AVSEDD ANVÄNDNING SAMMANFATTNING OCH FÖRKLARING TESTPRINCIP. Endast avsedd för användning med Sofia Analyzer

Transkript

1 Endast avsedd för användning med Sofia Analyzer AVSEDD ANVÄNDNING Sofia RSV FIA använder immunofluorescens för detektering av respiratorisk syncytialvirus (RSV) nukleoprotein-antigen direkt från nasofaryngeal teststicka (vaddpensel) och nasofaryngeala aspirat/sköljprov från symtomatiska patienter. Detta kvalitativa test är avsett att vara ett hjälpmedel vid snabb diagnostisering av akuta RSV-infektioner. Negativa resultat utesluter inte RSV-infektion och bör inte utgöra enda grund för behandling eller andra beslut gällande hantering. SAMMANFATTNING OCH FÖRKLARING RSV är ett ämne som orsakar mycket smittsam, akut, virusinfektion i andningsvägarna hos pediatriska och äldre populationer. Respiratoriskt syncytialvirus är ett enkelsträngat RNA-virus. 1 Närapå hälften av alla barn smittas av RSV under sitt första levnadsår. Viruset är även huvudorsak till nosokomiala sjukdomar hos barn som redan är inlagda på sjukhus av andra anledningar. 2 I USA uppskattar man att RSV är orsak till mellan och inläggningar på sjukhus per år endast på grund av bronkilit och lunginflammation hos barn under 1 år. 3 När det gäller barn som lagts in på sjukhus på grund av RSV-infektion är viruset troligen den vanligaste orsaken till virusorsakad dödlighet hos barn under 5 år. 4 För de barn som lagts in på sjukhus på grund av RSVinfektion uppskattas dödligheten till så lite som 0,3 % - 1,0 % 3, 5 och någonstans mellan 2,5 % och 3, 5, 6 4,0 % för barn med underliggande hjärt- eller lungsjukdom. TESTPRINCIP Sofia RSV FIA:s test använder immunofluorescensteknik som används tillsammans med Sofia Analyzer för snabb detektering av RSV-antigener. Sofia RSV FIA:s test innefattar splittring av RSVvirusantigener. Patientprovet placeras i reagensröret och viruspartiklarna i provet splittras, vilket leder till exponering av interna virusnukleoproteiner. Efter splittringen dispenseras provet i kassettens provbrunn. Från provbrunnen vandrar provet genom en testremsa som innehåller olika unika kemiska miljöer. Om det förekommer RSV-virusantigener kommer dessa att begränsas till ett speciellt område. Obs! Beroende på vad användaren väljer placeras kassetten antingen inuti Sofia Analyzer för automatisk tidsinställd utveckling (Gå ifrån-läge) eller på en bänk för manuellt tidsinställd utveckling och därefter i Sofia Analyzer för skanning (Läs nu-läge). Sofia Analyzer kommer att skanna testremsan och mäta den fluorescenta signalen genom att bearbeta resultatet med hjälp av metodspecifika algoritmer. Sofia Analyzer kommer att visa testresultatet (Positivt, Negativt, eller Ogiltigt) på skärmen. Resultatet kan även skrivas ut automatiskt på en inbyggd skrivare om det alternativet har valts. Sofia RSV FIA Sida 1 av 19

2 REAGENS OCH MATERIAL Sats med 25-tester: Individuellt förpackade kassetter (25): Monoklonala anti-rsv antikroppar från mus Reagensrör (25): Lyofiliserad buffert med rengöringsmedel och reducerande ämnen Reagenslösning (25): Ampuller med saltlösning Sterila nasofaryngeala stickor (vaddpenslar) (25) Stora, rosa fasta volympipetter (25) Små, genomskinliga pipetter med fast volym (25) RSV-positiv kontrollsticka (1): Stickan är belagd med icke-smittsam RSV-antigen Negativ kontrollsticka (1): Stickan är belagd med värmeinaktiverade, icke-smittsamma streptokock C-antigen Bipacksedel (1) Snabbreferens (1) QC-kort (på satsens förpackning) Översättningar på CD-ROM (1) Skrivarpapper (1) MATERIAL SOM INTE MEDFÖLJER I SATSEN Tidtagare eller klocka för användning i Läs-nu-läge Sofia Analyzer Steril saltlösning för uppsamling av nasofaryngealt aspirat eller sköljprover Utrustning som används för uppsamling av nasofaryngealt aspirat eller nasofaryngeal sköljning Kalibreringskassett (medföljer Sofia Analyzer) VARNINGAR OCH FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRDER För in vitro-diagnostiskt bruk. Använd inte satsen efter det utgångsdatum som anges på förpackningens utsida. Använd lämpliga försiktighetsåtgärder vid insamling, hantering, förvaring och avfallshantering av patientprov och använt innehåll. 7 Användning av nitrilgummihandskar eller latexhandskar (eller liknande) rekommenderas vid hantering av patientprover. 7 Gör dig av med behållare och använt innehåll enligt gällande nationella och lokala regler. Återanvänd inte använda kassetter, fasta volympipetter, reagensrör, lösningar eller kontrollstickor. Användaren får aldrig öppna foliepåsen runt testkassetten och utsätta den för den omgivande miljön innan kassetten är klar för omedelbar användning. Kasta och använd inte någon skadad kassett eller skadat material. Reagenslösningen innehåller en saltlösning. Om lösningen kommer i kontakt med huden eller ögonen ska du spola med rikliga mängder vatten. För att få korrekta resultat måste anvisningarna på bipacksedeln följas. Kalibreringskassetten måste förvaras i det medföljande fodralet mellan varje användning. Sofia RSV FIA Sida 2 av 19

