1 (2) Kommunala livsmedelstillsynsmyndigheter Livsmedelslaboratorier som godkänts för analys av sådana myndighetsprover, som avses i livsmedelslagen PROJEKTET LISTERIA I KÖTTPRODUKTER SOM INGÅR I RIKSPROGRAMMET FÖR LIVS- MEDELSTILLSYNEN (EVO) 2012-2013 I s till livsmedelstillsynsmyndigheterna riktade anvisning 10502/1 Mikrobiologisk provtagning och analys av livsmedel rekommenderas att tillsynsmyndigheternas provtagning inriktas på väl planerade patogenprojekt. I bilaga 1 till del II punkt 1 Riksprogram för livsmedelstillsynen i det för år 2012 uppdaterade gemensamma programmet för tillsynen över miljö- och hälsoskyddet 2011-2014 presenteras projekten inom livsmedelstillsynen under den innevarande programperioden. Som ett riksomfattande projekt som hänför sig till patogener som orsakar matförgiftning har valts ett projekt som gäller listeria i köttprodukter. I projektet undersöks förekomsten av bakterien L. monocytogenes i köttprodukter som äts som sådana. L. monocytogenes är en betydande livsmedelspatogen i Finland. Huvuddelen av smittorna är sådana som erhållits i hemlandet. Om livsmedelskällorna som hänför sig till listeriosfallen och orsakerna till insjuknandena har ändå inte erhållits tillräckligt med information. Syftet med det riksomfattande projektet är att samla in information för kartläggning av smittkällorna till listerios. På senare år har erhållits tecken på att bakterien Listeria monocytogenes förekommit i ätfärdiga köttprodukter som konsumerats i Finland. Enligt rapporterna som de lokala laboratorierna levererat till Evira har bakterien L. monocytogenes då och då förekommit i ätfärdiga köttprodukter och dessutom har en del av de listeriastammar som laboratorierna levererat till Evira härstammat från denna produktkategori. År 2010 undersöktes i detaljhandeln i Finland vissa ätfärdiga produkter för en listeriakartläggning på EU-nivå, men då var mängden prover för Finlands del liten och i de köttprodukter som då undersöktes konstaterades inte några L. monocytogenes -bakterier.
2 (2) Listeria monocytogenes förintas i den upphettningsbehandling som ingår i framställningen av köttprodukter, men produkterna kan efterkontamineras under den bearbetning de genomgår efter upphettningen. Produkterna kontamineras ofta av sådana ytor, som de kommer i kontakt med, såsom skivarna. Platser som är svåra att rengöra och som samlar organiskt avfall bildar en tillväxtmiljö för bakterien L. monocytogenes. L. monocytogenes kan också bilda permanenta anläggningsstammar i produktionslokalerna. L. monocytogenes förmår föröka sig i vakuumförpackningar och i förpackningar med skyddande atmosfär och också i kylskåpstemperaturer. I den invasiva formen av listerios är dödligheten av storleksklassen 20-30 procent. Syftet med projektet och hur projektet genomförs Syftet med projektet är att utreda i vilken utsträckning bakterien L. monocytogenes förekommer i skivade köttpåläggsprodukter som säljs i Finland. För att en statistiskt tillförlitlig uppskattning skall erhållas är det av avgörande vikt att en tillräcklig mängd prover undersöks inom ramen för projektet. För att det nationella målet med projektet skall uppnås önskas därför att ännu flera kommuner deltar i projektet än vad som skulle vara att vänta utgående från den utförda preliminära deltagningsenkäten. De deltagande kommunerna kan också överväga att öka antalet prover som undersöks. Målet är att i hela landet undersöka minst 800 prover inom projektet. De kommunala livsmedelstillsynsenheterna ombes genomföra projektet inom sitt eget område och inrapportera resultaten till Evira. Evira svarar för planeringen av projektet och för inrapporteringen på riksplanet. Evira svarar inte för kostnaderna som hänför sig till provtagningen, analyserna eller kommunernas rapportering. Provtagningsperioden börjar i juni 2012 och fortsätter åtminstone till utgången av år 2013. En kommun kan för sin del genomföra projektet också under en kortare tidsperiod än detta. Det lönar sig att analysera redan enstaka prover, eftersom varje analysresultat ger värdefull information. Som prover tas ätfärdiga, skivade köttprodukter i detaljhandeln förpackade i vakuum eller i en skyddande atmosfär. Medvurstarna och leverkorvarna och leverpatéerna faller utanför projektet och sådana tas således inte som prov. Prover tas i jämn takt under provtagningsperioden. En detaljerad provtagningsanvisning till tillsynsmyndigheterna medföljer som bilaga 1. Bilagan 2 är en undersökningsremiss. De kompletterade uppgifterna i remissen behövs vid inrapportering av analysresultatet till Evira. Bilagan 3 är en anvisning till laboratorierna som undersöker prover inom projektet. Laboratorierna som undersöker proverna skall vara laboratorier som godkänts för myndighetsundersökningar. Bilagan 4 är en remiss till fortsatt undersökning för typbestämning av isolerade Listeria monocytogenes -stammar.
