Tentamen i Immunteknologi 29 maj 2006, 8-13

Tentamen i Immunteknologi 29 maj 2006, 8-13 1 Varje fråga ger maximalt 5 p, totalt 10 frågor. 2 SKRIV NAMN OCH PERSONNUMMER PÅ ALLA SIDOR! (inklusive tentamensomslaget) 3 Använd ett NYTT papper för varje fråga! 4 Glöm inte att fylla i och lämna in KURSUTVÄRDERINGEN! (2 separata blad)

Tentamen i Immunteknologi 29 maj 2006, 8-13 Varje fråga ger maximalt 5 p. (<25 p = underkänd, >25p = godkänd) OBS! Använd ett nytt papper för varje fråga OBS! SKRIV NAMN OCH PERSONNUMMER PÅ ALLA SIDOR! (inklusive tentamensomslaget) Glöm inte att lämna in KURSUTVÄRDERINGEN! (2 papper) FRÅGA 1 Vårt immunförsvar innefattar både molekyler, celler och organ. A) Ge exempel på både centrala och perifera/sekundära lymfoida organ? (2p) B) Vilket/vilka lymfoida organ bekämpar blodburna infektioner? (1p) C) Ge exempel på 3 olika granulocyter och deras funktion i immunförsvaret? (2p) FRÅGA 2 En av de viktigaste egenskaperna hos komponenterna i vårt immunförsvar är att specifikt kunna känna igen ett visst ämne A) Beskriv hur immunförsvaret gör för att skapa MHC klass I och MHC klass II molekyler med alla de specificiteter som behövs? (2p) B) Motivera kort varför det behövs både MHC klass I och klass II molekyler? (1p) C) Förklara kortfattat varför just MHC molekylen är viktig vid transplantation? (1p) FRÅGA 3 T cellen har en central och viktig roll i immunförsvaret. A) T cellen bildas i benmärgen, men var mognar den? (0.5p) B) Vilka möjligheter har en CD4-positiv respektive CD8-positiv T cell för att se till att B celler producerar antikroppar mot ett visst främmande antigen? (1.5p) C) T celler kan bidra med immunologiskt minne. Vad är det? (1p) D) När blir en T cell anergisk och vad fyller detta för funktion i immunförsvaret? (2p) FRÅGA 4 Du sitter med i panelen Fråga Lund i egenskap av din expertis inom området antikroppar och immunologi. Av moderatorn får du följande frågor och påstående att klargöra; A) Termerna immunogen och antigen missförstås ofta. Förklara vad de betyder så att skillnaden i innebörd blir tydlig. (1p) B) Ett kännetecken för antikroppar är att de sägs vara specifika, men trots detta sägs de kunna uppvisa korsreaktivitet. Vad betyder / innebär denna korsreaktivitet? (1p) C) När väl antikropparna har bundit till det främmande ämnet som initierade immunsvaret så kan antikroppar utöva sina effektorfunktioner med målet att eliminera det bildade immunkomplexet. Beskriv tre effektorfunktioner som antikroppar kan utöva samt beskriv den strukturella basen för varför olika antikroppar kan utöva olika effektorfunktioner (2p) D) HAMA är en term som ofta hörs i sammanhang med antikroppar. Förklara vad termen betyder (1p).

FRÅGA 5 Du har nyligen varit ute och rest i obebodda marker. När du kommer hem så insjuknar du och din personliga läkare säger att du har drabbats av en virusinfektion. A) Beskriv kortfatta hur det medfödda immunförsvaret gör för att hjälpa dig att slå ut viruset. (2p) B) Viruset uttrycker ett protein, V-33, på ytan. V-33 har en immunodominant epitop som endast visas upp på en viss MHC-I molekyl. Vad innebär detta för immunförsvarets möjligheter att bekämpa viruset? Motivera ditt svar. (2p) C) Du har även infekterats av ett bakterie antigen. Din läkare ska nu på ett enkelt ta reda på om det är första gången du har infekterats av bakterien, eller om du redan har utsatts för det flera gånger. Beskriv en enkel analys man skulle kunna utföra för att ge svar på läkarens fråga. (1p) FRÅGA 6 Du är specialist på antikroppar och arbetar som gruppledare på bioteknik företaget AbFix. En av dina kollegor har precis genererat en grupp av hybridom, 2 stycken IgM och 2 stycken IgA. Antikropparna, specifika för antigenet AG-13, är baserade på samma ursprungliga variabla gen, men använder olika D och J gener. A) Din kollega har nu sekvenserat en del av den tunga kedjans variable region (figure 1). Ange vilka av sekvenserna som är dina 2 IgM hybridom respektive 2 IgA hybridom och motivera varför. (2p) 1 ASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKRHY--------TYDYWGQGT 2...GHWYTS----SSVMSV... 3...DG...S...H...T...GDHK------WVF... 4...V...V...G...ALLRY----GYGF.V... ***************** Figur 1. Sekvenser av den tunga kedjans variabelregion hos de 4 hybridomen. CDR3 (den tredje hypervariable regionen) är utmärkt med stjärnor. Aminosyrorna uttrycks i form av den standardiserade enbokstavskoden. I de fall aminosyran är identisk med den som finns på översta raden illustreras detta med en punkt. Om en aminosyra inte finns så indikeras detta med ett streck. B) Din kollega har även immobiliserat ett IgM respektive ett IgA hybridom på ett biacore chip. När du flödar samma antigen, AG-13, över ytorna så erhåller du följande två kromatogram (Figure 2). Vilket kromatogram hör rimligen till vilket hybridom och varför är det så? (2p) A B Figur 2. Sensorgram från Biacorekörningar. Uppåtriktad pil avser tillfället när injektionen av komponenten i den lösliga fasen påbörjas och nedåtriktad pil avser när denna injektion upphör och enbart buffert flödar i systemet. C) Beskriv kortfattad en annan teknik som du skulle kunna använda för att studera affiniteten hos en antikropp. (1p)

