Artisan Jones Basement Membrane Stain Kit Kod AR180 Avsedd användning För in vitro-diagnostik. Jones Basement Membrane Stain Kit är avsett för laboratorieanvändning för att med ljusmikroskopi identifiera basalmembran i vävnadsprover skurna i snitt om 2 mikrometer. 1,2 Rutinmässigt bearbetade prover (paraffininbäddade) kan användas. Det föredragna fixativet är neutralbuffrat formalin. Den kliniska tolkningen av all färgning, eller frånvaro av färgning, måste kompletteras genom morfologiska studier och lämpliga kontroller och måste utvärderas av en kvalificerad patolog inom ramen för patientens anamnes och andra diagnostiska tester. Alla reagenser i Jones Basal Membrane Stain Kit har optimerats för användning med Dakos Artisan Staining System och kräver ingen blandning eller spädning. Sammanfattning och förklaring Jones Basement Membrane Stain Kit används för att identifiera basalmembran, särskilt glomerulära och tubulära basalmembran i njurvävnader skurna i snitt om 2 mikrometer. 1,2 Hematoxylin- och eosinfärgade snitt av de flesta vävnader kan inte särskilja basalmembran särskilt bra, dock är basalmembran i glomerulus mer iögonfallande, särskilt vid sjukdomar som membranös nefropati eller diabetes. Dessa membran färgas starkt positiva med oxidation-aldehydteknik, dvs. metenaminsilver etc., som används av Jones Basement Membrane Stain Kit. 1 Procedurprincip Vid användning av högtorr ljusmikroskopi är basalmembran svåra att särskilja i hematoxylin- och eosinpreparat och syns med rosa kanter runt varje individuell glomerulus. Större känslighet för att detektera närvaron av basalmembran uppnås emellertid med applikationen av denna speciella färg. Jones Basement Membrane Stain Kit är en modifiering av den anpassade proceduren Fifteen-Minute Jones Stain for Renal Biopsies. 2 Jones Basement Membrane Stain Kit har optimerats för användning på Artisan Staining System. Tvättningssteg följer alla färgningssteg. Efter färgning skall de lufttorkade objektglasen tas bort från instrumentet och snabbt klargöras i xylen eller xylenersättning och monteras med lämpligt monteringsmedel. Resultaten tolkas med hjälp av ett vanligt ljusmikroskop. Kontrollvävnad: Njure med glomerulus Medföljande reagenser Jones Basement Membrane Stain Kit består av sju bruksfärdiga dispenserförpackningar innehållande: Periodic Acid 1% Perjodsyra i avjoniserat vatten Silver Enhancer 0.5% Tiosemikarbazid i avjoniserat vatten innehållande 0,05 % ProClin 300 Methenamine Borate 3% 2,7 % metenamin och 0,38 % natriumborat i avjoniserat vatten (2 förpackningar) Silver Nitrate 1% Silvernitrat i avjoniserat vatten Gold Chloride 0.2% Guldklorid i avjoniserat vatten Sodium Thiosulfate 5% Natriumtiosulfat i avjoniserat vatten innehållande antimikrobiellt medel (128414-001) P04306SE_01/AR180/2015.08 s. 1/5
Nuclear Fast Red 13,3 % aluminiumkaliumsulfat, 0,1 % Nuclear Fast Red och 0,1 % tymol i avjoniserat vatten Nuclear Fast Red reagensförpackning måste skakas före flödning. Låt reagensförpackningarna med Jones Basement Membrane anta rumstemperatur före användning. Dako tillhandahåller dessa reagenser vid optimal formulering för användning enligt de anvisningar som tillhandahålls för färgning på preparerade vävnadssnitt. Varje avvikelse från rekommenderade testprocedurer kan ogiltiggöra angivna förväntade resultat. Material som behövs men inte medföljer 1. Objektglas för mikroskop 2. Artisan Staining System 3. Wash Solution (kod AR102) Försiktighetsåtgärder 1. För yrkesmässigt bruk. 2. Minska mikrobiell kontamination av reagenser, annars kan en ökning av icke-specifik färgning inträffa. 3. Reagensförpackningarna kan innehålla restlösning efter det föreskrivna antalet tester fullbordats. 4. Andra inkubationstider eller temperaturer än de som specificeras kan ge felaktiga resultat. Användaren måste validera alla sådana ändringar som gjorts av den fabriksutgivna proceduren. 5. Förvara reagensförpackningarna i upprätt läge när de inte används på instrumentet. 6. Skydda reagensförpackningarna från direkt solljus samt värmegenererande källor. 