3 Otillräcklig eller felaktig provtagning, förvaring och transport kan ge falska testresultat. Provtagning och provhantering kräver särskild utbildning och vägledning. Använd virustransportmediet som rekommenderas i denna bipacksedel. När man samlar upp ett nasofaryngealt stickprov ska man använda den nasofaryngeala stickan (vaddpenseln) som följer med satsen. Använd lämplig pipett med fast volym i överensstämmelse med testprocedurerna: Den lilla, genomskinliga fasta volympipetten får ENDAST användas till att lägga till patientprov i testkassetten. Den stora, rosa fasta volympipetten får ENDAST användas i samband med en testprocedur som innefattar aspirat/sköljning eller ett virustransportmedium då ett patientprov ska förflyttas från uppsamlingskärlet till reagensröret. Skriv inte på streckkoden för kassetten. Den används av Sofia Analyzer för att identifiera den typ av test som analyseras och för att identifiera varje enskild kassett, och förhindra en andra avläsning av samma kassett. Försök inte skanna en kassett mer än en gång. Kassettens streckkod har en unik identifieringskod som förhindrar att Sofia Analyzer utför en andra avläsning av en kassett som tidigare skannats. Om en kassett skannas mer än en gång visas ett felmeddelande. Eftersom detekteringsreagensen är en fluorescerande förening visas inga synliga resultat på testremsan. Sofia Analyzer måste användas för tolkning av resultatet. SATSENS HÅLLBARHET OCH FÖRVARING Förvara satsen i rumstemperatur, C, där den inte kan utsättas för direkt solljus. Satsens innehåll är stabilt fram till det utgångsdatum som är tryckt på ytterförpackningen. Får ej frysas. KVALITETSKONTROLL Det finns tre typer av kvalitetskontroller för Sofia Analyzer och kassetten: Sofia Analyzers kalibreringsprocedur, inbyggda procedurkontroller och externa kontroller. Sofia Analyzers kalibreringskontroll Obs! Detta är en kalibreringskontroll. Kalibreringskontrollen bör utföras en gång var trettionde (30) dag. Sofia Analyzer kan ställas in på att påminna användaren om att utföra kalibreringskontrollen. Kalibreringskontrollen är en obligatorisk funktion som kontrollerar Sofia Analyzers optik och beräkningssystem med hjälp av en särskild kalibreringskassett. Denna kalibreringskassett medföljer Sofias installationspaket. Se bruksanvisningen för Sofia Analyzer för detaljer om kalibreringskontrollen. Viktigt: Se till att kalibreringskassetten förvaras förseglad i sitt fodral mellan varje användning för att skydda den mot ljus. Sofia RSV FIA Sida 3 av 19

4 1. Kontrollera kalibreringen av Sofia Analyzer genom att välja Kalibrering från huvudmenyn. 2. Följ anvisningarna, sätt in kalibreringskassetten i Sofia Analyzer och stäng lådan. Sofia Analyzer utför kalibreringskontrollen automatiskt utan att någon åtgärd krävs från användaren. Sofia Analyzer visar när kalibreringskontrollen är klar. Välj OK för att återgå till huvudmenyn. OBS! Om kalibreringen inte blir godkänd ska du anmäla det till arbetsledaren på plats eller kontakta Quidels tekniska support för hjälp mellan kl och normaltid vid Stillahavskusten på nr (inom USA) eller , fax: ; custserv@quidel.com (Kundtjänst); technicalsupport@quidel.com (Teknisk support) eller kontakta din lokala återförsäljare. Inbyggda procedurkontroller: Sofia RSV FIA har en inbyggd procedurkontroll. Varje gång som ett test körs i Sofia Analyzer skannas procedurkontrollzonen av Sofia Analyzer och resultatet visas på skärmen. Tillverkarens rekommendation för daglig kontroll är att dokumentera resultaten från dessa inbyggda procedurkontroller för det första provet som analyseras varje dag. Denna dokumentation loggas automatiskt i Analyzer med varje testresultat. Ett giltigt resultat som erhållits med procedurkontrollen visar att det provet flödade på rätt sätt och att kassetten fungerade som den ska. Denna procedurkontroll tolkas av Sofia Analyzer efter att kassetten har utvecklats under femton (15) minuter. Om provet inte har flödat korrekt kommer Sofia Analyzer att visa att resultatet är ogiltigt. Om detta inträffar ska du se över proceduren och upprepa testet med ett nytt patientprov och en ny testkassett. Sofia RSV FIA Sida 4 av 19

