Sida 1( 6) Riskbedömning Cellodling inkl. frysförvaring Utförd 2014-09-02 Av Eva Lindqvist på Bo Baldetorps grupp. Andrad senast 2014-09-22 Av Lars Ekblad Slutlig bedömning av hela metoden 1. Acceptabel risk 1. Ange vilka lokaler bedömningen avser KAMPRADHUSET Våning Rum Plan 10 10-25 Cellodling Plan 11 11-23 cellodling Plan 11 11-24 cellodling Plan 11 11-25 Cellodling Plan 13 13-21 cellodlingsrum Plan 13 13-25 litet cellodlingsrum Plan 13 13-27 Cellodlingsrum 2. Metodbeskrivning/Aktivitet Nedfrysta celler tinas och sätts till cellodlingsmedium inklusive serum, antibiotika och andra tillsatser beroende på cellinje. Cellerna odlas i inkubatorer med 5% CO2, 37 grader Celcius. Adherenta celler lossas med trypsin eller annan lösning. Cellerna räknas m.h.a trypanblått, se riskbedömning - Cellräkning/viabilitet trypanblått. Inför nedfrysning i flytande kväve blandas celler med DMSO, cellodlingsmedium och serum. Separat riskbedömning finns gällande flytande kvävehantering. 3. Produktlista Produktnamn Konc. Form Mängd Fara Kommentar DesiDos (volym) R22, R34, R43 S26, S36/37/39, S45 DMSO (Life Technologies) CLP-information H227, H315, H319 P264, P280, P305 + P351 + P338, P332 + P313, P337 + P313, P362 Äldre riskinformation R36/38 S24/25, S26, S28, S36/37/39 Listor brandfarlig vara Anmärkning H, AFS 2011:18 Organiska lösningsmedel 100 ml Etanol 30-70% CLP-information H226 P210, P243, P261, P280, P403 + P233 Äldre riskinformation R10 S16, S7 Listor brandfarlig vara Organiska lösningsmedel 70 % Vätska 1 liter
Sida 2( 6) Ja, halten luftföroreningar i inandningsluften av ämnet vid beskriven hantering är godtagbar utifrån gränsvärdet i AFS 2011:18. Mätning bedöms inte vara nödvändig. Används för avdödning av mikroorganismer i LAF-bänkar. Vi bedömer att halten i inandnings luften inte överskrider gränsvärdet. Fetalt Bovin Serum 500 ml Gentamicin lösning, cell culture testet CLP-information H317, H334 P261, P280, P342 + P311 Äldre riskinformation R42/43 S22, S36/37, S45 L-Glutamine solution 100 ml MEM icke essentiella Aminosyror R20/21/22, R34 S26, S36/37/39, S45 Pencillin-Streptomycin lösning 100 ml 100 ml Sodium pyruvate solution Trypsin, 0.25% (1X) with EDTA 4Na, liquid S23, S24, S26, S36/37 Trypsin, 0.5% (10x) with EDTA 4Na, liquid S23, S24, S26, S36/37 100 mm 100 ml 0,25 % 500 ml 0,5 % 100 ml Egna produkter Produktnamn Konc. Form Mängd Fara Kommentar R10 500 ml RPMI1640+FBS, PEST, MEM, pyruvat DMEM komplett DMEM+FBS+PEST Trypsin 1x 0.05 % 50 ml Faroangivelser H226 H227 H315 H317 H319 H334 Brandfarlig vätska och ånga. Brännbar vätska. Irriterar huden. Kan orsaka allergisk hudreaktion. Orsakar allvarlig ögonirritation. Kan orsaka allergi- eller astmasymtom eller andningssvårigheter vid inandning. Skyddsangivelser P210 P243 P261 Får inte utsättas för värme, heta ytor, gnistor, öppna lågor och andra antändningskällor. Rökning förbjuden. Vidta åtgärder mot statisk elektricitet. Undvik att andas in damm/rök/gaser/dimma/ångor/sprej. OBSERVERA! Skyddsangivelsen kräver specificering av leverantör/tillverkare, för exakt formulering se säkerhetsdatabladet. Tvätta grundligt efter användning. OBSERVERA!
