Monolisa HBe Ag-Ab PLUS 2 plattor

Transkript

1 Monolisa HBe Ag-Ab PLUS 2 plattor HBe Ag - 96 HBe Ab TEST FÖR DETEKTION AV HBe Ag OCH HBe Ab GENOM IMMUNOLOGISK ENZYMANALYS /01

2 INNEHÅLLSFÖRTECKNING 1. ANVÄNDNINGSOMRÅDE 2. KLINISK BETYDELSE 3. TESTPRINCIP 4. TESTETS BESTÅNDSDELAR 5. NÖDVÄNDIGT MEN EJ BIFOGAT MATERIAL 6. FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRDER 7. HÄLSO- OCH SÄKERHETSANVISNINGAR 8. REKONSTITUERING AV REAGENSER 9. VALIDITET - FÖRVARING 10. PROVER 11. TESTFÖRFARANDE 12. BERÄKNING OCH UTVÄRDERING AV RESULTATEN 13. SPEKTROFOTOMETRISK VERIFIERING AV PROV- OCH REAGENSPIPETTERING 14. TESTRESULTAT 15. REFERENSER 2

3 1 - ANVÄNDNINGSOMRÅDE Monolisa HBe Ag-Ab PLUS ska användas för kvalitativ bestämning genom immunologisk enzymanalys av hepatit Be-antigen (HBe Ag) eller antikropp mot hepatit Be-antigen (anti-hbe) i humant serum eller human plasma. 2 - KLINISK BETYDELSE Förekomst av HBe Ag avspeglar i allmänhet aktiv virusreplikation och indikerar infektionstillstånd i serumprover). HBe Ag uppträder tidigt under hepatit B-infektion och dess persistens (mer än en månad) utgör en risk för ökad leverpatologi genom virusreplikation. Förekomst av antikropp mot HBe Ag indikerar minskad virusreplikation och innebär i allmänhet en god klinisk prognos. 3 - TESTPRINCIP a) Påvisa HBe-antigen Detektion av HBe Ag baseras på en immunologisk enzymanalys av sandwich -typ i två steg där en human anti-hbe-antikropp och ett par murina monoklonala anti-hbe-antikroppar märkta med peroxidas (mab 1 och mab 2) används mot olika epitoper. Den fasta fasen består av 8 remsor med polystyrenbrunnar som är belagda med human anti-hbeantikropp. Testproceduren innehåller följande steg : 1. Inkubering av kontroll och okända prover med belagd anti-hbe-antikropp på den fasta fasen. 2. Tvätt, inkubering av fixerade komplex med peroxidasmärkta monoklonala antikroppar. 3. Eliminering genom tvätt av fritt konjugat och därefter framkallning av enzymaktiviteten som är bunden till den fasta fasen genom tillsats av substratet. 4. Avbrott av färgframkallningsreaktionen, därefter avläsning av absorbansen vid 450/620 nm och utvärdering av resultaten. b) Påvisa anti-hbe-antikroppar Vid detektion av anti-hbe används samma fasta fas som för HBe Ag. Testet baseras på konkurrens mellan den fixerade antikroppen och antikroppen i provet om en begränsad mängd HBe Ag som används som neutraliserande reagens. Detektion åstadkoms med hjälp av en annan blandning av peroxidasmärkta monoklonala antikroppar (mab 1 och mab 2). Testproceduren innehåller följande steg : 1. Inkubering av kontroll och okända prover med belagd anti-hbe-antikropp på den fasta fasen och den neutraliserande reagensen. 2. Tvätt, inkubering av fixerade komplex med peroxidasmärkta monoklonala antikroppar. 3. Eliminering genom tvätt av fritt konjugat och därefter framkallning av enzymaktivitet som är bunden till den fasta fasen genom tillsats av substratet. 4. Avbrott av färgframkallningsreaktionen, därefter avläsning av absorbansen vid 450/620 nm och utvärdering av resultaten. 3

4 4 - TESTETS BESTÅNDSDELAR Alla reagenser som ingår i testet är enbart avsedda för in vitro-diagnostiskt bruk. Reagenserna räcker till 2 x 96 test i 1 upp till 12 oberoende körningar och i följande kombinationer : antingen 96 HBe Ag-test och 96 anti-hbe-test antigen 2 x 48 HBe Ag-test och 2 x 48 anti-hbe-test samtidigt. Märkning Reagenssammansättning Innehåll R1 R2 R3 R4 R5 Microplate Concentrated washing solution (20X) Negative control HBe Ab positive control HBe Ag positive control Mikroplatta 12 x 8 brunnremsor, belagda med humana anti-hbe-antikroppar från plasma positiv för HBs Ag, inaktiverat Koncentrerad Tvättlösning (20X) Tris-NaCl-buffert ph 7,4 Konserveringsmedel : ProClin 300 (0,04 %) Negativ Kontroll Gemensam för HBe Ag- och anti-hbe-test Humanserum, negativt för antikroppar mot HBs Ag, anti-hiv1, anti- HIV2 och anti-hcv Konserveringsmedel : < 0,1 % natriumazid HBe Ab Positivt Kontrollserum Defibrinerad anti-hbe-positiv human plasma, potentiellt positiv för HBs Ag och negativ för antikroppar mot anti-hiv1, anti-hiv2 och anti-hcv, inaktiverat Konserveringsmedel : < 0,1 % natriumazid HBe Ag Positivt Kontrollserum Defibrinerad HBe Ag och HBs Ag-positiv human plasma, negativ för anti-hiv1, anti-hiv2 och anti-hcv, inaktiverat Konserveringsmedel : < 0,1 % natriumazid 2 plattor 235 ml 8 ml 1,5 ml 1,5 ml R6 Neutralizing HBe Ag Neutraliserande HBe-Antigen Defibrinerad HBe Ag och HBs Ag-positiv human plasma, negativ för antikroppar mot anti-hiv1, anti-hiv2 och anti-hcv, inaktiverat Konserveringsmedel : < 0,1 % natriumazid 8 ml R7a Concentrated anti HBe conjugate Koncentrerat Anti HBe-Testkonjugat (5X) Ett par monoklonala anti-hbe-antikroppar (mab1 och mab2)* märkta med peroxidas. Konserveringsmedel : ProClin 300 (0,5 %) 3 ml R7b Concentrated Ag HBe conjugate Koncentrerat Ag HBe-Konjugat (5X) Ett par monoklonala anti-hbe-antikroppar (mab1 och mab2)* märkta med peroxidas. Konserveringsmedel : ProClin 300 (0,5 %) 3 ml R8 Substrate buffer Peroxidassubstratbuffert Citronsyra- och natriumacetatlösning ph 4,0 innehållande H 2 O 2 (0,015 %) och DMSO (4 %) 60 ml R9 Chromogen : TMB solution (11X) Kromogen Lösning innehållande tetrametylbensidin (TMB) 5 ml R10 Stopping Solution Stoppreagens 1 N svavelsyra 28 ml Tom flaska för utspätt reagens 25 ml * Mab 1/mab 2-kvoten är olika för R7a- och R7b-konjugaten. Byt inte ut de 2 konjugaten mot varandra. 4

