Klinisk kemi Sid 1(5) Bakgrund, indikation och tolkning Hemoglobinhalten i blod är direkt proportionell mot antalet erytrocyter. Alla störningar i erytropoesen leder till sänkt antal erytrocyter och därmed sänkt hemoglobinhalt. En normal erytrocyt lever 120 dygn. Förkortad livslängd (hemolys) eller ökad elimination i mjälten ger sänkt antal erytrocyter och därmed sänkt hemoglobinhalt. Mätning av hemoglobinkoncentration användes för att påvisa anemi. Ökat B-Hb ses vid t.ex. hypoxemi och polycytemia vera (PCV). Snabba ändringar i B-Hb ses vid skiftningar i vätskebalans eller distribution. Förskjutningar av vatten över kapillärmembran vid byte av kroppsställning gör att B-Erytrocyter är i medeltal 8 % högre hos uppegående än hos liggande individer. Upprepade mätningar kan vara indicerade vid behandling (cytostatika, järnterapi, transfusion, vätskeinfusion, etc) [5]. Mätning av hemoglobinkoncentrationen i blod (B-Hb) utföres som ett allmänt och tidigt rutinprov i både akut och elektiv vård, bl.a. vid symtom från cirkulationsapparaten, centrala nervsystemet och lungorna, men även vid utredning av ospecifika symtom och vid allmän kontroll av hälsotillståndet. B-Hb används också för diagnostik av anemi och uppföljning av anemibehandling [1]. Låga värden talar för anemi eller ökad plasmavolym [1]. Förhöjda värden innebär polycytemi. Polycytemi kan vara absolut, dvs. med en absolut ökning av totala hemoglobinmängden (t ex vid polycytemia rubra vera, vistelse på hög höjd, allvarliga lung-/hjärtsjukdomar, omfattande tobaksrökning) eller relativ, dvs. en låg plasmavolym (t ex vid stressrelaterad polycytemi, dehydrering, förlust av plasma, tobaksrökning). Hemoglobinnivån är inte alltid ett säkert mått på den totala erytrocytmassan (exempelvis omedelbart efter akut blodförlust). Notera att kapillär provtagning direkt i kuvetter, anses som mindre tillförlitlig på grund av svårigheter att bedöma hur mycket vävnadsvätska som blandas med i bloddroppen. Analysprincip Fotometrisk mätmetod bredspektrum med kompensation för turbiditet och spridning med DiaSpect Hemoglobin T. Mätning vid multipa vågländer (450 nm till 750 nm).för provtagning och mätning används DiaSpect Hemoglobin kuvetter som ej innehåller något aktivt reagens [2]. Referensintervall Vuxna [4] Kvinnor: 117-153 g/l Män: 134-170 g/l Barn [5] 0-1 dagar: 150-240 g/l 1-6 dagar: 140-220 g/l 6-14 dagar: 130-200 g/l 2-4 veckor: 100-180 g/l 1-3 månader: 100-160 g/l
Klinisk kemi Sid 2(5) 3-12 månader: 100-140 g/l 1-6 år: 100-150 g/l 6-10 år: 105-150 g/l 10-18 år: 110-160 g/l Metodkarakteristika Interferenser och felkällor Om det finns luftblåsor i det optiska ögat på en fylld kuvett ska denna kastas och en ny kuvett fyllas. Fylld kuvett ska mätas inom 1 minut. Dessa substanser kan eventuellt interferera vid koncentrationer mer än [2]: Bilirubin 256 µmol/l Leukocyter 165 x 10 9 /L Trombocyter 1401 x 10 9 /L COHemoglobin 8,7 % Hemolys 10 g/l (P-Hb) Triglycerider 20 mmol/l so 2 (40% oxyhemoglobin) Testade område inom parenteser Mätområde Mätområde: 0-255 g/l. Resultat över 255 g/l visas Value too high [2]. Detektionsgräns 2 g/l Mätosäkerhet Beräknat på resultat av Extern kontroll (Equalis och SKÅNE-kontrollen) från 4 orter i Region Skåne under 2012 n CV% 12 2,0 Spårbarhet Metoden är standardiserad mot HICNreferens-metoden (ICSH), [2]. Övrig information Metoden är ej ackrediterad.