5 Exempel: Displayen visar ett ogiltigt resultat. Extern kvalitetskontroll Externa kontroller kan också användas för att visa att reagenserna och analysproceduren har utförts korrekt. Quidel rekommenderar att man kör positiva och negativa externa kontroller: en gång för varje outbildad operatör en gång för varje ny satsleverans förutsatt att var och en av de olika partierna som ingår i leveransen testas enligt vad dina interna kvalitetskontrollprocedurer därutöver finner nödvändigt och i överensstämmelse med lokala, statliga och federala bestämmelser eller krav på ackreditering. Användaren måste först välja Kör QC från huvudmenyn i Sofia Analyzer och sedan, på uppmaning, skanna QC-kortet (som finns på förpackningen). Detta kort innehåller information som är specifik för just det partiet, inklusive partinummer och utgångsdatum. Analyzer kommer att uppmana användaren att välja önskat läge (Gå ifrån eller Läs nu) och sedan köra de externa kontrollstickorna. Externa positiva och negativa kontrollstickor följer med satsen och ska testas enligt den testprocedur som anges på bipacksedeln eller i snabbreferensen. När QC-testet har avslutats kommer alla resultat att visas som "Godkända" eller "Underkända" för den positiva och negativa kontrollen. Utför inte patienttester eller rapportera patienters testresultat om något av kontrolltesterna inte ger de förväntade resultaten. Gör om testet eller kontakta Quidels tekniska support innan testning av patientprover ifall man har fått ett "underkänt" resultat från de externa kontrollerna. Ytterligare kontrollstickor för externa kontroller kan beställas separat genom att kontakta Quidels kundtjänst på (gratis inom USA) eller Sofia RSV FIA Sida 5 av 19

6 PROVTAGNING OCH HANTERING PROVTAGNING Nasofaryngealt stickprov: Använd den nasofaryngeala stickan som följer med satsen. För att ta ett nasofaryngealt stickprov ska man försiktigt föra in stickan i den näsborre där man visuellt kan se att det förekommer mest sekret. Se till att stickan befinner sig nära näsans septumvägg samtidigt som man försiktigt för in stickan i bakre nasofarynx. Rotera flera gånger på stickan och avlägsna den sedan från nasofarynx. Nasofaryngealt aspirat/sköljprov: Följ ditt institutionsprotokoll för att erhålla nasofaryngealt aspirat/sköljprov. Använd minsta mängd saltlösning som tillåts enligt din procedur. Alternativt, om din institution inte har något protokoll, kan man överväga följande procedurer som används av kliniker. För att samla upp ett nasofaryngealt aspiratprov: droppa i några droppar steril saltlösning i den näsborre som man ska suga ut. För in den böjbara plastledningen längs med näsväggen, parallellt med gommen. När man kommit in i nasofarynx ska man suga upp sekretet samtidigt som man avlägsnar ledningen. Proceduren bör upprepas i den andra näsborren om man inte erhöll tillräckligt med sekret från den första näsborren. För att ta ett nasofaryngealt sköljprov: barnet bör sitta i förälderns knä med ansiktet vänt framåt och huvudet vilande mot förälderns bröstkorg. Fyll sprutan eller blåsan för uppsugning med minimal mängd saltlösning med tanke på patientens storlek och ålder. Droppa i saltlösningen i en näsborre medan huvudet är bakåtlutat. Sug tillbaka sköljprovet i sprutan eller blåsan. Det uppsugna sköljprovet kommer troligtvis att ha en volym på 1 cc. Alternativt kan man, efter det att saltlösningen har droppats i, luta huvudet framåt och låta saltlösningen rinna ut i ett rent uppsamlingskärl. TRANSPORT OCH FÖRVARING AV PROV Man bör testa prover så fort som möjligt efter det att de har samlats upp. Om man likväl behöver transportera prover, rekommenderas minimal utspädning av provet. Detta på grund av att spädning kan resultera i reducerad testkänslighet. En (1) milliliter eller mindre rekommenderas för optimal snabb testning. Följande virustransportmedier som anges i tabell 1 är kompatibla med Sofia RSV FIA: Virustransportmedium Tabell 1 Rekommenderade virustransportmedier Rekommenderat förvaringstillstånd 2-8 C 25 C Copans universella transportmedium 24 timmar 24 timmar Hanks balanserade saltlösning 24 timmar 24 timmar Liquid Amies Media 24 timmar 24 timmar M4 24 timmar 24 timmar M4-RT 24 timmar 24 timmar M6 24 timmar 24 timmar Modified Liquid Stuarts Media 24 timmar 24 timmar Saltlösning 24 timmar 24 timmar Starplex Multitrans 24 timmar 24 timmar Fosfatbuffrad saltlösning 24 timmar 24 timmar Sofia RSV FIA Sida 6 av 19