5 5 - NÖDVÄNDIGT MEN EJ BIFOGAT MATERIAL Destillerat eller helt avjoniserat vatten. Natriumhypoklorit (blekmedel) och natriumbikarbonat. Absorberande papper. Engångshandskar. Engångspolystyrenrör (12 x 75 mm). Manuella eller halvautomatiska, justerbara eller förinställda pipetter för mätning och fördelning av 50 μl, 100 μl, 200 μl och 1 ml. Mätcylindrar : 10 ml, 50 ml, 100 ml, ml. Mixer av vortex-typ. Behållare för biologiskt riskavfall. Manuell, halvautomatisk eller automatisk tvättanordning för mikroplattor.* Vattenbad inställt via termostat på 40 ± 1 C, eller i en likvärdig inkubator för uppvärmning av mikroplattor.* Avläsare för mikroplattor med 450 nm- och 620 nm-filter.* (*) Om du har frågor kring den utrustning som rekommenderas kan du vända dig till vår tekniska avdelning. 6 - FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRDER Resultatens kvalitet är beroende av att god laboratoriesed (GLP) tillämpas : Blanda inte reagenser från olika partier inom en bestämd testkörning. KOMMENTAR : För tvättlösningen (R2, etikettmärkning : 20X grönfärgad), peroxidassubstrat-bufferten (R8, märknings-id : TMB buf. blåfärgad), kromogen (R9, märknings-id : TMB 11X lilafärgad) och stopplösning (R10 märknings-id : 1N rödfärgad) kan du använda andra partier än de som ingår i testet om samma parti används inom en bestämd testkörning. Dessa reagenser kan användas tillsammans med vissa andra Bio- Rad-produkter. Dessutom kan tvättlösningen (R2, etikett-märkning: 20X grönfärgad) blandas med de 2 andra tvättlösningarna som ingår i olika Bio-Rad-reagens-satser (R2, etikettmärkningar: 10X blå- eller 10X orangefärgad) vid korrekt blandning, förutsatt att endast en blandning används vid en given testkörning. Kontakta vår avdelning för teknisk service om du vill ha mer information. Namnet på testet och testets specifika ID-nummer är skrivna på ramen för varje mikrotiterplatta. Det specifika ID-numret anges också på varje remsa. Monolisa HBe Ag-Ab PLUS: Specifikt ID-nummer = 56. Kontrollera det specifika ID-numret före användning. Om ID-numret saknas eller om det skiljer sig från det angivna numret ovan ska remsan inte användas. Använd inte reagenser vars bäst före-datum har passerats. Före användning ska reagenserna stabiliseras i rumstemperatur i 30 minuter och den utspädda tvättbufferten R2 i 1 timme. Rekonstituera noggrant reagenserna och undvik all kontaminering. Utför inte testet i närvaro av reaktiva ångor (syraångor, alkaliska ångor, aldehydångor) eller damm som skulle kunna ändra konjugatets enzymatiska aktivitet. Använd glasvaror som noggrant har diskats och sköljts med avjoniserat vatten, eller ännu hellre engångsmaterial. Se till att mikroplattan inte hinner torka efter tvättproceduren innan reagenset har hällts i. Använd en ny pipettspets för varje prov. Tvättningen av brunnarna är ett kritiskt steg i proceduren. Följ det rekommenderade antalet tvättcykler och se till att alla brunnar är helt fyllda och därefter helt tömda. Felaktig tvättning kan leda till felaktiga resultat. Använd aldrig samma behållare för fördelning av konjugat- och framkallningslösning. Kontrollera precisionen för pipetterna och annan utrustning och att de fungerar korrekt. Ändra inte testförfarandet. Framkallningslösningen (substratbuffert och kromogen) måste vara rosafärgad. Om den rosa färgen förändras några minuter efter rekonstitueringen är detta en indikation på att reagensen inte kan användas och måste ersättas. Framkallningslösningen kan beredas i rena engångstråg av 5

6 plast eller i glasbehållare som först har förtvättats med 1 N HCl och därefter sköljts noggrant med destillerat vatten och torkats. Detta reagens måste förvaras i mörker. 7 - HÄLSO- OCH SÄKERHETSANVISNINGAR Alla reagenser som ingår i testet är avsedda för in vitro-diagnostiskt bruk. Använd engångshandskar när du hanterar reagenser och prover. Tvätta händerna noggrant efter hanteringen. Pipettera inte med munnen. Material av humant ursprung som använts vid beredningen av reagens R3 (negativ kontroll) har kontrollerats och befunnits icke-reaktivt för hepatit B-ytantigen (HBs Ag), antikroppar mot humant immunbristvirus (anti-hiv-1 och anti-hiv-2). Material av humant ursprung som används vid beredningen av reagens R1 (sensibiliserad mikroplatta) testades och befanns vara icke-reaktivt för antikroppar mot humant immunbristvirus (anti-hiv-1 och anti-hiv-2) och för antikroppar mot hepatit C-virus (HCV). Det är reaktivt för hepatit B-ytantigen (HBs Ag). Det inaktiverades fotokemiskt. Material av humant ursprung som använts vid beredningen av R4 (Anti-HBe-positiv kontroll), R5 (HBe Ag-positiv kontroll) och R6 (Neutraliserande HBe Ag) har kontrollerats och befunnits ickereaktivt för antikroppar mot humant immunbristvirus (anti-hiv-1 och anti-hiv-2) och antikroppar mot hepatit C-virus (anti-hcv). R5 och R6 har befunnits reaktiva för hepatit B-ytantigen (HBs Ag), R4 är potentiellt reaktivt för HBs Ag. Det inaktiverades fotokemiskt. Eftersom ingen testmetod med säkerhet kan garantera frånvaron av smittsamma ämnen, ska reagenser och patientprover hanteras som potentiellt smittsamma. Betrakta material i direkt kontakt med prover och reagenser samt tvättlösningar som kontaminerat material och hantera det som sådant. Undvik att spilla prover eller lösningar som innehåller prover. Spill måste sköljas med blekmedel som spätts till 10%. Om den smittfarliga lösningen är en syra måste spill först neutraliseras med natriumbikarbonat och därefter torkas upp med absorberande papper. Materialet som används för rengöring måste kastas i en behållare för smittfarligt avfall. Prover och reagenser av humant ursprung, liksom smittfarligt material och smittfarliga produkter måste omhändertas efter saneringen enligt följande: - antingen sänkas ned i blekmedel vid en slutkoncentration på 5% natriumhypoklorit (1 del blekmedel till 10 delar smittfarlig vätska eller smittfarligt vatten) i 30 minuter - eller autoklaveras i 121 C i minst 2 timmar. Autoklavering är den bästa metoden för inaktivering av HIV- och HBV-virus. HÄLL INGA LÖSNINGAR INNEHÅLLANDE NATRIUMHYPOKLORIT I AUTOKLAVEN Glöm inte att neutralisera och/eller autoklavera lösningar eller tvättavfall eller vätskor som innehåller biologiska prover innan de hälls ut i vasken. Ett säkerhetsdatablad kan erhållas på begäran. Hantering och kassering av kemiska produkter ska genomföras enligt rutiner för god laboratoriesed (GLP). Undvik all hud- och slemhinnekontakt med substratbuffert, kromogen och stopplösning (risk för förgiftning, irritation eller brännskador). Mer information om risk- och försiktighetsinformation för vissa kemiska komponenter i testkitet hittar du på etiketterna och i den information som finns sist i bruksanvisningen. Säkerhetsdatabladet (SDS) finns tillgängligt på REKONSTITUERING AV REAGENSER OBS : Låt reagenserna uppnå rumstemperatur (18-30 C) före användning Mikroplatta (R1) Varje stödram innehåller 12 remsor och är förrpackad i en försluten påse. Klipp upp påsen med en sax eller skär upp den med en skalpell 0,5-1 cm ovanför förslutningen. Öppna påsen och ta ut ramen. Lägg tillbaka oanvända remsor i påsen. Stäng påsen noggrant och förvara den i +2-8 C.

