Artisan Reticulin-Nuclear Fast Red Stain Kit Kod AR179 Avsedd användning För in vitro-diagnostik. Reticulin-Nuclear Fast Red Stain Kit är avsett för laboratorieanvändning för att med ljusmikroskopi identifiera retikulinfibrer i vävnadsprover. 1-3 Rutinmässigt bearbetade prover (paraffininbäddade) kan användas. Det föredragna fixativet är neutralbuffrat formalin. Den kliniska tolkningen av all färgning, eller frånvaro av färgning, måste kompletteras genom morfologiska studier och lämpliga kontroller och måste utvärderas av en kvalificerad patolog inom ramen för patientens anamnes och andra diagnostiska tester. Alla reagenser i Reticulin-Nuclear Fast Red Stain Kit har optimerats för användning med Dakos Artisan Staining System och kräver ingen blandning eller spädning. Sammanfattning och förklaring Reticulin-Nuclear Fast Red Stain Kit används för att identifiera en primitiv form av bindvävnad som kallas retikulin. Denna procedur är baserad på arbete av Gomori 1 och Snook 2,3 och använder en ammoniakalisk silvernitratlösning för att färga retikulinfibrer i vävnad. Silvret reduceras sedan och tonas för att producera en svart färgning av fibrerna, vilka syns med ljusmikroskopi. Procedurprincip Retikulin färgar inte med hematoxylin och eosin. Reticulin-Nuclear Fast Red Stain Kit är en modifiering av Gomoris och Snooks ursprungliga metoder. Reticulin-Nuclear Fast Red Stain Kit har optimerats för användning på Artisan Staining System. Tvättningssteg följer alla färgningssteg. Efter färgning tas de lufttorkade objektglasen bort från instrumentet och klargörs i xylen eller xylenersättning och monteras med lämpligt monteringsmedel. Resultaten tolkas med hjälp av ett vanligt ljusmikroskop. Kontrollvävnad: Lever, mjälte eller lymfkörtel Medföljande reagenser Reticulin-Nuclear Fast Red Stain Kit består av åtta bruksfärdiga dispenserförpackningar innehållande: Potassium Permanganate 1% Kaliumpermanganat i avjoniserat vatten Oxalic Acid 5% Oxalsyra i avjoniserat vatten Ferric Ammonium Sulfate 2.5% Järnammoniumsulfat i avjoniserat vatten Ammoniacal Silver Nitrate Silvernitrat, ammoniumhydroxid och kaliumhydroxid i avjoniserat vatten Alcoholic Formalin 30% 30 % formaldehyd i denaturerad etylalkohol Gold Chloride 0.2% Guldklorid i avjoniserat vatten (128411-001) P04305SE_01/AR179/2015.08 s. 1/5
Sodium Thiosulfate 5% Natriumtiosulfat i avjoniserat vatten innehållande antimikrobiellt medel Nuclear Fast Red Aluminiumsulfat och 0,1 % Nuclear Fast Red i avjoniserat vatten Järnammoniumsulfat 2,5 % och Nuclear Fast Red reagensförpackningar måste skakas före flödning. Reagensförpackningarna med Reticulin-Nuclear Fast Red måste anta rumstemperatur före användning. Dako tillhandahåller dessa reagenser vid optimal formulering för användning enligt de anvisningar som tillhandahålls för färgning på preparerade vävnadssnitt. Varje avvikelse från rekommenderade testprocedurer kan ogiltiggöra angivna förväntade resultat. Material som behövs men inte medföljer 1. Objektglas för mikroskop 2. Artisan Staining System 3. Wash Solution (kod AR102) Försiktighetsåtgärder 1. För yrkesmässigt bruk. 2. Minska mikrobiell kontamination av reagenser, annars kan en ökning av icke-specifik färgning inträffa. 3. Reagensförpackningarna kan innehålla restlösning efter det föreskrivna antalet tester fullbordats. 4. Andra inkubationstider eller temperaturer än de som specificeras kan ge felaktiga resultat. Användaren måste validera alla sådana ändringar som gjorts av den fabriksutgivna proceduren. 5. Förvara reagensförpackningarna i upprätt läge när de inte används på instrumentet. 