7. Som huvudregel får personer under 18 år inte arbeta med denna produkt. Användare måste vara ordentligt utbildade i lämpliga arbetsprocedurer, produktens farliga egenskaper samt nödvändiga säkerhetsinstruktioner. Ytterligare information finns i säkerhetsdatabladet (SDS). 8. Använd lämplig personlig skyddsutrustning för att undvika kontakt med ögonen och huden. 9. Oanvänd lösning måste kasseras i enlighet med lokala och statliga föreskrifter. 10. Datablad för materialsäkerhet för yrkesanvändare kan erhållas på begäran. Periodic Acid 1%: 0.1-1% Orthoperiodic acid H314 Orsakar allvarliga frätskador på hud och ögon. Använd ögon- eller ansiktsskydd. Använd skyddskläder. P304 + P340 + VID INANDNING: Flytta personen till frisk luft och se till att han eller hon vilar i en ställning som underlättar andningen. Kontakta genast GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. P301 + + VID FÖRTÄRING: Kontakta genast GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. Skölj munnen. Framkalla INTE P330 + P331 kräkning. P303 + P361 + VID HUDKONTAKT (även håret): Ta omedelbart av alla nedstänkta kläder. Skölj huden med vatten eller duscha. P353 + + Nedstänkta kläder ska tvättas innan de används igen. Kontakta genast GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. P305 + P351 + VID KONTAKT MED ÖGONEN: Skölj försiktigt med vatten i flera minuter. Ta ur eventuella kontaktlinser om det går lätt. P338 + Fortsätt att skölja. Kontakta genast GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. Varning Silver Enhancer 0.5%: < 0.1% 3(2H)-Isothiazolone, 5-chloro-2-methyl-, mixt. with 2-methyl-3(2H)-isothiazolone P302 + P352 + VID HUDKONTAKT: Tvätta med mycket tvål och vatten. Nedstänkta kläder ska tvättas innan de används igen. Methenamine Borate 3%: 30-60% Borax (B4Na2O7.10H2O), 30-60% metenamin H360 Kan skada fertiliteten eller det ofödda barnet. P201 Inhämta särskilda instruktioner före användning. P202 Använd inte produkten innan du har läst och förstått säkerhetsanvisningarna. (128414-001) P04306SE_01/AR180/2015.08 s. 2/5
P281 P308 + P313 P302 + P352 + P333 + P313 Använd föreskriven personlig skyddsutrustning. Vid exponering eller misstanke om exponering: Sök läkarvård. VID HUDKONTAKT: Tvätta med mycket tvål och vatten. Nedstänkta kläder ska tvättas innan de används igen. Vid hudirritation eller utslag: Sök läkarhjälp. Silver Nitrate 1%: 0.1-1% Silvernitrat H319 Orsakar allvarlig ögonirritation. H315 Irriterar huden. H372 Orsakar organskador genom lång eller upprepad exponering. Använd ögon- eller ansiktsskydd. P260 Inandas inte ångor. P270 Ät inte, drick inte och rök inte när du använder produkten. P314 Sök läkarhjälp vid obehag. P302 + P352 + P362-2 + VID HUDKONTAKT: Tvätta med mycket tvål och vatten. Ta av nedstänkta kläder. Nedstänkta kläder ska tvättas innan de används igen. P332 + P313 Vid hudirritation: Sök läkarhjälp. P305 + P351 + P338 VID KONTAKT MED ÖGONEN: Skölj försiktigt med vatten i flera minuter. Ta ur eventuella kontaktlinser om det går lätt. Fortsätt att skölja. P337 + P313 Vid bestående ögonirritation: Sök läkarhjälp. Gold Chloride 0.2 percent: 0.1-1% Aurate(1-), tetrachloro-, hydrogen, trihydrate, (SP-4-1)- H314 Orsakar allvarliga frätskador på hud och ögon. Använd ögon- eller ansiktsskydd. Använd skyddskläder. P304 + P340 + VID INANDNING: Flytta personen till frisk luft och se till att han eller hon vilar i en ställning som underlättar andningen. Kontakta genast GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. P301 + + P330 + P331 VID FÖRTÄRING: Kontakta genast GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. Skölj munnen. Framkalla INTE kräkning. P303 + P361 + P353 + + VID HUDKONTAKT (även håret): Ta omedelbart av alla nedstänkta kläder. Skölj huden med vatten eller duscha. Nedstänkta kläder ska tvättas innan de används igen. Kontakta genast GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. P302 + P352 VID HUDKONTAKT: Tvätta med mycket tvål och vatten. P305 + P351 + P338 + VID KONTAKT MED ÖGONEN: Skölj försiktigt med vatten i flera minuter. Ta ur eventuella kontaktlinser om det går lätt. Fortsätt att skölja. Kontakta genast GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. Varning Sodium Thiosulfate 5%: < 0.1% 3(2H)-Isothiazolone, 5-chloro-2-methyl-, mixt. with 2-methyl-3(2H)-isothiazolone P302 + P352 + VID HUDKONTAKT: Tvätta med mycket tvål och vatten. Nedstänkta kläder ska tvättas innan de används igen. (128414-001) P04306SE_01/AR180/2015.08 s. 3/5