7 Koncentrerat Tvättlösning (20X) : R2 Späd 1:20 med destillerat vatten för att få en färdig tvättlösning. Blanda. Det behövs 75 ml bruksfärdig tvättlösning till en remsa. Koncentrerat anti HBe-konjugattest (R7a) Späd R7a 1:5 med beredd R2-lösning enligt det antal remsor som ska användas : Antal remsor som ska användas Volym R7a (ml) Komplett med beredd R2 upp till (ml) 1 0, , , , , , , , , ,4 12 Blanda. Konjugatet R7a kan användas som det är, utan förspädning med följande rekommenderade procedur: Tillsätt 80 μl utspädd tvättlösning (R2) till 20 μl anti-hbe-konjugatet R7a. Blanda. Koncentrerat Ag HBe-konjugattest (R7b) Gör på samma sätt som med R7a-konjugatet. Färgframkallningslösning (R8 + R9) Späd reagensen (R9) 1:11 med reagens R8 (exempel : 1 ml reagens R9 i 10 ml reagens R8). Homogenisera. 10 ml krävs och är tillräckligt för 1 till 10 remsor. 9 - VALIDITET - FÖRVARING Testet ska förvaras i +2-8 C. Om det förvaras i rätt temperatur kan alla reagenser som ingår användas till det sista förbrukningsdatum som anges påförpackningen (om inga specialinstruktioner anges). R1 : När den vakuumförslutna förpackningen har öppnats kan remsorna användas i upp till 1 månad förutsatt att de förvaras vid +2-8 C i samma väl förslutna förpackning. R2 : Den utspädda tvättlösningen kan förvaras vid rumstemperatur (2-30 C) i 2 veckor. Den koncentrerade tvättlösningen (R2) kan förvaras vid C. R7a : Utspätt konjugat för HBe Ag-test kan förvaras 8 timmar i rumstemperatur (18-30 C). Aktiv konjugatlösning skyddas från ljus vid rumstemperatur (18-30 C). R7b : Utspätt konjugat för HBe Ag-test kan förvaras 8 timmar i rumstemperatur (18-30 C). Aktiv konjugatlösning skyddas från ljus vid rumstemperatur (18-30 C). R8 + R9 : Efter rekonstitutionen kan reagensen förvarad i mörker användas i 6 timmar vid rumstemperatur (18-30 C) PROVER Ta ett blodprov enligt de normala rutinerna. Testet ska utföras på outspätt serum eller plasma (insamlat i EDTA-, citrat- och ACD-baserade antikoagulantia). Extrahera så fort som möjligt för att undvika hemolys. Prover som innehåller aggregat måste klaras genom centrifugering innan testet utförs. Suspenderade fibrinaggregat eller fibrinpartiklar kan ge falskt positiva resultat. Proverna bör förvaras vid +2-8 C om screeningen utförs inom 7 dagar, eller djupfrysas vid -20 C. 7

8 Värm inte proverna. Undvik upprepad nedfrysning/upptining. Om proverna ska skickas bör de förpackas i enlighet med föreskrifterna om transport av etiologiska agenser. Transportera dem helst frysta. ANVÄND INTE KONTAMINERADE, HYPERLIPEMISKA ELLER HYPERHEMOLYSERADE SERA. KOMMENTAR : Prover som innehåller upp till 100 mg/l bilirubin, lipemiska prover som innehåller upp till motsvarande 36 g/l triolein och hemolyserade prover som innehåller upp till 2,5 mg/ml hemoglobin påverkar inte resultaten. En minskning av kvoterna för negativa prover spikade med 45 mg/ml albumin observerades TESTFÖRFARANDE Förfarande vid parallellt anti-hbe- och HBe Ag-test på samma platta, följ den rekommenderade schemaplattan : Anti-HBe-test : raderna 1 till 6 HBe Ag-test : raderna 7 till 12 a) Förfarande vid Anti-HBe-test 1. Bered tvättlösningen. 2. Ta ut en eller flera remsor och brickan ur förpackningen. Lägg tillbaka oanvända remsor i förpackningen och förslut den. 3. Fördela följande i brunnarna : A1, B1, C1 : 100 μl av den negativa kontrollen (R3). D1 : 100 μl av den positiva kontrollen (R4). E1, F1, G1 : 100 μl av provet. Beroende på systemet som används kan man ändra kontrollernas position eller distributionsordningen. OBS! Det finns en klar färgskillnad mellan de tomma brunnarna och brunnar med prov (gula). Det är möjligt att verifiera förekomsten av prov i brunnarna genom en spektrofotometrisk avläsning vid 490 nm (enstaka våglängd). Se avsnitt 13: SPEKTROFOTOMETRISK VERIFIERING AV PROV- OCH REAGENSPIPETTERING. 4. Tillsätt snabbt 50 μl neutraliserande HBe-antigen (R6) per brunn. Homogenisera. Täck med självhäftande film och inkubera i 3 timmar ± 10 minuter i 37 C ± 1 C. OBSERVERA : Fördelningen av neutraliserande HBe-antigen (R6), som är rosafärgad, kan kontrolleras visuellt i denna fas av hanteringen. Det är möjligt att verifiera förekomsten av neutraliserande HBe-antigen i brunnarna genom en spektrofotometrisk avläsning vid 490 nm (enstaka våglängd). Se avsnitt 13 : SPEKTROFOTOMETRISK VERIFIERING AV PROV- OCH REAGENSPIPETTERING. 5. Bered den utspädda konjugatlösningen R7a medan inkuberingen (steg 4) pågår. 6. Ta bort den självhäftande filmen. Sug upp innehållet i varje brunn i en behållare för biologiskt riskavfall. Tvätta därefter fyra gånger. 7. Fördela snabbt 100 μl utspädd konjugatlösning (R7a) (se avsnitt 8 : REKONSTITUERING AV REAGENSERNA) i varje brunn eller använd R7a-konjugatet som det är med följande rekommenderade procedur: Fördela först 80 μl utspädd tvättlösning (R2) i varje brunn, sedan 20 μl anti-hbe-konjugatet R7a (5X). Homogenisera. Täck med självhäftande film och inkubera i 30 minuter i 37 C ± 1 C (minst 25 minuter, högst 40 minuter). Ta bort den självhäftande filmen, sug upp innehållet i varje brunn till avfallsbehållaren och tvätta därefter fem gånger. OBSERVERA : Fördelningen av den utspädda konjugatlösningen R7a, som är violettfärgad, kan kontrolleras visuellt i denna fas av hanteringen. Det är möjligt att verifiera förekomsten av den utspädda konjugatlösningen R7a i brunnarna genom en spektrofotometrisk avläsning vid 620 nm (enstaka våglängd). Se avsnitt 13 : SPEKTROFOTOMETRISK VERIFIERING AV PROV- OCH REAGENSPIPETTERING. 8. Bered färgframkallningslösningen (R8 + R9) strax innan den används. Se avsnitt 8 : REKONSTITUERING AV REAGENSER. 8