7 TESTPROCEDUR Alla kliniska prover måste ha rumstemperatur innan testet startar. Utgångsdatum: Kontrollera utgångsdatum på varje testförpackning eller ytter fodral före testning. Använd inte något test efter det utgångsdatum som anges på etiketten. Nasofaryngeal testprocedur med sticka (vaddpensel) 1. Kontrollera att Sofia Analyzer är inställd på önskat analysläge: Gå ifrån eller Läs nu. Se avsnittet "Användning av Sofia Analyzer" för mer information. 2. Dispensera all reagenslösning i reagensröret. Snurra lätt på reagensröret för att lösa upp innehållet. 3. Placera patientens stickprov i reagensröret. Rulla stickan åtminstone tre (3) gånger samtidigt som du pressar huvudet mot reagensrörets botten och sida. Låt stickan vara i reagensröret under en (1) minut. 4. Rulla stickans huvud mot reagensrörets insida samtidigt som du tar bort den. Kassera den använda stickan som miljöfarligt avfall. 5. Fyll den medföljande lilla, genomskinliga fasta volympipetten med patientprov från reagensröret. För att fylla den fasta volympipetten med patientprovet: a) Pressa ihop den översta blåsan ORDENTLIGT. b) Fortsätt att trycka samtidigt som du placerar pipettspetsen i patientprovet. c) När pipettspetsen fortfarande befinner sig i patientprovet, släpp på trycket på blåsan för att fylla pipetten. Sofia RSV FIA Sida 7 av 19

8 6. Tryck ihop den översta blåsan för att få till stånd en ordentlig tömning av innehållet ur den lilla, genomskinliga fasta volympipetten i kassettprovet. Det är OK att det finns extra vätska i överflödesblåsan. OBS! Den fasta volympipetten har utformats för att kunna samla in och dispensera rätt mängd vätskeprov. Kassera pipetten som miljöfarligt avfall. 7. Gå vidare till nästa avsnitt "Använda Sofia Analyzer" för att genomföra testet. Nasofaryngeal aspirat/sköljning eller testprocedur för prover i virustransportmedier 1. Kontrollera att Sofia Analyzer är inställd på önskat analysläge: Gå ifrån eller Läs nu. Se avsnittet "Användning av Sofia Analyzer" för mer information. 2. Dispensera all reagenslösning i reagensröret. Snurra lätt på reagensröret för att lösa upp innehållet. 3. Fyll den medföljande stora, rosa fasta volympipetten med patientens vätskeprov från uppsamlingskärlet. För att fylla den fasta volympipetten med provet: a) Pressa ihop den översta blåsan ORDENTLIGT. b) Fortsätt att trycka samtidigt som du placerar pipettspetsen i vätskeprovet. c) När pipettspetsen fortfarande befinner sig i vätskeprovet, släpp på trycket på blåsan för att fylla pipetten. 4. Tryck ihop den översta blåsan för att tömma ut innehållet ur den stora, rosa fasta volympipetten i reagensröret. Det är OK att det finns extra vätska i överflödesblåsan. Snurra lätt på reagensröret för att blanda. OBS! Den fasta volympipetten har utformats för att kunna samla in och dispensera rätt mängd vätskeprov. Kassera pipetten som miljöfarligt avfall. Sofia RSV FIA Sida 8 av 19

