Artisan Massons Trichrome Stain Kit Kod AR173 Avsedd användning För in vitro-diagnostik. Massons Trichrome Stain Kit är avsett för laboratorieanvändning för att med ljusmikroskopi identifiera bindvävnad och muskel i vävnadsprover. 1-3 Rutinmässigt bearbetade prover (paraffininbäddade) kan användas. Det föredragna fixativet är neutralbuffrat formalin. Den kliniska tolkningen av all färgning, eller frånvaro av färgning, måste kompletteras genom morfologiska studier och lämpliga kontroller och måste utvärderas av en kvalificerad patolog inom ramen för patientens anamnes och andra diagnostiska tester. Alla reagenser i Massons Trichrome Stain Kit har optimerats för användning med Dakos Artisan Staining System och kräver ingen blandning eller spädning. Sammanfattning och förklaring Massons Trichrome Stain Kit används för att identifiera muskel, kollagenfibrer, fibrin och erytrocyter i vävnadssnitt. 1-3 Massons Trichrome används ofta för att påvisa ökad kollagendeposition som associeras med att funktionsvävnad ersätts av ärrvävnad. Det är användbart vid diagnostisering av skleros i levern i vilken tätare kollagen ersätter normal vävnad vilket orsakar dysfunktion i levern. Massons Trichrome är även bättre för att påvisa muskel än hematoxylin- och eosinfärgning. Procedurprincip Kollagenfibrer och fibrin färgar inte med hematoxylin- och eosinfärgning. Massons Trichrome Stain Kit är baserat på Massons ursprungliga procedur. 1-3 Bindvävnad är ett tredimensionellt proteinnätverk. Dessa nätverk kan formas från olika proteiner, vilka ger olika fysiska funktioner. Strukturen och densiteten på proteinnätverket kan relatera direkt till färgningsreaktioner för vävnadskomponenter. 2 Massos Trichrome Stain Kit har optimerats för användning på Artisan Staining System. Tvättningssteg följer alla färgningssteg. Efter färgning tas de lufttorkade objektglasen bort från instrumentet och klargörs i xylen eller xylenersättning och monteras med lämpligt monteringsmedel. Resultaten tolkas med hjälp av ett vanligt ljusmikroskop. Kontrollvävnad: Livmoder, tunntarm, lever, blindtarm eller äggledare Medföljande reagenser Massons Trichrome Stain Kit består av åtta bruksfärdiga dispenserförpackningar innehållande: Bouin s Solution 0,9 % pikrinsyra, 23,8 % formaldehyd och 4,8 % ättiksyra i avjoniserat vatten Weigert s Hematoxylin A 1 % hematoxylin, 95 % alkohol Weigert s Hematoxylin B 1,16 % järnklorid och 1 % saltsyra i avjoniserat vatten Biebrich Scarlet Acid Fuchsin 0,1 % syrafuksin, 0,9 % Biebrich Scarlet och 1 % ättiksyra i avjoniserat vatten innehållande 1 % Triton X-100 Phosphotungstic Phosphomolybdic Acid- 2 Packs 2,5 % fosfovolframsyra och 2,5 % fosfomolybdensyra i avjoniserat vatten Aniline Blue 2,5 % anilinblått och 2 % ättiksyra i avjoniserat vatten innehållande 1 % Triton X-100 (127373-001) P04012SE_01/AR173/2015.04 s. 1/5
Acetic Acid 3% Ättiksyra i avjoniserat vatten Dako tillhandahåller dessa reagenser vid optimal formulering för användning enligt de anvisningar som tillhandahålls för färgning på preparerade vävnadssnitt. Varje avvikelse från rekommenderade testprocedurer kan ogiltiggöra angivna förväntade resultat. Material som behövs men inte medföljer 1. Objektglas för mikroskop 2. Artisan Staining System 3. Wash Solution (kod AR102) Försiktighetsåtgärder 1. För yrkesmässigt bruk. 2. Om Bouins lösning torkar kan möjlig explosiv nedbrytning genom stötar eller temperaturstegring inträffa. 3. Minska mikrobiell kontamination av reagenser, annars kan en ökning av icke-specifik färgning inträffa. 4. Reagensförpackningarna kan innehålla restlösning efter det föreskrivna antalet tester fullbordats. 5. Andra inkubationstider eller temperaturer än de som specificeras kan ge felaktiga resultat. Användaren måste validera alla sådana ändringar som gjorts av den fabriksutgivna proceduren. 6. Förvara reagensförpackningarna i upprätt läge när de inte används på instrumentet. 7. Skydda reagensförpackningarna från direkt solljus samt värmegenererande källor. 8. Som huvudregel får personer under 18 år inte arbeta med denna produkt. Användare måste vara ordentligt utbildade i lämpliga arbetsprocedurer, produktens farliga egenskaper samt nödvändiga säkerhetsinstruktioner. Ytterligare information finns i säkerhetsdatabladet (SDS). 