3 (2) De färdiga undersökningsresultaten som hänför sig till projektet och bakgrundsuppgifterna som hänför sig till proverna (utgående från undersökningsremissen) skall levereras till Evira på en elektronisk webropol-inrapporteringsblankett som öppnats för detta projekt: https://www.webropolsurveys.com/s/6ff2e218c001bcda.par. För varje enskild saluförpackning som tagits som prov fylls i en blankett. För att det skall vara möjligt att följa upp hur det sammanlagda antalet prover inom projektet växer, hoppas vi att resultaten inrapporteras allt eftersom sådana inkommer. Vi ber att de sista resultaten inrapporteras senast 31.3.2014. Vi ber att tillsynsmyndigheterna säkerställer att det undersökande laboratoriet sänder de isolerade L. monocytogenes -stammarna med bakgrundsuppgifter till Evira för fortsatta undersökningar. Instrueringen som hänför sig till projektet finns också på Eviras webbplats under: http://www.evira.fi/portal/se/livsmedel/tillverkning_och_forsaljning/tillsyn/undersokning ar_och_projekt/projektet+listeria+i+kottprodukter+-evo-+2012-2013/ På webbplatsen finns också bearbetbara versioner av undersökningsremissen och remissen till fortsatt undersökning (stamtypning). Mer information i frågor som hänför sig till projektet ger överinspektör Annika Pihlajasaari på Eviras enhet för livsmedelshygien (tfn 040 351 6884, e-post: annika.pihlajasaari@evira.fi). Vikarie för sektionschefen, Överinspektör Tuula Koimäki Överinspektör Annika Pihlajasaari För kännedom Regionförvaltningsverken Bilagor 1. Provtagningsanvisning 2. Undersökningsremiss 3. Anvisning till laboratorierna 4. Remiss till fortsatt undersökning / stamtypning
1 (1) BILAGA 1 PROVTAGNINGSANVISNING Projektet listeria i köttprodukter (EVO) 2012-2013 Tidpunkt Projektet genomförs under tidsperioden juni 2012 december 2013. Provtagningsplatser Prover tas i detaljhandeln. Hur prover tas Som prov tas ätfärdiga skivade köttprodukter (påläggschark) förpackade i vakuum eller i en skyddande atmosfär. Produkten kan vara såväl en köttprodukt av helt kött som en kokt korv. Köttprodukten skall vara värmebehandlad eller kallrökt och efter det ännu skivad innan den förpackats. Medvurstar och leverkorvar och patéer faller utanför projektet och sådana skall således inte tas som prov. Vikten på provet som analyseras skall vara minst 100 g (provenheten är en saluförpackning). Proverna tas slumpmässigt bland produkter som hålls framme i detaljhandeln. Som prover tas i första hand s.k. bulkvara dvs. sådana produkter från stora tillverkare som finns i detaljhandelsbutikerna. Som prov tas såväl inhemska som utländska produkter. Prover från små, ofta lokala producenter tas högst 10 % av den sammanlagda mängden prover. Förpackningen skall vara hel. Provförpackningen skall vara försedd med uppgifter om tillverkningslandet (identifieringsmärke), eventuell partiidentifikation, sista förbrukningsdatumet, förvaringstemperaturen, ingredienserna och andra uppgifter som skall kompletteras på provremissen. Om uppgifterna inte finns på förpackningen, skall representanten för detaljhandelsbutiken bes om de uppgifter som saknas. Om märkningarna på förpackningen är otydliga eller oläsliga, kan produkten inte tas som prov. Produktens temperatur mäts på provtagningsplatsen. Hur proverna undersöks Proverna undersöks helst såväl kvalitativt som kvantitativt. En kvantitativ undersökning inleds i varje fall åtminstone då resultatet av den kvalitativa analysen preliminärt är positivt. Proverna undersöks som myndighetsprover i ett laboratorium som Evira godkänt för utförande av myndighetsundersökningar och som har ackrediterade livsmedelsundersökningsmetoder för bestämning (såväl kvalitativ som kvantitativ) av bakterien L. monocytogenes. Proverna kan också undersökas i ett sådant laboratorium, där endast den kvalitativa metoden är ackrediterad, om laboratoriet har beredskap att sända provet till kvantitativ undersökning i ett sådant laboratorium, där denna metod är ackrediterad.