9 5. Fyll den medföljande lilla, genomskinliga fasta volympipetten med patientprov från reagensröret. 6. Tryck ihop den översta blåsan för att få till stånd en ordentlig tömning av innehållet ur den lilla, genomskinliga fasta volympipetten i kassettprovet. Det är OK att det finns extra vätska i överflödesblåsan. Kassera pipetten som miljöfarligt avfall. 7. Gå vidare till nästa avsnitt "Använda Sofia Analyzer" för att genomföra testet. ANVÄNDA SOFIA ANALYZER Lägena Gå ifrån/läs nu Se bruksanvisningen för Sofia Analyzer. Analyzer går att ställa in på två olika lägen (Gå ifrån eller Läs nu). Procedurerna för varje läge beskrivs nedan. Gå ifrån-läge I Gå ifrån-läge sätter användaren omedelbart in kassetten i Analyzer. Därpå återvänder användaren efter femton (15) minuter för att inhämta testresultatet. I det här läget kommer Analyzer automatiskt att ta tid på testutvecklingen innan testresultatet skannas och visas upp. Läs nu-läge Låt testet utvecklas under femton (15) minuter INNAN det placeras i Analyzer. Först måste användaren placera kassetten på disken eller ovanpå bänken under femton (15) minuter (utanför Analyzer) och ta tid på den här utvecklingsfasen för hand. Därefter ska användaren sätta in kassetten i Analyzer. I Läs nu-läget kommer Analyzer att skanna och visa testresultatet inom loppet av en (1) minut. Tips för satstestning Beroende på arbetsbelastningen har man flera olika valmöjligheter som gör det enklare att genomföra satstestning. Användaren kan tillsätta reagenslösningen i en eller flera reagensrör, återförsluta dem och förvara dem på bänken i rumstemperatur i uppemot 12 timmar utan aktivitetsförlust innan man tillsätter prov/et (-en). Efter att användaren har tillsatt reagenslösningen Sofia RSV FIA Sida 9 av 19

10 kan användaren även bearbeta stick- eller vätskeprov i reagensröret. När man sedan har tagit bort stickan (om tillämpligt), ska man återförsluta röret och låta proven stå i rumstemperatur i uppemot 12 timmar utan aktivitetsförlust före testning. Det är mycket viktigt att användaren aldrig öppnar foliepåsen och därmed utsätter testkassetten för den omgivande miljön innan kassetten är klar för omedelbar användning. Kör testet 1. Ange användar-id med hjälp av streckkodsläsaren eller genom att skriva in manuellt via knappsatsen. OBS! Om Du av misstag råkar skanna in fel streckkod ska Du använda piltangenterna på Sofia Analyzers knappsats för att markera området på nytt. Skanna därefter bara på nytt med rätt streckkod och den föregående koden skrivs över med rätt streckkod. 2. Ange patient-id eller beställningsnummer med hjälp av streckkodsläsaren eller genom att skriva in manuellt på knappsatsen. Sofia RSV FIA Sida 10 av 19

11 3. Tryck på Starta test så öppnas lådan på Sofia Analyzer automatiskt. 4. Kontrollera att rätt utvecklingsläge har valts, Gå ifrån eller Läs nu. Sätt in den förberedda patientprovskassetten i lådan på Sofia Analyzer och stäng lådan. 5. Analyzer kommer att starta automatiskt och visa information om förloppet, som i exemplet nedan. I Gå ifrån-läge kommer testresultaten att visas på skärmen efter omkring femton (15) minuter. I Läs nu-läge kommer testresultaten att visas på skärmen efter omkring en (1) minut. Se avsnittet Tolkning av resultat. Exempel: Denna display visar att det i Gå ifrån-läge återstår 12 minuter och 13 sekunder. Sofia Analyzer kommer att läsa och visa resultatet efter 15 minuter. Sofia RSV FIA Sida 11 av 19

12 TOLKNING AV RESULTAT När testet är klart kommer resultaten att visas på skärmen på Sofia Analyzer. Resultaten kan skrivas ut automatiskt på den inbyggda skrivaren om det alternativet väljs. Fluorescenta testlinjer går ej att uppfatta med blotta ögat. Sofia Analyzer-skärmen kommer att visa resultat från procedurkontrollen som giltiga eller ogiltiga, och kommer att lämna ett positivt eller negativt RSV-resultat. Om procedurkontrollen visas som "ogiltig" ska man genomföra ett nytt test med ett nytt patientprov och en ny kassett. Positiva resultat: Exempel: Denna display visar ett giltigt positivt RSV-resultat. OBS! Ett positivt resultat utesluter inte samtidiga infektioner med andra patogener. Negativa resultat: Exempel: Denna display visar ett giltigt negativt RSV-resultat. OBS! Ett negativt resultat utesluter inte RSV-virusinfektion. Negativa resultat bör bekräftas via virusodling. Sofia RSV FIA Sida 12 av 19