9 9. Fördela snabbt 80 μl färgframkallningslösning i varje brunn. Ställ plattan mörkt i 30 minuter ± 5 minuter i rumstemperatur ( C). OBSERVERA : Fördelningen av framkallningslösningen, som är rosafärgad, kan kontrolleras visuellt i den här fasen. Det finns en klar färgskillnad mellan tomma brunnar och brunnar med den rosafärgade lösningen. Se avsnitt 13 : SPEKTROFOTOMETRISK VERIFIERING AV PROV- OCH REAGENSPIPETTERING. 10.Tillsätt snabbt 100 μl stopplösning (R10) i varje brunn. OBS! Fördelningen av stopplösningen, som är färglös, kan kontrolleras visuellt i den här fasen. Efter tillsättningen av stopplösning blir det rosafärgade substratet ofärgat för negativa prover och de blåfärgade substraten blir gula för positiva prover. 11.Torka noggrant av mikroplattans botten. Avläs den optiska densiteten vid 450/620 nm med hjälp av en plattavläsare minst 4 minuter efter tillsatsen av stopplösningen och inom 30 minuter efter att reaktionen har avbrutits. b) Förfarande vid HBe Ag-test 1. Bered tvättlösningen. 2. Ta ut en eller flera remsor och brickan ur förpackningen. Lägg tillbaka oanvända remsor i förpackningen och förslut den. 3. Fördela följande i brunnarna: A1, B1, C1: 100 μl av den negativa kontrollen (R3). D1: 100 μl av den positiva kontrollen (R5). E1, F1, G1: 100 μl av provet. Beroende på systemet som används kan man ändra kontrollernas position eller distributionsordningen. OBS! Det finns en klar färgskillnad mellan de tomma brunnarna och brunnar med prov (gula). Det är möjligt att verifiera förekomsten av prov i brunnarna genom en spektrofotometrisk avläsning vid 490 nm (enstaka våglängd). Se avsnitt 13: SPEKTROFOTOMETRISK VERIFIERING AV PROV- OCH REAGENSPIPETTERING. 4. Täck med självhäftande film och inkubera i 3 timmar ± 10 minuter i 37 C ± 1 C. 5. Bered konjugatlösningen R7b medan inkuberingen (steg 4) pågår. 6. Ta bort den självhäftande filmen. Sug upp innehållet i varje brunn i en behållare för biologiskt riskavfall. Tvätta därefter fyra gånger. 7. Fördela snabbt 100 μl utspädd konjugatlösning (R7b) i varje brunn eller använd R7b-konjugatet som det är med följande rekommenderade procedur : Fördela först 80 μl utspädd tvättlösning (R2) i varje brunn, sedan 20 μl anti-hbe-konjugat R7b (5X). Homogenisera. Täck med självhäftande film och inkubera i 30 minuter i 37 C ± 1 C (minst 25 minuter, högst 40 minuter). Ta bort den självhäftande folien, sug upp innehållet i varje brunn till avfallsbehållaren och tvätta därefter fem gånger. OBSERVERA : Fördelningen av den utspädda konjugatlösningen R7b, som är turkosfärgad, kan kontrolleras visuellt i denna fas av hanteringen. Det är möjligt att verifiera förekomsten av den utspädda konjugatlösningen R7a i brunnarna genom en spektrofotometrisk avläsning vid 620 nm (enstaka våglängd). Se avsnitt 13 : SPEKTROFOTOMETRISK VERIFIERING AV PROV- OCH REAGENSPIPETTERING. 8. Bered färgframkallningslösningen (R8 + R9) strax innan den används. 9. Fördela snabbt 80 μl färgframkallningslösning (R8 + R9) i varje brunn. Ställ plattan mörkt i 30 minuter ± 5 i rumstemperatur ( C). OBSERVERA : Fördelningen av framkallningslösningen, som är rosafärgad, kan kontrolleras visuellt i den här fasen. Det finns en klar färgskillnad mellan tomma brunnar och brunnar med den rosafärgade lösningen. Se avsnitt 13 : SPEKTROFOTOMETRISK VERIFIERING AV PROV- OCH REAGENSPIPETTERING. 10.Tillsätt snabbt 100 μl stopplösning (R10) i varje brunn. Obs! Fördelningen av stopplösningen, som är färglös, kan kontrolleras visuellt i den här fasen. Efter tillsättningen av stopplösning blir det rosafärgade substratet ofärgat för negativa prover och de blåfärgade substraten blir gula för positiva prover. 9

10 11.Torka noggrant av mikroplattans botten. Avläs den optiska densiteten vid 450/620 nm med hjälp av en plattavläsare minst 4 minuter efter tillsatsen av stopplösningen och inom 30 minuter efter att reaktionen har avbrutits. c) Förfarande vid parallellt anti-hbe- och HBe Ag-test (på samma platta) Tillvägagångssättet är detsamma som det som beskrivs ovan. Den enda skillnaden är provfördelningsschemat, som ser ut på följande sätt: Anti-HBe-test : raderna 1 till 6 HBe Ag-test : raderna 7 till BERÄKNING OCH UTVÄRDERING AV RESULTATEN a) Anti HBe-test 1. Beräkna medelvärdet för absorbans (= optisk densitet O.D.) i de negativa kontrollreplikaten : medelvärde för OD R3 Exempel : R3 negativ kontroll OD 1 1, , ,552 Total OD = 4,569 Medelvärde (OD R3) = total OD/3 = 4,569/3 = 1,523 Högst ett R3-absorbansvärde kan elimineras om det avviker med mer än 25% från medelvärdet. Beräkna därefter medelvärdet för absorbans på nytt med de två andra värdena. 2. Beräkning av cutoff-värde För varje platta beräknas cutoff-värdet enligt formeln : Cutoff-värde = medelvärde (OD R3) x 0,4 Exempel : Medelvärde (OD R3) = 1,523 Cutoff-värde = 1,523 x 0,4 = 0, Analysvalidering för anti-hbe-test Medelvärde (OD R3) > 0,900 OD R4 < 0, Beräkning av kvot För varje prov beräknas kvoten enligt formeln: Kvot = OD-prov / cutoff-värde 5. Utvärdering av resultaten Proverna anses som : positiva om kvotvärdet är lägre än eller lika med 0,9 (kvot 0,9) negativa om kvotvärdet är större än 1,1 (kvot > 1,1) Ligger resultatet däremot mellan 0,9 och 1,1 bör en ny anti-hbe-sökning göras i en efterföljande provtagning. Vi rekommenderar att positiva prover testas på nytt i duplikat. Efter omtest anses provet positivt om minst ett värde är positivt. b) HBe Ag-test 1. Beräkna medelvärdet för absorbans (= optisk densitet O.D.) i de negativa kontrollreplikaten : medelvärde för OD R3 Exempel : R3 negativ kontroll OD 1 0, , ,026 Total OD = 0,071 Medelvärde (OD R3) = total OD/3 = 0,071/3 = 0,024 Högst ett R3-absorbansvärde kan elimineras om det avviker med mer än 25 % från medelvärdet. Beräkna därefter medelvärdet för absorbans på nytt med de två andra värdena. 10

11 2. Beräkning av cutoff-värde För varje platta beräknas cutoff-värdet enligt formeln : Cutoff-värde = medelvärde (OD R3) + 0,025 Exempel : Medelvärde (OD R3) = 0,024 Cutoff-värde = 0, ,025 = 0, Analysvalidering för Ag HBe-test Medelvärde (OD R3) < 0,060 OD R5 > 0, Beräkning av kvot För varje prov beräknas kvoten enligt formeln : Kvot = OD-prov / cutoff-värde 5. Utvärdering av resultaten Proverna anses som : negativa om kvotvärdet är mindre än 1 (kvot < 1) positiva om kvotvärdet är större än eller lika med 1 (kvot 1) Vi rekommenderar att positiva prover testas på nytt i duplikat. Efter omtest anses provet positivt om minst ett värde är positivt SPEKTROFOTOMETRISK VERIFIERING AV PROV- OCH REAGENSPIPETTERING 1 - Anti-HBe-TEST Förekomst av prov och kontroll Förekomsten av prov och kontroll i brunnarna kan verifieras med automatisk avläsning vid 490 nm. Varje brunn som innehåller en provkontroll måste ha en OD större än 0,050. Förekomsten av neutraliserande HBe-antigen (R6) Förekomsten av neutraliserande HBe-antigen i brunnarna kan verifieras med automatisk avläsning vid 490 nm med en OD delta-beräkning. OD delta = (OD490 prov (eller kontroll) med R6) (OD490 prov (eller kontroll) enbart) OD delta måste vara större än 0,150. Förekomst av koncentrerat Anti HBe-konjugattest (R7a) Förekomsten av utspätt konjugat R7a i brunnen kan verifieras med automatisk avläsning vid 620 nm. OD-värdet i varje brunn måste vara större än eller lika med 0,070 och mindre än eller lika med 0,200. Förekomst av framkallningslösning (R8 + R9) Förekomsten av framkallningslösning i brunnen kan verifieras med automatisk avläsning vid 490 nm. OD-värdet i varje brunn måste vara större än 0, HBe Ag-TEST Förekomst av prov och kontroll Förekomsten av prov och kontroll i brunnarna kan verifieras med automatisk avläsning vid 490 nm. Varje brunn som innehåller en provkontroll måste ha en OD större än 0,050. Förekomst av koncentrerat Ag HBe-konjugat (R7b) Förekomsten av utspätt konjugat R7b i brunnen kan verifieras med automatisk avläsning vid 620 nm. OD-värdet i varje brunn måste vara större än 0,210. Förekomst av framkallningslösning (R8 + R9) Förekomsten av framkallningslösning i brunnen kan verifieras med automatisk avläsning vid 490 nm. OD-värdet i varje brunn måste vara större än 0,

