B Onclarity HPV Assay

Transkript

1 B Onclarity HPV Assay (05) Svenska AVSEDD ANVÄNDNING BD Onclarity HPV Assay (HPV-analys) är ett amplifierat DNA-test för kvalitativ detektion av högrisktyper av humant papillomvirus (HPV). Analysen detekterar alla högrisktyper av HPV (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 och 68) och ger möjlighet att genotypa sex högrisktyper (HPV 16, 18, 31, 45, 51 och 52). Cervixprover som testas med BD Onclarity HPV-analys inbegriper BD Onclarity HPV Cervical Brush Collection Kit (BD set med cervixborstar för BD Onclarity HPV-analys), BD SurePath konserveringsvätska och PreservCyt lösning (med hjälp av en alikvot som avlägsnas före eller efter beredning för antingen BD SurePath eller ThinPrep Pap-test). BD Onclarity HPV-analys utförs med BD Viper LT-systemet. SAMMANFATTNING OCH FÖRKLARING Humant papillomvirus (HPV) är det vanligaste sexuellt överförda viruset i världen, och 50 % av alla sexuellt aktiva personer får genitalt HPV någon gång under livet. Människor vet ofta inte att de är infekterade och vidtar inga försiktighetsåtgärder för att förhindra spridning av viruset till andra. Det finns över 40 olika typer av HPV som kan infektera det genitala området. 1 I många fall är HPV-infektionen övergående och kroppen avlägsnar själv viruset. Men i vissa fall är viruset bestående och gör att normala celler blir onormala, vilket leder till cancer. Dessa onkogena HPV-typer klassificeras som hög risk, och omfattar HPV 16 och 18. Andra typer betraktas som låg risk eftersom de inte verkar orsaka cancer. Enligt Världshälsoorganisationen (WHO) är HPV det nästa största orsaken till att kvinnor dör i cancer i världen. Cirka kvinnor dör av detta varje år. Bara i Europa släcker sjukdomen omkring liv varje år. 2 Det uppskattas att nästan 70 % av all livmoderhalscancer orsakas av HPV-typerna 16 och Idag finns det pap-tester som kan informera läkaren om det finns cellförändringar på livmoderhalsen. Om dessa celler är onormala kan ett HPV-test göras för att avgöra om förändringarna på livmoderhalsen beror på en HPV-stam som kan leda till livmoderhalscancer. Inte alla molekylära analyser kan skilja mellan de olika typerna av HPV. BD Onclarity HPV-analys är, när den testas med BD Viper LT-systemet, en amplifierad DNA-analys för kvalitativ detektion av högrisktyper av humant papillomvirus (HPV). Analysen detekterar HPV-typerna (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 och 68) och ger samtidigt möjlighet att identifiera högrisktyperna 16 18, 31, 45, 51, 52 och andra högriskgenotyper som rapporteras efter genotypgrupp (P1: 33/58; P2: 56/59/66; P3: 35/39/68). Cervixprover som kan testas med BD Onclarity HPV-analys inbegriper BD SurePath konserveringsvätska (med användning av en alikvot som avlägsnas före eller efter beredning för BD SurePath paptest), PreservCyt lösning (med användning av en alikvot som avlägsnas före eller efter beredning för PreservCyt pap-test) och BD Onclarity HPV Cervical Brush Collection Kit (set med cervixborstar för BD Onclarity HPV-analys). PRINCIPER FÖR METODEN BD Onclarity humant papillomvirusanalys (HPV) är utformad för användning med BD SurePath konserveringsvätska (med användning av en alikvot som avlägsnas före eller efter beredning för BD SurePath pap-test), PreservCyt lösning (med användning av en alikvot som avlägsnas före eller efter beredning för PreservCyt pap-test) och BD Onclarity HPV Cervical Brush Collection Kit (set med cervixborstar för BD Onclarity HPV-analys), lämpliga reagenser, BD Viper LT-systemet samt BD FOX-extraktion. Proverna genomgår ett förvärmningssteg i BD Pre-warm Heater för att homogenisera matrisen, lysera cellerna och frisätta DNA som kan extraheras och amplifieras. När proverna har svalnat laddas de i BD Viper LT-systemet som sedan utför alla de steg som krävs för extraktion och amplifiering av mål-dna utan vidare åtgärd från användaren. Provet överförs till ett extraktionsrör som innehåller järnoxidpartiklar i upplösbar film. Sedan tillsätts syra för att sänka ph-värdet och inducera en positiv laddning på järnoxiden, vilket i sin tur binder det negativt laddade DNA. Partiklarna och det bundna DNA dras sedan mot sidorna av extraktionsröret av magneter och det bearbetade provet aspireras till avfall. Partiklarna tvättas och en elueringsbuffert med högt ph-värde tillsätts för att eluera renat DNA. En neutraliseringsbuffert används slutligen för att göra ph-värdet i eluatet optimalt för amplifiering av mål- DNA. BD Onclarity HPV-analys bygger på simultan amplifiering och detektion av mål-dna, med hjälp av amplifieringsprimers och fluorescensmärkta detektorprober med användning av en polymeraskedjereaktion (PCR) i realtid. Reagenserna torkas i tre provrör (G1, G2 och G3) som kan detektera de 14 HPV-genotyperna och en intern kontroll härledd från provet bestående av ett DNAfragment från den humana betaglobingenen. Varje provrör innehåller de amplifieringsprimers, flourescensmärkta detektorprober, DNA-polymeras, nukleotider och övriga reagenser som krävs för amplifiering för respektive analys. BD Viper LT-systemet pipetterar en del av den renade DNA-lösningen från varje extraktionsrör till de tre BD Onclarity HPV PCR-rören (G1, G2 och G3) som därefter förseglas för att förhindra kontamination. Närvaro eller frånvaro av HPV-DNA fastställs genom PCR-cykeln, under vilken signalen korsar ett i förväg fastställt tröskelvärde. Dessutom extraherar, amplifierar och detekterar analysen ett fragment av den humana betaglobingenen som en intern kontroll för att utvärdera beredningen, extraktionen och amplifieringen av provet. REAGENSER OCH MATERIAL SOM MEDFÖLJER: Varje BD Onclarity HPV-analysreagensförpackning innehåller: BD Onclarity HPV G1 PCR-rör, 2 x 96: varje G1 PCR-rör innehåller cirka 32,5 pmol oligonukleotider, 20 pmol fluorescensmärkta detektorprober, 80 nmol dntps samt 0,52 enheter DNA-polymeras med stabiliseringsmedel och buffertkomponenter. BD Onclarity HPV G2 PCR-rör, 2 x 96: varje G2 PCR-rör innehåller cirka 42,5 pmol oligonukleotider, 30 pmol fluorescensmärkta detektorprober, 80 nmol dntps samt 0,52 enheter DNA-polymeras med stabiliseringsmedel och buffertkomponenter. BD Onclarity HPV G3 PCR-rör, 2 x 96: varje G3 PCR-rör innehåller cirka 42,5 pmol oligonukleotider, 25 pmol fluorescensmärkta detektorprober, 80 nmol dntps samt 0,52 enheter DNA-polymeras med stabiliseringsmedel och buffertkomponenter. OBS! Varje påse innehåller en påse med torkmedel. 1

2 Control Set for the BD Onclarity HPV Assay: 24 rör med BD Onclarity HPV Positive Control med cirka kopior av HPV 16 lineariserad plasmid, kopior av HPV 18 lineariserad plasmid, kopior av HPV 56 lineariserad plasmid och kopior av plasmid som innehåller en human betaglobingensekvens i carriernukleinsyra och rör med BD Onclarity HPV Negative Control med endast carriernukleinsyra. Koncentrationerna av carriernukleinsyra och plasmider fastställs med UV-spektrofotometri. BD Onclarity HPV Liquid Based Cytology Specimen (LBC) Diluent Tubes: 400 rör som vardera innehåller ca 1,7 ml kaliumfosfat/ kaliumhydroxidbuffert med DMSO och konserveringsmedel. BD FOX PCR Extraction Tubes: 48 remsor med 8 rör som vardera innehåller cirka 10 mg järnoxid i en upplösbar film. BD Viper PCR Extraction Reagent Trough with Piercing Tool: varje extraktionsreagenstråg med 5 håligheter innehåller cirka 16,5 ml bindande syra, 72,5 ml tvättbuffert, 25,4 ml elueringsbuffert, 19,4 ml neutraliseringsbuffert med konserveringsmedel och 15,5 ml avfallsneutraliseringslösning. Instrument, utrustning och material Tillhandahållet material: BD Onclarity HPV Cervical Brush Collection Kit, BD Viper LT-instrument, BD Viper LT Instrument Plates (instrumentplattor), BD Viper LT Pipette Tips (pipettspetsar), BD Viper LT Solid Waste Liners (innerbehållare för fast avfall), BD Viper LT System PCR Tube/Tray Kit, (PCR-rör/bricksats för BD Viper LT-systemet), BD Viper LT System PCR Accessory Kit (PCRtillbehörssats för BD Viper LT-systemet), BD Viper Pre-warm Heater, BD Viper LT Specimen Rack (provställ), BD Viper Neutralization Pouches (neutraliseringspåsar), provrör och lock för användning i BD Viper-systemet (extraherat läge), BD ProbeTec Chlamydia trachomatis/neisseria gonorrhoeae (CT/GC) Amplified DNA Assay Endocervical Specimen Collection and DRY TRANSPORT Kit (Chlamydia trachomatis/neisseria gonorrhoeae (CT/GC) sats för amplifierad DNA-analysprovtagning och TORR TRANSPORT). Material som krävs men ej medföljer, att användas med BD Onclarity set med cervixborstar för HPV-analys eller manuell överföring av alikvot från LBC: Nitrilhandskar, förskjutningspipetter, aerosolresistenta pipettspetsar av polypropylen som klarar att avge 0,5 ± 0,05 ml, vortexmixer, 0,5 % (volym/volymprocent) natriumhypoklorit, 1 % (volym/volymprocent) natriumhypoklorit, 3 % (vikt/volym) väteperoxid, isopropylalkohol samt nukleasfritt molekylärbiologiskt graderat vatten. Material som krävs men ej medföljer för automatiskt utförd överföring av alikvot från LBC med hjälp av BD Totalys MultiProcessor men ej medföljer: BD Totalys MultiProcessor, BD Syringing Pipettes (sprutpipetter), vortexblandare, handskar. Krav för förvaring och hantering: BD Onclarity LBC spädningsmedel och BD Onclarity HPV spädningsmedel för cervixborste ska förvaras vid 2 25 C. Alla andra reagenser kan förvaras vid 2 33 C. Oöppnade reagenspack är hållbara fram till utgångsdatum. Efter att påsen öppnats är PCR-rören hållbara i 4 veckor, förutsatt att påsen är ordentligt försluten, eller fram till utgångsdatum, beroende på vilket som inträffar först. Får inte frysas. Varningar och försiktighetsbeaktanden 1. Avsedd för in vitro-diagnostik. 2. Patogena mikroorganismer, inklusive hepatitvirus och humant immunbristvirus, kan förekomma i kliniska prover. Allmänna försiktighetsbeaktanden 4-7 och institutionens riktlinjer bör följas vid hantering av alla föremål som kontaminerats med blod eller andra kroppsvätskor. För ytterligare specifika varningar, försiktighetsbeaktanden och anmärkningar beträffande BD Viper LT, hänvisas till BD Viper LT-systemets användarhandbok. Prov: 3. För vätskebaserade cytologiprover ska endast BD Onclarity HPV LBC spädningsrör användas. 4. Använd endast BD Onclarity set med cervixborstar för HPV-analys för prover som skall tas med cervixborste. 5. För optimalt resultat vid användning av BD Onclarity HPV-analys krävs att provtagning, hantering och transport av proverna utförs korrekt. 6. Minska risken för onödig blödning genom att inte rotera cervixborsten för mycket under provtagningen. 7. Varje prov som lämnas till laboratoriet ska vara korrekt märkt. 8. Var försiktig när du bryter av skaftet på cervixborsten så att det inte stänker, spiller eller bildar aerosoler. Undvik att kontaminera cervixborstens huvud. 9. Var noga med att undvika korskontamination när provet hanteras. Se till att behållare med provtagningsmaterial inte kommer i kontakt med varandra och kassera använt material utan att förflytta det över öppna behållare. Om handskarna kommer i kontakt med provmaterialet ska de bytas så att korskontaminering undviks. 10. Om LBC-prover ej dispenseras med tillräcklig mängd eller dispenseras för mycket i BD Onclarity HPV LBC-spädningsrör kan detta påverka analysens prestanda. Om rören fylls för mycket kan detta även orsaka vätskespill på BD Viper LT:s instrumentbord och orsaka kontamination. 11. Cervixprover måste tas och testas före utgångsdatum för BD Onclarity HPV LBC spädningsrör eller BD Onclarity HPV spädningsrör för cervixborste. 12. Vid manuell överföring, använd endast aerosolresistenta pipettspetsar av polypropylen för att överföra proverna till BD Onclarity HPV LBC-spädningsrören. 13. Vid automatiskt utförd överföring ska endast BD Totalys MultiProcessor användas för att överföra BD SurePath LBC-prover till BD Onclarity HPV LBC-spädningsrören. Analys/reagens: 14. BD Onclarity HPV positiva och negativa kontroller måste förvärmas inom 24 timmar från hydreringen. 15. Använd endast prov- och kontrollrör med punkterbara lock i BD Viper LT-systemet. Avlägsna inte punkterbara lock innan instrumentet körs. Se till att byta ut eventuella punkterade lock mot nya punkterbara lock innan instrumentet körs. 16. Byt inte ut och blanda inte reagenser från satser med olika partinummer. 2