Varning Nuclear Fast Red: 5-10% Etanol H373 Kan orsaka organskador genom lång eller upprepad exponering. P260 Inandas inte ångor. P314 Sök läkarhjälp vid obehag. Förvaring Varje komponent skall förvaras vid den temperatur som anges på etiketten. Får ej användas efter utgångsdatum. Användaren måste validera alla förvaringsförhållanden som avviker från de som specificerats. Det finns inga tydliga tecken som indikerar instabilitet för denna produkt. Lämplig vävnad måste därför köras som kontroller för sådan verifiering. Kontakta Dako teknisk service om du observerar oväntad färgning som inte kan förklaras med variationer i laboratorieprocedurerna eller olämplig förvaring. Instrumentprocedur/färgningsprocedur Preliminära kommentarer Se användarhandboken för Artisan för ytterligare information. Flöda reagensförpackningarna Innan färgningen påbörjas skall reagensförpackningarna flödas och kontrolleras med avseende på läckor. Kontrollera och flöda alla reagensförpackningar när en ny sats används och före dagens första färgningskörning. 1. Arbeta över en pappersduk och avlägsna det röda eller svarta transportlocket, om sådant finns, från reagensförpackningens dispenserenhet genom att försiktigt dra locket nedåt. 2. Vid leveransen av en reagensförpackning flödar du den genom att hålla reagensförpackningen så att dispenserenheten pekar nedåt och försiktigt knacka på reagensförpackningens sida 2 3 gånger så att eventuella luftbubblor som kan sitta fast i dispenserenheten frigörs. 3. Tryck in och släpp ut kolven fullständigt 3 4 gånger i snabb följd tills ett stabilt flöde uppnås. Var noga med att eventuell vätska som sprutar ut absorberas av en pappersduk, absorberande gasväv eller något liknande material. 4. Undvik att göra av med onödigt stora mängder reagens vid flödningen. Överdriven flödning leder till förlust av reagenser, vilket kan göra att reagensförpackningen tar slut innan det beräknade antalet tester har utförts. 5. Före varje användning kan reagensförpackningarna flödas 1 2 gånger för att kontrollera att genomströmningen är stabil. 6. Håll reagensförpackningen i ena handen och för in monteringsguiden på förpackningens baksida i springorna på reagenskarusellen tills förpackningen sitter fast ordentligt. Procedur Se avsnittet Procedurrapporter i Artisan-värdprogrammet för rekommenderad detaljerad procedur. När färgningen är klar är objektglasen torra. Doppa objektglasen i xylen eller i xylenersättning och montera dem. Obs! Nuclear Fast Red startar utfällningsprocessen om det utsätts för kalla temperaturer. För att ta bort utfällningsmedlet från objektglasen, placera dem under rinnande vatten tills utfällningsmedlet är borta. Dehydrera i alkohol, doppa dem därefter i xylen eller i xylenersättning och montera dem. Tolkning av färgningen Basalmembran:...Svart Kärnor:...Röda Bakgrund:...Rosa Prestandaegenskaper Reproducerbarhet 100 % reproducerbarhet inom körningar bestämdes genom färgning av 12 objektglas innehållande samma kontrollvävnad på ett instrument. 100 % reproducerbarhet mellan körningar bestämdes genom färgning av 12 objektglas innehållande samma kontrollvävnad på tre olika instrument. Felsökning Se avsnittet Underhåll och felsökning i användarhandboken för Artisan eller kontakta vår tekniska supportgrupp. Referenser 1. Bancroft JD, Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques, 4th edition, Churchill Livingstone Inc., New York, New York, 1996 2. Smith S. Fifteen-Minute Jones Stain for Renal Biopsies. Laboratory Medicine, 10(12):769-771, 1979 (128414-001) P04306SE_01/AR180/2015.08 s. 4/5
Utgåva 08/15 (128414-001) P04306SE_01/AR180/2015.08 s. 5/5