Sida 3( 6) P264 P280 P305 + P351 + P338 P332 + P313 P337 + P313 P342 + P311 P362 P403 + P233 Tvätta grundligt efter användning. OBSERVERA! Skyddsangivelsen kräver specificering av leverantör/tillverkare, för exakt formulering se säkerhetsdatabladet. Använd skyddshandskar/skyddskläder/ögonskydd/ansiktsskydd. OBSERVERA! Skyddsangivelsen kräver specificering av leverantör/tillverkare, för exakt formulering se säkerhetsdatabladet. VID KONTAKT MED ÖGONEN: Skölj försiktigt med vatten i flera minuter. Ta ur eventuella kontaktlinser om det går lätt. Fortsätt att skölja. Vid hudirritation: Sök läkarhjälp. Vid bestående ögonirritation: Sök läkarhjälp. Vid besvär i luftvägarna: Kontakta GIFTINFORMATIONSCENTRALEN/läkare/... Ta av nedstänkta kläder. Förvaras på väl ventilerad plats. Förpackningen ska förvaras väl tillsluten. Riskfraser R10 R20/21/22 R22 R34 Brandfarligt. Farligt vid inandning, hudkontakt och förtäring. Farligt vid förtäring. Frätande. R36/38 Irriterar ögonen och huden. R42/43 Kan ge allergi vid inandning och hudkontakt. R43 Kan ge allergi vid hudkontakt. Skyddsfraser S16 S22 S23 S24 Förvaras åtskilt från antändningskällor - Rökning förbjuden Undvik inandning av damm Undvik inandning av gas/rök/ånga/dimma (lämplig formulering anges av den som släpper ut produkten på marknaden) Undvik kontakt med huden S24/25 Undvik kontakt med huden och ögonen S26 S28 Vid kontakt med ögonen, spola genast med mycket vatten och kontakta läkare Vid kontakt med huden tvätta genast med mycket... (anges av den som släpper ut produkten på marknaden) S36/37 Använd lämpliga skyddskläder och skyddshandskar S36/37/39 S45 S7 Använd lämpliga skyddskläder, skyddshandskar samt skyddsglasögon eller ansiktsskydd Vid olycksfall, illamående eller annan påverkan, kontakta omedelbart läkare. Visa om möjligt etiketten. Förpackningen förvaras väl tillsluten 4. Kemikaliernas inneboende risk a: Mkt hög risk 5. Exponeringsnivå Låg 6. Skyddsventilation Skyddsnivå 2 - dragskåp e.d. 7. Biologiskt material
Sida 4( 6) Humant, Animalt, Agens klass 1 8. Kommentarer till Biologiskt material En viss smittorisk finns alltid vid hantering av humant material. Därför ska använda medier, materiel och cellkulturer behandlas som potentiellt smittförande. Om biologiska agens av klass 2 eller högre ska odlas måste tillstånd sökas och särskild riskbedömning göras enligt AFS 2005:1. Skyddsrock, handskar och glasvisir används. Allt biologiskt material slängs i kartonger avsedda för stickande/skärande/smittförande avfall. Alla ytor torkas av med 70 % etanol eller desidos. Personer som utför detta arbetet tar själva hand om disk och avfall. 9. Eventuellt samverkande effekter och möjliga reaktioner 10. Kommentar till Eventuellt samverkande effekter och möjliga reaktioner 11. Krav på lokal och utrustning i lokal Ej relevant 12. Kommentarer till Krav på lokal och utrustning i lokal 13. Specificering av förvaring Ventilerat skåp, Kylskåp, Frys 14. Kommentarer till Förvaring Endast mindre mängd etanol förvaras i rummet (ca 3 liter), större mängd etanol förvaras i brandsäkert, ventilerat skåp i annan lokal. 15. Får ej förvaras tillsammans med. Salpetersyra, Lättantändligt material 16. Kommentarer till Får ej förvaras tillsammans med Gäller endast etanol. 17. Krav på skyltning Kemikalier 18. Kommentarer till Krav på skyltning Särskild riskbedömning och skyltning krävs om riskklassade celler används. 19. Personlig skyddsutrustning Skyddsglasögon/visir, Skyddshandskar, Skyddsrock 20. Kommentarer till Personlig skyddsutrustning