3 17. Testa inte BD Onclarity HPV spädningsrör för cervixborste om det mottagits på laboratoriet utan borsten. Ett falskt negativt testresultat kan annars erhållas. 18. Använd endast BD Viper LT pipettspetsar tillhandahållna av BD med BD Viper LT-systemet. 19. BD Viper PCR-extraktionsreagenstråg med håltagningsverktyg Fara H302 Skadligt vid förtäring. H314 Orsakar allvarliga frätskador på hud och ögon. H318 Orsakar allvarliga ögonskador. P260 Inandas inte damm/rök/gaser/dimma/ångor/sprej. P280 Använd skyddshandskar/skyddskläder/ögonskydd/ansiktsskydd. P303+P361+P353 VID HUDKONTAKT (även håret): Ta omedelbart av alla nedstänkta kläder. Skölj huden med vatten/ duscha. P304+P340 VID INANDNING: Flytta personen till frisk luft och se till att andningen underlättas. P405 Förvaras inlåst. P501 Innehållet/behållaren ska kasseras i enlighet med lokala/regionala/nationella/internationella bestämmelser. 20. Använd endast BD Viper LT Clear Plate Sealers (genomskinliga svarta plattförseglare) på PCR-rören med BD Viper LT-systemet. 21. Reagenspåsar med oanvända PCR-rör MÅSTE förslutas noggrant efter att de öppnats. Kontrollera att torkmedlet finns med innan reagenspåsarna försluts. 22. PCR-rören MÅSTE vara ordentligt förseglade med BD Viper LT genomskinliga plattförseglare innan plattan flyttas från BD Viper LT-systemet. Förseglingen säkerställer en sluten reaktion för amplifiering och detektion och är nödvändig för att undvika att instrumentet och arbetsområdet kontamineras med amplifieringsprodukter. Förseglingsmaterialet får inte vid något tillfälle avlägsnas från PCR-rören. 23. För att förhindra att arbetsområdet kontamineras med amplifieringsprodukter ska avfallspåsarna som medföljer BD Viper LT System PCR Accessory Kit (tillbehörssats för PCR) användas för kassering av använda PCR-rör. Kontrollera att påsarna är ordentligt förslutna innan de kasseras. 24. Även om särskilt avdelade arbetsområden inte behövs eftersom BD Viper LT-systemets design reducerar risken för kontaminering med amplifieringsprodukter i testområdet, krävs dock andra försiktighetsåtgärder för att förhindra kontaminering, i synnerhet kontaminering av prover under hantering. 25. BYT HANDSKAR om de kommer i kontakt med prover eller blir våta, så att kontaminering av andra prover undviks. Byt även handskar innan du lämnar arbetsområdet samt när du kommer in i arbetsområdet. 26. Se användarhandboken till BD Viper LT-systemet för specifika anvisningar om rengöring i händelse av kontamination. 27. Kontakta BD Teknisk service och support om det händer något ovanligt, till exempel spill i BD Viper LT-instrumentet eller DNA- kontaminering som inte kan avlägsnas genom rengöring. PROVTAGNING OCH TRANSPORT AV PROVER Cervixprover som kan testas med BD Onclarity HPV-analys inbegriper BD Onclarity HPV provtagningssats för cervixborste, BD SurePath konserveringsvätska (med användning av en alikvot som avlägsnas före eller efter beredning för BD SurePath paptest) och PreservCyt lösning (med användning av en alikvot som avlägsnas före eller efter beredning för ThinPrep pap-test). För inrikes eller utrikes försändelser ska proverna märkas i enlighet med gällande statliga och internationella bestämmelser avseende transport av kliniska prover och etiologiska agens/smittsamma ämnen. Angiven förvaringstid och temperatur ska iakttas under hela transporten. Provtagning MED cervixborste 1. För in BD Onclarity HPV-cervixborste i endocervix tills bara borstens nedersta strån är synliga vid mynningen. Rotera sakta ¼ till ½ varv i en riktning. Minska risken för onödig blödning genom att inte rotera borsten för mycket. 2. Ta av locket från BD Onclarity HPV Cervical Brush Diluent-röret och placera omedelbart borsten i botten på röret. 3. Bryt försiktigt av skaftet vid skåran. Undvik att stänka innehållet. 4. Sätt på locket ordentligt på röret. FÖRVARING OCH TRANSPORT AV PROVER PÅ CERVIXBORSTE Proverna på cervixborste i BD Onclarity HPV spädningsrör för cervixborste måste förvaras och transporteras till laboratoriet och/ eller analysplatsen inom 30 dagar efter provtagning om de förvaras vid 2 30 C inom 180 dagar efter provtagning om de förvaras vid 2 8 C, eller inom 180 dagar efter provtaging om de förvaras frysta vid -20 C. Prover ska inte förvaras eller transporteras efter utgångsdatumet för spädningsröret för cervixborste. LBC-PROVTAGNING BD SurePath- eller PreservCyt-prover måste tas antingen med en cervixborste eller med en kombinerad borste/spatel enligt beskrivning i bipacksedeln till BD SurePath eller PreservCyt. När BD SurePath- eller PreservCyt-prover har tagits kan de sparas och transporteras i sina originalflaskor upp till 30 dagar vid 2 30 C, 180 dagar vid 2 8 C eller 180 dagar om de förvaras frysta vid -20 C före överföring till BD Onclarity HPV LBC-provspädningsrören. 3

4 TRANSPORT OCH FÖRVARING AV LBC-PROVER LBC-provöverföring till BD Onclarity HPV LBC spädningsrör före eller efter avlägsnande av en alikvot för beredning för antingen BD SurePath- eller ThinPrep test. En alikvot på 0,5 ml av antingen BD SurePath- eller PreservCyt-prov överförs från originalflaskan till BD Onclarity HPV LBC spädningsrör före eller efter beredning för antingen BD SurePath- eller ThinPrep-pap-test. Använd handskar vid hantering av BD Onclarity HPV LBC provspädningsrör och BD SurePath eller PreservCyt-provflaskan. Om handskarna kommer i kontakt med prover ska de omedelbart bytas för att undvika kontaminering av andra prover. Manuell BD SurePath-provöverföring före eller efter beredning för BD SurePath-testet OBS! Se instruktionerna i bipacksedeln till BD PrepStain Slide Processor (objektglasprocessor) eller BD Totalys SlidePrep om hur en alikvot tas ut ur BD SurePath-provflaskan innan BD SurePath liquid-based Pap test (vätskebaserat Pap-test) utförs. OBS! Hantera ett prov i taget för beredning. 1. Märk ett BD Onclarity HPV LBC spädningsrör med patientens identifieringsuppgifter. 2. Ta av locket från BD Onclarity HPV LBC spädningsröret. 3. Vortexblanda BD SurePath-provflaskan i s för att säkerställa en homogen blandning. 4. Överför snabbt 0,5 ml från provflaskan med en aerosolbeständig spets till BD Onclarity HPV LBC spädningsröret inom en minut efter vortexblandningen. 5. Kassera pipettspetsen. OBS! En ny pipettspets måste användas för varje prov. 6. Dra åt locket till BD Onclarity HPV LBC spädningsröret ordentligt. 7. Vänd BD Onclarity HPV LBC spädningsröret 3 4 gånger så att prov och spädningsvätska blandas ordentligt. Automatiskt utförd BD SurePath-provöverföring med hjälp av BD Totalys MultiProcessor före eller efter beredning för BD SurePath-testet 1. Se bruksanvisningen för BD Totalys MultiProcessor för anvisningar om hur man tar bort en alikvot från BD SurePath insamlingsflaska. 2. Se bipacksedeln för BD Onclarity HPV LBC spädningsrör för anvisningar om insättning av BD Onclarity HPV LBC spädningsröret i MultiProcessor för automatsikt utförd överföring av alikvot. Manuell PreservCyt-provöverföring före eller efter beredning för ThinPrep Pap-testet OBS! Se tillägget i användarhandboken till ThinPrep 2000/3000-systemet för instruktioner om avlägsnande av en alikvot från PreservCyt-provflaskan innan ThinPrep-testet utförs. OBS! Hantera ett prov i taget för beredning. 1. Märk ett BD Onclarity HPV LBC spädningsrör med patientens identifieringsuppgifter. 2. Ta av locket från BD Onclarity HPV LBC spädningsröret. 3. Vortexblanda PreservCyt-provflaskan med hög hastighet i 8 12 s för att säkerställa en homogen blandning. 4. Överför omedelbart 0,5 ml från provflaskan med en aerosolbeständig spets till BD Onclarity HPV LBC spädningsröret. 5. Kassera pipettspetsen. OBS! En ny pipettspets måste användas för varje prov. 6. Dra åt locket till BD Onclarity HPV LBC spädningsröret ordentligt. 7. Vänd BD Onclarity HPV LBC spädningsröret 3 4 gånger så att prov och spädningsvätska blandas ordentligt. Förvaring och transport av prover som överförts till BD HPV LBC-spädningsrören Efter överföring till ett BD Onclarity HPV LBC-spädningsrör kan de utspädda proverna förvaras vid 2 30 C i upp till 15 dagar, eller i upp till 90 dagar om de förvaras vid -20 C. BEREDNINGSFÖRFARANDE FÖR ALLA PROVER OBS! Om proverna är frysta, se till att de har tinats fullständigt i rumstemperatur och blandats genom att vändas upp och ned innan du fortsätter. 1. Använd rapporten Tube Layout (Provrörslayout) och placera proverna i rätt ordning i BD Viper LT-provstället och lås fast. 2. Proverna är nu klara att förvärmas. 3. Byt handskar innan du fortsätter, så att kontaminering undviks. Beredning av kvalitetskontroll 1. Ta av locket på en negativ BD Onclarity HPV-kontroll och ett rör med BD Onclarity HPV LBC Diluent. 2. Häll hela innehållet i röret med BD Onclarity HPV LBC Diluent i den negativa BD Onclarity HPV-kontrollen. 3. Sätt på locket på den rehydrerade negativa BD Onclarity HPV-kontrollen. Sätt på locket på och kassera det tomma röret med BD Onclarity HPV LBC Diluent. 4. Ta av locket på en positiv BD Onclarity HPV-kontroll och ett rör med BD Onclarity HPV LBC Diluent. 5. Häll hela innehållet i röret med BD Onclarity HPV LBC Diluent i den positiva BD Onclarity HPV-kontrollen. 6. Sätt på locket på den rehydrerade positiva BD Onclarity HPV-kontrollen. Sätt på locket på och kassera det tomma röret med BD Onclarity HPV LBC Diluent. 4

