderande desinfektionsmedel i provtagningskärlet. Menstruationsblod ger falsk positiv reaktion [5,6].
Klinisk kemi Sid 4(6) Metodvaliditet Parameter Mätområde Praktisk Riktighet (Arbiträra enheter) Analysgräns ph 5-9 95 % i förhållande till ph-meter Glukos Ketoner Leukocyter Normal 55 mmol/l (0-4) Neg 15 mmol/l (0-3) Neg 500 leu/µl (0-3) 2.2 mmol/l 90 % i förhållande till hexokinasmetod 0.5 mmol/l 85 % i förhållande till fotometrisk enzymatisk acetatbestämning 10 25lLeu/µL 90 % i förhållande till kammarräkning Nitrit Negativ positiv 0.5 mg/l 90 % för 10 7 gram-positiva organismer i förhållande till Griess prov Protein Erytrocyter Neg 5 g/l (0-3) Neg 250 ery/µl (0-4) 60 mg albumin/l 90 % i förhållande till radiell immundiffusion 5 ery/µl 90 % i förhållande till kammarräkning [4] Referenser 1. Little P, Turner S, Rumsby K, Warner G, Moore M, Lowes JA, et al. Health Technology Assessment:Dipsticks and diagnostic algorithms in urinary tract infection: development and validation, randomised trial, economic analysis, observational cohort and qualitative study. Health Technol Assess 2009;13(19). 2. Miller et al, Current issues in measurement and reporting of urinary albumin excretion -NKDEP-IFCC workgroup. Clin Chem 2008;55:24-38. 3. Nilsson-Ehle P, Berggren Söderlund M, Theodorsson E. Laurells Klinisk kemi i praktisk medicin. Lund. Studentlitteratur 2012, 9:e upplagan. 4. Bipacksedel Combur 7 Test. Roche Diagnostics. 5. Compendium Urinalysis with Test Strips. Roche Diagnostics. 6. Hageman, P. Kimling, H. Zawata, B. Fundamentals of Laboratory testing, Urine. Roche Diagnostics. 7. Bruksanvisning för InternKontroller MAS UA Urin kontroller. 8. Användarhandbok Urisys 1100 version 04. Roche Diagnostics.
Klinisk kemi Sid 5(6) Provtagning Ca 10 ml urin i plaströr/plastbägare. För nitritanalys bör urinen ha stått minst 4 timmar i blåsan därför rekommenderas morgonurin. Provet ska vara rumstempererat och mindre än 2 timmar gammalt vid analys. Provhantering Hållbarhet Hållbart i 2 timmar i rumstemperatur. Instrument och tillbehör Urisys 1100, Roche Diagnostics. Reagens Beteckning ph Glu Ket Leu Nitrit Alb Ery Combur 7 Test X X X X X X X Roche Diagnostics Combur 5 Test X X X X X Roche Diagnostics Förvaring och hållbarhet Förpackningen förvaras i +2 ºC - +30 ºC. Burken med testremsorna ska förslutas omedelbart efter att man har tagit ur en testremsa. Testremsorna är hållbara till utgångsdatum om man har förslutits burken omedelbart efter varje öppning [4]. Kalibrator Instrumentet är fabrikskalibrerat.
Klinisk kemi Sid 6(6) Interna kontroller Beteckning MAS UA Control 3x2x15 ml (2 nivåer), Liquid Assayed Urinanalysis Control. Kontrollförfarande Kontrollerna ska analyseras varje analys dag. Se tillverkarens bruksanvisning MAS UA Kontroller [7]. Förvaring och hållbarhet Öppnad förpackning är hållbar 3 månader i kyl. Märkning Flaskan märks med dagens datum när man öppnar den första gången. Utförande av Patientanalys Se tillverkarens snabbguide och användarhandbok Urisys 1100 [8]. Dagligt underhåll Se tillverkarens snabbguide och användarhandbok Urisys 1100 [8]. Svarsrapportering Svar skrivs in som arbiträra enheter med heltal. Normalt resultat Norm som betyder negativt, kan skrivas in som noll värde. Säkerhetsföreskrifter Inga speciella säkerhetsföreskrifter gäller. Avfallet kan normalt kastas bland konventionella sopor som bränns. Se lokala föreskrifter.