12 14 - TESTRESULTAT Testresultaten för Monolisa HBe Ag-Ab PLUS, sammanfattade nedan, har utvärderats på 2 ställen med prover från blodgivare, patienter och serokonversionspaneler. 1 - HBe Ag-test Specificitet Specificitet baserat på totalt 200 slumpvis utvalda blodgivare befanns vara 100% [98,51 100%], (IC95). Dessutom, utvärderades specificiteten på patientprover och befanns vara 100% [99,28 100%] (IC95, 416/416 prover). Analysen av 195 patienter som uppvisade andra sjukdomar eller tillstånd som inte var relaterade till hepatit B (gravida kvinnor, reumafaktor, antinukleära antikroppar, anti-mus-ig eller andra virus- eller bakterieinfektioner) gav en specificitet på 99,49% [97,18 99,99%] (IC 95, 194/195 negativa prover). Analytisk känslighet Testets känslighetsgräns har uppskattats vara 0,64 IU/ml [0,49 0,84] (IC 95) under utvärdering med PEI-standard. Känslighet Känsligheten testades på 203 positiva prover från uppföljning av patienter med kronisk HBV-infektion och kommersiella serokonversionspaneler. Känsligheten för dessa prover befanns vara 99,51% [97,29 99,99%] (IC 95, 202/203 prover). Reproducerbarhet för testet Reproducerbarheten för testet Monolisa HBe Ag-Ab PLUS (HBe Ag) har bestämts genom analys av 4 prover : 1 negativt prov, 1 låg-hbe Ag-positivt prov, 1 hög-hbe Ag-positivt prov och 1 intermediärt HBe Ag-positivt prov. Reproducerbarheten inom testet har uppskattats genom testning av dessa 4 prover 30 gånger under samma körning. Reproducerbarheten mellan testen har uppskattats genom testning av dessa 4 prover i duplikat under 20 dagar med 2 test per dag. Resultaten visas i följande tabeller : Tabell 1 : Reproducerbarhet inom testet n = 30 prov 1 prov 2 prov 3 prov 4 medelvärde av kvoterna 3,56 5,29 27,24 45,56 standard-avvikelse (SD) 0,05 0,35 0,63 2,88 CV (%) 14,20 6,53 2,31 6,33 Tabell 2 : Reproducerbarhet mellan test n = 80 prov 1 prov 2 prov 3 prov 4 medelvärde av kvoterna 0,51 8,19 27,33 46,35 standard-avvikelse (SD) 0,12 1,17 3,26 4,98 CV (%) 23,86 14,27 11,92 10, HBe Ab-test Specificitet Specificitet baserat på totalt 200 slumpvis utvalda blodgivare befanns vara 100% [98,51 100%], (IC95). Dessutom utvärderades specificiteten på 206 patientprover och befanns vara 98,54% [95,80-99,70%] (IC95, 203/206). 198 patienter som uppvisade andra sjukdomar eller tillstånd som inte var relaterade till hepatit B (gravida kvinnor, reumafaktor, antinukleära antikroppar, anti-mus-ig eller andra virus- eller bakterieinfektioner) testades. 3 prover befanns vara positiva (2 HCV-prover och 1 reumafaktorprov). Populationens specificitet är 98,48% [95,64 99,69%] (IC 95, 195/198 negativa prover). Dessa prover har testats om, reumafaktorprovet befanns upprepat reaktivt. De två HCV-proverna befanns antingen negativa eller tveksamma. Känslighet Känslighetsstudier har utförts på 220 positiva prover från uppföljning av patienter med kronisk HBVinfektion och kommersiella paneler. Känsligheten befanns vara 98,64% [96,07 99,72%] (IC 95, 217/220 prover). 12

13 Reproducerbarhet för testet Reproducerbarheten för testet Monolisa HBe Ag-Ab PLUS (anti-hbe Ac) har bestämts genom analys av 4 prover : 1 negativt prov, 1 låg-hbe Ac-positivt prov, 1 hög-hbe Ac-positivt prov och 1 intermediärt HBe Ac-positivt prov. Reproducerbarheten inom testet har uppskattats genom testning av dessa 4 prover 30 gånger under samma körning. Reproducerbarheten mellan testen har uppskattats genom testning av dessa 4 prover i duplikat under 20 dagar med 2 test per dag. Resultaten visas i följande tabeller : Tabell 1 : Reproducerbarhet inom testet n = 30 prov 1 prov 2 prov 3 prov 4 medelvärde av kvoterna 3,15 0,69 0,42 0,03 standard-avvikelse (SD) 0,05 0,04 0,04 0,00 CV (%) 1,7 5,7 10,5 6,6 Tabell 2 : Reproducerbarhet mellan test n = 80 prov 1 prov 2 prov 3 prov 4 medelvärde av kvoterna 2,39 0,81 0,59 0,3 standard-avvikelse (SD) 0,23 0,077 0,09 0,01 CV (%) 9,6 9,5 14,5 39, REFERENSER 1-MIYAKAWA Y.; MAYUMI M.; (1985) Hepatitis Be antigen and antibody (HBe Ag/Anti-HBe) in Hepatitis B. Academic Press., chap. 4: KANNO A.; OHORI H., MATSUDA K.; NAKAYAMA H.; MIYAZAKI Y.; ISHIIM.; SUZUKI H.; OHTSUKI M.; GOTO Y. (1987) Virological significance of HBe Ag subtypes (HBe Ag/1 and HBe Ag/2) in patients with type B hepatitis. Hepatology; 7 (1) BRECHOT C.; (1987) Les marqueurs et la prévention des infections par le virus de l hépatite B en Encyclopédie Médicochirurgicale; Instantanés Médicaux, 4; THIERS V.; BOUCHARDEAU F.; COUROUCE A.M.; TIOLLAIS P.; BRECHOT C., (1986) L ADN du virus de l hépatite B comme marqueur de multiplication virale: comparaison avec l antigène HBe et l anticorps anti Hbe. La Presse Médicale: 15: LAROUZE B., PENALBA C., DAZZA M.C. (1983) Signification des marqueurs sériques du virus de l hépatite B. Biologiste et praticien; 56; ALDERSHVILE J., FROSNER G.G.; NIELSEN J.O.; HARDT F. DEINHARTD F.; SKINHOJ P., (1980) Hepatitis Be antigen and antibody measured by radioimmuno-assay in acute hepatitis B surface antigen positive hepatitis. J. Infect. dis.: 141 (3), TAKAHASHI K.; IMAI M., TSUDA F., TAKAHASHI T., MIYAKAWA Y. MAYUMI M. (1976) Association of Dane particles with e antigen in the serum of asymptomatic carriers of hepatitis B surface antigen. J. of Immunol. 117 (1);