1 (1) BILAGA 2 UNDERSÖKNINGSREMISS Projektet listeria i köttprodukter (EVO) 2012-2013 Laboratoriets anteckningar Ankomstdatum och tid Dnr Förvaringstemperatur i laboratoriet Allmän information Myndighet som tagit provet (kommunal myndighet) Provtagarens namn och telefonnummer Provtagningsplatsens kommun och namn Provtagningsdatum och tid / 201 kl. Provets temperatur på provtagningsplatsen, C Information om provet Produktens handelsnamn Tillverkarens/förpackarens landkod (såsom FI) och nummer som framgår av identifieringsmärket Produktens tillverkares och/eller förpackares namn Produktens kötthalt, % Typ av förpackning Vakuum Skyddande atmosfär Av vilken djurarts (en eller flera) kött har köttprodukten tillverkats? Svin Nöt Kalkon Broilerkyckling Ren Annan, vad Sista förbrukningsdatum på förpackningen / 20 Tillverkningsdatum (om det märkts ut på förpackningen) / 20 Köttets ursprungsland (om det märkts ut på förpackningen) Beskrivning av produkten (om det inte framgår av handelsnamnet) Är produkten kallrökt? Ja Nej Förpackningsdatum (om det märkts ut på förpackningen) / 20 Partiidentifikation
1 (3) BILAGA 3 ANVISNING TILL LABORATORIERNA Projektet listeria i köttprodukter (EVO) 2012-2013 1 Hur proverna tas emot Laboratoriet - kontrollerar att provet är undersökningsdugligt: förvarat i kallt under hela transporten, förpackningen hel - antecknar ankomstdatumet, klockslaget och diarienumret på provtagnings- och rapporteringsblanketten som följer med provet - kontrollerar uppgifterna som provtagaren antecknat på remissblanketten och kompletterar den, om brister konstateras 2 Provernas undersökningstidpunkt och förvaring av proverna för undersökning Proverna undersöks sista förbrukningsdagen eller möjligast nära den. Om saluhållningstiden för en produkt som tagits som prov löper ut under ett veckoslut eller en nationell ledig dag, skall undersökningen av provet inledas den senaste arbetsdagen innan saluhållningstiden löper ut, ändå högst 4 dagar innan sista försäljningsdagen. Ända fram till undersökningstidpunkten förvaras proverna i en temperatur på högst 6 C och så nära den temperaturen som möjligt. Förvaringstemperaturen inrapporteras på resultatblanketten. 3 Sammansättning av provet och beredning av startsuspensionen För Listeria monocytogenes -analyser tas ett representativt prov på 100 150 gram. Provet tas av flera skivor. Vakuumförpackningen öppnas aseptiskt. Provet som skall undersökas finfördelas aseptiskt i en steril plastpåse med hjälp av en steril sax, en sked eller/och pincetter. Det finfördelade provet homogeniseras t.ex. genom omblandning med en steril sked och av provet vägs 10 g för kvantitativ analys (bestämning av antalet) av bakterien L. monocytogenes och 25 g för kvalitativ analys (påvisande). 4 L. monocytogenes -undersökningarna Såväl påvisandet som bestämningen av antalet inleds helst samtidigt. Alternativt kan bestämningen av antalet inledas först då man fått ett preliminärt positivt resultat med påvisningsmetoden. Då förvaras det kvarstående homogeniserade provet för bestämning av antalet i ett kylskåp som har en temperatur på högst 4 C. Om provet sänds för bestämning av antalet till ett annat laboratorium, fryses det kvarstående provet ned omedelbart och sänds för undersökning genast, om provet verifieras som positivt med påvisningsmetoden.