FRÅGA 7 Du arbetar som forskningschef på ABbiotech. Du är nu ansvarig för att designa två antikroppsbaserade analysmetoder for att kunna detektera och kvantifiera två nya, farliga antigen, AG1 och AG2. AG1 är en mycket liten molekyl medan AG2 är ett mycket stort protein. A) Beskriv kortfattad för hur du skulle kunna generera specifika antikroppar mot AG1 respektive AG2. Du måste välja två olika metoder, en för varje antigen. (2p) B) Du funderar på att sätta upp kompetitiva och/eller non-kompetitiva analysmetoder för att kvantifiera antigenen. Beskriv kortfattat den principiella basen för dessa metoder och motivera vilken metod du skulle kunna använda för respektive antigen (förutsättningen är sådana att du har fri tillgång till de reagenser som du själv anger). (2p) C) Vidare så får du i uppdrag att framställa ett vaccin mot AG2. Vad är ett vaccin? (1p) FRÅGA 8 En ny farlig sjukdom håller på att sprida sig på den europeiska kontinenten. Forskare har identifierat antigenet, SARS, och du har precis lyckats tillverka antikroppar mot antigenet, dels efter immunisering av getter dels genom att etablera ett IgG-producerande hybridom efter immunisering av möss. A) Din kollega Olle har gjutit in den monoklonala IgG antikroppen i en gel för att köra raketimmunelektrofores. Eftersom han inte får några precipitat (raketer) trots att han har provat en stor mängd olika koncentrationer av både mängden ingjuten antikropp och mängden antigen så kommer han till för att få hjälp med att tolka data. Vilken är den mest troliga förklaringen till den misslyckade analysen och vad rekommenderar du att han skall testa för att få precipitat i denna typ av test? (2p) B) Du ska nu utvärdera den terapeutiska potentialen hos den framställda mus IgG antikroppen. Beskriv kortfattat två vägar som du kan gå för att omvandla din mus antikropp till en human antikropp. (2p) C) Antikroppar kan ibland vara inblandade i ett fenomen som heter ADCC. Vad är det? (1p) FRÅGA 9 Födescytometri är en vanligt förekommande teknik som används för att analysera celler. A) Vilken typ av kunskap om cellerna i ett prov kan man få ut av en flödescytometri analys (ge 4 exempel)? (2p) B) Du har tillgång till 3 antikroppar. Ab-1 är specifik för en markör på cancer celler, ab-2 är specifik för en markör på friska celler, medan ab-3 är specifik för en markör som finns på båda cell typerna. Du analyserar nu antikropparna reaktivitet mha FACS analys. Hur kommer dina FACS data att se ut? (tips använd diagrammen nedan för att visa tänkbara FACS data kan se ut) (3p) Friska celler uts la g Negativ Ab-1 Ab-2 Ab-3 kontroll Cancer celler uts la g Negativ Ab-1 Ab-2 Ab-3 kontroll [bunden ab] [bunden ab] [bunden ab] [bunden ab]

Fråga 10 Allergi är en vanlig sjukdom i Sverige idag som i någon form drabbar upp till 30% av befolkningen. Det är därför viktigt att förstå vilka immunologiska processer som ligger bakom de allergiska symptomen, för att kunna hitta passande terapeutiska angreppssätt. A) Vilken antikropps isotyp är speciellt viktiga vid allergi och vilken roll spelar dessa antikroppar? (1p) B) Man försöker numera använda sig av vaccinering för att behandla allergi. Hur är det tänkt att denna vaccinering ska skydda mot allergi? (2p) C) Namnge två effektorceller som är involverade vi en allergisk immunoreaktion samt minst en aktiv substans var som de producerar och som ger symtomen. (2p) Lycka till!

Minneslista: Christer kommer och svarar på eventuella frågor under tentan. Tentamen äger rum i Eden 26 (bakom Gamla Kirurgen) måndagen den 29 maj kl. 8.00-13.00. Ingen akademisk kvart. Ta med tejp och en lapp för att markera på dörren vilken verksamhet som äger rum där. Lägg före tentans början ut tentamensomslag och papper (minst 10/student) på de bänkar där eleverna (ca 25) skall sitta. Ta med papper och tentamensomslag till alla eleverna. Observera att det behövs minst 30 tentamensomslag och ca 400 papper (minst ett per elev och fråga) För en lista (namn och personnummer) på vilka som deltagit i tentamen. Alla som deltagit i tentamen skall lämna in ett ifyllt tentamensomslag, även om de inte svarat på någon fråga. Kontrollera att eleverna har betalt terminsräkning senast när de lämnar in tentan. För en lista på att detta skett. Om detta inte kan ske för att terminsräkningen inte tagits med så skall eleverna komma upp på avdelningen och visa denna vid ett senare tillfälle. Det är alltså tillåtet att skriva tentan även om man inte har med sig terminsräkningen men resultatet kommer bara att registreras när de väl visat upp sin terminsräkning. Ingen får lämna in sin tenta före 9.00. Ingen får komma och börja tentera sedan någon lämnat in tentan och gått ifrån lokalen. Inga hjälpmedel utöver papper och penna är tillåtna. Ta med extra kursutvärderingar om någon elev glömt sina exemplar. Samla in kursutvärderingar. Be studenterna skriva ner sin e-post adress till vilken tenta resultatet kan skickas till!