5 7. Använd provrörslayoutrapporten och placera den rehydrerade negativa BD Onclarity HPV-kontrollen i den korrekta positionen i BD Onclarity LT-provstället. 8. Använd provrörslayoutrapporten och placera den rehydrerade positiva BD Onclarity HPV-kontrollen i den korrekta positionen i BD Onclarity LT-provstället. 9. Kontrollerna är nu klara att förvärmas tillsammans med proverna. OBS! Kontrollerna måste förvärmas inom 24 timmar efter hydreringen. FÖRVÄRMNINGSFÖRFARANDE OBS! Förvärmningsförfarandet måste utföras på alla prover för att säkerställa att provmatrisen är homogen innan proverna placeras i BD Viper LT-system. Om proverna inte förvärms kan detta ha en negativ påverkan på prestandan hos BD Onclarity HPVanalysen och/eller BD Viper LT-systemet. OBS! Kylda eller frysta prover måste tinas helt i rumstemperatur innan de förvärms. 1. Sätt i BD Viper LT-provstället i BD Pre-warm-värmaren och välj förvärmningsprotokollet för BD Onclarity HPV-analys på BD Viper LT-instrumentet. 2. BD Pre-warm Heater förvärmer automatiskt proverna och kontrollerna enligt förvärmningsprotokollet för BD Onclarity HPV-analys. 3. När förvärmningsprotokollet för BD Onclarity HPV-analys har slutförts ska du avlägsna stället från värmaren och sätta in det i BD Viper LT-instrumentet. 4. Se testförfarandet för testning av prover och kontroller. 5. Efter förvärmning kan proverna förvaras i upp till 7 dagar vid 2 30 C eller i upp till 30 dagar vid -20 C utan ytterligare förvärmning innan de analyseras i BD Viper LT-systemet. 6. Efter förvärmning kan kontrollerna förvaras i upp till 24 timmar vid 2 30 C utan ytterligare förvärmning innan de analyseras i BD Viper LT-systemet. TESTFÖRFARANDE Se användarhandboken till BD Viper LT-systemet för specifika anvisningar om användning och underhåll av systemets komponenter. Optimala miljövillkor för HPV analysen befanns vara C och % relativ fuktighet. KVALITETSKONTROLL Kvalitetskontroll måste utföras i enlighet med gällande lokala och/eller statliga bestämmelser eller ackrediteringskrav samt laboratoriets fastställda förfaranden för kvalitetskontroll. Det rekommenderas att användaren konsulterar gällande CLSI-riktlinjer och CLIA-föreskrifter för lämpliga kvalitetskontrollförfaranden. Kontrollsatsen for BD Onclarity HPV-analys tillhandahålls separat. En positiv och en negativ kontroll måste inkluderas i varje analysomgång samt för varje nytt reagenspartinummer. Kontrollerna måste placeras i enlighet med användarhandboken till BD Viper LT-systemet. Den positiva HPV-kontrollen används endast för att övervaka större reagensfel. Den negativa HPV-kontrollen används för att övervaka kontaminering av reagens och/eller omgivning. Ytterligare kontroller kan analyseras i enlighet med riktlinjer eller krav utfärdade av lokala, statliga och/eller kommunala myndigheter eller ackrediteringsorganisationer. Allmän kvalitetskontrollinformation om BD Viper LT-systemet: PCR-rörens placeringar visas på en färgmärkt plattlayoutskärm på LCD-skärmen. Plussymbolen (+) inuti röret anger det positiva kvalitetskontrollprovet. Minussymbolen (-) inuti röret anger det negativa kvalitetskontrollprovet. Ett kvalitetskontrollpar måste loggas in för varje reagenskitpartinummer. Om kvalitetskontrollparen inte har loggats in visas en meddelanderuta som gör att stället inte kan sparas och det inte går att fortsätta. Ytterligare (valfria) kvalitetskontrollrör för analys kan loggas in. Dessa rör testas som valiga prover och påverkar inte statusen godkänd/ej godkänd för analysomgången. Se användarhandboken för BD Viper LT-systemet för anvisningar. OBS! BD Onclarity HPV-kontrollerna måste rehydreras innan de laddas i BD Viper LT Specimen Rack (provstället). Tolkning av kvalitetskontrollresultat: För att patientresultaten skall kunna erhållas måste den positiva och den negativa BD Onclarity HPV-kontrollen utfalla respektive negativt. Om resultaten för kontrollerna inte utfaller som förväntat betraktas analysomgången som ogiltig och patientresultaten rapporteras inte av instrumentet. Om någon av kontrollerna inte ger de förväntade resultaten ska hela omgången upprepas med en ny uppsättning kontroller, nya extraktionsrör, nytt extraktionsreagenstråg och nya PCR-rör. Kontakta närmaste BD tekniska service och support för ytterligare information om problemet inte går att lösa. 5

6 Tabell 1: Tolkning av kvalitetskontrollresultat Kontrolltyp Symbol för rapport om rörresultat Utfall av kvalitetskontroll BD Onclarity HPV positiv kontroll OK Godkänd BD Onclarity HPV positiv kontroll BD Onclarity HPV positiv kontroll BD Onclarity HPV positiv kontroll Ej godkänd Ej godkänd Ej godkänd BD Onclarity HPV negativ kontroll OK Godkänd BD Onclarity HPV negativ kontroll BD Onclarity HPV negativ kontroll BD Onclarity HPV negativ kontroll Ej godkänd Ej godkänd Ej godkänd Se Tolkning av testresultat för en beskrivning av symboler som förekommer i provrörsresultatrapporten. TOLKNING AV TESTRESULTAT Vid BD Onclarity HPV-analys används en polymeraskedjereaktion i realtid för att detektera närvaro av humant papillomvirus (HPV) i kliniska prover. Alla beräkningar utförs automatiskt av BD Viper LT-programmet. Närvaro eller frånvaro av kliniskt relevant HPV-DNA fastställs genom PCR-cykeln (Ct), under vilken signalen korsar ett i förväg fastställt tröskelvärde. Analysen extraherar, amplifierar och detekterar ett fragment av den humana betaglobingenen som en intern kontroll för att utvärdera beredningen, extraktionen, amplifieringen av provet samt indikera närvaro av PCR-hämmare. Om den HPV-specifika signalen överskrider ett tröskelvärde i cykeln används den interna kontrollen av algoritmen vid tolkningen av resultatet. Om den HPV-specifika signalen är mindre än eller lika med ett tröskelvärde i cykeln ignoreras den interna kontrollen av algoritmen. För HPV-prover visas ett HR -resultat (kombinationen av alla genotyper) på rapporten Tube Result (Provrörsresultat). En positiv symbol i denna kolumn betyder att en eller flera av de genotyper som HPV-analys kan detektera hade ett resultat. Kolumnen GT används för att rapportera resultat för genotyper som inte är tillgängliga i din region. Dessa resultat kan inte köpas. Specifika genotyper och kombinerade genomtyper visas i kolumnerna. Om resultat för en genotyp har köpts rapporteras dessa resultat på det sätt som förklaras nedan. Om resultaten för en genotyp inte har konfigurerats för automatiska inköp markeras dessa resultat med ikonen nyckeln. Instrumentet kan konfigureras så att det köper/rapporterar specifika genotyper när analysomgången är klar. Se användarhandboken till BD Viper LT-systemet för anvisningar om auktorisation av automatisk rapportering av genotyper. Om förväntade analyskontrollresultat inte erhålls rapporteras inte patientresultaten. Se avsnittet om kvalitetskontroll för information om förväntade kontrollvärden. De rapporterade resultaten bestäms enligt följande: Tabell 2: Tolkning av testresultat för HPV-genotyper med hög risk för BD Onclarity HPV-analys Högrisk-HPV-resultat Tolkning Resultat HR Positivt för HPV-typer med hög risk HPV HR- HR Negativt för HPV-typer med hög risk HPV HR-negativt HPV-DNA ej detekterbart (om närvarande). HPV-DNA ej detekterbart (om närvarande). HPV-DNA ej detekterbart (om närvarande). HPV-DNA ej detekterbart, om närvarande. Internt kontrollfel Extraktionsöverföring misslyckades Fel på vätskenivå Fel 6