14 (BG) Този продукт съдържа човешки или животински компоненти. Бъдете внимателни при работа с него. (CZ) Tento výrobek obsahuje lidské nebo zvířecí komponenty. Zacházejte s ním opatrně. (DE) Dieses Produkt enthält Bestandteile menschlichen oder tierischen Ursprungs. Vorsichtig handhaben. (DK) Dette produkt indeholder humane og animalske komponenter. Skal behandles med forsigtighed. (EE) Käesolev toode sisaldab inim-või loomseid komponente. Käsitseda ettevaatlikult. (EN) This product contains human or animal components. Handle with care. (ES) Este producto contiene componentes humanos o animales. Manejar con cuidado. (FI) Tässä tuotteessa on ihmisestä tai eläimistä peräisin olevia osia. Käsittele varovasti. (FR) Ce produit contient des composants d'origine humaine ou animale. Manipuler avec précaution. (GR) Αυτό το προϊόν περιέχει ανθρώπινα ή ζωικά στοιχεία. Χειριστείτε το με προσοχή. (HR) Ovaj proizvod sadrži ljudske ili životinjske sastojke. Pažljivo rukovati. (HU) A készítmény emberi vagy állati eredetű összetevőket tartalmaz. Óvatosan kezelendő. (IT) Questo prodotto contiene componenti umane o animali. Maneggiare con cura. (LT) Šiame produkte yra žmogiškosios arba gyvūninės kilmės sudėtinių dalių. Elgtis atsargiai. (MT) Dan il-prodott fih komponenti umani jew tal-annimali. Uża b attenzjoni. (NL) Dit product bevat menselijke of dierlijke bestanddelen. Breekbaar. (NO) Dette produktet inneholder humane eller animalske komponenter. Håndteres med forsiktighet. (PL) Niniejszy produkt zawiera składniki pochodzenia ludzkiego lub zwierzęcego. Należy obchodzić się z nim ostrożnie. (PT) Este medicamento contém componentes de origem humana ou animal. Manuseie com cuidado. (RO) Acest produs conţine materiale de origine umană sau animală. Manevraţi-l cu grijă. (SE) Denna produkt innehåller beståndsdelar från människa eller djur. Hantera produkten varsamt. (SI) Izdelek vsebuje človeške ali živalske sestavine. Rokujte previdno. (SK) Tento výrobok obsahuje ľudské alebo zvieracie zložky. Narábajte s ním opatrne.

15 H314 - H317 P280 - P305+P351+P338 - P301+P330+P331 - P303+P361+P353 - P333+P313 - P501 (BG) опасно Причинява тежки изгаряния на кожата и сериозно увреждане на очите. Може да причини алергична кожна реакция. Използвайте предпазни ръкавици/предпазно облекло/предпазни очила/предпазна маска за лице. ПРИ КОНТАКТ С ОЧИТЕ: Промивайте внимателно с вода в продължение на няколко минути. Свалете контактните лещи, ако има такива и доколкото това е възможно. Продължавайте да промивате. ПРИ ПОГЛЪЩАНЕ: изплакнете устата. НЕ предизвиквайте повръщане. ПРИ КОНТАКТ С КОЖАТА (или косата): Незабавно свалете цялото замърсено облекло. Облейте кожата с вода/вземете душ При поява на кожно дразнене или обрив на кожата: Потърсете медицински съвет/помощ. Изхвърлете съдържанието/контейнера в съответствие с местните/регионалните/националните/ международните разпоредби. (CZ) Nebezpečí Způsobuje těžké poleptání kůže a poškození očí. Může vyvolat alergickou kožní reakci. Používejte ochranné rukavice/ochranný oděv/ochranné brýle/obličejový štít. PŘI ZASAŽENÍ OČÍ: Několik minut opatrně vyplachujte vodou. Vyjměte kontaktní čočky, jsou-li nasazeny a pokud je lze vyjmout snadno. Pokračujte ve vyplachování. PŘI POŽITÍ: Vypláchněte ústa. NEVYVOLÁVEJTE zvracení. PŘI STYKU S KŮŽÍ (nebo s vlasy): Veškeré kontaminované části oděvu okamžitě svlékněte. Opláchněte kůži vodou/osprchujte. Při podráždění kůže nebo vyrážce: Vyhledejte lékařskou pomoc/ošetření. Obsah/nádobu likvidujte v souladu s místními/regionálními/národními/mezinárodními předpisy. (DE) Gefahr Verursacht schwere Verätzungen der Haut und schwere Augenschäden. Kann allergische Hautreaktionen verursachen. Schutzhandschuhe/Schutzkleidung/Augenschutz/Gesichtssch utz tragen. BEI KONTAKT MIT DEN AUGEN: Einige Minuten lang behutsam mit Wasser spülen. Vorhandene Kontaktlinsen nach Möglichkeit entfernen. Weiter spülen. BEI VERSCHLUCKEN: Mund ausspülen. KEIN Erbrechen herbeiführen. BEI KONTAKT MIT DER HAUT (oder dem Haar): Alle beschmutzten, getränkten Kleidungsstücke sofort ausziehen. Haut mit Wasser abwaschen/duschen. Bei Hautreizung oder -ausschlag: Ärztlichen Rat einholen/ärztliche Hilfe hinzuziehen. Entsorgung des Inhalts / des Behälters gemäß den örtlichen / regionalen / nationalen/ internationalen Vorschriften. (DK) Fare Forårsager svære forbrændinger af huden og øjenskader. Kan forårsage allergisk hudreaktion. Bær beskyttelseshandsker/beskyttelsestøj/øjenbeskyttelse/ ansigtsbeskyttelse VED KONTAKT MED ØJNENE: Skyl forsigtigt med vand i flere minutter. Fjern eventuelle kontaktlinser, hvis dette kan gøres let. Fortsæt skylning. I TILFÆLDE AF INDTAGELSE: Skyl munden. Fremkald IKKE opkastning. VED KONTAKT MED HUDEN (eller håret): Tilsmudset tøj tages straks af/fjernes. Skyl/brus huden med vand. Ved hudirritation eller udslet: Søg lægehjælp. Bortskaffelse af indholdet/beholderen i henhold til de lokale/regionale/nationale/internationale forskrifter. (EE) Ettevaatust Põhjustab rasket nahasöövitust ja silmakahjustusi. Võib põhjustada allergilist nahareaktsiooni. Kanda kaitsekindaid/kaitserõivastust/kaitseprille/kaitsemaski. SILMA SATTUMISE KORRAL: loputada mitme minuti jooksul ettevaatlikult veega. Eemaldada kontaktläätsed, kui neid kasutatakse ja kui neid on kerge eemaldada. Loputada veel kord. ALLANEELAMISE KORRAL: loputada suud. MITTE kutsuda esile oksendamist. NAHALE (või juustele) SATTUMISE KORRAL: võtta viivitamata kõik saastunud rõivad seljast. Loputada nahka veega/loputada duši all. Nahaärrituse või _obe korral: pöörduda arsti poole. Sisu/konteineri käitlus vastavuses kohalike/regionaalsete/rahvuslike/rahvusvaheliste nõuetega. (EN) Danger Causes severe skin burns and eye damage. May cause an allergic skin reaction. Wear protective gloves/protective clothing/eye protection/face protection. IF IN EYES: Rinse cautiously with water for several minutes. Remove contact lenses, if present and easy to do. Continue rinsing. IF SWALLOWED: rinse mouth. Do NOT induce vomiting. IF ON SKIN (or hair): Remove/Take off immediately all contaminated clothing. Rinse skin with water/shower. If skin irritation or rash occurs: Get medical advice/attention. Dispose of contents/container in accordance with local/regional/national/international regulations. (ES) Peligro Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves. Puede provocar una reacción alérgica en la piel. Llevar guantes que aíslen del frío/gafas/máscara. EN CASO DE CONTACTO CON LOS OJOS: Aclarar cuidadosamente con agua durante varios minutos. Quitar las lentes de contacto, si lleva y resulta fácil. Seguir aclarando. EN CASO DE INGESTIÓN: Enjuagarse la boca. NO provocar el vómito. EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL (o el pelo): Quitarse inmediatamente las prendas contaminadas. Aclararse la piel con agua o ducharse. En caso de irritación o erupción cutánea: Consultar a un médico. Eliminar el contenido o el recipiente conforme a la reglamentación local/regional/nacional/ internacional. (FI) Vaara Voimakkaasti ihoa syövyttävää ja silmiä vaurioittavaa. Voi aiheuttaa allergisen ihoreaktion. Käytä suojakäsineitä/suojavaatetusta/silmiensuojainta/ kasvonsuojainta. JOS KEMIKAALIA JOUTUU SILMIIN: Huuhdo huolellisesti vedellä usean minuutin ajan. Poista piilolinssit, _edical voi tehdä helposti. Jatka huuhtomista. JOS KEMIKAALIA ON NIELTY: Huuhdo suu. EI saa oksennuttaa. JOS KEMIKAALIA JOUTUU IHOLLE (tai hiuksiin): Riisu saastunut vaatetus välittömästi. Huuhdo/suihkuta iho vedellä. Jos ilmenee ihoärsytystä tai ihottumaa: Hakeudu lääkäriin. Säilytä säiliö(t) noudattaen paikallisia/alueellisia/kansallisia/ kansainvälisiä määräyksiä.