9. Använd lämplig personlig skyddsutrustning för att undvika kontakt med ögonen och huden. 10. Oanvänd lösning måste kasseras i enlighet med lokala och statliga föreskrifter. 11. Datablad för materialsäkerhet för yrkesanvändare kan erhållas på begäran. Fara Bouin s Solution: 10-30% Formaldehyde, 1-5% Acetic acid, 0.1-1% 2,4,6-Trinitrophenol H302 + H312 + Skadligt vid förtäring, hudkontakt eller inandning. H332 H314 Orsakar allvarliga frätskador på hud och ögon. H317 Kan orsaka allergisk hudreaktion. H350 Kan orsaka cancer. H341 Misstänks kunna orsaka genetiska defekter. H335 Kan orsaka irritation i luftvägarna. P201 Inhämta särskilda instruktioner före användning. P202 Använd inte produkten innan du har läst och förstått säkerhetsanvisningarna. P281 Använd föreskriven personlig skyddsutrustning. P271 Används endast utomhus eller i väl ventilerade utrymmen. P261 Undvik att inandas ångor. P270 Ät inte, drick inte och rök inte när du använder produkten. P272 Nedstänkta arbetskläder får inte avlägsnas från arbetsplatsen. P308 + P313 Vid exponering eller misstanke om exponering: Sök läkarvård. P304 + P340 + VID INANDNING: Flytta personen till frisk luft och se till att han eller hon vilar i en ställning som underlättar andningen. Kontakta genast GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. P301 + + P330 + P331 VID FÖRTÄRING: Kontakta genast GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. Skölj munnen. Framkalla INTE kräkning. P303 + P361 + P353 + P363 + VID HUDKONTAKT (även håret): Ta omedelbart av alla nedstänkta kläder. Skölj huden med vatten eller duscha. Nedstänkta kläder ska tvättas innan de används igen. Kontakta genast GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. P302 + P352 + P312 VID HUDKONTAKT: Tvätta med mycket tvål och vatten. Vid obehag, kontakta GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. P333 + P313 Vid hudirritation eller utslag: Sök läkarhjälp. + Kontakta genast GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. (127373-001) P04012SE_01/AR173/2015.04 s. 2/5
Fara Weigert s Hematoxylin A: 60-100% Ethanol, 1-5% Methanol H225 Mycket brandfarlig vätska och ånga. H360 Kan skada fertiliteten eller det ofödda barnet. H371 Kan orsaka organskador. H335 Kan orsaka irritation i luftvägarna. H336 Kan göra att man blir dåsig eller omtöcknad. H373 Kan orsaka organskador genom lång eller upprepad exponering. P201 Inhämta särskilda instruktioner före användning. P202 Använd inte produkten innan du har läst och förstått säkerhetsanvisningarna. P281 Använd föreskriven personlig skyddsutrustning. P210 Får inte utsättas för värme, heta ytor, gnistor, öppen låga eller andra antändningskällor. Rökning förbjuden. P241 Använd explosionssäker elektrisk utrustning, ventilationsutrustning, belysningsutrustning och materialhanteringsutrustning. P242 Använd endast verktyg som inte ger upphov till gnistor. P243 Vidta åtgärder mot statisk elektricitet. P233 Behållaren ska vara väl tillsluten. P271 Används endast utomhus eller i väl ventilerade utrymmen. P260 Inandas inte ångor. P270 Ät inte, drick inte och rök inte när du använder produkten. P314 Sök läkarhjälp vid obehag. P309 + P311 Vid exponering eller obehag: Kontakta GIFTINFORMATIONSCENTRAL eller läkare. P304 + P340 + P312 VID INANDNING: Flytta personen till frisk luft och se till att han eller hon vilar i en ställning som underlättar andningen. Vid obehag, kontakta GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. P303 + P361 + VID HUDKONTAKT (även håret): Ta omedelbart av alla nedstänkta kläder. Skölj huden med vatten eller duscha. P353 P403 Förvaras på väl ventilerad plats. P235 Förvaras svalt. Weigert s Hematoxylin B: 1-3% Iron chloride (FeCl3), hexahydrate, 0.1-1% Hydrochloric acid H315 Irriterar huden. P302 + P352 + P362-2 + P363 VID HUDKONTAKT: Tvätta med mycket tvål och vatten. Ta av nedstänkta kläder. Nedstänkta kläder ska tvättas innan de används igen. P332 + P313 Vid hudirritation: Sök läkarhjälp. Biebrich Scarlet Acid Fuchsin: 0.1-1% Poly(oxy-1,2-ethanediyl),.alpha.-[4-(1,1,3,3-tetramethylbutyl)phenyl]-.omega.-hydroxy- (127373-001) P04012SE_01/AR173/2015.04 s. 3/5