13 Ogiltiga resultat: Exempel: Displayen visar ett ogiltigt resultat. Ogiltigt resultat: Om testet är ogiltigt ska ett nytt test göras med ett nytt patientprov och en ny testkassett. BEGRÄNSNINGAR Innehållet i den här satsen är avsett att användas för kvalitativ detektering av RSV-antigen från nasofaryngeal sticka och nasofaryngeala aspirat/sköljprov. Det här testet detekterar såväl levande som ej levande RSV. Testeffekt beror på mängden virus (antigen) i provet och kan eller också inte korrelera med resultat från virusodling som kommer från samma prov. Ett negativt testresultat kan uppstå om nivån av antigen i ett prov är under detekteringsgränsen i testet eller om provet samlades upp eller transporterades felaktigt. Underlåtenhet att följa testproceduren kan påverka testresultatet och/eller göra testresultatet ogiltigt. Testresultaten måste utvärderas tillsammans med andra kliniska data som finns tillgängliga för läkaren. Ett positivt resultat utesluter inte samtidiga infektioner med andra patogener. Negativa testresultat ska inte inkludera andra icke-rsv virus- eller bakteriella infektioner. Barn har en tendens att sprida virus i högre grad och under längre perioder än vuxna. Därför brukar testning av prover från vuxna ge lägre känslighet än testning av prover från barn. Positiva och negativa prediktiva värden beror i hög grad på prevalensen. Det är mer sannolikt att man erhåller falska negativa testresultat under högaktivitetsperioder när sjukdomsprevalensen är hög. Det är mer sannolikt att man erhåller falska negativa resultat under perioder av låg RSV-aktivitet då prevalensen är måttlig till låg. Det kan hända att monoklonala antikroppar inte detekterar RSV-virus som har genomgått mindre aminosyreförändringar i målepitopregionen med mindre känslighet, eller detekterar det med mindre grad av känslighet. Prov som kontaminerats med helblod >1 % v/v kan störa tolkningen av testet. Prov vari blodet är synligt bör ej användas. Effekten av det här testet har inte utvärderats med tanke på användning på patienter som inte uppvisar tecken och symtom på respiratorisk infektion. Sofia RSV FIA Sida 13 av 19

14 FÖRVÄNTADE VÄRDEN Andelen positivitet som observeras vid RSV-testning varierar beroende på provuppsamlingsmetod, det hanterings-/transportsystem som används, den detekteringsmetod som nyttjas, tiden på året, patientens ålder samt sjukdomsprevalens. Prevalensen som observerades vid odling under den kliniska studien var 7 % (81/1142) PRESTANDAEGENSKAPER Sofia RSV FIA-resultat jämfört med cellodling Resultatet av Sofia RSV FIA jämfördes med metoder för viruscellodling enligt DFA i en multicenter klinisk fältstudie från och med februari till och med mars 2012 i USA. Denna studie genomfördes av sjukvårdspersonal på 7 olika platser i olika geografiska regioner i USA. I denna point-of-care (POC) fältstudie som omfattade flera centra, samlade man upp (2) nasofaryngeala stick eller nasofaryngeala aspirat/sköljprov från varje 1142 patient. Ett par nasofaryngeala stickprov erhölls från 412 patienter och ett nasofaryngealt aspirat/sköljprov erhölls från 730 patienter. Alla kliniska prover samlades in från symtomatiska patienter (18 år eller yngre): 56 % var män och 44 % var kvinnor. Testning på plats i ett nasofaryngealt stickprov eller en del av ett nasofaryngealt aspirat-/sköljprov utfördes av sjukvårdspersonal på läkarmottagningen eller sjukhusanläggningen med Sofia RSV FIA. Proven hade precis samlats in och testats. Återstoden av provet placerades i virustransportmedium för odling. De parade stickproven randomiserades med hänsyn till testordningen i Sofia RSV FIA jämfört med odling. Viruscellodling utfördes antingen vid ett lokalt kliniskt labb på testkliniken eller så transporterades proven nedkylda på ispackar, ej frysta, nattetid, till ett centrallabb för odling inom loppet av 48 timmar. Resultaten presenteras i tabell 2 och 3. Tabell 2 Nasofaryngeala stickresultat med Sofia RSV FIA jämfört med odling Odling Känsl = 22/22 = 100 % Pos Neg (95 % k.i %) Sofia Pos Spec = 376/390 = 96 % Sofia Neg (95 % k.i %) PPV = 61 % NPV = 100 % Tabell 3 Sofia RSV FIA Nasofaryngeal aspirat/sköljresultat kontra odling Odling Känsl = 54/59 = 92 % Pos Neg (95 % k.i %) Sofia Pos Spec = 656/671 = 98 % Sofia Neg (95 % k.i %) PPV = 78 % NPV = 99 % Sofia RSV FIA Sida 14 av 19