16 (FR) Danger Provoque des brûlures de la peau et des lésions oculaires graves. Peut provoquer une allergie cutanée. Porter des gants de protection/des vêtements de protection/un équipement de protection des yeux/du visage. EN CAS DE CONTACT AVEC LES YEUX: rincer avec précaution à l eau pendant plusieurs minutes. Enlever les lentilles de contact si la victime en porte et si elles peuvent être facilement enlevées. Continuer à rincer. EN CAS D INGESTION: rincer la bouche. NE PAS faire vomir. EN CAS DE CONTACT AVEC LA PEAU (ou les cheveux): enlever immédiatement les vêtements contaminés. Rincer la peau à l eau/se doucher. En cas d irritation ou d éruption cutanée: consulter un médecin. Éliminer le contenu/récipient conformément à la réglementation locale/régionale/nationale/internationale. (GR) Κίνδυνος Προκαλεί σοβαρά δερµατικά εγκαύµατα και οφθαλµικές βλάβες. Μπορεί να προκαλέσει αλλεργική δερµατική αντίδραση. Να φοράτε προστατευτικά γάντια/προστατευτικά ενδύµατα/µέσα ατοµικής προστασίας για ταµάτια/πρόσωπο. ΣΕ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ ΕΠΑΦΗΣ ΜΕ ΤΑ ΜΑΤΙΑ: Ξεπλύνετε προσεκτικά µε νερό για αρκετά λεπτά. Εάν υπάρχουν φακοί επαφής, αφαιρέστε τους, εφόσον είναι εύκολο. Συνεχίστε να ξεπλένετε. ΣΕ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ ΚΑΤΑΠΟΣΗΣ: Ξεπλύνετε το στόµα. ΜΗΝ προκαλέσετε εµετό. ΣΕ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ ΕΠΑΦΗΣ ΜΕ ΤΟ ΔΕΡΜΑ (ή µετα µαλλιά): Αφαιρέστε αµέσως όλα τα µολυσµένα ενδύµατα. Ξεπλύνετε το δέρµα µε νερό/στο ντους. Εάν παρατηρηθεί ερεθισµός του δέρµατος ή εµφανιστεί εξάνθηµα: Συµβουλευθείτε/Επισκεφθείτεγιατρό. Απορρίψτε τα περιεχόµενα/δοχείο σύµφωνα µε τους τοπικούς/εθνικούς/διεθνείς κανονισµούς. (HR) Ppasnost Uzrokuje teške opekline kože i ozljede oka. Može izazvati alergijsku reakciju na koži. Nositi zaštitne rukavice/zaštitnu odijelo/zaštitu za oči/zaštitu za lice. U SLUČAJU DODIRA S OČIMA: oprezno ispirati vodom nekoliko minuta. Ukloniti kontaktne leće ukoliko ih nosite i ako se one lako uklanjaju. Nastaviti ispiranje. AKO SE PROGUTA: isprati usta. NE izazivati povraćanje. U SLUČAJU DODIRA S KOŽOM (ili kosom): odmah ukloniti/skinuti svu zaganenu odjeću. Isprati kožu vodom/tuširanjem. U slučaju nadražaja ili osipa na koži: zatražiti savjet/pomoć liječnika. Odložite sadržaje /spremnike u skladu s lokalnim/regionalnim/nacionalni/ međunarodnim odredbama. (HU) Veszély Smarkiai nudegina odą ir pažeidžia akis. Allergiás bőrreakciót válthat ki. Védőkesztyű/védőruha/szemvédő/arcvédő használata kötelező. SZEMBE KERÜLÉS esetén: Több percig tartó óvatos öblítés vízzel. Adott esetben a kontaktlencsék eltávolítása, ha könnyen megoldható. Az öblítés folytatása. LENYELÉS ESETÉN: a szájat ki kell öblíteni. TILOS hánytatni. HA BŐRRE (vagy hajra) KERÜL: Az összes szennyezett ruhadarabot azonnal el kell távolítani/le kell vetni. A bőrt le kell öblíteni vízzel/zuhanyozás. Bőrirritáció vagy kiütések megjelenése esetén: orvosi ellátást kell kérni. Az edény tartalmát / a tartályt a helyi/regionális/nemzeti/nemzetközi szabályozásoknak megfelelően kell hulladékként elhelyezni. (IT) Pericolo Provoca gravi ustioni cutanee e gravi lesioni oculari. Può provocare una reazione allergica cutanea. Indossare guanti/indumenti protettivi/proteggere gli occhi/il viso. IN CASO DI CONTATTO CON GLI OCCHI: sciacquare accuratamente per parecchi minuti. Togliere le eventuali lenti a contatto se è agevole farlo. Continuare a sciacquare. IN CASO DI INGESTIONE: sciacquare la bocca. NON provocare il vomito. IN CASO DI CONTATTO CON LA PELLE (o con i capelli): togliersi di dosso immediatamente tutti gli indumenti contaminati. Sciacquare la pelle/fare una doccia. In caso di irritazione o eruzione della pelle: consultare un medico. Smaltire il prodotto/recipiente in conformità con le disposizioni locali / regionali / nazionali / internazionali. (LT) Pavojinga Smarkiai nudegina odą ir pažeidžia akis. Gali sukelti alerginę odos reakciją. Mūvėti apsaugines pirštines/dėvėti apsauginius drabužius/ naudoti akių (veido) apsaugos priemones. PATEKUS Į AKIS: Kelias minutes atsargiai plauti vandeniu. Išimti kontaktinius lęšius, jeigu jie yra ir jeigu lengvai galima tai padaryti. Toliau plauti akis. PRARIJUS: išskalauti burną. NESKATINTI vėmimo. PATEKUS ANT ODOS (arba plaukų): Nedelsiant nuvilkti/pašalinti visus užterštus drabužius. Odą nuplauti vandeniu/čiurkšle. Jeigu sudirginama oda arba ją išberia: kreiptis į gydytoją. Turinį/talpą išpilti (išmesti) - šalinti pagal vietines / regionines / nacionalines / tarptautines taisykles. (NL) Gevaar Veroorzaakt ernstige brandwonden en oogletsel. Kan een allergische huidreactie veroorzaken. Beschermende handschoenen/beschermende kleding/ oogbescherming/gelaatsbescherming dragen. BIJ CONTACT MET DE OGEN: voorzichtig afspoelen met water gedurende een aantal minuten; contactlenzen verwijderen, indien mogelijk; blijven spoelen. NA INSLIKKEN: de mond spoelen GEEN braken opwekken. BIJ CONTACT MET DE HUID (of het haar): verontreinigde kleding onmiddellijk uittrekken huid met water afspoelen/afdouchen. Bij huidirritatie of uitslag: een arts raadplegen. De inhoud en de verpakking verwerken volgens de plaatselijke/regionale/nationale/internationale voorschriften. (NO) Fare Forårsaker alvorlige hudforbrenninger og øyeskader. Kan forårsake allergiske hudreaksjoner. Bruk vernehansker/verneklær/vernebriller/ansiktsskjerm. VED KONTAKT MED ØYNENE: Skyll forsiktig med vann i opptil flere minutter. Fjern evt. kontaktlinser såfremt dette er lett mulig. Fortsett skyllingen. VED SVELGING: Skyll munnen. IKKE fremkall brekninger. VED HUDKONTAKT (eller kontakt med hår): Alle tilsølte klær må fjernes straks. Vask/dusj huden med vann. Ved hudirritasjon eller -utslett: Kontakt / tilkall lege. Innholdet / emballasjen skal avhendes i henhold til de lokale / regionale / nasjonale / internasjonale forskrifter.