7 Tabell 3: Tolkning av testresultat för specifika HPV-genotyper med hög risk för BD Onclarity HPV-analysen HPV-genotypresultat Tolkning Resultat 16 Positivt för HPV-typ 16 Positivt för HPV-typ Negativt för HPV-typ 16 Negativt för HPV-typ Positivt för HPV-typ 18 Positivt för HPV-typ Negativt för HPV-typ 18 Negativt för HPV-typ Positivt för HPV-typ 45 Positivt för HPV-typ Negativt för HPV-typ 45 Negativt för HPV-typ 45 P1 Positivt för HPV-typ 33 och/eller 58 Positivt för HPV-typ 33 och/eller 58 P1 Negativt för HPV-typ 33 och/eller 58 Negativt för HPV-typ 33 och/eller Positivt för HPV-typ 31 Positivt för HPV-typ Negativt för HPV-typ 31 Negativt för HPV-typ 31 P2 Positivt för HPV-typ 56, 59 och/eller 66 Positivt för HPV-typ 56, 59 och/eller 66 P2 Negativt för HPV-typ 56, 59 och/eller 66 Negativt för HPV-typ 56, 59 och/eller Positivt för HPV-typ 51 Positivt för HPV-typ Negativt för HPV-typ 51 Negativt för HPV-typ Positivt för HPV-typ 52 Positivt för HPV-typ Negativt för HPV-typ 52 Negativt för HPV-typ 52 P3 Positivt för HPV-typ 35, 39 och/eller 68 Positivt för HPV-typ 35, 39 och/eller 68 P3 Negativt för HPV-typ 35, 39 och/eller 68 Negativt för HPV-typ 35, 39 och/eller 68 GT Positivt(a) resultat för HPV-genotyp som inte är tillgänglig i din region Begränsat (a) resultat för HPV-genotyp Negativt(a) resultat för HPV-genotyp som inte är tillgänglig i din region begränsat negativt(a) resultat för HPV-genotyp GT HPV-genotypresultatet är tillgängligt för köp HPV-genotypresultatet är inte tillgängligt för köp Resultatet för genotypen är låst Negativt HPV-resultat, internt kontrollfel, vätskenivåfel eller fel vid extraktionsöverföring Övervakning av förekomst av DNA-kontamination Följande testförfarande bör utföras minst en gång i månaden, för att kontrollera om arbetsområdet och utrustningens ytor har kontaminerats med DNA. Övervakning av miljön är av avgörande betydelse för att detektera kontaminering innan problem uppstår. 1. För varje område som ska testas, använd en ren provtagningspinne från BD ProbeTec Chlamydia trachomatis/neisseria gonorrhoeae (CT/GC) sats för endocervikal provtagning med förstärkt DNA-analys och TORR TRANSPORT. 2. Häll av litet nukleasfritt molekylärbiologiskt graderat vatten i en liten, ren behållare. 3. Doppa provtagningspinnen i det nukleasfria molekylärbiologiskt graderade vattnet och torka av det första området med en vid, svepande rörelse. 4. Ta av locket från ett BD Onclarity HPV LBC-spädningsrör och för in pinnprovet i spädningsmedlet. Blanda genom att röra om med pinnen i röret med BD Onclarity HPV Diluent i 5 10 s. 5. Pressa provtagningspinnen mot rörets insida så att vätskan rinner ut ur pinnen och tillbaka ned i röret. 6. Ta ut pinnen försiktigt från röret med BD Onclarity HPV LBC Diluent så att det inte stänker. Kassera pinnen. 7. Sätt på det svarta punkterbara locket ordentligt på röret med BD Onclarity HPV LBC Diluent. 8. Upprepa ovanstående för varje område som ska testas. 9. När alla prover har tagits och exprimerats, bered dem enligt förvärmningsförfarandet och följ sedan testförfarandet. Ytterligare information om miljöövervakning och rengöringsförfaranden finns i handboken till BD Viper LT-systemet. Kontakta närmaste BD teknisk service och support för ytterligare information om kontaminationen inte går att avlägsna. 7

8 FÖRFARANDETS BEGRÄNSNINGAR 1. För optimalt resultat krävs korrekt provtagning och -förberedelse. Se avsnittet Provtagning och transport av prover i den här bipacksedeln. 2. Ett negativt analysresultat utesluter inte möjligheten av en infektion, eftersom analysresultaten kan påverkas av felaktig provtagningsteknik, tekniska fel, förväxling av prover, pågående antibiotikabehandling eller antalet organismer i provet, vilket kan ligga under analysens sensitivitet. 3. BD Onclarity HPV-analysen tillhandahåller kvalitativa resultat. 4. Användning av BD Onclarity HPV-analys skall begränsas till personal med utbildning i analysförfarandet och BD Viper LT-systemet. KLINISKA PRESTANDA BD Onclarity HPV cervixborstprover, BD SurePath-prover och/eller PreservCyt-prover samlades in från 836 kvinnor som uppfyllde protokollet och som remitterats till uppföljning på grund av onormalt pap-test eller HPV-infektion eller kvinnor som kom till en mottagning för ett rutinbesök på två geografiskt skilda kliniker i Europa. Två prover togs från var och en av de rekryterade patienterna i följande ordning: ett BD SurePath-prov (Klinik A) eller ett PreservCyt-prov (Klinik B) samt ett BD Onclarity HPV cervixborstprov (transporterat i ett BD Onclarity Cervical Brush-spädningsrör). För varje cytologisk flaska som samlades in alikvoterades 0,5 ml till ett BD Onclarity HPV LBC-spädningsrör. Cytologiska, HPV-DNA-resultat (digene Hybrid Capture 2 (hc2) High-Risk HPV DNA-test) och Roche LINEAR ARRAY HPV-genotypningstest (RLA)-resultat var tillgängliga för de flesta av proverna. Histologiska resultat var tillgängliga för de flesta av patienterna som kom till en högriskklinik. Varje klinik samlades också in residualprover (BD SurePath eller PreservCyt) med tillhörande cytologiska resultat, HPV-DNAresultat (digene Hybrid Capture 2 High-Risk HPV DNA-test), Roche LINEAR ARRAY HPV-genotypningstestresultat samt, om tillämpligt, histologiska resultat. För varje insamlat prov alikvoterades 0,5 ml till ett BD Onclarity HPV LBC-spädningsrör. 510 wgodkända retrospektiva prover samlades in, med histologiska resultat tillgängliga för 234 kvinnor. Samtliga prover testades i BD Viper LT-systemet i enlighet med analysens bipacksedel och användarhandboken. För varje mediatyp beräknades den kliniska sensitiviteten och specificiteten för sjukdomsdetektion, definierat som (1) cervikal intraepitelial neoplasi (CIN2) eller högre histologiskt resultat eller (2) cervikal intraepitelial neoplasi (CIN3) eller högre histologisk resultat. Den slutliga dataanalysen inkluderade BD Onclarity HPV-analysresultat från 472 BD SurePath-prover, 361 PreservCyt-prover och sammanlagt 515 BD Onclarity HPV cervixborstprover: 247 BD Onclarity HPV-cervixborstprover (i BD Onclarity HPV Cervical Brush Diluent) för klinik A och 268 BD Onclarity HPV-cervixborstprover (i BD Onclarity HPV Cervical Brush Diluent) för klinik B. Prestandauppskattningarna för detektion av höggradig cervixsjukdom för BD Onclarity HPV-analysen och hc2-analysen presenteras i tabell 4 och 5 för BD SurePath-media, i tabell 8 och 9 för PreservCyt-media samt i tabell 12 och 13 för BD Onclarity HPV-cervixborstprover. Analysresultaten för BD Onclarity HPV jämfördes också med HPV DNA-resultaten från digene Hybrid Capture 2 High-Risk HPV DNA-test) och Roche LINEAR ARRAY HPV-genotypningstest (sammansatt komparator). Ett resultat från både hc2 och RLA (högrisk-)analyserna definieras som positiv sammansatt komparator, ett negativt resultat från både hc2 och RLA (högrisk-) analyserna definieras som negativ sammansatt komparator, och när de båda analyserna inte överensstämde (eller resultat för båda testerna inte var tillgängliga) definieras resultatet för sammansatt komparator som olöst. De positiva, negativa och sammanlagda procentuella överensstämmelserna beräknades för varje mediatyp jämfört med den sammansatta komparatorn. Den slutliga dataanalysen inkluderade BD Onclarity HPV-analysresultat och resultat för sammansatt komparator (oasett histologisk status) från 670 BD SurePath-prover och 674 PreservCyt-prover. (Tabell 6 och 10) Den absoluta sjukdomsrisken (CIN2+ och CIN3+) i studiepopulationen för varje mediatyp beräknades för varje genotyp eller genotypsgrupp i BD Onclarity HPV-analysen. De absoluta riskerna har beräknats när genotypen (eller genotypsgruppen) är närvarande ensam och/eller i närvaro av andra genotyper. En tabell över absolut risk visas för varje mediatyp. Varje media samlades endast in på en klinik, därför kan skillnader i positivitetsfrekvenserna för HPV och genotyp på grund av populationsvariationer förväntas. (Tabell 7 och 11) Klinisk pretanda för BD SurePath-prover Tabell 4: Prestanda för BD Onclarity HPV-analys med BD SurePath-media jämfört med histologiska resultat (CIN2+) BD Onclarity HPV-analys hc2 HPV-DNA-test Uppskattning 95 % konfidensintervall Uppskattning 95 % konfidensintervall Sensitivitet 97,9 % (190/194) (94,8 %, 99,2 %) 98,4 % (190/193) (95,5 %, 99,5 %) Specificitet 22,7 % (63/278) (18,1 %, 27,9 %) 17,0 % (47/277) (13,0 %, 21,8 %) Tabell 5: Prestanda för BD Onclarity HPV-analys med BD SurePath-media jämfört med histologiska resultat (CIN3+) BD Onclarity HPV-analys hc2 HPV-DNA-test Uppskattning 95 % konfidensintervall Uppskattning 95 % konfidensintervall Sensitivitet 97,7 % (126/129) (93,4 %, 99,2 %) 98,4 % (126/128) (94,5 %, 99,6 %) Specificitet 18,7 % (64/343) (14,9 %, 23.1 %) 14,0 % (48/342) (10,8 %, 18,1 %) 8