15 Sofia RSV FIA-resultat jämfört med cellodling när man testar prov som har placerats i virustransportmedier Resultatet av Sofia RSV FIA när man testade prov som placerats i VTM jämfördes med viruscellodlingsmetoder enligt DFA i samma multicenter klinisk fältstudie från och med februari till och med mars 2012 i USA. Denna del av studien utfördes av laboratoriepersonal vid två (2) olika laboratorier inom USA. Ett nasofaryngealt stickprov eller ett nasofaryngealt aspirat/sköljprov placerades i ett 1,5-ml universellt transportmedia (Copan) och transporterades sedan kallt på is, inte fruset, övernatt till laboratoriet. Sofia RSV FIA-testet utfördes på en del av varje prov och odlingen utfördes med hjälp av resten av samma prov i VTM. Nasofaryngeala stickprov erhölls från 413 patienter och nasofaryngeala aspirat/sköljprov erhölls från 738 patienter. Resultaten presenteras i tabell 4 och 5. Tabell 4 Sofia RSV FIA nasofaryngeala stickprov i VTM jämfört med odling Odling Känsl = 22/22 = 100 % Pos Neg (95 % k.i %) Sofia Pos Spec = 380/391 = 97 % Sofia Neg (95 % k.i %) PPV = 67 % NPV = 100 % Tabell 5 Sofia RSV FIA nasofaryngealt aspirat/sköljresultat i VTM jämfört med odling Odling Känsl = 58/60 = 97 % Pos Neg (95 % k.i %) Sofia Pos Spec = 657/678 = 97 % Sofia Neg (95 % k.i %) PPV = 73 % NPV = 100 % Detekteringsgräns och analytisk reaktivitet Detekteringsgränsen (Limit of Detection, LoD) för Sofia RSV FIA fastställdes med hjälp av totalt fyra (4) RSV-stammar, två (2) RSV A-isolat och två (2) RSV B-isolat (Tabell 6). Tabell 6 Detekteringsgräns vid humana RSV A- och B-isolat Virusstam Minsta detekterbara nivå (TCID 50 /ml) RSV A RSV A Long 172 RSV B Washington/18537/62 27 RSV B CH93-18(18) 225 TCID 50/ml=50 % infektionsdos för vävnadsodling. TCID 50 nivåer fastställdes av Reed-Muench metoden. Sofia RSV FIA Sida 15 av 19

16 Analytisk reaktivitet kunde påvisas med hjälp av två (2) extra RSV B-stammar: West Virginiastam/14617/85 och RSV Varje stam gav positiva resultat vid eller över 142 TCID 50 /ml (WV) och 7 TCID 50 /ml (9320). Analytisk exakthet Korsreaktivitet Sofia RSV FIA utvärderades med hjälp av 32 bakteriella och fungala mikroorganismer och 42 icke- RSV virusisolat. Bakterie- och svampisolat utvärderades vid koncentrationer från 1.76 x x10 6 cfu/ml. Virusisolat utvärderades vid koncentrationer från 2.00x x10 7 TCID 50 /ml. Inga av de organismer eller icke-rsv-virus vid de koncentrationer som anges nedan i tabell 7 visade några tecken på korsreaktivitet i analysen. Provflödet och kontrollinjens framträdande påverkades inte heller. Tabell 7 Analytisk exakthet och korsreaktivitet Organism/Icke-RSV-virus Koncentration* Resultat Acinetobacter baumannii 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Bacteroides fragilis 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Bordetella pertussis 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Candida albicans (jäst) 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Corynebacterium diptheriae 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Escherichia coli 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Haemophilus influenzae 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Klebsiella pneumoniae 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Lactobacillus plantarum 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Legionella pneumophila 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Moraxella catarrhalis 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Mycobacterium avium 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Mycobacterium intracellulare 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Mycobacterium tuberculosis 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Mycoplasma pneumoniae 1.76x10 4 cfu/ml Negativt Neisseria meningitides 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Neisseria mucosa 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Neisseria sicca 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Neisseria subflava 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Pseudomanas aeruginosa 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Serratia marcescens 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Staphylococcus aureus 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Staphylococcus aureus (Cowen 1) 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Staphylococcus epidermidis 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Streptococcus mutans 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Streptococcus pneumoniae 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Streptococcus pyogenes 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Streptococcus sanguis 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Streptococcus sp. Grupp B 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Streptococcus sp. Grupp C 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Streptococcus sp. Grupp F 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Streptococcus sp. Grupp G 1.76x10 6 cfu/ml Negativt Sofia RSV FIA Sida 16 av 19