Fara Phosphotungstic Phosphomolybdic Acid: 1-5% Phosphotungstic phosphomolybdic acid H314 Orsakar allvarliga frätskador på hud och ögon. P304 + P340 + VID INANDNING: Flytta personen till frisk luft och se till att han eller hon vilar i en ställning som underlättar andningen. Kontakta genast GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. P301 + + VID FÖRTÄRING: Kontakta genast GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. Skölj munnen. Framkalla INTE P330 + P331 kräkning. P303 + P361 + VID HUDKONTAKT (även håret): Ta omedelbart av alla nedstänkta kläder. Skölj huden med vatten eller duscha. P353 + P363 + Nedstänkta kläder ska tvättas innan de används igen. Kontakta genast GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. + Kontakta genast GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en läkare. Aniline Blue: 1-5% Acetic acid, 0.1-1% Polyoxyethylene octyl phenyl ether Förvaring Varje komponent skall förvaras vid den temperatur som anges på etiketten. Får ej användas efter utgångsdatum. Användaren måste validera alla förvaringsförhållanden som avviker från de som specificerats. Det finns inga tydliga tecken som indikerar instabilitet för denna produkt. Lämplig vävnad måste därför köras som kontroller för sådan verifiering. Kontakta Dako teknisk service om du observerar oväntad färgning som inte kan förklaras med variationer i laboratorieprocedurerna eller olämplig förvaring. Instrumentprocedur/färgningsprocedur Preliminära kommentarer Se användarhandboken för Artisan för ytterligare information. Flöda reagensförpackningarna Innan färgningen påbörjas skall reagensförpackningarna flödas och kontrolleras med avseende på läckor. Kontrollera och flöda alla reagensförpackningar när en ny sats används och före dagens första färgningskörning. 1. Arbeta över en pappersduk och avlägsna det röda eller svarta transportlocket, om sådant finns, från reagensförpackningens dispenserenhet genom att försiktigt dra locket nedåt. 2. Vid leveransen av en reagensförpackning flödar du den genom att hålla reagensförpackningen så att dispenserenheten pekar nedåt och försiktigt knacka på reagensförpackningens sida 2 3 gånger så att eventuella luftbubblor som kan sitta fast i dispenserenheten frigörs. 3. Tryck in och släpp ut kolven fullständigt 3 4 gånger i snabb följd tills ett stabilt flöde uppnås. Var noga med att eventuell vätska som sprutar ut absorberas av en pappersduk, absorberande gasväv eller något liknande material. 4. Undvik att göra av med onödigt stora mängder reagens vid flödningen. Överdriven flödning leder till förlust av reagenser, vilket kan göra att reagensförpackningen tar slut innan det beräknade antalet tester har utförts. 5. Före varje användning kan reagensförpackningarna flödas 1 2 gånger för att kontrollera att genomströmningen är stabil. 6. Håll reagensförpackningen i ena handen och för in monteringsguiden på förpackningens baksida i springorna på reagenskarusellen tills förpackningen sitter fast ordentligt. Procedur Se avsnittet Procedurrapporter i Artisan-värdprogrammet för rekommenderad detaljerad procedur. När färgningen är klar är objektglasen torra. Doppa objektglasen i xylen eller i xylenersättning och montera dem. Tolkning av färgningen Muskelfibrer:...Röda Fibrin:...Rosa Kollagen:...Blå Kärnor:...Blåa eller svarta Erytrocyter:...Röda (127373-001) P04012SE_01/AR173/2015.04 s. 4/5
Prestandaegenskaper Reproducerbarhet 100 % reproducerbarhet inom körningar bestämdes genom färgning av 12 objektglas innehållande samma kontrollvävnad på ett instrument. 100 % reproducerbarhet mellan körningar bestämdes genom färgning av 12 objektglas innehållande samma kontrollvävnad på tre olika instrument. Felsökning Se avsnittet Underhåll och felsökning i användarhandboken för Artisan eller kontakta vår tekniska supportgrupp. Referenser 1. Bancroft JD, Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques, 4th edition, Churchill Livingstone Inc., New York, New York, 1996 2. Luna LG. Manual of Histologic Staining Methods of the AFIP, 3rd edition. McGraw-Hill Book Company, New York, New York, 1968 3. Luna LG. Histopathological Methods and Color Atlas of Special Stains and Tissue Artifacts, 1st edition, American Histolabs, Inc., Gaithersburg, MD, 1992 Utgåva 04/15 (127373-001) P04012SE_01/AR173/2015.04 s. 5/5