17 (PL) Niebezpieczeństwo Powoduje poważne oparzenia skóry oraz uszkodzenia oczu. Może powodować reakcję alergiczną skóry. Stosować rękawice ochronne/odzież ochronną/ochronę oczu/ochronę twarzy. W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ DO OCZU: Ostrożnie płukać wodą przez kilka minut. Wyjąć soczewki kontaktowe, jeżeli są i można je łatwo usunąć. Nadal płukać. W PRZYPADKU POŁKNIĘCIA: wypłukać usta. NIE wywoływać wymiotów. W PRZYPADKU KONTATKU ZE SKÓRĄ (lub z włosami): Natychmiast usunąć/zdjąć całą zanieczyszczoną odzież. Spłukać skórę pod strumieniem wody/prysznicem. W przypadku wystąpienia podrażnienia skóry lub wysypki: Zasięgnąć porady/zgłosić się pod opiekę lekarza. Zawartość / pojemnik usuwać zgodnie z przepisami miejscowymi / regionalnymi / narodowymi / międzynarodowymi. (PT) Perigo Provoca queimaduras na pele e lesões oculares graves. Pode provocar uma reacção alérgica cutânea. Usar luvas de protecção/vestuário de protecção/protecção ocular/protecção facial. SE ENTRAR EM CONTACTO COM OS OLHOS: enxaguar cuidadosamente com água durante vários minutos. Se usar lentes de contacto, retire-as, se tal lhe for possível. Continuar a enxaguar. EM CASO DE INGESTÃO: enxaguar a boca. NÃO provocar o vómito. SE ENTRAR EM CONTACTO COM A PELE (ou o cabelo): despir/retirar imediatamente toda a roupa contaminada. Enxaguar a pele com água/tomar um duche. Em caso de irritação ou erupção cutânea: consulte um médico. Eliminar o conteúdo/recipiente de acordo com a legislação local/regional/nacional/ internacional. (Sl) Nevarno Povzroča hude opekline kože in poškodbe oči. Lahko povzroči alergijski odziv kože. Nositi zaščitne rokavice/zaščitno obleko/zaščito za oči/zaščito za obraz. PRI STIKU Z OČMI: previdno izpirajte z vodo nekaj minut. Odstranite kontaktne leče, če jih imate in če to lahko storite brez težav. Nadaljujte z izpiranjem. PRI STIKU Z OČMI: previdno izpirajte z vodo nekaj minut. Odstranite kontaktne leče, če jih imate in če to lahko storite brez težav. Nadaljujte z izpiranjem. PRI STIKU S KOŽO (ali lasmi): takoj odstraniti/sleči vsa kontaminirana oblačila. Izprati kožo z vodo/prho. Če nastopi draženje kože ali se pojavi izpuščaj: poiščite zdravniško pomoč/oskrbo. Vsebino/vsebnik odstranite v skladu z lokalnimi/regionalnimi/narodnimi/mednarodnimi predpisi. (SK) Nebezpečenstvo Provoacă arsuri grave ale pielii şi lezarea ochilor. Môže vyvolať alergickú kožnú reakciu. Noste ochranné rukavice/ochranný odev/ochranné okuliare/ochranu tváre. PO POŽITÍ: vypláchnite ústa. Nevyvolávajte zvracanie. PO POŽITÍ: vypláchnite ústa. Nevyvolávajte zvracanie. PRI KONTAKTE S POKOŽKOU (alebo vlasmi): Odstráňte/vyzlečte všetky kontaminované časti odevu. Pokožku ihneď opláchnite vodou/sprchou. Ak sa prejaví podráždenie pokožky alebo sa vytvoria vyrážky: vyhľadajte lekársku pomoc/starostlivosť. Zneškodnenie obsahu/obalu v súlade s miestnymi/oblastnými/ národnými/medzinárodnými nariadeniami. (RO) Pericol Provoacă arsuri grave ale pielii şi lezarea ochilor. Poate provoca o reacţie alergică a pielii. Purtaţi mănuşi de protecţie/îmbrăcăminte de protecţie/echipament de protecţie a ochilor/ chipament de protecţie a feţei. ÎN CAZ DE CONTACT CU OCHII: clătiţi cu atenţie cu apă timp de mai multe minute. Scoateţi lentilele de contact, dacă este cazul şi dacă acest lucru se poate face cu uşurinţă. Continuaţi să clătiţi. ÎN CAZ DE ÎNGHIŢIRE: clătiţi gura. NU provocaţi voma. ÎN CAZ DE CONTACT CU PIELEA (sau părul): scoateţi imediat toată îmbrăcămintea contaminată. Clătiţi pielea cu apă/faceţi duş. În caz de iritare a pielii sau de erupţie cutanată: consultaţi medicul. Aruncaţi conţinutul/containerul în acord cu regulamentele locale/ regionale/naţionale/internaţionale. (SE) Fara Orsakar allvarliga frätskador på hud och ögon. Kan orsaka allergisk hudreaktion. Använd skyddshandskar/skyddskläder/ögonskydd/ ansiktsskydd. VID KONTAKT MED ÖGONEN: Skölj försiktigt med vatten i flera minuter. Ta ur eventuella kontaktlinser om det går lätt. Fortsätt att skölja. VID FÖRTÄRING: Skölj munnen. Framkalla INTE kräkning. VID HUDKONTAKT (även håret): Ta omedelbart av alla nedstänkta kläder. Skölj huden med vatten/duscha. Vid hudirritation eller utslag: Sök läkarhjälp. Innehållet / behållaren avfallshanteras enligt lokala / regionala / nationella / internationella föreskrifter.

18 Bio-Rad 3, boulevard Raymond Poincaré Marnes-la-Coquette - France Tel.: +33 (0) Fax: +33 (0) /