Tentamen i Immunteknologi 23 maj 2007, 8-13

Tentamen i Immunteknologi 23 maj 2007, 8-13 1 Varje fråga ger maximalt 5 p, totalt 10 frågor. 2 SKRIV NMN OCH PERSONNUMMER PÅ LL SIDOR! (inklusive tentamensomslaget) 3 nvänd ett NYTT papper för varje fråga! 4 Glöm inte att fylla i och lämna in KURSUTVÄRDERINGEN! (2 separata blad)

Tentamen i Immunteknologi 23 maj 2007, 8-13 Varje fråga ger maximalt 5 p. (<25 p = underkänd, >25p = godkänd) OBS! nvänd ett nytt papper för varje fråga OBS! SKRIV NMN OCH PERSONNUMMER PÅ LL SIDOR! (inklusive tentamensomslaget) Glöm inte att lämna in KURSUTVÄRDERINGEN! (2 papper) FRÅG 1 Immunförsvaret agerar snabbt och specifikt för att ge oss ett skydd mot främmande ämnen. ) Definiera termerna epitop, antigen och immunogen? (1.5p) B) Ge ett exempel på det mest troliga sekundära lymfoida organ ett antigen kommer att dyka upp i om du blivit infekterad via blodbanan respektive luftvägarna? (1p) C) Ge 3 exempel på hur det medfödda immunförsvaret agerar för att ge oss ett försvar mot främmande ämnen? (1.5p) D) Vad är immunologiskt minne? (1p) FRÅG 2 Du har blivit infekterad av ett främmande ämne vars ursprung du är osäker på. ) Du analyserar immunförsvaret i detalj och upptäcker då att antigenet presenteras på MHC klass I. Vad säger det dig om antigenet och dess ursprung? (motivera kortfattat) (1p). B) Beskriv kortfattat 2 mekanismer som ditt immunförsvar troligen kommer att använda för att slå ut antigenet i punkt? (1.5p) C) Om du istället hade sett att antigenet hade presenterats på MHC klass II molekyler, vad hade det sagt dig dels om antigenet och dess ursprung, samt beskriv kortfattat 2 mekanismer om hur antiget då hade kunnat elimineras? (2.5p) FRÅG 3 Du arbetar som forskningschef på företagt VaciCure, och är ansvarig för att tillverka vaccin och antisera mot alla tänkbara ämnen. ) Definiera termerna vaccin samt vaccinering? (1p) B) Beskriv kortfattat 3 strategier för hur du skulle kunna tillverka ett vaccin mot en farlig mikroorganism? (1.5p) C) Vidare så har du fått en kort peptidkedja, 10 aminosyror lång i din hand, mot vilken du ska tillverka ett antisera i kanin. Beskriv kortfattat hur du skulle gå tillväga för att göra detta och motivera ditt tillvägagångssätt? (1p) D) Du vill sedan analysera peptidreaktiviteten hos ditt antisera från punkt C med hjälp av en icke-kompetitiv analysuppställning. Motivera kortfattat hur ett sådant typiskt analysdiagram skulle se ut (plotta signal vs koncentration) samt redogör för vilka reagenser du skulle behöva för att kunna köra analysen? (1.5p)

FRÅG 4 Du är en av Lunds ledande experter på B celler och antikroppar och intervjuas nu i Sydnytt angående dina kunskaper inom detta fält. ) Beskriv kortfattat vilka kontrollsystem kroppen har för att säkerställa att B cellen inte tillverkar antikroppar mot kroppsegna proteiner? (1.5p) B) Vad är ett germinalt center (GC), och beskrivs kortfattat två viktiga händelser som sker med B cellen i ett GC? (1.5p) C) Du isolerar de antikroppar och tillhörande B celler som en individ har producerat i svar mot ett antigen. Du ska nu fastställa om det var första eller andra gången den här individen träffade på antigenet. Beskriv två saker du kan studera för att avgöra denna fråga baserat på det material du har isolerat från individen? (2p) FRÅG 5 Du ska kartlägga funktionen av ett nytt normalstort (40 kda) mus protein, benämt RPX-1. För detta ändamål behöver din forskargrupp producera antikroppar som känner igen mus-rpx-1. Din kollega Olle har därför immuniserat 5 möss med proteinet för att producera antikroppar med hybridomteknologi. Han har därvid använt ett lämpligt adjuvant för att få ett starkt immunsvar. Efter att han fuserat B celler från immuniserade möss med tumörceller så hittar han inte ett enda hybridom som producerar antikroppar mot just mus-rpx-1. ) Efter att Olle har fuserat sina B-celler med tumörceller för att få hybridom så använde han en kemikalieblandning som förkortas HT i odlingsmediet. Beskriv kortfattat vad HT gör och varför man behöver använda sig av det? (1p). B) Vad är en rimlig immunologisk förklaring till varför Olle inte fick några specifika antikroppar riktade mot mus-rpx-1? (2p). C) Hur skulle du rekommendera Olle att gå tillväga för att producera antikroppar mot proteinet? (fagdisplayteknologi undantaget) (2p) FRÅG 6 Din avdelning har nyligen köpt in utrustning för flödescytometri (FCS) för analys av celler (dvs inte sortering). En kollega till dig känner inte till vad utrustningen kan användas till och kommer till dig med några frågor. ) Beskriv kortfattat hur en flödescytometer fungerar? (1.5p) B) nge 4 olika egenskaper hos en cell som man kan studera mha en flödescytometer? (1.5p) C) Vilken/vilka av nedanstående cell populationer (, B och C) motsvaras av T celler, B celler samt dendritiska celler och varför? (2p) CD3-PE CD80-PE CD86-PE CD8-PE B+C B+C B C MHC class II-FITC Fotnot: CD80=B7.1; CD86=B7.2 MHC class II-FITC IgM-FITC