9 Tabell 6: Prestanda för BD Onclarity HPV-analys med BD SurePath-media jämfört med sammansatt komparator BD Onclarity HPV-analys Resultat för sammansatt komparator Positiv Negativ Olöst* Totalt Positiv Negativ Totalt Procentandel positiv överensstämmelse (95 % konfidensintervall) 98,5 % (97,1 %, 99,2 %) Procentandel negativ överensstämmelse (95 % konfidensintervall) 89,3 % (78,5 %, 95,0 %) Total procentandel överensstämmelse (95 % konfidensintervall) 97,7 % (96,1 %, 98,6 %) *hc2- och RLA-resultaten överensstämmer inte eller resultat var inte tillgängliga för båda testerna. Tabell 7: Absolut risk för CIN2+ och CIN3+ för olika genotyper vid BD Onclarity HPV-analys med BD SurePath-media BD Onclarity HPV-analys HPV 16 HPV 18 HPV 45 HPV 33/58 HPV 31 HPV 56/59/66 HPV 51 HPV 52 HPV 35/39/68 Infektion med en eller flera genotyper Absolut risk CIN2+ 63,9 % (99/155) 50,0 % (24/48) 46,7 % (21/45) 49,4 % (42/85) 64,2 % (52/81) 25,5 % (25/98) 41,7 % (15/36) 35,1 % (20/57) 36,0 % (27/75) 95 % konfidensintervall (56,1 %, 71,0 %) (36,4 %, 63,6 %) (32,9 %, 60,9 %) (39,0 %, 59,8 %) (53,3 %, 73,8 %) (17,9 %, 35,0 %) (27,1 %, 57,8 %) (24,0 %, 48,1 %) (26,1 %, 47,3 %) Infektion med en enda genotyp eller genotypsgrupp Absolut risk CIN2+ 64,9 % (48/74) 50,0 % (7/14) 23,5 % (4/17) 47,1 % (16/34) 72,7 % (16/22) 0,0 % (0/29) 25,0 % (2/8) 33,3 % (4/12) 33,3 % (7/21) 95 % konfidensintervall (53,5 %, 74,8 %) (26,8 %, 73,2 %) (9,6 %, 47,3 %) (31,5 %, 63,3 %) (51,8 %, 86,8 %) (0,0 %, 11,7 %) (7,1 %, 59,1 %) (13,8 %, 60,9 %) (17,2 %, 54,6 %) Infektion med en eller flera genotyper Absolut risk CIN3+ 43,9 % (68/155) 43,8 % (21/48) 31,1 % (14/45) 31,8 % (27/85) 40,7 % (33/81) 13,3 % (13/98) 25,0 % (9/36) 19,3 % (11/57) 17,3 % (13/75) 95 % konfidensintervall (36,3 %, 51,7 %) (30,7 %, 57,7 %) (19,5 %, 45,7 %) (22,8 %, 42,3 %) (30,7 %, 51,6 %) (7,9 %, 21,4 %) (13,8 %, 41,1 %) (11,1 %, 31,3 %) (10,4 %, 27,4 %) Infektion med en enda genotyp eller genotypsgrupp Absolut risk CIN3+ 47,3 % (35/74) 42,9 % (6/14) 17,6 % (3/17) 23,5 % (8/34) 50,0 % (11/22) 0,0 % (0/29) 12,5 % (1/8) 16,7 % (2/12) 19,0 % (4/21) Klinisk prestanda för PreservCyt-prover Tabell 8: Prestanda för BD Onclarity HPV-analys med PreservCyt-media jämfört med histologiska resultat (CIN2+) 95 % konfidensintervall (36,3 %, 58,5 %) (21,4 %, 67,4 %) (6,2 %, 41,0 %) (12,4 %, 40,0 %) (30,7 %, 69,3 %) (0,0 %, 11,7 %) (2,2 %, 47,1 %) (4,7 %, 44,8 %) (7,7 %, 40,0 %) BD Onclarity HPV-analys hc2 HPV-DNA-test Uppskattning 95 % konfidensintervall Uppskattning 95 % konfidensintervall Sensitivitet 94,7 % (160/169) (90,2 %, 97,2 %) 97,0 % (160/165) (93,1 %, 98,7 %) Specificitet 50,5 % (97/192) (43,5 %, 57,5 %) 40,8 % (75/184) (33,9 %, 48,0 %) Tabell 9: Prestanda för BD Onclarity HPV-analys med PreservCyt-media jämfört med histologiska resultat (CIN3+) BD Onclarity HPV-analys hc2 HPV-DNA-test Uppskattning 95 % konfidensintervall Uppskattning 95 % konfidensintervall Sensitivitet 94,4 % (85/90) (87,6 %, 97,6 %) 97,7 % (85/87) (92,0 %, 99,4 %) Specificitet 37,3 % (101/271) (31,7 %, 43,2 %) 29,8 % (78/262) (24,6 %, 35,6 %) Tabell 10: Prestanda för BD Onclarity HPV-analys med PreservCyt-media jämfört med sammansatt komparator BD Onclarity HPV-analys Resultat för sammansatt komparator Positiv Negativ Olöst* Totalt Positiv Negativ Totalt Procentandel positiv överensstämmelse (95 % konfidensintervall) 96,1 % (93,0 %, 97,9 %) Procentandel negativ överensstämmelse (95 % konfidensintervall) 98,7 % (96,9 %, 99,4 %) Total procentandel överensstämmelse (95 % konfidensintervall) 97,6 % (96,1 %, 98,5 %) *hc2- och RLA-resultaten överensstämmer inte eller resultat var inte tillgängliga för båda testerna. 9

10 Tabell 11: Absolut risk för CIN2+ och CIN3+ för olika genotyper vid BD Onclarity HPV-analys med PreservCyt-media BD Onclarity HPV-analys HPV 16 HPV 18 HPV 45 HPV 33/58 HPV 31 HPV 56/59/66 HPV 51 HPV 52 HPV 35/39/68 Infektion med en eller flera genotyper Absolut risk CIN2+ 77,1 % (84/109) 50,0 % (12/24) 50,0 % (6/12) 70,0 % (28/40) 67,7 % (42/62) 34,0 % (18/53) 48,0 % (12/25) 73,9 % (17/23) 38,5 % (10/26) 95 % konfidensintervall (68,3 %, 84,0 %) (31,4 %, 68,6 %) (25,4 %, 74,6 %) (54,6 %, 81,9 %) (55,4 %, 78,0 %) (22,7 %, 47,4 %) (30,0 %, 66,5 %) (53,5 %, 87,5 %) (22,4 %, 57,5 %) Infektion med en enda genotyp eller genotypsgrupp Absolut risk CIN2+ 81,4 % (57/70) 45,5 % (5/11) 25,0 % (1/4) 75,0 % (15/20) 71,0 % (22/31) 11,1 % (2/18) 27,3 % (3/11) 85,7 % (6/7) 40,0 % (2/5) 95 % konfidensintervall (70,8 %, 88,8 %) (21,3 %, 72,0 %) (4,6 % 69,9 %) (53,1 %, 88,8 %) (53,4 %, 83,9 %) (3,1 %, 32,8 %) (9,7 %, 56,6 %) (48,7 %, 97,4 %) (11,8 %, 76,9 %) Infektion med en eller flera genotyper Absolut risk CIN3+ 44,0 % (48/109) 29,2 % (7/24) 16,7 % (2/12) 35,0 % (14/40) 30,6 % (19/62) 9,4 % (5/53) 1,.0 % (4/25) 26,1 % (6/23) 15,4 % (4/26) 95 % konfidensintervall (35,1 %, 53,4 %) (14,9 %, 49,2 %) (4,7 %, 44,8 %) (22,1 %, 50,5 %) (20,6 %, 43,0 %) (4,1 %, 20,3 %) (6,4 %, 34,7 %) (12,5 %, 46,5 %) (6,1 %, 33,5 %) Infektion med en enda genotyp eller genotypsgrupp Absolut risk CIN3+ 50,0 % (35/70) 18,2 % (2/11) 0,0 % (0/4) 50,0 % (10/20) 41,9 % (13/31) 0,0 % (0/18) 18,2 % (2/11) 42,9 % (3/7) 20,0 % (1/5) 95 % konfidensintervall (38,6 %, 61,4 %) (5,1 %, 47,7 %) (0,0 %, 49,0 %) (29,9 %, 70,1 %) (26,4 %, 59,2 %) (0,0 %, 17,6 %) (5,1 %, 47,7 %) (15,8 %, 75,0 %) (3,6 %, 62,4 %) Klinisk prestanda för BD Onclarity HPV cervixborstprover Tabell 12: Prestanda för BD Onclarity HPV-analys med BD Onclarity HPV-cervixborstprover jämfört med histologiska resultat (CIN2+) Institution A B BD Onclarity HPV-analys hc2 HPV-DNA-test Uppskattning 95 % konfidensintervall Uppskattning 95 % konfidensintervall Sensitivitet 97,2 % (104/107) (92,1 %, 99,0 %) 99,1 % (106/107) (94,9 %, 99,8 %) Specificitet 17,9 % (25/140) (12,4 %, 25,0 %) 21,4 % (30/140) (15,4 %, 28,9 %) Sensitivitet 100,0 % (121/121) (96,9 %, 100,0 %) 97,5 % (116/119) (92,8 %, 99,1 %) Specificitet 37,4 % (55/147) (30,0 %, 45,5 %) 43,0 % (61/142) (35,1 %, 51,2 %) Tabell 13: Prestanda för BD Onclarity HPV-analys med BD Onclarity HPV-cervixborste jämfört med histologiska resultat (CIN3+) Institution A B BD Onclarity HPV-analys hc2 HPV-DNA-test Uppskattning 95 % konfidensintervall Uppskattning 95 % konfidensintervall Sensitivitet 97,3 % (72/74) (90,7 %, 99,3 %) 98,6 % (73/74) (92,7 %, 99,8 %) Specificitet 15,0 % (26/173) (10,5 %, 21,1 %) 17,3 % (30/173) (12,4 %, 23,7 %) Sensitivitet 100,0 % (60/60) (94,0 %, 100,0 %) 98,3 % (57/58) (90,9 %, 99,7 %) Specificitet 26,4 % (55/208) (20,9 %, 32,8 %) 31,0 % (63/203) (25,1 %, 37,7 %) Analytiska studier Analytisk sensitivitet vid den kliniska brytpunkten: Detektionsgränsen (limit of detection, LOD) vid den kliniska brytpunkten för HPV fastställdes för BD Onclarity HPV-analys med användning av HPV-positiva cellinjer: SiHa (HPV 16), HeLa (HPV 18) och MS751 (HPV 45) samt klonat plasmid-dna innehållande sekvenser av följande HPV-genotyper: HPV 31, 33, 35, 39, 51, 52, 56, 58, 59, 66, and 68 i BD SurePath konserveringsvätska, PreservCyt-lösning och BD Onclarity Cervical Brush Diluent innehållande en HPV-negativ cellinje (C33A). HPV-cellinjerna testades individuellt medan HPV-plasmiderna testades kollektivt i tre grupper: 1) HPV 31, 33, 51, 52 och 59; 2) HPV 56, 58, 68 samt 3) HPV 35 och 66. Minst fyrtiofem replikat av var och en av sex målnivåer för HPV-cellinjerna och tjugo replikat för var och en av sex målnivåer för HPV-plasmiderna testades över minst tre partier av reagenser och med minst tre BD Viper LT-system. LOD är den nivå av HPV-DNA i det outspädda provet som har positiva resultat över den kliniska brytpunkten minst 95 % av tiden. Högsta LODvärde för var och en av HPV-genotyperna och medierna beskrivs i tabell

11 Tabell 14: Analytisk sensitivitet Mål BD SurePath-media (95 % konfidensintervall) PreservCyt-media (95 % konfidensintervall) BD Onclarity HPV Cervical Brush Diluent (95 % konfidensintervall) SiHa (HPV 16) celler/ml 1584 ( ) 1835 ( ) 137 ( ) HeLa (HPV 18) celler/ml 915 ( ) 1786 ( ) 51 (46 56) MS751 (HPV 45) celler/ml 3793 ( ) 5425 ( ) 305 ( ) HPV 31 kopior/ml 3652 ( ) 4118 ( ) 692 ( ) HPV 33 kopior/ml 7326 ( ) 8272 ( ) 1376 ( ) HPV 35 kopior/ml 6820 ( ) 7282 ( ) 1552 ( ) HPV 39 kopior/ml 7894 ( ) 8272 ( ) 1531 ( ) HPV 51 kopior/ml 6697 ( ) 5909 ( ) 1229 ( ) HPV 52 kopior/ml 3582 ( ) 4184 ( ) 833 ( ) HPV 56 kopior/ml 4976 ( ) 4774 ( ) 836 ( ) HPV 58 kopior/ml ( ) ( ) 2990 ( ) HPV 59 kopior/ml 4400 ( ) 4374 ( ) 772 ( ) HPV 66 kopior/ml 3793 ( ) 4462 ( ) 701 ( ) HPV 68 kopior/ml ( ) ( ) 2079 ( ) Korsreaktivitet: En panel med bakterier, jäst och odlade virus tillsammans med klonat plasmid-dna innehållande högrisk och lågrisk HPVmålsekvenser användes för att utvärdera den analytiska specificiteten för BD Onclarity HPV-analysen i BD Viper LT-systemet. Varje potentiell korsreaktant testades individuellt i BD SurePath konserveringsvätska och PreservCyt-lösning innehållande en HPVnegativ cellinje (C33A). Mikroorganismerna beskrivs i tabell 15 och 16. BD Onclarity HPV-analysen korsreagerade inte med någon av de mikroorganismer som testades. 11