Klinisk kemi Sid 3(5) Referenser 1. Nilsson-Ehle P. Laurells Klinisk kemi i praktisk medicin, Lund Studentlitteratur, 2012, 9:e uppl; 213-216 2. DiaSpect Hemoglobin mätsystem Manual. DiaSpect Medical AB. Versionsnr 20120411 3. Analytisk metodjämförelse av B-Hemoglobin, 2010-12-14, Verifiering 9731-1 4. Rustad P, Simonsson P, Felding P, Pedersen M. Nordic Reference Interval Project Biobank and Database (NOBIDA): a source for future estimation and retrospective evaluation of reference intervals. Scand J Clin Lab Invest. 2004; 64(4):431-8. 5. Hematology: Basic Principles and Practice, 5th ed. On-line version 2008 av Hoffmann. 6. Produktblad DiaSpect Control HB 7. Produktblad DiaSpect Hemoglobin Cuvettes Provtagning Rörtyper EDTA-rör (lila kork). Fylls med mer än 2/3 av avsedd volym. EDTA mikrotainerrör (lila kork), fylls med 250-500µL. Kapillärt, venöst eller arteriellt helblod kan användas. Notera att kapillär provtagning direkt i kuvetter, anses som mindre tillförlitlig på grund av svårigheter att bedöma hur mycket vävnadsvätska som blandas med i bloddroppen. För att undvika provspädning rekommenderas antikoagulantia (EDTA eller heparin/fluorid) i torr form. Provvolym 10µl blod per kuvett. Vid kapillär provtagning direkt i kuvett analysera alltid dubbelprov. Provhantering Hållbarhet Fylld Hb-kuvett måste analyseras inom 1 minut. Instrument och tillbehör Mätinstrument DiaSpect Hemoglobin T [2] samt DiaSpect Hemoglobin kuvetter[7].
Klinisk kemi Sid 4(5) Reagens DiaSpect Hemoglobin Kuvetter[7]. Tillverkare: DiaSpect Medical GmbH, Germany, Catalog no 90C.0001. Förvaring och hållbarhet Kuvetterna är förpackade i en återförslutningsbar påse om 100 st. Förvaras i stängd originalförpackning vid temperatur 0-50 C. Kuvetterna och är då hållbara till på förpackningen angivet utgångsdatum. Kalibrator Instrumentet DiaSpect Hemoglobin T är fabrikskalibrerat. Interna kontroller DiaSpect Control Pack HB4, DiaSpect Medical GmbH, Germany [6]. Art.nr 90B.0004 Nivåer: HB-L (ca 80 g/l), HB-N (ca 125g/L) och HB-H (ca 160 g/l), 3 flaskor/nivå per förpackning Beredning Färdig att använda. Kontrollförfarande Kontroll analyseras dagligen eller minst en gång per vecka om instrumentet används sällan. Resultatet godkänds om mätningen av internkontroll ligger inom åsatta gränser. Utförande Mätaren startas genom att man håller ON-knappen intyckt i ca tre sekunder och displayen tänds och symboler syns. Tag ut kuvetten ur påsen. Håll kuvetten i den bakre delen. Överför en droppe av den välblandade, rumstempererad kontrollen på en hydrofob yta, t.ex. en plastfilm. Fyll kuvetten enligt DiaSpects anvisningar [2]. Kuvetten läggs i instrumentet inom 1 minut, för avläsning. Förvaring och hållbarhet Hållbarhet till utgångsdatum på förpackningen vid 0-50 ºC. Öppnad flaska är hållbar i 60 dagar vid 0-50 ºC [6]. Externa kontroller Helblodskontroll med okänd Hb-koncentration, från Labmedicin Skåne (Extern kontroll SKÅNE lokal) eller Equalis AB. Kontrollutskick 10 gg/år.
Klinisk kemi Sid 5(5) Notera att pga. tillsatser i kontrollblodet lämnar DiaSpect ett för högt resultat, DiaSpectresultaten ska därför endast jämföras i sin egen kontrollgrupp i resultatrapporteringen. Tekniskt/medicinskt godkännande Interna kontroller ska ligga inom angivna gränser. Ändras från lot till lot. Svarsrapportering Svar anges i g/l utan decimal. Resultat över 255 g/l visas Value too high [2] Kapillärt prov: skillnaden mellan resultaten från de två kuvetterna får ej överstiga 8 g/l om B-Hb är <110 g/l eller ej överstiga 10 g/l om B-Hb är > 110 g/l. Om större skillnad uppmäts bör provtagning och mätningar upprepas. Se anvisningar Larmsvar aktuell version. Säkerhetsföreskrifter DiaSpect kuvetter och utrustning för kapillärprovtagning är riskavfall. För övrigt följ lokala anvisningar. Författare Eva Lindström