17 Organism/Icke-RSV-virus Koncentration* Resultat Adenovirus x10 5 TCID 50 /ml Negativt Adenovirus x10 4 TCID 50 /ml Negativt Adenovirus x10 5 TCID 50 /ml Negativt Adenovirus 7A 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt Adenovirus x10 5 TCID 50 /ml Negativt Coranavirus OC x10 5 TCID 50 /ml Negativt Coranavirus 229E 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt Coxsackievirus B5 (Faulkner) 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt Cytomegalovirus AD x10 5 TCID 50 /ml Negativt Cytomegalovirus Towne 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt ECHO-virus typ x10 5 TCID 50 /ml Negativt Herpes Simplex-virus x10 5 TCID 50 /ml Negativt Herpes Simplex-virus x10 5 TCID 50 /ml Negativt Humant metapneumovirus A1 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt Humant metapneumovirus A2 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt Humant metapneumovirus B1 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt Humant metapneumovirus B2 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt Humant metapneumovirus VR UIHC 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt Influensa A H1N1 (5 stammar) 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt Influensa A H3N2 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt Influensa B Hong Kong 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt Influensa B Panama 1.76x10 7 TCID 50 /ml Negativt Influensa C/Taylor/1233/ x10 5 TCID 50 /ml Negativt Mässling (Edmonston) 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt Påssjuka (Enders) 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt Parainfluensavirus x10 5 TCID 50 /ml Negativt Parainfluensavirus x10 5 TCID 50 /ml Negativt Parainfluensavirus x10 5 TCID 50 /ml Negativt Parainfluensavirus 4A 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt Parainfluensavirus 4B 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt Rhinovirus typ 1B 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativt Rhinovirus typ x10 5 TCID 50 /ml Negativt Rhinovirus typ x10 5 TCID 50 /ml Negativt Rhinovirus typ x10 5 TCID 50 /ml Negativt Rhinovirus typ x10 5 TCID 50 /ml Negativt Rhinovirus typ x10 5 TCID 50 /ml Negativt Rhinovirus typ x10 5 TCID 50 /ml Negativt Varicellazostervirus 2.69x10 4 TCID 50 /ml Negativt *Bakterienivåerna bestämdes genom att begränsa utspädningen, bakteriekulturen och koloniantalet för att generera cfu/ml (cfu=kolonibildningsenhet). Viruskoncentrationerna bestämdes enligt vanliga virologimetoder, Reed-Muench. Interfererande ämnen Helblod, mucin och flera receptfria produkter samt vanligt förekommande kemikalier utvärderades och man fann att de inte interfererar med Sofia RSV FIA vid de nivåer som testades (Tabell 8). Sofia RSV FIA Sida 17 av 19

18 Ämne [Aktiv ingrediens] Tabell 8 Ämnen som inte interfererar Koncentration Helblod 1 % Mucin Listerine Cool Mint munskölj [eukalyptol, mentol, metylsalicylat och tymol] Crest Pro-health munskölj [cetylpyridinklorid] 7 mg/ml 44 % 44 % Scope munskölj [cetylpyridinklorid] 44 % CVS Mentol [mentol] 26 % Halls Mentho-lyptus [mentol] 26 % Ricola [mentol] 26 % Vicks Sinex nasspray[oximetazolinhydroklor] 4-vägs snabbverkande nässpray [fenylefrinhydroklor] Equate snabbverkande nässpray [fenylefrinhydroklor] Acetamidofenol Acetylsalicylsyra Klorfeniramin Dextrometorfan Difenhydramin Guajakol Fenylefrin Rimantadin Albuterol 18 % 18 % 18 % 18 mg/ml 18 mg/ml 3 mg/ml 3 mg/ml 3 mg/ml 35 mg/ml 9 mg/ml 88 µg/ml 35 mg/ml HJÄLP Om du har några frågor om användningen av denna produkt eller om du vill rapportera ett problem med testsystemet kan du ringa till Quidels tekniska support på (gratis inom USA) eller måndag till fredag, mellan och normaltid vid Stillahavskusten. Om du befinner dig utanför USA kan du kontakta din lokala återförsäljare eller skriva till technicalsupport@quidel.com. REFERENSER 1. Red Book, American Academy of Pediatrics, 28:e upplagan (2009) pp Macartney K. et al. Nosocomial Respiratory Syncytial Virus Infections: The Cost-Effectiveness and Cost-Benefit of Infection Control. Pediatrics, 2000 sept; 106(3): Collins P., Chanock R., Murphy B. Fields Virology. Fjärde upplagan. Volym 1. Kapitel 45 Respiratory Syncytial Virus. Lippincot Williams and Wilkins (2001). 4. Thompson W. et al. Mortality Associated With Influenza and Respiratory Syncytial Virus in the United States. JAMA, 2003 januari; 289(2):184. Sofia RSV FIA Sida 18 av 19

19 5. Navas L., Wang E. et al. Improved outcome of respiratory syncytial virus infection in a high risk hospitalized population of Canadian children. Pediatric Investigators Collaborative Network on Infections in Canada. J Pediatr Sep; 121(3): Moler F.W. et al. Respiratory syncytial virus morbidity and mortality estimates in congenital heart disease patients: a recent experience. Crit Care Med Okt; 20(10): Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories, 5:e upplagan. U.S. Department of Health and Human Services, CDC, NIH, Washington, DC (2007) Sofia RSV FIA 25 Test MDSS GmbH Schiffgraben Hannover, Tyskland Quidel Corporation Worldwide Headquarters McKellar Court San Diego, CA USA quidel.com SV00 (08/12) Auktoriserad representant inom europeiska gemenskapen Katalognummer Positiv kontroll Negativ kontroll Satskod För in vitro-diagnostiskt bruk Konsultera bruksanvisningen CD-ROM Använd före Tillverkare Temperaturbegränsning Sofia RSV FIA Sida 19 av 19