12 Tabell 15: Mikroorganismer testade för analytisk specificitet Bakterier* Virus** Actinomyces israelii Adenovirus, typ 5 Atopobium vaginae EBV-1, stam B95-8 Bacteroides fragilis Bacteroides ureolyticus Bifidobacterium adolescentis Bifidobacterium breve Bifidobacterium longum ssp. longum HCMV, stam AD169 HIV-1 HSV1 HSV2 Högrisk-HPV*** Chlamydia trachomatis HPV 16 Clostridium perfringens HPV 18 Corynebacterium genitalium HPV 31 Enterobacter cloacae ssp. cloacae HPV 33 Enterococcus faecalis HPV 35 Enterococcus faecium HPV 39 Escherichia coli HPV 45 Fusobacterium nucleatum ssp. nucleatum HPV 51 Gardnerella vaginalis HPV 52 Klebsiella pneumoniae ssp. ozaenae HPV 56 Lactobacillus acidophilus HPV 58 Mycobacterium smegmatis HPV 59 Mycoplasma genitalium HPV 66 Neisseria gonorrhoeae HPV 68 Peptostreptococcus anaerobius Prevotella bivia Prevotella disiens Proteus mirabilis Proteus vulgaris Providencia stuartii Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis Streptococcus agalactiae Streptococcus pyogenes Ureaplasma urealyticum Jäst/protozoer**** Candida albicans Trichomonas vaginalis *Bakterierna testades vid ungefär 1,0 x 10 7 CFU/mL med undantag av följande: Chlamydia trachomatis (1,0 x 10 7 EB/mL), Mycobacterium smegmatis (2,5 x 10 6 CFU/mL) och Ureaplasma urealyticum (8,0 x 10 6 CFU/mL). **Virus testades vid 1,0 x 10 6 VP/mL ***Högrisk HPV-plasmid-DNA testades vid 1,0 x 10 6 kopior/ml. **** Jäst (Candida albicans) testades vid ungefär 1,0 x 10 7 CFU/mL; Protozoer (Trichomonas vaginalis) testades vid 1,4 x 10 6 CFU/mL. Tabell 16: Lågrisk HPV-plasmider testade för analytisk specificitet HPV 6 HPV 69 HPV 11 HPV 70 HPV 26 HPV 73 HPV 30 HPV 82 HPV 34 HPV 97 HPV 53 HPV 67 HPV c85 *Lågrisk HPV-plasmid-DNA testades vid 1,0 x 10 6 kopior/ml. 12

13 Interfererande substanser: Potentialen för interest med BD Onclarity HPV-analys på BD Viper LT-systemet fastställdes i närvaro av exogena och endogena substanser som kan påträffas i kliniska cervixprover. Sammanställda HPV-negativa prover och HPV-positiva prover (som spetsats med SiHa, HeLa och MS751-celler vid 3 x LOD) testades i närvaro och frånvaro av varje potentiellt interfererande substans. De substanser som användes vid dessa studier beskrivs i tabell 17. Koncentrationerna representerar den högsta nivå av substansen som inte ledde till någon interferens i BD Onclarity HPV-analysen. Tabell 17: Pontentiellt interfererande substanser BD Onclarity HPV Cervical Brush Diluent BD SurePath-media PreservCyt-media Pontentiellt interfererande substans Testad koncentration Testad koncentration Testad koncentration KY vaginala glidmedel 10 %(vikt/volym) 6 % (vikt/volym) 10 % (vikt/volym) VCF vaginal preventivfilm 3 % (vikt/volym) 10 % (vikt/volym) 10 % (vikt/volym) VCF vaginal preventivskum 10 % (vikt/volym) 10 % (vikt/volym) 10 % (vikt/volym) Conceptrol preventivgel 1 % (vikt/volym) 10 % (vikt/volym) 10 % (vikt/volym) Monistat 3* 2 % (vikt/volym) 2 % (vikt/volym) 1,8 % (vikt/volym) Clotrimazol 7 10 % (vikt/volym) 10 % (vikt/volym) 10 % (vikt/volym) Vagistat-1 Tioconazol 2 % (vikt/volym) 2 % (vikt/volym) 2 % (vikt/volym) Clindamycin vaginalkräm 9 % (vikt/volym) 10 % (vikt/volym) 10 % (vikt/volym) Summer s Eve spray 10 % (volym/volymprocent) 10 % (volym/volymprocent) 10 % (volym/volymprocent) Zovirax (Acyclovir) kräm 10 % (vikt/volym) 8 % (vikt/volym) 10 % (vikt/volym) Vandazole gel (Metronidazol vaginalt gel, 0,75 %) 10 % (vikt/volym) 10 % (vikt/volym) 10 % (vikt/volym) Summer s Eve deodorant 2 % (vikt/volym) 3 % (vikt/volym) 2 % (vikt/volym) Bovint mucin 10 % (volym/volymprocent) 10 % (volym/volymprocent) 10 % (volym/volymprocent) Progesteron 20 ng/ml 20 ng/ml 20 ng/ml Östradiol 1,2 ng/ml 1,2 ng/ml 1,2 ng/ml Helblod 3 % (volym/volymprocent) 5 % (volym/volymprocent) 5 % (volym/volymprocent) Leukocyter 1 x 10 6 celler/ml 1 x 10 6 celler/ml 1 x 10 6 celler/ml Sperma 10 % (volym/volymprocent) 10 % (volym/volymprocent) 10 % (volym/volymprocent) Ättiksyra, tvätt** 5 % (volym/volymprocent) Blod + ättiksyra, tvätt 5 % blod (volym/volymprocent), 2,5 % ättiksyra, tvätt(volym/ volymprocent) * Högre koncentrationer än de angivna ledde till vätskenivåfel under extraktion i BD Viper LT-systemet. ** Ättiksyra, tvätt, består av 1 del isättiksyra: 9 delar CytoLyt-lösning. Jämförande målinterferens: Potentialen att hämma HPV-detektionen på grund av att ett mål förekommer vid hög nivå och ett annat mål förekommer i låga nivåer under en blandad infektion utvärderades för BD Onclarity HPV-analys. SiHa-, HeLa- och MS751-celler testades individuellt eller kollektivt vid 3 x LOD i närvaro eller frånvaro av konkurrerande HPV-mål vid 1,0 x 10 6 kopior/ml i BD SurePath konserveringsvätska, PreservCyt-lösning och BD Onclarity HPV Cervical Brush Diluent (spädningsmedel för cervixborste) innehållande en HPV-negativ cellinje (C33A) (Tabell 18). Tabell 18: Jämförande målinterferens Typ av HPV-analysrör G1-genotyper med samamplifierade G1-mål G1-genotyper med samamplifierade G2-mål G1-genotyper med samamplifierade G3-mål Individuella cellulära HPV-mål vid 3 x LOD HPV-plasmider vid 1,0 x 10 6 kopior/ml Cellulär HPV-måldetektion i närvaro eller frånvaro av konkurrerande genotyper (HPV-plasmider) SiHa (HPV 16) HPV 18 + HPV 45 Ja HeLa (HPV 18) HPV 16 + HPV 45 Ja HPV 45 (MS751) HPV 16 + HPV 18 Ja SiHa + HeLa + MS751 HPV 31 + HPV 33 + HPV 56 + HPV 58 + HPV 59 + HPV 66 Ja SiHa + HeLa + MS751 HPV 35 + HPV 39 + HPV 51+ HPV 52 + HPV 68 Ja 13

14 Reproducerbarhet: Reproducerbarheten för BD Onclarity HPV-analys utvärderades i BD Viper LT-instrumentet med användning av en panel med fyra medlemmar bestående av negativa, kraftigt negativa, svagt positiva och måttligt positiva prover. De positiva panelmedlemmarna bestod av SiHa-, HeLa- och MS751-celler som tillsatts kollektivt till pooler med HPV-negativa BD SurePath-prover och BD Onclarity HPV Cervical Brush Diluent (spädningsmedel för cervixborste) innehållande en HPV-negativ cellinje (C33A). panelen testades över en lika fördelning av tre partier med reagens och tre instrument i 12 dagar. Data sammanfattas i tabell 19. Tabell 19: Sammanfattning av reproducerbarhetsdata för BD Onclarity HPV-analys på BD Viper LT-system Medium SurePath Cervical Brush Diluent. Cellinje (genotyp) SiHa (HPV 16) HeLa (HPV 18) MS-751 (HPV 45) SiHa (HPV 16) HeLa (HPV 18) MS-751 (HPV 45) Panelnivå Koncentration celler/ml Neg 0 Kraftigt negativt (0,3X LOD) Svagt Måttligt Neg 0 Kraftigt negativt (0,3X LOD) Svagt Måttligt Neg 0 Kraftigt negativt (0,3X LOD) Svagt Måttligt Neg 0 Kraftigt negativt (0,3X LOD) Svagt Måttligt Neg 0 Kraftigt negativt (0,3X LOD) Svagt Måttligt Neg 0 Kraftigt negativt (0,3X LOD) Svagt Måttligt % korrekta 97,69 % (211/216) 98,61 % (213/216) 99,54 % (215/216) 99,54 % (215/216) (214/214) (218/218) 94,91 % (205/216) (214/214) 99,07 % (214/216) 99,08 % (216/218) 99,54 % (215/216) (214/214) 99,54 % (215/216) (218/218) 95 % konfidensintervall (98,25 % ) (94,7 % 99,01 %) ( 98,25 %) ( 98,25 %) (98,25 % ) (96 % 99,53 %) (97,42 % 99,92 %) ( 98,25 %) (98,25 % ) (98,25 % ) ( 98,25 %) (97,42 % 99,92 %) (98,24 % ) (98,27 % ) (91,11 % 97,13 %) (98,25 % ) (98,24 % ) (96,69 % 99,75 %) (96,72 % 99,75 %) (97,42 % 99,92 %) (98,24 % ) (98,25 % ) (97,42 % 99,92 %) (98,27 % ) Medel Ct Mellan Inom analysomgångar analysomgångar Totalt SD % CV SD % CV SD % CV NA NA NA NA NA NA NA 35,28 0,16 0,46 0,54 1,52 0,57 1,62 32,31 0,16 0,50 0,22 0,69 0,30 0,92 31,07 0,22 0,69 0,22 0,71 0,35 1,11 NA NA NA NA NA NA NA 35,89 0,24 0,68 0,75 2,09 0,85 2,37 32,70 0,16 0,50 0,30 0,92 0,37 1,14 30,68 0,13 0,43 0,22 0,72 0,30 0,98 NA NA NA NA NA NA NA 35,77 0,00 0,00 0,52 1,45 0,55 1,53 32,71 0,20 0,60 0,26 0,80 0,36 1,10 31,33 0,18 0,57 0,35 1,10 0,41 1,31 NA NA NA NA NA NA NA 36,29 0,09 0,25 0,59 1,63 0,62 1,71 33,63 0,26 0,78 0,33 0,97 0,43 1,27 31,80 0,16 0,51 0,18 0,56 0,25 0,79 NA NA NA NA NA NA NA 35,69 0,10 0,29 0,78 2,18 0,80 2,23 33,34 0,15 0,44 0,25 0,76 0,30 0,91 32,07 0,24 0,73 0,25 0,78 0,37 1,16 NA NA NA NA NA NA NA 36,54 0,22 0,61 0,62 1,68 0,66 1,81 33,22 0,16 0,48 0,25 0,75 0,32 0,95 31,74 0,14 0,43 0,21 0,67 0,27 0,84 14