2 (3) Undersökningarna görs i enlighet med metodbeskrivningarna Evira 3463/6 och Evira 3477/3 (ISO 11290-1:1996, korrigeringsblad 1:2004, omarbetning; ISO 11290-2:1998, korrigeringsblad 1:2004, omarbetning / NMKL Nr 136, 5 utgåvan, 2010). Beskrivningarna finns på finska på webbplatsen: http://www.evira.fi/portal/fi/evira/esittely/toiminta/laboratoriotoiminta/vertailulaboratoriotoimi nta/ohjeita_laboratorioille/menetelma_ja_toimintaohjeet/. En del instruktioner finns på svenska på webbplatsen: http://www.evira.fi/portal/se/evira/presentation/verksamhet/laboratorieverksamhet/referens laboratorieverksamhet/instruktioner_till_laboratorierna/_instruktioner_om_metoderna/ Även NordVal-, AFNOR- eller AOAC-validerade och certifierade snabbmetoder (motsvarar validering enligt standard EN/ISO 16140) kan användas, om de möjliggör isolering av stammarna. Prover som konstaterats positiva med en snabbmetod verifieras i enlighet med metodbeskrivningen Evira 3463/6. 4.1 Påvisande av bakterien L. monocytogenes (Evira 3463/6) Som metodbeskrivningen Evira 3463/6 säger används ALOA- och LMBA-substrat som fasta, selektiva substrat. 4.2 Bestämning av bakterien L. monocytogenes (Evira 3477/3) Startspädningen (10 g + 90 ml = spädning 10-1 ) görs i en pepton- och saltlösning (0,1 % pepton och 0,85 % NaCl). Suspensionen homogeniseras i en Stomacher i 1/2-1 minuts tid och av den odlas 1 ml på 3 ALOA-plattor (diametern 90 mm) så att cirka 0,3 ml suspension odlas på varje av dem. Alternativt kan användas en stor platta (diametern 140 mm). Då blir bestämningsgränsen <10 cfu/g. Utöver det odlas 0,1 ml på en ALOA-platta, varvid man ännu kan bestämma halten 10 000-15 000 cfu/g (på en platta växer 100-150 cfu). Parallellplattor behöver inte odlas, eftersom man odlar på varandra följande spädningar (ISO 7218). Fortsätt i enlighet med metodbeskrivningen Evira 3477/3. 5 Hur isolerade L. monocytogenes -stammar sänds in till Evira för fortsatt undersökning Av varje positivt prov förvaras två L. monocytogenes -isoleringar, som efter att undersökningen i fråga blivit färdig åtföljda av uppgifter om provet (Eviras undersökningsremiss BI- LAGA 4) sänds till Eviras forskningsenhet för livsmedels- och fodermikrobiologi, Sektionen för livsmedelsmikrobiologi (Mustialagatan 3, 00790 Helsingfors) för sero- och genotypning. Om L. monocytogenes isoleras av provet med såväl påvisnings- som bestämningsmetoden, förvaras isoleringarna och sänds till Evira.
3 (3) Stammar sänds in på följande sätt: 1) sådana som påvisats positiva enbart med påvisningsmetoden en stam/aloa en stam/lmba 2) sådana som isolerats vid bestämning av antalet två stammar/aloa, varvid stammarna som isolerats med påvisningsmetoden inte behöver sändas in. 3) om endast en koloni växer på plattan med bestämningsmetoden, sänds en renodling av den in och utöver det också en isolering som gjorts med påvisningsmetoden. Stammarna skall åtföljas av en för projektet utarbetad remiss till fortsatt undersökning (BI- LAGA 4), på vilken laboratoriet fyllt i önskade uppgifter om provet. 6 Hur resultaten av undersökningen inrapporteras Resultaten av undersökningen levereras till den som sänt in provet, som vidarerapporterar resultaten till Evira. Resultaten för proverna som hänför sig till projektet skall inte inrapporteras via programmet Patogenix. Mer information ger: Tuula Johansson tuula.johansson@evira.fi tfn 050 435 1714
1 (2) BILAGA 4 REMISS TILL FORTSATT UNDERSÖKNING / STAMTYPNING Projektet listeria i köttprodukter (EVO) 2012-2013 Ankomstdatum Dnr Fyll i med maskin eller med tryckbokstäver. Tillsynsmyndighet som beställt undersökningen FO-nummer Adress Telefon Laboratorium som sänder bakteriestammen FO-nummer Adress Telefon Tillverkare av köttprodukten FO-nummer Adress Telefon Myndighetstillsynsprov ÖNSKAD UNDERSÖKNING / BAKTERIESTAMMAR Identifiering (vid behov) Serotypning Genotypning I stamsamlingen Datum Underskrift och namnförtydligande E-postadress
2 (2) REMISS TILL FORTSATT UNDERSÖKNING / STAMTYPNING Projektet listeria i köttprodukter (EVO) 2012-2013 Dnr Fyll i med maskin eller med tryckbokstäver Listeria monocytogenes -stammar och uppgifter om dessa Identifikation Undersökningsmetod/metoder Undersökningen inledd Undersökningen färdig Förvaringstemperatur i laboratoriet Konstaterad halt cfu/g Köttproduktens handelsnamn Parti och tillverkningsdatum Provtagningsdatum Provtagningsplats Ursprungsland Förpackningsdatum/ bäst före/sista förbrukningsdatum