Sida 5( 6) Vid arbete i LAF-bänk med skyddsglaset nerfällt behövs inte skyddsglasögon. Särskilda skyddsrockar används i cellodlingsrummen. Dessa får inte användas i andra lokaler. Rockarna byts minst var 4:e vecka. 21. Beskriv teknisk utrustning LAF-bänkar och centrifuger servas och kontrolleras regelbundet av fackman. Inga kritiska moment föreligger. Vaccuumsug med Medelasystem används för uppsamling av celler och cellodlingsmedium. Alternativt används även uppsamling av celler och cellodlingsmedium i plastflaskor innehållande uppsugande material - swell. Dessa flaskor slängs i riskavfallskartongen. Glaspasteurpipetter används tillsammans med vacuumsugen. Vi bedömer risken för stickskador som låg vid cellarbetet, men använda glaspipetter samlas i plastbehållare med lock för att undvika stickskador vid avfallshantering. Mikroskop, 37-gradigt vattenbad och cellinkubatorer används. Inga kritiska moment föreligger. 22. Yttre miljö Utsläpp till luft 23. Kommentar till Yttre miljö Aerosol bildas och avdunstar vid rengöring med etanol. 24. Avfallshantering Skärande/stickande/smittförande avfall 25. Kommentarer till Avfallshantering Medelasystem används för uppsamling av celler och cellodlingsmedium med alla ingående kemikalier. Alternativt används även uppsamling av celler och cellodlingsmedium med alla ingående kemikalier i plastflaskor innehållande uppsugande material - swell. Dessa flaskor slängs sedan i riskavfallskartongen. 26. Första hjälpen samt beredskap inför olycka, brand och spill Nöddusch, Ögondusch, Jordfelsbrytare, Brandsläckare skum, Brandsläckare kolsyra, Brandfilt, Absorberande ämne 27. Kommentarer till Första hjälpen samt beredskap inför olycka, brand och spill Alla hjälpmedel nämnda i punkt 26, finns lättillgängliga. Vid större spill används vermiculit eller absorbent i spill-kit. 28. Arbetsmoment och omständigheter som är riskfyllda Ej relevant 29. Kommentarer till Arbetsmoment och omständigheter som är riskfyllda 30. Särskilda instruktioner till annan personal Spill tas om hand av ansvarig labbpersonal. 31. Slutlig bedömning av hela metoden
Sida 6( 6) 1. Acceptabel risk 32. Kommentarer Slutlig bedömning samt ytterligare riskbegränsande åtgärder Etanol används vid desinficering av arbetsytor. Vi bedömer att detta är det bästa ur miljö- och hälsoaspekt, men kan ge en viss brandrisk eftersom gnistbildning kan antända etanol i gasform. Användandet av sprutflaskor minskar denna risk så att vi bedömer den som acceptabel. DMSO används i små mängder i LAF-bänk och risken för exponering är därför liten. Gentamicin kan orsaka allergiska reaktioner vid inandning, men hanteras endast i lösning. Därför bedömer vi risken som acceptabel. PRIO-ämnen: Trypsin är ett prioriterat riskminskningsämne. Det finns inget bra alternativ till trypsin i dagsläget och vi bedömer riskerna som försumbara vid den aktuella hanteringen. 33. Deltagande personer i riskbedömningen Eva Lindqvist, Maria Johansson, Lars Ekblad, Anna Darabi Signatur Ansvarig chef Datum Lars Ekblad Datum för nästa bedömning: 2019-09-22