6. Skydda reagensförpackningarna från direkt solljus samt värmegenererande källor. 7. Som huvudregel får personer under 18 år inte arbeta med denna produkt. Användare måste vara ordentligt utbildade i lämpliga arbetsprocedurer, produktens farliga egenskaper samt nödvändiga säkerhetsinstruktioner. Ytterligare information finns i säkerhetsdatabladet (SDS). 8. Använd lämplig skyddsutrustning för att undvika kontakt med ögon och hud. 9. Oanvänd lösning måste kasseras i enlighet med lokala och statliga föreskrifter. 10. Datablad för materialsäkerhet för yrkesanvändare kan erhållas på begäran. Oxalic Acid 5%: 1-5% Ethanedioic acid, hydrate (1:2) P301 + + VID FÖRTÄRING: Skölj munnen. Framkalla INTE P338 + Fortsätt att skölja. Ammoniacal Silver Nitrate: 1-5% Potassium hydroxide, 1-5% Silver nitrate, 0.1-1% Ammonia H370 Orsakar organskador. H372 Orsakar organskador genom lång eller upprepad exponering. P270 Ät inte, drick inte och rök inte när du använder produkten. P307 + P311 Om du exponerats: Kontakta GIFTINFORMATIONSCENTRAL eller (128411-001) P04305SE_01/AR179/2015.08 s. 2/5
P301 + + P338 + VID FÖRTÄRING: Skölj munnen. Framkalla INTE Fortsätt att skölja. Alcoholic Formalin 30%: 60-100% Ethanol, 10-30% Formaldehyde, 1-5% Methanol H225 Mycket brandfarlig vätska och ånga. H301 + H311 + Giftigt vid förtäring, hudkontakt eller inandning. H331 H350 Kan orsaka cancer. H360 Kan skada fertiliteten eller det ofödda barnet. H341 Misstänks kunna orsaka genetiska defekter. H371 Kan orsaka organskador. H335 Kan orsaka irritation i luftvägarna. H336 Kan göra att man blir dåsig eller omtöcknad. H373 Kan orsaka organskador genom lång eller upprepad exponering. P201 Inhämta särskilda instruktioner före användning. P202 Använd inte produkten innan du har läst och förstått säkerhetsanvisningarna. P281 Använd föreskriven personlig skyddsutrustning. P210 Får inte utsättas för värme, heta ytor, gnistor, öppen låga eller andra antändningskällor. Rökning förbjuden. P241 Använd explosionssäker elektrisk utrustning, ventilationsutrustning, belysningsutrustning och materialhanteringsutrustning. P242 Använd endast verktyg som inte ger upphov till gnistor. P243 Vidta åtgärder mot statisk elektricitet. P233 Behållaren ska vara väl tillsluten. P271 Används endast utomhus eller i väl ventilerade utrymmen. P270 Ät inte, drick inte och rök inte när du använder produkten. P309 + P311 Vid exponering eller obehag: Kontakta GIFTINFORMATIONSCENTRAL eller P301 + + VID FÖRTÄRING: Skölj munnen. Framkalla INTE P302 + P352 + P312 VID HUDKONTAKT: Tvätta med mycket tvål och vatten. Vid obehag, kontakta GIFTINFORMATIONSCENTRALEN eller en P333 + P313 Vid hudirritation eller utslag: Sök läkarhjälp. P338 + Fortsätt att skölja. P403 Förvaras på väl ventilerad plats. P235 Förvaras svalt. Gold Chloride 0.2 percent: 0.1-1% Aurate(1-), tetrachloro-, hydrogen, trihydrate, (SP-4-1)- P261 Undvik att inandas ångor. (128411-001) P04305SE_01/AR179/2015.08 s. 3/5
P301 + + P302 + P352 P333 + P313 P338 + VID FÖRTÄRING: Skölj munnen. Framkalla INTE VID HUDKONTAKT: Tvätta med mycket vatten/ Vid hudirritation eller utslag: Sök läkarhjälp. Fortsätt att skölja. Varning Sodium Thiosulfate 5%: < 0.1% 3(2H)-Isothiazolone, 5-chloro-2-methyl-, mixt. with 2-methyl-3(2H)-isothiazolone Använd skyddshandskar. P261 Undvik att inandas ångor. P302 + P352 + VID HUDKONTAKT: Tvätta med mycket tvål och vatten. Nedstänkta kläder ska tvättas innan de används igen. P363 P333 + P313 Vid hudirritation eller utslag: Sök läkarhjälp. Varning Nuclear Fast Red: 0.1-1% Nuclear Fast Red H373 Kan orsaka organskador genom lång eller upprepad exponering. Förvaring Varje