15 Korskontaminering: En studie utfördes för att utvärdera risken för falskt positiva resultat i antingen samma omgång (korskontaminering inom analysomgång) eller i efterföljande omgång (överföringskontaminering mellan analysomgångar) på BD Viper LT-systemet. En analysomgång utfördes per dag under fem dagar på vart och ett av tre instrument, uppgående till sammanlagt 675 testreplikat. Varja analysomgång bestod av prover i BD SurePath konserveringsvätska eller PreservCyt-lösning innehållande en HPV-negativ cellinje (C33A) med och utan SiHa-celler som tillsatts med 1,0 x 10 5 celler/ml arrangerade i ett alternerande schackrutigt mönster. Den övergripande kontamineringsfrekvensen med både BD SurePath konserveringsvätska och PreservCyt-lösning var 0,00 %. Ren provstabilitet (i flaska): Analytiska studier utfördes som underlag till anspråk beträffande hållbarhet och stabilitet för förvaring av rena cervixprover. Prover i BD SurePath konserveringsvätska, PreservCyt-lösning och BD Onclarity Cervical Brush Diluent innehållande en HPV-negativ cellinje (C33A) spetsades med SiHa-celler vid 3 x LOD och förvarades vid 2 8 C, 30 C och -20 C för flera olika tidpunkter. Vid varje tidpunkt avlägsnades proverna från förvaring och analyserades med BD Onclarity HPV-analys på BD Viper LT-system. Tjugofyra analysreplikat skapades för varje förhållande (provtyp/temperatur/duration). 180 dagars hållbarhet uppnåddes vid 2 8 C och 180 dagars vid -20 C. Utspädda provers hållbarhet: Analytiska studier utfördes som underlag till anspråk beträffande hållbarhet och stabilitet för utspädda cervixprover. Prover i BD SurePath konserveringsvätska och PreservCyt-lösning innehållande en HPV-negativ cellinje (C33A) spetsades med SiHa-celler vid 3 x LOD, späddes med BD HPV LBC Diluent och förvarades därefter vid 2 8 C, 30 C och -20 C för flera olika tidpunkter. Vid varje tidpunkt avlägsnades proverna från förvaring och analyserades med BD Onclarity HPV-analys på BD Viper LT-system. Tjugofyra analysreplikat skapades för varje förhållande (provtyp/temperatur/duration). 15 dagars hållbarhet uppnåddes vid 2 30 C och 90 dagars vid -20 C. Provstabilitet efter förvärmning: Analytiska studier utfördes som underlag till anspråk beträffande hållbarhet och stabilitet efter förvärmning av cervixprover. Prover i BD SurePath konserveringsvätska, PreservCyt-lösning och BD Onclarity Cervical Brush Diluent innehållande en HPV-negativ cellinje (C33A) spetsades med SiHa-celler vid 3 x LOD. späddes med BD Onclarity HPV LBC Diluent och förvärmdes sedan med BD Viper LT Pre-warm-värmare. De beredda proverna förvarades 2 8 C, 30 C och -20 C för flera olika tidpunkter. Vid varje tidpunkt avlägsnades proverna från förvaring och analyserades med BD Onclarity HPV-analys på BD Viper LT-system. Tjugofyra analysreplikat skapades för varje förhållande (provtyp/temperatur/duration). 7 dagars hållbarhet uppnåddes vid 2 30 C och 180 dagars vid -20 C. TOLKNING AV TABELLER Symboler och förkortningar Symboler (+) (-) negativt # antal % procent Förkortningar ASCUS Atypiska skvamösa celler av obestämd betydelse cfu kolonibildande enheter CI konfidensintervall CIN Cervikal intraepitelial neoplasi CV Variationskoefficient HPV Humant papillomvirus HR Högrisk LBC Vätskebaserad cytologi n antal NA Ej tillämpligt NEG Negativt NPA Negativ procentuell överensstämmelse PBS Fosfatbuffrad koksaltlösning PCR Polymeras kedjereaktion POS Positivt PPA Positiv procentuell överensstämmelse QC Kvalitetskontroll SD Standardavvikelse 15

16 TILLGÄNGLIGHET Följande BD Onclarity och BD Viper-produkter för användning på BD Viper LT finns också tillgängliga: Kat. nr. Beskrivning BD Onclarity HPV Assay Reagent Pack (reagensförpackning för HPV-analys), 192 tester Kontrollsats för BD Onclarity HPV Assay (HPV-analys), 24 positiva och 24 negativa rör BD Viper PCR Extraction Reagent Trough with Piercing Tool (extraktionsreagenstråg med håltagningsverktyg), 12 extraktionsreagenstråg BD FOX PCR Extraction Tubes (PCR-extraktionsrör), 384 rör BD Viper System Neutralization Pouch (neutraliseringspåse för BD Viper-systemet), 12 påsar BD Onclarity HPV Liquid Based Cytology Specimen (spädningsrör för vätskebaserad cytologi, LBC), BD Onclarity HPV Assay Cervical Brush Collection Kit (set med cervixborstar för HPV-analys), BD Viper LT System PCR Tube/Tray Kit (PCR-rör-/bricksats för BD Viper LT-systemet) Nyckelkort för BD Viper LT-systemet BD ProbeTec Chlamydia trachomatis/neisseria gonorrhoeae (CT/GC) Amplified DNA Assay Endocervical Specimen Collection and DRY TRANSPORT Kit (CT/GC-analys med DNA-amplifiering; sats för cervixprovtagning och TORR TRANSPORT) BD Viper LT Pipette Tips (pipettspetsar), BD Viper LT Solid Waste Liners (innerbehållare för fast avfall), BD Pre-warm Heater (värmare) BD Viper LT System PCR Acessory kit (tillbehörssats för PCR) BD Viper LT-system BD Totalys MultiProcessor BD Totalys MultiProcessor Consumables Kit (sats med förbrukningsartiklar) BD Syringing Pipettes (sprutpipetter) REFERENSER Cervical cancer, human papillomavirus (hpv), and hpv vaccines key points for policy-makers and health professionals 4. Clinical and Laboratory Standards Institute Approved Guideline M29-A3. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections, 3rd ed., CLSI, Wayne, PA. 5. Garner, J.S Hospital Infection Control Practices Advisory Committee, U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hosp. Epidemiol. 17: U.S. Department of Health and Human Services Biosafety in microbiological and biomedical laboratories,hhs Publication (CDC), 5th ed. U.S. Government Printing Office, Washington, D.C. 7. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p BD Diagnostics teknisk service: Kontakta närmaste BD-representant eller besök 16