FRÅG 7 Variabilitet och specificitet är två nyckelord i vårt immunförsvar. ) Beskriv kortfattat de 3 huvudmekanismer som gör det möjligt för en T cell att skapa den variablitet som behövs för dess T cells receptor? (1.5p) B) Du har en antikropp och en T cells receptor som är specifika för samma protein antigen. Beskriv kort två fundamentala skillnader i hur de känner igen antigenet? (1p) C) Du insjuknar akut och man upptäcker att du behöver en ny njure. För att du ska överleva transplanteras omedelbart en ny njure från en okänd donator. Inom kort får du ett immunsvar och din kropp stöter bort den nya njuren. Förklara kortfattat från en immunologisk synvinkel vad det är som händer? (1.5p) D) Beskriv kortfattat hur en makrofag känner igen om det är en bakterie eller inte den stöter på? (1p) FRÅG 8 Du har köpt in nya immunologiska reagenser till ditt laboratorium som ska analyseras och karaktäriseras. ) I första skedet så har du köpt in dels ett kanin antisera samt uppprenade mus monoklonala antikroppar båda riktade mot humant IgG. Du analyserar nu deras reaktivitet med hjälp av dubbel immunodiffusion enligt Ouchterlony. Du får följande resultat, se bild. Förklara kortfattat resultatet? (2p). 1 1 6 2 6 2 B 5 3 5 3 4 : kanin antisera 1: humant serum 2: upprenade humana IgG 3: hamster IgG 4: albumin 5: transferin 6: ovalbumin 4 B: mus monoklonal antikropp 1: humant serum 2: upprenade humana IgG 3: hamster IgG 4: albumin 5: transferin 6: ovalbumin B) Vidare, så har du köpt in två monoklonala mus antikroppar mot GI-22, ett humant protein, och du vill nu avgöra vilken som har bäst affinitet. Beskriv kortfattat en metod för att bestämma afffiniteten hos en antikropp? (1p) C) Du ska nu använda den bästa antikroppen i punkt B i terapeutiska syften. För att kunna utnyttja dess terapeutiska potential i människa så måste du dels förbättra affiniteten hos antikroppen, samt förbereda antikroppen så att du undviker tex HM. Beskriv kortfattat hur du uppnår dessa mål? (2p)

FRÅG 9 Överkänslighet, t.ex. allergi mot vanliga ämnen i vår omgivning blir allt vanligare i västvärlden. Ökad förståelse för de immunologiska processerna som ligger bakom symptomen är viktiga för att hitta nya teurapeutiska angreppssätt. ) Beskriv kortfattat vad som karaktäriserar överkänslighet typ 1 till 4? (2p) B) Du har producerat en massa (>50) antikroppar specifika för en rad olika antigen och bestämmer dig för att sätta upp en höghastighets metod för att screena ett stort antal prover (>100) på förekomsten av dessa allergen. Beskriv kortfattat principen för en lämplig metod för att kunna utföra denna analysen. (1p) C) Baserat på dina nyvunna kunskaper inom immunologi, kan du kortfattat beskriva ett tillvägagångssätt som du, ur en immunologisk synvinkel, skulle kunna använda dig av för att bota allergi? (2p) Fråga 10 ntigen-presenterande celler (PCs) tar upp och presenterar antigen för T celler. Namnge de tre huvudtyperna av PCs samt beskriv kortfattat likheter/skillnader i i) var dessa tre PCs är lokaliserade, ii) hur de tar upp antigen, samt iii) vilken typ av ag de tar upp, samt iv) andra möjliga funktioner hos dessa tre celltyper? (5p) Lycka till!

Minneslista: Christer kommer och svarar på eventuella frågor under tentan. Tentamen äger rum i Eden 26 (bakom Gamla Kirurgen) måndagen den 29 maj kl. 8.00-13.00. Ingen akademisk kvart. Ta med tejp och en lapp för att markera på dörren vilken verksamhet som äger rum där. Lägg före tentans början ut tentamensomslag och papper (minst 10/student) på de bänkar där eleverna (ca 25) skall sitta. Ta med papper och tentamensomslag till alla eleverna. Observera att det behövs minst 30 tentamensomslag och ca 400 papper (minst ett per elev och fråga) För en lista (namn och personnummer) på vilka som deltagit i tentamen. lla som deltagit i tentamen skall lämna in ett ifyllt tentamensomslag, även om de inte svarat på någon fråga. Kontrollera att eleverna har betalt terminsräkning senast när de lämnar in tentan. För en lista på att detta skett. Om detta inte kan ske för att terminsräkningen inte tagits med så skall eleverna komma upp på avdelningen och visa denna vid ett senare tillfälle. Det är alltså tillåtet att skriva tentan även om man inte har med sig terminsräkningen men resultatet kommer bara att registreras när de väl visat upp sin terminsräkning. Ingen får lämna in sin tenta före 9.00. Ingen får komma och börja tentera sedan någon lämnat in tentan och gått ifrån lokalen. Inga hjälpmedel utöver papper och penna är tillåtna. Ta med extra kursutvärderingar om någon elev glömt sina exemplar. Samla in kursutvärderingar. Be studenterna skriva ner sin e-post adress till vilken tenta resultatet kan skickas till!