komponent skall förvaras vid den temperatur som anges på etiketten. Får ej användas efter utgångsdatum. Användaren måste validera alla förvaringsförhållanden som avviker från de som specificerats. Det finns inga tydliga tecken som indikerar instabilitet för denna produkt. Lämplig vävnad måste därför köras som kontroller för sådan verifiering. Kontakta Dako teknisk service om du observerar oväntad färgning som inte kan förklaras med variationer i laboratorieprocedurerna eller olämplig förvaring. Instrumentprocedur/färgningsprocedur Preliminära kommentarer Se användarhandboken för Artisan för ytterligare information. Flöda reagensförpackningarna Innan färgningen påbörjas skall reagensförpackningarna flödas och kontrolleras med avseende på läckor. Kontrollera och flöda alla reagensförpackningar när en ny sats används och före dagens första färgningskörning. 1. Arbeta över en pappersduk och avlägsna det röda eller svarta transportlocket, om sådant finns, från reagensförpackningens dispenserenhet genom att försiktigt dra locket nedåt. 2. Vid leveransen av en reagensförpackning flödar du den genom att hålla reagensförpackningen så att dispenserenheten pekar nedåt och försiktigt knacka på reagensförpackningens sida 2 3 gånger så att eventuella luftbubblor som kan sitta fast i dispenserenheten frigörs. 3. Tryck in och släpp ut kolven fullständigt 3 4 gånger i snabb följd tills ett stabilt flöde uppnås. Var noga med att eventuell vätska som sprutar ut absorberas av en pappersduk, absorberande gasväv eller något liknande material. 4. Undvik att göra av med onödigt stora mängder reagens vid flödningen. Överdriven flödning leder till förlust av reagenser, vilket kan göra att reagensförpackningen tar slut innan det beräknade antalet tester har utförts. 5. Före varje användning kan reagensförpackningarna flödas 1 2 gånger för att kontrollera att genomströmningen är stabil. 6. Håll reagensförpackningen i ena handen och för in monteringsguiden på förpackningens baksida i springorna på reagenskarusellen tills förpackningen sitter fast ordentligt. Procedur Se avsnittet Procedurrapporter i Artisan-värdprogrammet för rekommenderad detaljerad procedur. När färgningen är klar är objektglasen torra. Doppa i xylen eller i xylenersättning och montera dem. Obs! Nuclear Fast Red startar utfällningsprocessen om det utsätts för kalla temperaturer. För att ta bort utfällningsmedlet från objektglasen, placera dem under rinnande vatten tills utfällningsmedlet är borta. Dehydrera i alkohol, doppa dem därefter i xylen eller i xylenersättning och montera dem. Tolkning av färgningen Retikulinfibrer:...Svarta Bakgrund:...Röd (128411-001) P04305SE_01/AR179/2015.08 s. 4/5
Prestandaegenskaper Reproducerbarhet 100 % reproducerbarhet inom körningar bestämdes genom färgning av 12 objektglas innehållande samma kontrollvävnad på ett instrument. 100 % reproducerbarhet mellan körningar bestämdes genom färgning av 12 objektglas innehållande samma kontrollvävnad på tre olika instrument. Felsökning Se avsnittet Underhåll och felsökning i användarhandboken för Artisan eller kontakta vår tekniska supportgrupp. Referenser 1. Bancroft JD, Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques, 4th edition. Churchill Livingstone Inc., New York, New York, 1996 2. Luna LG. Manual of Histologic Staining Methods of the AFIP, 3rd edition, McGraw-Hill Book Company, New York, New York, 1968 3. Prophet EB, Mills B, Arrington JB, Sobin LH. AFIP: Laboratory Methods is Histotechnology, 1st edition. American Registry of Pathology, Washington, DC, 1992 Utgåva 08/15 (128411-001) P04305SE_01/AR179/2015.08 s. 5/5