17 Use Manufacturer / Производител / Výrobce / Fabrikant / Hersteller / Κατασκευαστής / Fabricante / Tootja / Fabricant / Proizvođać / Gyártó / Fabbricante / Атқарушы / 제조업체 / Gamintojas / Ražotājs / Tilvirker / Producent / Producător / Производитель / Výrobca / Proizvođač / Tillverkare / Üretici / Виробник / 生 产 厂 商 by / Използвайте до / Spotřebujte do / Brug før / Verwendbar bis / Χρήση έως / Usar antes de / Kasutada enne / Date de péremption / 사용 기한 / Upotrijebiti do / Felhasználhatóság dátuma / Usare entro / Дейін пайдалануға / Naudokite iki / Izlietot līdz / Houdbaar tot / Brukes for / Stosować do / Prazo de validade / A se utiliza până la / Использовать до / Použite do / Upotrebiti do / Använd före / Son kullanma tarihi / Використати до\line / 使 用 截 止 日 期 YYYY-MM-DD / YYYY-MM (MM = end of month) ГГГГ-ММ-ДД / ГГГГ-ММ (ММ = края на месеца) RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = konec měsíce) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutning af måned) JJJJ-MM-TT / JJJJ-MM (MM = Monatsende) ΕΕΕΕ-MM-HH / ΕΕΕΕ-MM (MM = τέλος του μήνα) AAAA-MM-DD / AAAA-MM (MM = fin del mes) AAAA-KK-PP / AAAA-KK (KK = kuu lõpp) AAAA-MM-JJ / AAAA-MM (MM = fin du mois) GGGG-MM-DD / GGGG-MM (MM = kraj mjeseca) ÉÉÉÉ-HH-NN / ÉÉÉÉ-HH (HH = hónap utolsó napja) AAAA-MM-GG / AAAA-MM (MM = fine mese) ЖЖЖЖ-АА-КК / ЖЖЖЖ-АА / (АА = айдың соңы) YYYY-MM-DD/YYYY-MM(MM = 월말) MMMM-MM-DD / MMMM-MM (MM = mėnesio pabaiga) GGGG-MM-DD/GGGG-MM (MM = mēneša beigas) JJJJ-MM-DD / JJJJ-MM (MM = einde maand) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutten av måneden) RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = koniec miesiąca) AAAA-MM-DD / AAAA-MM (MM = fim do mês) AAAA-LL-ZZ / AAAA-LL (LL = sfârşitul lunii) ГГГГ-ММ-ДД / ГГГГ-ММ (ММ = конец месяца) RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = koniec mesiaca) GGGG-MM-DD / GGGG-MM (MM = kraj meseca) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutet av månaden) YYYY-AA-GG / YYYY-AA (AA = ayın sonu) РРРР-MM-ДД / РРРР-MM (MM = кінець місяця) YYYY-MM-DD / YYYY-MM (MM = 月 末 ) Catalog number / Каталожен номер / Katalogové číslo / Katalognummer / Αριθμός καταλόγου / Número de catálogo / Katalooginumber / Numéro catalogue / Kataloški broj / Katalógusszám / Numero di catalogo / Каталог нөмірі / 카탈로그 번호 / Katalogo / numeris / Kataloga numurs / Catalogus nummer / Numer katalogowy / Număr de catalog / Номер по каталогу / Katalógové číslo / Kataloški broj / Katalog numarası / Номер за каталогом / 目 录 号 Authorized Representative in the European Community / Оторизиран представител в Европейската общност / Autorizovaný zástupce pro Evropském společenství / Autoriseret repræsentant i De Europæiske Fællesskaber / Autorisierter Vertreter in der Europäischen Gemeinschaft / Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα / Representante autorizado en la Comunidad Europea / Volitatud esindaja Euroopa Nõukogus / Représentant autorisé pour la Communauté européenne / Autorizuirani predstavnik u Europskoj uniji / Meghatalmazott képviselő az Európai Közösségben / Rappresentante autorizzato nella Comunità Europea / Европа қауымдастығындағы уәкілетті өкіл /유럽 공동체의 위임 대표 / Įgaliotasis atstovas Europos Bendrijoje / Pilnvarotais pārstāvis Eiropas Kopienā / Bevoegde vertegenwoordiger in de Europese Gemeenschap / Autorisert representant i EU / Autoryzowane przedstawicielstwo we Wspólnocie Europejskiej / Representante autorizado na Comunidade Europeia / Reprezentantul autorizat pentru Comunitatea Europeană / Уполномоченный представитель в Европейском сообществе / Autorizovaný zástupca v Európskom spoločenstve / Autorizovano predstavništvo u Evropskoj uniji / Auktoriserad representant i Europeiska gemenskapen / Avrupa Topluluğu Yetkili Temsilcisi / Уповноважений представник у країнах ЄС / 欧 洲 共 同 体 授 权 代 表 In Vitro Diagnostic Medical Device / Медицински уред за диагностика ин витро / Lékařské zařízení určené pro diagnostiku in vitro / In vitro diagnostisk medicinsk anordning / Medizinisches In-vitro-Diagnostikum / In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή / Dispositivo médico para diagnóstico in vitro / In vitro diagnostika meditsiiniaparatuur / Dispositif médical de diagnostic in vitro / Medicinska pomagala za In Vitro Dijagnostiku / In vitro diagnosztikai orvosi eszköz / Dispositivo medicale per diagnostica in vitro / Жасанды жағдайда жүргізетін медициналық диагностика аспабы / In Vitro Diagnostic 의료 기기 / In vitro diagnostikos prietaisas / Medicīnas ierīces, ko lieto in vitro diagnostikā / Medisch hulpmiddel voor in-vitro diagnostiek / In vitro diagnostisk medisinsk utstyr / Urządzenie medyczne do diagnostyki in vitro / Dispositivo médico para diagnóstico in vitro / Dispozitiv medical pentru diagnostic in vitro / Медицинский прибор для диагностики in vitro / Medicínska pomôcka na diagnostiku in vitro / Medicinski uređaj za in vitro dijagnostiku / Medicinteknisk produkt för in vitro-diagnostik / İn Vitro Diyagnostik Tıbbi Cihaz / Медичний пристрій для діагностики in vitro / 体 外 诊 断 医 疗 设 备 Temperature limitation / Температурни ограничения / Teplotní omezení / Temperaturbegrænsning / Temperaturbegrenzung / Περιορισμοί θερμοκρασίας / Limitación de temperatura / Temperatuuri piirang / Limites de température / Dozvoljena temperatura / Hőmérsékleti határ / Limiti di temperatura / Температураны шектеу /온도 제한 / Laikymo temperatūra / Temperatūras ierobežojumi / Temperatuurlimiet / Temperaturbegrensning / Ograniczenie temperatury / Limites de temperatura / Limite de temperatură / Ограничение температуры / Ohraničenie teploty / Ograničenje temperature / Temperaturgräns / Sıcaklık sınırlaması / Обмеження температури / 温 度 限 制 Batch Code (Lot) / Код на партидата / Kód (číslo) šarže / Batch-kode (lot) / Batch-Code (Charge) / Κωδικός παρτίδας (παρτίδα) / Código de lote (lote) / Partii kood / Numéro de lot / Lot (kod) / Tétel száma (Lot) / Codice batch (lotto) / Топтама коды / 배치 코드(로트) / Partijos numeris (LOT) / Partijas kods (laidiens) / Lot nummer / Batch-kode (parti) / Kod partii (seria) / Código do lote / Cod de serie (Lot) / Код партии (лот) / Kód série (šarža) / Kod serije / Partinummer (Lot) / Parti Kodu (Lot) / Код партії / 批 号 ( 亚 批 ) Contains sufficient for <n> tests / Съдържанието е достатъчно за <n> теста / Dostatečné množství pro <n> testů / Indeholder tilstrækkeligt til <n> tests / Ausreichend für <n> Tests / Περιέχει επαρκή ποσότητα για <n> εξετάσεις / Contenido suficiente para <n> pruebas / Küllaldane <n> testide jaoks / Contenu suffisant pour <n> tests / Sadržaj za <n> testova / <n> teszthez elegendő / Contenuto sufficiente per <n> test / <п> тесттері үшін жеткілікті / <n> 테스트가 충분히 포함됨 / Pakankamas kiekis atlikti <n> testų / Satur pietiekami <n> pārbaudēm / Inhoud voldoende voor n testen / Innholder tilstrekkelig til <n> tester / Zawiera ilość wystarczającą do <n> testów / Conteúdo suficiente para <n> testes / Conţinut suficient pentru <n> teste / Достаточно для <n> тестов(а) / Obsah vystačí na <n> testov / Sadržaj dovoljan za <n> testova / Innehåller tillräckligt för <n> analyser / <n> test için yeterli malzeme içerir / Вистачить для аналізів: <n> / 足 够 进 行 <n> 次 检 测 Peel / Обелете / Otevřete zde / Åbn / Abziehen / Αποκολλήστε / Desprender / Koorida / Décoller / Otvoriti skini / Húzza le / Staccare / Ұстіңгі қабатын алып таста / 벗기기 / Plėšti čia / Atlīmēt / Schillen / Trekk av / Oderwać / Destacar / Se dezlipeşte / Отклеить / Odtrhnite / Oljuštiti / Dra isär / Ayırma / Відклеїти / 撕 下 Consult Instructions for Use / Направете справка в инструкциите за употреба / Prostudujte pokyny k použití / Se brugsanvisningen / Gebrauchsanweisung beachten / Συμβουλευτείτε τις οδηγίες χρήσης / Consultar las instrucciones de uso / Lugeda kasutusjuhendit / Consulter la notice d emploi / Koristi upute za upotrebu / Olvassa el a használati utasítást / Consultare le istruzioni per l uso / Пайдалану нұсқаулығымен танысып алыңыз / 사용 지침 참조 / Skaitykite naudojimo instrukcijas / Skatīt lietošanas pamācību / Raadpleeg de gebruiksaanwijzing / Se i bruksanvisningen / Zobacz instrukcja użytkowania / Consultar as instruções de utilização / Consultaţi instrucţiunile de utilizare / См. руководство по эксплуатации / Pozri Pokyny na používanie / Pogledajte uputstvo za upotrebu / Se bruksanvisningen / Kullanım Talimatları na başvurun / Див. інструкції з використання / 请 参 阅 使 用 说 明 17

18 Positive control / Положителен контрол / Pozitivní kontrola / Positiv kontrol / Positive Kontrolle / Θετικός μάρτυρας / Control positivo / Positiivne kontroll / Contrôle positif / Pozitivna kontrola / Pozitív kontroll / Controllo positivo / Оң бақылау / 양성 컨트롤 / Teigiama kontrolė / Pozitīvā kontrole / Positieve controle / Kontrola dodatnia / Controlo positivo / Control pozitiv / Положительный контроль / Pozitif kontrol / Позитивний контроль / 阳 性 对 照 试 剂 Negative control / Отрицателен контрол / Negativní kontrola / Negativ kontrol / Negative Kontrolle / Αρνητικός μάρτυρας / Control negativo / Negatiivne kontroll / Contrôle négatif / Negativna kontrola / Negatív kontroll / Controllo negativo / Негативтік бақылау / 음성 컨트롤 / Neigiama kontrolė / Negatīvā kontrole / Negatieve controle / Kontrola ujemna / Controlo negativo / Control negativ / Отрицательный контроль / Negatif kontrol / Негативний контроль / 阴 性 对 照 试 剂 Do not use if package damaged / Не използвайте, ако опаковката е повредена / Nepoužívejte, je-li obal poškozený / Må ikke anvendes hvis emballagen er beskadiget / Inhal beschädigter Packungnicht verwenden / Μη χρησιμοποιείτε εάν η συσκευασία έχει υποστεί ζημιά. / No usar si el paquete está dañado / Mitte kasutada, kui pakend on kahjustatud / Ne pas l utiliser si l emballage est endommagé / Ne koristiti ako je oštećeno pakiranje / Ne használja, ha a csomagolás sérült / Non usare se la confezione è danneggiata / Егер пакет бұзылған болса, пайдаланба / 패키지가 손상된 경우 사용 금지 / Jei pakuotė pažeista, nenaudoti / Nelietot, ja iepakojums bojāts / Niet gebruiken indien de verpakking beschadigd is / Må ikke brukes hvis pakke er skadet / Nie używać, jeśli opakowanie jest uszkodzone / Não usar se a embalagem estiver danificada / A nu se folosi dacă pachetul este deteriorat / Не использовать при повреждении упаковки / Nepoužívajte, ak je obal poškodený / Ne koristite ako je pakovanje oštećeno / Använd ej om förpackningen är skadad / Ambalaj hasar görmüşse kullanmayın / Не використовувати за пошкодженої упаковки / 如 果 包 装 破 损, 请 勿 使 用 Collection date / Дата на събиране / Datum odběru / Opsamlingsdato / Entnahmedatum / Ημερομηνία συλλογής / Fecha de recogida / Kogumiskuupäev / Date de prélèvement / Dani prikupljanja / Mintavétel dátuma / Data di raccolta / Жинаған тізбекүні / 수집 날짜 / Paėmimo data / Savākšanas datums / Verzameldatum / Dato prøvetaking / Data pobrania / Data de colheita / Data colectării / Дата сбора / Dátum odberu / Datum prikupljanja / Uppsamlingsdatum / Toplama tarihi / Дата забору / 采 集 日 期 Patient ID number / ИД номер на пациента / ID pacienta / Patientens ID-nummer / Patienten-ID / Αριθμός αναγνώρισης ασθενούς / Número de ID del paciente / Patsiendi ID / No d identification du patient / Identifikacijski broj pacijenta / Beteg azonosító száma / Numero ID paziente / Пациенттің идентификациялық нөмірі / 환자 ID 번호 / Paciento identifikavimo numeris / Pacienta ID numurs / Identificatienummer van de patiënt / Pasientens ID-nummer / Numer ID pacjenta / Número da ID do doente / Număr ID pacient / Идентификационный номер пациента / Identifikačné číslo pacienta / ID broj pacijenta / Patientnummer / Hasta kimlik numarası / Ідентифікатор пацієнта / 患 者 标 识 号 Becton, Dickinson and Company 7 Loveton Circle Sparks, MD USA Benex Limited Pottery Road, Dun Laoghaire Co. Dublin, Ireland LINEAR ARRAY is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc. Hybrid Capture and Digene are registered trademarks of Digene Corporation. Brands listed in the table of Potential Interfering Substances are trademarks of their respective owners. PreservCyt, ThinPrep and CytoLyt are registered trademarks of Hologic, Inc. BD, BD Logo and all other trademarks are property of Becton, Dickinson and Company BD 18